作為髓過氧化物酶抑制劑的硫代黃嘌呤衍生物的製作方法

2023-10-07 23:39:14 2

專利名稱：作為髓過氧化物酶抑制劑的硫代黃嘌呤衍生物的製作方法
技術領域：
本發明涉及作為髓過氧化物酶(MPO)抑制劑的硫代黃嘌呤衍生物的用途。還公開了某些新的硫代黃嘌呤衍生物、它們的製備方法、含有它們的組合物以及它們在治療中的用途。
背景技術：
髓過氧化物酶(MPO)是主要在多形核白細胞(PMNs)中發現的含血紅素的酶。MPO是哺乳動物過氧化物酶的多種蛋白家族中的一員，哺乳動物過氧化物酶還包括嗜酸細胞過氧化物酶、甲狀腺過氧化物酶、唾液過氧化物酶、乳過氧化物酶、前列腺素H合酶等等。成熟的酶是兩個相同半分子的二聚體。每個半分子含有共價鍵血紅素，該血紅素表現出與MPO特有的綠色相對應的異常的光譜特性。連結MPO的兩個半分子的二硫鍵斷裂產生半酶，半酶與全酶相比表現出難以辨別的光譜和催化特性。該酶利用過氧化氫將氯氧化成次氯酸。其它的滷化物和類滷化物(如硫氰酸鹽)也是MPO的生理學底物。
PMNs對於抑制傳染是特別重要的。這些細胞含有MPO，據記載具有良好的殺菌活性。PMNs通過非特異性的吞噬作用吞食微生物，將其混入到液泡中，被稱為吞噬體，其與含有髓過氧化物酶的顆粒結合形成吞噬溶酶體。在吞噬溶酶體中，髓過氧化物酶的酶活性導致次氯酸的形成，它是一種有效的殺細菌化合物。次氯酸自身氧化，最易與硫醇和硫醚反應，而且將胺轉化成氯胺，氯化芳族胺基酸。巨噬細胞是巨大的吞噬細胞，如PMNs，能夠吞噬微生物。巨噬細胞可產生過氧化氫，活化可產生髓過氧化物酶。MPO和過氧化氫也能釋放到細胞的外部，與氯反應可引起鄰近組織的損傷。
在神經炎性反應的神經疾病中暗示了MPO的活性與疾病的聯繫，包括多發性硬化、阿爾茨海默病、帕金森病和中風，以及其它的炎性疾病或症狀如哮喘、慢性阻塞性肺病、膽囊纖維化、動脈硬化症、炎性腸病、腎小球損傷和風溼性關節炎。肺癌也表明與高濃度的MPO有關。
WO01/85146公開了多種MPO抑制劑化合物，因此用於治療慢性阻塞性肺病(COPD)。3-正丙基-2-硫代黃嘌呤公開在Drug DevelopmentResearch，1999，47，45-53中。3-異丁基-6-硫代黃嘌呤公開在J.Chem.Soc.，1962，1863中。2-硫代黃嘌呤是市售的。
本發明涉及一批硫代黃嘌呤衍生物，令人驚奇地顯示出了作為MPO酶抑制劑的有益性能。

發明內容
本發明提供了通式(Ia)或(Ib)化合物 或 其中X和Y中的一個代表S，另一個代表O或S；R1代表氫或C1-6烷基；R2代表氫或C1-6烷基；所述烷基可任選的被以下基團所取代i)飽和或部分不飽和的3-7元環，任選的加入一個或兩個獨立的選自O、N和S的雜原子，和任選的加入羰基；該環可任選的被一個或多個選自滷素、羥基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；該烷基可任選的再被羥基或C1-6烷氧基所取代；或ii)C1-6烷氧基；或iii)選自苯基、呋喃基或噻吩基的芳環；該芳環可任選的再被滷素、C1-6烷基或C1-6烷氧基所取代；R3和R4獨立的代表氫或C1-6烷基；或其藥學上可接受的鹽在製備用於治療或預防MPO酶被抑制時的疾病或症狀的藥物中有益的用途。
通式(Ia)或(Ib)的化合物可以對映異構體的形式存在。因此所有的對映體、非對映體、外消旋物及其混合物都包括在本發明的範圍內。
應當理解，當R3在通式(Ia)和(Ib)中代表氫時，兩個可選擇的代表(Ia)和(Ib)是同一化合物的互變異構體形式。所有的上述互變異構體以及互變異構體的混合物都包括在本發明的範圍內。
本發明更特別的一方面提供了通式(Ia)或(Ib)的化合物或其藥學上可接受的鹽，在治療或預防神經炎性疾病的藥物製備中的用途。
本發明還提供了治療，或降低MPO酶被抑制有益時的疾病或症狀的危險的方法，包括向患有所述疾病或症狀或正在此危險中的病人施用治療有效量的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其藥學上可接受的鹽。
更特別地，還提供了治療，或降低患有所述疾病或症狀病人的神經炎性疾病的危險的方法，其中，該方法包括向病人施用治療有效量的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其藥學上可接受的鹽。
本發明另一方面提供了一種藥物製劑，包含治療有效量的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的助劑、稀釋劑或載體混合，用於治療或預防MPO酶被抑制時的疾病或症狀是有益的。
本發明另一更特別的方面提供了一種藥物製劑，包含治療有效量的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的助劑、稀釋劑或載體混合，用於治療或預防神經炎性疾病。
在一個實施方案中，提供了通式(Ia)或(Ib)化合物，其中X和Y中的至少一個代表S，另一個代表O或S；R1代表氫或C1-6烷基；R2代表氫或C1-6烷基；所述烷基可任選的被C3-7環烷基、C1-4烷氧基、或選自苯基、呋喃基或噻吩基的芳環所取代；所述芳環可任選的再被滷素、C1-4烷基或C1-4烷氧基所取代；R3和R4獨立的代表氫或C1-6烷基；或其藥學上可接受的鹽，其對映體或外消旋物，在製備用於治療或預防MPO酶被抑制時的疾病或症狀的藥物中的用途是有益的。
在另一實施方案中，提供了通式(Ia)或(Ib)化合物，其中X和Y中的至少一個代表S，另一個代表O或S；R1代表氫或C1-6烷基；R2代表氫或C1-6烷基；所述烷基可任選的被以下基團所取代i)飽和或部分不飽和的3-7元環，該環任選的加入一個或兩個獨立的選自O、N和S的雜原子，和任選的加入羰基；該環可任選的被一個或多個選自滷素、羥基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；該烷基可任選的再被羥基或C1-4烷氧基所取代；或ii)C1-4烷氧基；或iii)選自苯基、呋喃基或噻吩基的芳環；該芳環可任選的再被滷素、C1-4烷基或C1-4烷氧基所取代；R3和R4獨立的代表氫或C1-6烷基；或其藥學上可接受的鹽在製備用於治療或預防MPO酶被抑制時的疾病或症狀的藥物中的用途有益。
在一個實施方案中，本發明涉及通式(Ia)或(Ib)化合物的用途，其中X代表S，Y代表O。
在另一實施方案中，R3在通式(Ia)或(Ib)中代表氫。
在另一實施方案中，R2在通式(Ia)或(Ib)中代表任選的取代的C1-6烷基。
在另一實施方案中，R2在通式(Ia)或(Ib)中代表被飽和或部分不飽和的3-7元環取代的C1-6烷基，該環任選的加入一個或兩個獨立的選自O、N和S的雜原子，和任選的加入羰基；該環可任選的被一個或多個選自滷素、羥基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；該烷基可任選的再被羥基或C1-6烷氧基所取代。
在另一實施方案中，R2在通式(Ia)或(Ib)中代表被環丙基、環己基、四氫呋喃或嗎啉基所取代的亞甲基、1，2-亞乙基或1，3-亞丙基。
在另一實施方案中，R2在通式(Ia)或(Ib)中代表被C1-6烷氧基取代的C1-6烷基。
在另一實施方案中，R2在通式(Ia)或(Ib)中代表被甲氧基或乙氧基所取代的1，2-亞乙基或1，3-亞丙基。
當X代表S，Y代表O時，另一個實施方案包括其中R1代表氫的通式(Ia)或(Ib)化合物。
當X代表S，Y代表O時，再另一個實施方案包括其中R4代表氫的通式(Ia)或(Ib)化合物。
當X代表O，Y代表S時，另一個實施方案包括其中R1代表C1-6烷基的通式(Ia)或(Ib)化合物。
當X代表O，Y代表S時，再另一個實施方案包括其中R4代表C1-6烷基的通式(Ia)或(Ib)化合物。
在一個實施方案中，本發明涉及通式(Ia)或(Ib)化合物的用途，其中X代表S，Y代表O；R2代表任選的取代的C1-6烷基；R1、R3和R4每一個代表氫。
在一個實施方案中，本發明涉及通式(Ia)或(Ib)化合物的用途，其中X代表S，Y代表O；R2代表被飽和或部分不飽和的3-7元環取代的C1-6烷基，該環任選的加入一個或兩個獨立的選自O、N和S的雜原子，和任選的加入羰基；該環可任選的被一個或多個選自滷素、羥基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；該烷基可任選的再被羥基或C1-6烷氧基所取代；和R1、R3和R4每一個代表氫。
在一個實施方案中，本發明涉及通式(Ia)或(Ib)化合物的用途，其中X代表S，Y代表O；R2代表被C1-6烷氧基取代的C1-6烷基；和R1、R3和R4每一個代表氫。
本發明具體的一方面涉及以下的通式(Ia)或(Ib)的化合物1，3-二異丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤；1，3-二丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤；3-異丁基-1，8-二甲基-6-硫代黃嘌呤；3-(2-甲基丁基)-6-硫代黃嘌呤；3-異丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤；3-異丁基-2-硫代黃嘌呤；3-異丁基-2，6-二硫代黃嘌呤；3-異丁基-8-甲基-2-硫代黃嘌呤；3-異丁基-7-甲基-2-硫代黃嘌呤；3-環己基甲基-2-硫代黃嘌呤；3-(3-甲氧基丙基)-2-硫代黃嘌呤；3-環丙基甲基-2-硫代黃嘌呤；3-異丁基-1-甲基-2-硫代黃嘌呤；3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；3-(2-甲氧基乙基)-2-硫代黃嘌呤；3-(3-(1-嗎啉基)丙基)-2-硫代黃嘌呤；3-(2-呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；
3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代黃嘌呤；3-(4-氟苄基)-2-硫代黃嘌呤；3-苯乙基-2-硫代黃嘌呤；(+)-3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；(-)-3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；3-正丁基-2-硫代黃嘌呤；3-正丙基-2-硫代黃嘌呤；3-異丁基-6-硫代黃嘌呤；2-硫代黃嘌呤；及其藥學上可接受的鹽的用途。
除非另外說明，此處所涉及的術語「C1-6烷基」指的是具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基。上述基團的實例包括甲基、乙基、1-丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基和己基。
術語「C1-4烷基」類似地進行解釋。
除非另外說明，此處所涉及的術語「C3-7環烷基」指的是具有3-7個碳原子的環烷基。上述基團的實例包括環丙基、環戊基和環己基。
除非另外說明，此處所涉及的術語「C1-6烷氧基」指的是具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基。上述基團的實例包括甲氧基、乙氧基、1-丙氧基、2-丙氧基和叔丁氧基。
術語「C1-4烷氧基」類似地進行解釋。
除非另外說明，此處所涉及的術語「滷素」指氟、氯、溴和碘。
任選的加入一個或兩個獨立的選自O、N和S的雜原子，和任選的加入羰基的飽和或部分不飽和的3-7元環的實例包括環丙基、環戊基、環己基、環戊酮、四氫呋喃、吡咯烷、哌啶、嗎啉、哌嗪、吡咯烷酮和哌啶酮(piperidinone)。特別的實例包括環丙基、環己基、四氫呋喃基和嗎啉基。
通式(Ia)或(Ib)的某些化合物是新的。因此，本發明的另一方法提供了下列的通式(Ia)或(Ib)的新化合物
或 其中X代表S，Y代表O；R1代表氫或C1-6烷基；R2代表被飽和或部分不飽和的3-7元環取代的C1-6烷基，該環任選的加入一個或兩個獨立的選自O、N和S的雜原子，和任選的加入羰基；該環可任選的被一個或多個選自滷素、羥基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；該烷基可任選的再被羥基或C1-6烷氧基所取代；R3和R4獨立的代表氫或C1-6烷基；及其藥學上可接受的鹽。
本發明的另一方面提供了下列的通式(Ia)或(Ib)的新化合物1，3-二異丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤；1，3-二丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤；3-異丁基-1，8-二甲基-6-硫代黃嘌呤；3-(2-甲基丁基)-6-硫代黃嘌呤；3-異丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤；3-異丁基-2-硫代黃嘌呤；3-異丁基-2，6-二硫代黃嘌呤；3-異丁基-8-甲基-2-硫代黃嘌呤；3-異丁基-7-甲基-2-硫代黃嘌呤；3-環己基甲基-2-硫代黃嘌呤；3-(3-甲氧基丙基)-2-硫代黃嘌呤；3-環丙基甲基-2-硫代黃嘌呤；
3-異丁基-1-甲基-2-硫代黃嘌呤；3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；3-(2-甲氧基乙基)-2-硫代黃嘌呤；3-(3-(1-嗎啉基)丙基)-2-硫代黃嘌呤；3-(2-呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代黃嘌呤；3-(4-氟苄基)-2-硫代黃嘌呤；3-苯乙基-2-硫代黃嘌呤；(+)-3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；(-)-3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；3-正丁基-2-硫代黃嘌呤；及其藥學上可接受的鹽。
本發明的另一方面是通式(Ia)或(Ib)的新化合物作為藥物的用途。
根據本發明，我們還提供了製備通式(Ia)或(Ib)的新化合物，或其藥學上可接受的鹽，其對映體、非對映體或外消旋物的方法，包括(a)通式(IIa)或(IIb)化合物 或 其中R1、R2、R3和R4如通式(Ia)或(Ib)中所定義，X代表O或S，Y代表O；與硫化作用化合物如Lawesson試劑或五硫化二磷的反應；或(b)通式(IIIa)或(IIIb)的二胺
或 其中R1、R2、R3、X和Y如通式(Ia)或(Ib)中所定義；與甲酸或與三烷基原酸酯反應；其中，根據需要將所得的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其另一種鹽轉化成其藥學上可接受的鹽；或將所得的通式(Ia)或(Ib)化合物轉化成另一種通式(Ia)或(Ib)化合物；其中根據需要將所得的通式(Ia)或(Ib)化合物轉化成其光學異構體。
在方法(a)中，通式(IIa)或(IIb)化合物和硫化試劑如Lawesson試劑或五硫化二磷溶解或懸浮在適合的無水有機溶劑如苯、甲苯、二甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷或二噁烷中，然後加熱到30℃至溶劑的回流溫度，直到反應完成，一般1-30小時。然後，反應混合物冷卻並過濾分出不溶的固體。減壓分出溶劑，粗產物通過柱色譜法或重結晶法純化。
在方法(b)中，通式(IIIa)或(IIIb)的二胺在適合的溫度下用過量的適當的原酸酯如原甲酸三乙酯、原乙酸三乙酯、原丙酸三乙酯、原丁酸三乙酯、原甲酸三丙酯、原甲酸三丁酯和原甲酸三異丙酯，任選的在適合的溶劑如醇的存在下處理，直到反應完成。溫度一般是直到反應混合物的回流溫度，反應時間通常30分鐘至過夜。在一個實施方案中，原酸酯是原甲酸三乙酯，乙醇作為任選的溶劑。
有選擇性地，在方法(b)中，通式(IIIa)或(IIIb)的二胺在室溫至反應混合物回流溫度的適合的溫度下用98％的甲酸處理。該方法繼續適當的一段時間，一般0.5-5小時。分出甲酸後，用適合的鹼水溶液處理，例如，用10％的氫氧化鈉水溶液處理，然後得到通式(I)化合物。鹼處理在適合的時間內適合的溫度下進行，例如，在室溫至反應混合物的回流溫度下約10分鐘至4小時的時間。
通式(IIIa)或(IIIb)的二胺轉化成通式(Ia)或(Ib)化合物的其它方法在文獻中有描述，對本領域的技術人員來說應該是公知的。
本發明包括通式(Ia)或(Ib)化合物的鹽的形式，尤其是酸加成鹽。適合的鹽包括那些與有機酸和無機酸形成的鹽。雖然，非藥學上可接受的酸鹽在化合物的製備和純化中的實用性受到懷疑，但是上述酸加成鹽通常是藥學上可接受的。因而，優選的鹽包括那些由鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、甲磺酸和苯磺酸形成的鹽。
通式(Ia)或(Ib)化合物的鹽可通過將其游離鹼、或鹽、對映體或外消旋物，與一個或多個當量的適當的酸反應來形成。反應可在鹽不溶的溶劑或介質中進行，或在鹽可溶的溶劑中進行，例如，水、二噁烷、乙醇、四氫呋喃或乙醚、或溶劑的混合物，溶劑可通過真空或冷凍乾燥分出。反應也可以是置換方法或可通過離子交換樹脂來進行。
通式通式(IIa)或(IIb)化合物和通式(IIIa)或(IIIb)化合物在文獻中也是公知的，或可利用對本領域技術人員來說很顯而易見的公知方法來製備。
本發明的化合物及其中間體可從它們的反應混合物中分離，如果需要可利用標準技術進一步純化。
通式(Ia)或(Ib)化合物可以對映異構體的形式存在。因此，所有的對映體、非對映體、外消旋物及其混合物都包括在本發明的範圍內。多種光學異構體可利用常規技術，例如，分級結晶、或HPLC對化合物的外消旋混合物進行分離。有選擇性地，多種光學異構體可直接通過旋光起始物質來製備。
中間體化合物也可以對映體的形式存在，可用作純化的對映體、非對映體、外消旋物或混合物。
通式(Ia)或(Ib)的化合物，和它們藥學上可接受的鹽是有用的，因為它們擁有作為MPO酶抑制劑的藥物學活性。
通式(Ia)和(Ib)化合物，和它們的藥學上可接受的鹽指出用於治療或預防其中的髓過氧化物酶(MPO)的活性需要調節的疾病或症狀。特別地，在神經炎性疾病中暗示了MPO活性與疾病的聯繫。因此，本發明化合物特別指出用於治療哺乳動物包括人的神經炎性症狀或疾病。上述症狀或疾病對本領域技術人員來說是顯而易見的。
可具體提及的症狀或疾病包括多發性硬化、阿爾茨海默病、帕金森病、肌萎縮性(脊髓)側索硬化和中風、以及其它的炎性疾病或症狀如哮喘、慢性阻塞性肺病、膽囊纖維化、特發性肺纖維化、急性呼吸窘迫症候群、竇炎、鼻炎、牛皮癬、皮炎、葡萄膜炎、齦炎、動脈硬化症、炎性腸病、腎小球損傷、肝纖維化、敗血症、直腸炎、風溼性關節炎、和與損傷再癒合、脊髓損傷和組織傷害/疤痕/粘連/排斥有關的炎症。肺癌也表明與高濃度的MPO有關。該化合物也期望在治療疼痛中是有用的。
預防被認為與先前發作過所述疾病或症狀，或其它的被認為其危險增加時的病人的治療特別相關。有產生特殊疾病或症狀的危險的病人通常包括那些具有疾病或症狀的家族史，或那些通過遺傳測驗或篩選鑑定特別容易產生該疾病或症狀的人。
當然，對於上述的治療適應症，所施用的劑量隨施用的化合物、施用方式和治療需要而變化。然而，通常，當化合物以固體形式施用時，每天1mg-2000mg的劑量獲得了滿意的結果。
通式(Ia)或(Ib)化合物，及其藥學上可接受的衍生物可單獨使用，或以化合物或衍生物與藥學上可接受的助劑、稀釋劑或載體混合的適當的藥物組合物的形式使用。因而，本發明的另一方面涉及含有新的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的助劑、稀釋劑或載體混合的藥物組合物。施藥可通過，但不限制於，經腸(包括口服、舌下或直腸)、鼻內、吸入、靜脈內、局部或其它的腸道外路線。選擇和製備適合的藥物製劑的常規方法描述在，例如，「Pharmaceuticals-The Science of Dosage FormDesigns」，M.E.Aulton，Churchill Livingstone，1988中。藥物組合物優選含有少於80％，更優選少於50％的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其藥學上可接受的鹽。
還提供了製備上述藥物組合物的方法，包括混合這些成分。
本發明通過下面的實施例進行說明，但決不是進行限制。
在25℃下通過300MHz Bruker DPX儀器或Varian Unity 400MHz分光計記錄1H和13C NMR光譜。使用下面的參考信號DMSO-d6δ39.5(13C)；DMSO-d6δ2.50(1H)的中間線。所有的質譜通過Waters LCMS(2790)儀器進行記錄。薄層色譜法(TLC)通過Merck TLC鋁片矽膠60F254預製板(層厚度0.2mm)來進行。Merck Silica gel 60(0.063-0.200mm)用於柱色譜法。通過Gynkotek P580 HPG進行HPLC分析，帶有Gynkotek UVD 170S紫外-可冗光檢測器的梯度泵。柱子；Waters symmetry C18，5μm，3.9×150mm。製備液相色譜法通過Gynkotek P580 HPG進行，帶有Gynkotek UVD 170S UV-vis檢測器的梯度泵。柱子；Waters symmetry C18，5μm，19×100mm。
起始物質可根據下面的參考文獻製備1.Merlos，M.；Gomez，L.；Vericat，M.L.；Bartroli，J.；Garcia-Rafanell，J.；Forn，J.；Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther.；25；81990；653-658。
2.Kjellin，P.G.；Persson，C.G.A.，EP0010531。
3.Katritzky，A.R.；Drewniak，M.，Tet.Lett.(1988)，29(15)，1755-1758。
4.Van der Goot，H.；Schepers，M.J.P.；Sterk，G.J.；Timmerman，H.，Eur.J.Med.Chem.(1992)，27(5)，511-517。
實施例11，3-二異丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤1，3-二異丁基-8-甲基黃嘌呤1(0.20g，0.72mmol)和Lawesson試劑(1.5g，3.6mmol)懸浮在甲苯(8mL)中，然後在100℃下加熱21小時。反應混合物冷卻，過濾分出不溶固體。減壓分出溶劑，粗產物通過柱色譜法利用矽膠並用乙酸乙酯/庚烷(1∶1)洗脫進行純化得到題列化合物(90mg，43％的收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.1(s，1H)，4.28(d，2H，J7.2Hz)，3.84(d，2H，J7.5Hz)，2.40(s，3H)，2.28-2.35(m，1H)，2.17-2.25(m，1H)，0.85-0.88(m，12H)。
MS(ES)m/z 295(M+1)。
實施例21，3-二丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤1，3-二丁基-8-甲基黃嘌呤1(0.20g，0.72mmol)和Lawesson試劑(0.87g，2.2mmol)懸浮在甲苯(8mL)中，在120℃下加熱30小時。所得的褐色混合物冷卻，減壓蒸發出溶劑。微褐色的固體殘餘物懸浮在10％的氫氧化鈉(25mL)中並攪拌過夜。然後，溶液的pH用10％的乙酸調整至pH4。過濾收集沉澱物並用水洗滌。該粗產物通過柱色譜法利用矽膠並用乙酸乙酯/庚烷(9∶1)洗脫進行純化得到題列化合物(0.15g，收率69％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.1(s，1H)，4.40(t，2H，J7.6Hz)，3.99(t，2H，J7.3Hz)，2.40(s，3H)，1.57-1.69(m，4H)，1.28-1.35(m，4H)，0.88-0.93(m，6H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.5，154.2，148.9，143.2，118.9，45.61，43.13，29.24，28.37，19.51，19.31，14.42，13.60。
MS(ES)m/z 295(m+1)。
實施例33-異丁基-1，8-二甲基-6-硫代黃嘌呤3-異丁基-1，8-二甲基黃嘌呤1(0.150g，6.35mmol，1.0當量)和Lawesson試劑(0.128g，3.17mmol，0.5當量)懸浮在甲苯(10mL)中，反應混合物加熱至回流3.5小時。根據HPLC轉化小於10％。加入Lawesson試劑(0.5g)，反應混合物加熱至回流過夜。蒸發出溶劑，剩餘的褐色固體通過製備HPLC純化得到題列化合物(78mg，49％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.16(s，1H)，3.92(d，2H)，3.77(s，3H)，2.50(s，3H)，2.35(m，1H)，0.97(d，6H)。
實施例43-(2-甲基丁基)-6-硫代黃嘌呤3-(2-甲基丁基)黃嘌呤2(3g，0.013mol)和五硫化二磷(5g，0.025mol)的二噁烷(250mL)溶液回流3小時。蒸餾出差不多150mL二噁烷，並冷卻該溶液。加入水(100mL)，混合物室溫下攪拌2小時。加入2N氫氧化鈉(75mL)，過濾該溶液並用5N的鹽酸中和。過濾出該粗結晶並由乙醇中重結晶得到題列化合物(1.6g，51％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.53(s，1H)，12.32(s，1H)，8.11(s，1H)，3.85(dd，1H，2J13.1Hz，3J7.1Hz)，3.78(dd，1H，2J13.1Hz，3J8.1Hz)，2.00(m，1H)，1.36(m，1H)，1.14(m，1H)，0.87(t，3H，J7.6)，0.82(d，3H，J6.6)。
13C NMR(DMSO-d6)δ175.11，149.19，145.73，143.62，118.32，48.11，32.93，26.40，16.57，11.05。
實施例53-異丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤3-異丁基-8-甲基黃嘌呤2(4.5g，0.02mol)和五硫化二磷(8g，0.04mol)的二噁烷(400mL)溶液回流5小時。蒸餾出差不多200mL二噁烷，並冷卻該溶液。加入水(250mL)，混合物室溫下攪拌2小時。加入2N氫氧化鈉(150mL)，過濾該溶液並用5N的鹽酸中和，該溶液留置過夜。過濾出粗結晶並用水洗滌，得到所要的產物(4.3g)。一部分(2.3g)由乙酸中重結晶得到純的產物(1.5g，共31％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.13(s，1H)，12.16(s，1H)，3.77(d，2H，J8.1Hz)，2.38(s，3H)，2.20(m，1H)，0.86(d，3H，J7.1)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.19，154.23，149.14，146.11，118.56，49.29，26.63，19.73，14.54。
實施例63-異丁基-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-異丁基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮異丁基硫脲3(3.8g，29mmol)和氰基乙酸乙酯(3.9g，34mmol)加入到乙醇鈉溶液[由鈉(0.72g，32mmol)和無水乙醇(30mL)製備]中。所得的混合物回流4小時。冷卻至室溫後，減壓下蒸發出溶劑。10％的乙酸(45mL)加入到粘稠的漿中。過濾收集所得的沉澱物，並用水洗滌該固體。由甲醇/水中重結晶得到所要的產物(4.0g，70％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.8(s，1H)，6.99(s，2H)，4.85(m，2H)，4.61(寬s，1H)，2.29(m，1H)，0.87(d，6H，J6.6Hz)。
MS(ES)m/z 200(M+1)。
b)6-氨基-1-異丁基-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮6-氨基-1-異丁基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.0g，5.0mmol)懸浮在10％的乙酸(20mL)中。加入亞硝酸鈉(0.38g，5.5mmol)，所得的混合物在75℃下加熱1小時。反應混合物先變為粉紅色，然後變為紫色。紫色混合物冷卻至室溫。然後加入水(20mL)，過濾收集紫色固體並用水洗滌得到題列化合物(1.1g，92％的收率)。該固體不用進一步純化用於以下步驟。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.1(寬s，1H)，12.8(寬s，1H)，9.1(寬s，1H)，4.80(寬s，1H)，3.78(寬s，1H)，2.21(m，1H)，0.88(d，6H，J6.3Hz)。
MS(ES)m/z 229(M+1)。
c)5，6-二氨基-1-異丁基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮6-氨基-1-異丁基-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.1g，4.5mmol)懸浮在32％的氨水(10mL)中，加入水(10mL)。該紅色混合物在75℃下加熱。以少部分的加入連二硫酸鈉。當加入1.8g(10mmol)連二硫酸鈉時，溶液的顏色由紅色變為淺黃色。在該點所有的固體都溶解了。再加熱5分鐘後，在溶液中形成沉澱。從油浴中移出反應混合物，室溫下攪拌45分鐘。溶液的pH用10％的乙酸調整至中性pH。過濾收集黃色沉澱並用水洗滌，乾燥得到二胺(0.76g，77％)。該產物使用時不用進一步純化。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.3(寬s，1H)，6.19(s，2H)，4.94(寬s，1H)，3.70(寬s，1H)，3.43(s，2H)，2.27-2.35(m，1H)，0.88(d，6H，J6.1Hz)。
MS(ES)m/z 215(M+1)。
d)3-異丁基-2-硫代黃嘌呤
5，6-二氨基-1-異丁基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.22g，1.0mmol)懸浮在甲酸(1.5mL)中，該溶液在100℃下加熱1小時。減壓蒸發出過量的甲酸。10％的氫氧化鈉(1.5mL)加入到橙色固體中，所得的溶液在100℃下加熱15分鐘。加入水，溶液的pH用稀乙酸調整至pH4。所得的漿狀物室溫下攪拌0.5小時，然後過濾收集沉澱物並用水洗滌。收率(0.21g，90％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.82(s，1H)，12.42(s，1H)，8.15(s，1H)，4.31(d，2H，J7.6Hz)，2.50(m，1H)，0.88(d，6H，J6.6Hz)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.81，152.57，149.79，141.19，110.68，54.04，26.11，19.79。
MS(ES)m/z 225(M+1)。
實施例73-異丁基-2，6-二硫代黃嘌呤3-異丁基-2-硫代黃嘌呤(0.20g，0.89mmol)和Lawesson試劑(1.1g，2.7mmol)懸浮在甲苯(8mL)中。該混合物在120℃下加熱17小時。冷卻反應混合物，減壓分出溶劑。加入10％的氫氧化鈉(20mL)，該混合物攪拌10分鐘。過濾該溶液分出不溶固體，固體用10％的氫氧化鈉溶液洗滌。鹼性濾液用稀乙酸處理直到達到pH4。過濾收集所得的沉澱並用水洗滌。乾燥該物質得到題列化合物(0.16g，73％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.9(s寬，1H)，13.5(s寬，1H)，8.27(s，1H)，4.32(d，2H，J7.5Hz)，2.48-2.55(m，1H)，0.89(d，6H，J6.7Hz)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.3，172.0，144.9，144.5，122.8，54.9，26.3，20.2。
MS(ES)m/z 241(M+1)。
實施例83-異丁基-8-甲基-2-硫代黃嘌呤5，6-二氨基-1-異丁基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(實施例6(c)，0.70g，3.26mmol)和原乙酸三乙酯(10mL)的混合物在130℃下加熱2小時40分鐘。然後反應混合物用冰浴冷卻，過濾固體並用乙醇(4×2mL)洗滌。該固體真空乾燥得到題列化合物(0.71g，95％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.45(s，1H)，12.33(s，1H)，4.28(d，2H，J7.6Hz)，2.50(m，1H)，2.39(s，3H)，0.87(d，6H，J6.6Hz)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.47，152.09，151.18，150.01，110.62，53.96，26.08，19.75，14.41。
MS(ES)m/z 239(M+1)。
實施例93-異丁基-7-甲基-2-硫代黃嘌呤a)N-(6-氨基-1-異丁基-4-氧代-2-硫代-1，2，3，4-四氫嘧啶-5-基)甲醯胺5，6-二氨基-1-異丁基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(實施例6(c)，0.25g，1.2mmol)溶解在甲酸(1.5mL)中，室溫下攪拌0.5小時。幾分鐘後開始形成粉紅色沉澱。加入水，所得的混合物攪拌10分鐘。過濾收集粉紅色固體，用水洗滌，乾燥得到題列化合物(0.25g，86％)。該物質的使用不用進一步純化。NMR顯示所獲得的產物是兩種互變異構體的混合物甲醯胺(主要)和亞氨基(次要)。
1H NMR(DMSO-d6)δ12.0(寬s，1H)，8.73(s，1H)，8.07(s，1H)，6.85(s，2H)，4.94(寬s，1H)，3.71(寬s，1H)，2.22-2.32(m，1H)，0.88(d，6H，J6.5Hz)。由亞氨基異構體產生的另外的峰8.12(d，1H，J11.5 Hz)，7.77(d，1H，J11.5Hz)，7.13(s，2H)。
MS(ES)m/z 243(M+1)。
b)6-氨基-1-異丁基-5-甲基氨基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮N-(6-氨基-1-異丁基-4-氧代-2-硫代-1，2，3，4-四氫嘧啶-5-基)甲醯胺(0.25g，1.0mmol)懸浮在無水四氫呋喃(5mL)中，並逐滴地加入硼烷二甲亞碸絡合物(1M的二氯甲烷溶液，2.5mL，2.5mmol)。反應混合物室溫下攪拌2.5小時。向所得的澄清黃色溶液中加入幾滴2M的鹽酸來除去未反應的硼烷。加入水，所得的水溶液用二氯甲烷(3×15mL)萃取。合併後的有機相用鹽水洗滌並通過Na2SO4乾燥。減壓下蒸發出溶劑得到題列化合物(0.12g，收率54％)。該物質不用進一步純化就可使用。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.9(寬s，1H)，5.75(s，2H)，4.94(寬s，1H)，3.70(寬s，1H)，3.43(s，2H)，2.38(s，3H)，2.24-2.32(m，1H)，0.87(d，6H，J6.8Hz)。
MS(ES)m/z 229(M+1)。
c)3-異丁基-7-甲基-2-硫代黃嘌呤6-氨基-1-異丁基-5-甲基氨基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.11g，0.48mmol)溶解在甲酸(1mL)中，在85℃下加熱1小時。減壓下蒸發出過量的甲酸。加入10％的氫氧化鈉溶液(2mL)，在85℃下加熱該溶液20分鐘。加入水，用稀乙酸將pH調整至4，此時有白色固體沉澱。過濾收集白色固體，用水洗滌並乾燥得到題列化合物(85mg，74％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ12.4(s，1H)，8.10(s，1H)，4.28(d，2H，J7.5Hz)，3.89(s，3H)，2.44-2.50(m，1H)，0.88(d，6H，J6.7Hz)。
13C NMR(DMSO-d6)δ174.3，153.2，150.1，143.7，111.2，54.1，33.6，26.4，20.1。
MS(ES)m/z 239(M+1)。
實施例103-環己基甲基-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-環己基甲基-2-硫代-2，3-二氫1H-嘧啶-4-酮題列化合物根據實施例6(a)的一般方法利用環己基甲基硫脲4(3.92g，22.7mmol)來製備，得到題列化合物，白色固體(4.87g，90％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.75(s，1H)，6.93(s，2H)，5.1-4.7(brm，1H)，4.83(s，1H)，3.55(寬，1H)，1.93(br，1H)，1.75-1.30(brm，5H)，1.10(br，5H)。
b)6-氨基-1-環己基甲基-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例6(b)的一般方法由6-氨基-1-環己基甲基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(3.75g，15.7mmol)製備題列化合物，得到3.60g(85％)的紫色固體產物。
1H NMRδ13.5(br s，1H)，12.7(br s，1H)，9.1(br s，1H)，4.84(br s，1H)，3.82(br s，1H)，1.80(br，1H)，1.64-1.59(br m，5H)，1.07(br，5H)。
c)5，6-二氨基-1-環己基甲基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例6(c)中的一般方法由6-氨基-1-環己基甲基-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(3.60g，13.4mmol)製備題列化合物，不用進一步純化在下一步驟中使用。
1H NMR(DMSO-d6)δ6.17(s，2H)，5.01(br，1H)，4.0-3.0(非常寬的峰，3H)，1.97(br，1H)，1.8-1.3(br m，5H)，1.09(br m，5H)。
d)3-環己基甲基-2-硫代黃嘌呤5，6-二氨基-1-環己基甲基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.44g，5.67mmol)與原甲酸三乙酯(15mL)在146℃下加熱2小時10分鐘。混合物冷卻至室溫，然後再通過冰浴冷卻，之後加入庚烷(5mL)。懸浮液過濾並用庚烷(20mL)洗滌後，所獲得的固體真空乾燥。將該固體(1.2g)懸浮在2-丙醇(125mL)、水(5mL)和叔丁基甲基醚(25mL)的熱混合物中，冷卻並過濾後得到白色沉澱，再用叔丁基甲基醚(5mL)洗滌。該固體真空乾燥得到題列化合物(0.95g，63％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.69(s，1H)，12.35(s，1H)，8.12(s，1H)，4.33(d，2H，J7.1Hz)，2.18(m，1H)，1.49-1.50(m，5H)，1.02-1.17(m，5H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.65，152.68，149.90，141.41，110.96，52.97，35.31，30.09，25.88，25.32。
MS(ES)m/z 265(M+1)。
實施例11
3-(3-甲氧基丙基)-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-(3-甲氧基丙基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮甲醇鈉(0.81g，21.2mmol，1.05當量)加入到3-甲氧基丙基硫脲(3.00g，20.2mmol)的乙醇(10mL)溶液中。加入氰基乙酸乙酯(2.18mL，20.2mmol)的乙醇(10mL)溶液，所得的白色漿狀物加熱至回流2.5小時。蒸出溶劑，剩餘的淡褐色油用2M的乙酸(15mL)處理。過濾出白色結晶並用乙酸洗滌得到題列化合物(2.10g，48％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.77(s，1H)，6.95(s，2H)，4.86(s，1H)，3.39(t，2H)，3.24(s，3H)，1.88(m，2H)。
b)3-(3-甲氧基丙基)-2-硫代黃嘌呤乙酸(25mL)加入到6-氨基-1-(3-甲氧基丙基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(2.00g，9.29mmol)中，紅色反應混合物加熱至90℃。加入亞硝酸鈉(0.71g，10.2mmol)的水(7mL)溶液，移走油浴，反應混合物攪拌20分鐘。溶劑與乙醇共蒸發，剩餘的紅色固體(1.8g，79％)不用進一步純化用於下一步驟中。
鉑/碳(0.5g)加入到粗6-氨基-1-(3-甲氧基丙基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.80g，7.38mmol)的四氫呋喃(80mL)和水(20mL)溶液中，反應混合物大氣壓下氫化2小時。過濾掉催化劑，淡褐色的濾液與乙醇(250mL)共蒸發。所得的褐色固體1.6g不用進一步純化用於下一步驟中。
5，6-二氨基-1-環己基甲基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.6g，12.2mmol)溶解在乙醇(10mL)和原甲酸三乙酯(10mL)中，反應混合物回流2.5小時。蒸發出溶劑，所得的褐色固體通過快速色譜法(庚烷/乙酸乙酯，4∶1-1∶1)純化得到題列化合物(110mg，9％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.78(s，1H)，12.40(s，1H)，8.16(s，1H)，4.52(t，2H，J7.1Hz)，3.41(t，2H，J7.1Hz)，3.21(s，3H)，1.98(m，2H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.27，152.63，149.30，141.50，110.94，69.51，57.82，45.47，26.68。
實施例123-環丙基甲基-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-環丙基甲基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮向1-環丙基甲基-2-硫脲(0.60g，4.6mmol)的乙醇(10mL)溶液中加入甲醇鈉(0.26g，4.8mmol)，5分鐘後加入氰基乙酸乙酯(0.50mL，4.6mmol)。所得的混合物加熱至回流2小時40分鐘，繼而減壓蒸發出溶劑，所得的黃色固體用2M的乙酸水溶液(10mL)處理得到白色固體。過濾收集該固體並用2M的乙酸水溶液(10mL)洗滌，與乙醇(10mL)攪拌，然後減壓下蒸發並乾燥，得到題列化合物(0.51g，56％)。
MS(ES)m/z 198(M+1)。
b)3-環丙基甲基-2-硫代黃嘌呤6-氨基-1-環丙基甲基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.50g，2.5mmol)懸浮在乙酸(8mL)中，在90℃下加熱15分鐘後，向溶液中加入亞硝酸鈉(0.19g，2.8mmol)的水(1mL)溶液。15分鐘後停止加熱，反應混合物室溫下攪拌3小時。加入乙醇(30mL)，減壓分出溶劑。所得的油用乙醇(30mL)處理，蒸發並乾燥，得到6-氨基-1-環丙基甲基-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.61g)，棕紅色固體。
由前一反應得到的粗產物(0.61g)溶解在水(10mL)和四氫呋喃(30mL)中，加入鉑/碳(0.30g)。混合物在大氣壓下氫化4小時，過濾分出催化劑，減壓分出溶劑。蒸發加入的乙醇(50mL)得到橙色固體。殘餘物溶解在乙醇(10mL)中，加入原甲酸三乙酯(5mL)，所得的混合物回流溫度下加熱過夜。蒸發溶劑並利用製備HPLC純化得到所要的化合物(38mg，6-氨基-1-環丙基甲基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮的收率6.2％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.78(s，1H)，12.43(s，1H)，8.15(s，1H)，4.37(d，2H，J7.1Hz)，1.50(m，1H)，0.52(m，2H)，0.45(m，2H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.52，152.62，149.52，141.48，111.02，51.71，9.27，3.50。
MS(ES)m/z 223(M+1)。
實施例133-異丁基-1-甲基-2-硫代黃嘌呤a)1-異丁基-3-甲基硫脲甲胺(2M的甲醇溶液，20.0mL，40.2mmol)室溫下15分鐘內逐滴地加入到異丁基異硫氰酸酯(2.00mL，16.5mmol)中。反應混合物加熱至回流3.5小時，蒸發出溶劑得到題列化合物(2.37g，98％)，無色的油。
1H NMR(DMSO-d6)δ7.40(s，1H)，7.29(s，1H)，3.15(寬s，2H)，2.80(d，2H)，1.81(m，1H)，0.83(d，6H)。
b)6-氨基-1-異丁基-3-甲基-5-亞硝基-2-硫代-1H-嘧啶-4-酮氰基乙酸(1.52g，17.8mmol)的乙酸酐(2.45mL，25.9mmol)溶液加入到1-異丁基-3-甲基硫脲(2.37g，16.2mmol)中。反應混合物加熱至60℃1.5小時。溶劑蒸發，所得的紅色油溶解在乙醇(5mL)中，加入5M的氫氧化鈉(1.6mL，8.1mmol)。反應混合物回流2小時。溶劑與乙醇共蒸發，所得的淡褐色固體通過快速色譜法(乙酸乙酯)純化得到6-氨基-1-異丁基-3-甲基-2-硫代-1H-嘧啶-4-酮(1.0g，29％)，黃色固體。
亞硝酸鈉(0.34g，4.9mmol)的水(1.5mL)溶液室溫下加入到胺(1.00g，4.7mmol)的乙醇(7.0mL)溶液中。加入5M的鹽酸(1.0mL，4.9mmol)，所得的暗紅色反應混合物室溫下攪拌2小時。加入乙醇(20mL)，過濾出紅色結晶並用二乙醚洗滌。乾燥結晶得到題列化合物(0.68g，60％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，9.35(s，1H)，4.28(dd，2H)，3.75(s，3H)，2.34(m，1H)，0.90(d，6H)。
c)3-異丁基-1-甲基-2-硫代黃嘌呤鈀/碳(3.70g)加入到6-氨基-1-異丁基-3-甲基-5-亞硝基-2-硫代-1H-嘧啶-4-酮(6.0g，24.8mmol)的四氫呋喃(1200mL)和水(300mL)溶液中，反應混合物氫化(2.5bar)21小時。過濾掉催化劑，減壓下蒸發出四氫呋喃。殘餘物用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。有機相濃縮，乙醇(100ml)加入到殘餘物中並蒸發。
褐色的二胺中間體溶解在原甲酸三乙酯(50mL)中，反應混合物加熱至140℃40分鐘。反應混合物濃縮並與乙醇共蒸發得到褐色固體。殘餘物通過快速色譜法(庚烷/乙酸乙酯，2∶1-乙酸乙酯)純化，然後用二乙醚和己烷洗滌該固體得到題列化合物(160mg，2.7％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.86(s，1H)，8.21(s，1H)，4.34(d，2H，J7.1Hz)，3.89(s，3H)，2.40(m，1H)，0.86(d，6H，J7.1Hz)。
13C NMR(DMSO-d6)δ174.68，153.33，148.41，141.73，109.92，52.83，37.17，25.77，19.92。
實施例143-(2-四氫呋喃基-甲基)-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-(2-四氫呋喃基-甲基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮2-四氫呋喃基-甲基硫脲(1.0g，6.2mmol)和氰基乙酸乙酯(0.85g，7.5mmol)加入到乙醇鈉[剛由鈉(0.16g，6.9mmol)和無水乙醇(4mL)製備的]溶液中。所得的混合物回流3.5小時。冷卻至室溫後，減壓蒸發出溶劑，所得的粘稠漿液重新溶解在水(30mL)中。該鹼性溶液用2M鹽酸中和。過濾收集所得的沉澱，固體用水洗滌。該粗產物(1.3g，90％)不用進一步純化就可使用。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.9(s，1H)，6.79(s，2H)，4.91(s，1H)，4.62-4.65(m，1H)，4.21-4.31(m，3H)，3.81-3.87(m，1H)，3.63-3.68(m，1H)，1.77-2.01(m，3H)，1.57-1.65(m，1H)。
MS(ES)m/z 228(M+1)。
b)6-氨基-1-(2-四氫呋喃基甲基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮6-氨基-1-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.3g，5.6mmol)懸浮在10％的乙酸(25mL)水溶液中。加入亞硝酸鈉(0.43g，6.2mmol)，該混合物在75℃下加熱1小時。過濾收集紫色固體，洗滌並乾燥，得到題列產物(1.3g，90％)。
1H NMRδ13.3(br s，1H)，12.8(br s，1H)，8.93(br s，1H)，4.57(br s，1H)，4.45(br s，1H)，4.18-4.24(m，1H)，3.74-3.79(m，1H)，3.59-3.64(m，1H)，1.86-2.01(m，2H)，1.74-1.82(m，1H)，1.59-1.67(m，1H)。
c)5，6-二氨基-1-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮6-氨基-1-(2-四氫呋喃基甲基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.3g，5.1mmol)溶解在32％的氨水(15mL)中，加入水(15mL)。紅色溶液在70℃下加熱，同時以小部分的加入連二硫酸鈉(2.2g，13mmol)。加熱再繼續15分鐘，然後黃色溶液在室溫下攪拌1小時。該溶液用2M的鹽酸中和。過濾收集黃色沉澱，用水洗滌，乾燥，得到題列產物(0.90g，73％)。該物質不用進一步純化用於下一步驟中。
1H NMR(DMSO-d6)δ5.96(s，2 H)，4.74(brd，1H)，4.35(brs，1H)，4.21-4.28(m，1H)，3.84-3.89(m，1H)，3.64-3.69(m，1H)，3.49(brs，2H)，1.78-2.01(m，4H)，1.60-1.67(1H)。
MS(ES)m/z 243(M+1)。
d)3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤5，6-二氨基-1-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.25g，1.0mmol)溶解於甲酸(1mL)中，在70℃下加熱0.5小時。幾分鐘後在溶液中形成粉紅色固體。蒸發出過量的甲酸，所得的固體溶解於10％的氫氧化鈉溶液(4mL)中。該溶液在70℃下加熱40分鐘，然後用2M的鹽酸中和。過濾收集所得的沉澱，用水洗滌並乾燥，得到純產物(0.23g，87％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.8(brs，1H)，12.4(brs，1H)，8.16(s，1H)，4.53-4.61(m，2H)，4.38-4.44(m，1H)，3.79-3.84(m，1H)，3.58-3.63(m，1H)，1.72-1.98(m，4H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.65，152.68，149.90，141.41，110.96，52.97，35.31，30.09，25.88，25.32。
MS(ES)m/z 253(M+1)。
實施例153-(2-甲氧基乙基)-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮題列化合物可根據實施例14(a)的一般方法來製備，但是使用(2-甲氧基乙基)硫脲(1.5g，11mmol)，得到題列化合物，白色固體(2.1g，93％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.9(s，1H)，6.82(s，2H)，4.89(s，1H)，4.53(寬s，2H)，3.62(t，2H，J5.9Hz)，3.29(s，3H)。
MS(ES)m/z 202(M+1)。
b)6-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮6-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.0g，5.0mmol)懸浮在10％的乙酸(20mL)中。加入亞硝酸鈉(0.38g，5.5mmol)，所得的混合物75℃下加熱1小時。反應混合物先變為粉紅色，再變為紫色。加入水(20mL)，反應混合物放入冰箱中過夜。過濾收集紫色固體，用水洗滌得到題列化合物(0.42g，37％)。通過縮小紫色濾液的體積獲得第二部分產物(0.22g，19％)。該粗產物不用進一步純化用於下一步驟中。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.4(br s，1H)，12.8(br s，1H)，9.06(br s，1H)，4.54(br s，2H)，3.60(t，2H，J5.8Hz)，3.24(s，3H)。
c)5，6-二氨基-1-(2-甲氧基乙基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(c)的一般方法製備題列化合物，但是使用6-氨基-1-(2-甲氧基乙基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.42g，1.8mmol)，得到題列化合物，黃色固體(0.28g，68％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.9(br s，1H)，5.94(s，2H)，4.58(br s，2H)，3.64(t，2H，J5.6Hz)，3.47(br s，2H)，3.28(s，3H)。
MS(ES)m/z 217(M+1)。
d)3-(2-甲氧基乙基)-2-硫代黃嘌呤5，6-二氨基-1-(2-甲氧基乙基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.27g，1.3mmol)懸浮在甲酸(2mL)中，該溶液在90℃下加熱1.5小時。減壓下蒸發出過量的甲酸。10％的氫氧化鈉溶液(5mL)加入到橙色固體中，所得的溶液90℃下加熱2小時。反應混合物用稀乙酸中和。所得的溶液放入冰箱中幾天，然後過濾收集已經形成的橙色針狀結晶，並用水洗滌。收率(0.11g，40％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.8(寬s，1H)，12.5(寬s，1H)，8.16(s，1H)，4.65(t，2H，J6.4Hz)，3.73(t，2H，J6.4Hz)，3.28(s，3H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ172.14，151.06，148.02，139.85，109.20，66.04，56.65，44.72。
MS(ES)m/z 227(M+1)。
實施例163-(3-(1-嗎啉基)丙基)-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-(3-(1-嗎啉基)丙基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4酮根據實施例14(a)的一般方法製備題列化合物，只是使用1-(3-(1-嗎啉基)丙基)-2-硫脲(1.1g，5.3mmol)，得到題列化合物，白色固體(1.2g，87％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.8(s，1H)，7.24(s，2H)，4.84(s，1H)，4.33(br s，2H)，3.55-3.57(m，4H)，2.30-2.36(m，6H)，1.82-1.89(m，2H)。
MS(ES)m/z 271(M+1)。
b)5，6-二氨基-1-(3-(1-嗎啉基)丙基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4酮6-氨基-1-(3-(1-嗎啉基)丙基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.57g，2.1mmol)溶解在10％的乙酸(10mL)中。加入亞硝酸鈉(0.16g，2.3mmol)，室溫下攪拌漿狀物。2小時後仍剩餘大量起始物質。加入更多的亞硝酸鈉(0.32g，4.6mmol)，溶液攪拌過夜。過濾收集沉澱並用水洗滌。沒有經過分析，這減少了極端不溶的固體。該固體溶解於32％的氨水(6mL)中，然後加入水(6mL)。所得的紅色溶液70℃下加熱，以小部分的加入連二硫酸鈉(0.91g，5.2mmol)。然後，該溶液70℃下攪拌1.5小時。加入更多的連二硫酸鈉(0.91g，5.2mmol)，該溶液再在70℃下攪拌2.5小時。過濾該中性溶液分出不溶固體。濾液濃縮，所得的黃色固體懸浮在水中。過濾收集固體，用水洗滌，乾燥得到題列產物(0.068g，11％)。
1H NMRδ12.0(br s，1H)，6.48(s，2H)，3.59(m，4H)，2.30-2.45(m，6H)，1.88-1.91(m，2H)。
MS(ES)m/z 286(M+1)。
c)3-(3-(1-嗎啉基)丙基)-2-硫代黃嘌呤5，6-二氨基-1-(3-(1-嗎啉基)丙基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.068g，0.24mmol)溶解於甲酸(0.4mL)中，室溫下攪拌1小時。蒸發出過量的甲酸，加入10％的氫氧化鈉溶液(1.5mL)，該黃色溶液70℃下加熱40分鐘。冷卻的溶液用2M的鹽酸中和，放入冰箱中幾小時。過濾收集沉澱，用水洗滌，乾燥得到題列化合物，灰白色固體(0.025g，36％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.7(寬s，1H)，12.4(s，1H)，8.17(s，1H)，4.53(t，2H，J7.5Hz)，3.52(m，4H)，2.31-2.46(m，6H)，1.91-1.99(m，2H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.68，152.99，149.82，141.75，111.24，66.39，55.70，53.43，46.58，23.35。
MS(ES)m/z 296(M+1)。
實施例173-(2-呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-(2-呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(a)的一般方法製備題列化合物，只是反應時間降低至1.5小時，用稀乙酸沉澱產物。利用2-呋喃基甲基硫脲(1.0g，6.4mmol)，獲得題列產物(0.95g，66％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.8(br s，1H)，7.58-7.62(m，1H)，7.05(br s，2H)，6.38-6.42(m，1H)，6.31-6.36(m，1H)，5.68(br s，2H)，4.85(s，1H)。
MS(ES)m/z 224(M+1)。
b)6-氨基-1-(2-呋喃基甲基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(b)的一般方法製備題列化合物，只是反應混合物先在60℃下加熱1小時，然後在室溫下攪拌1小時。當使用6-氨基-1-(2-呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.37g，1.6mmol)和2當量的亞硝酸鈉(0.23g，3.3mmol)時，獲得褐色固體產物(0.25g，60％)。
1H NMRδ12.1(br s，1H)，7.54-7.57(m，1H)，7.45-7.47(m，1H)，6.37-6.40(m，1H)，6.32-6.38(m，1H)，6.30-6.32(m，1H)，5.62(s，2H)，5.48(s，2H)。
c)5，6-二氨基-1-(2-呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(c)的一般方法由6-氨基-1-(2-呋喃基甲基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.25g，0.99mmol)製備題列化合物(0.12g，52％)，不需純化用於下一步驟中。
1H NMR(DMSO-d6)δ12.5(brs，1H)，12.2(s，1H)，7.58-7.60(m，1H)，7.55-7.57(m，1H)，6.38-6.41(m，2H)，6.34-6.37(m，1H)，6.30(br s，2H)，5.77(s，2H)，5.63(s，2H)。
MS(ES)m/z 239(M+1)。
d)3-(2-呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤5，6-二氨基-1-(2-呋喃基甲基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.12g，0.51mmol)的甲酸(0.5mL)溶液室溫下攪拌0.5小時。蒸發出過量的甲酸，所得的固體溶解於10％的氫氧化鈉溶液(3mL)中。該溶液在70℃下加熱0.5小時。反應混合物用2M的鹽酸中和。過濾收集所得的沉澱，用水洗滌，乾燥。收率(0.047g，37％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.9(s，1H)，12.5(s，1H)，8.18(s，1H)，7.55-7.57(m，1H)，6.36-6.39(m，2H)，5.69(s，2H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ174.14，152.85，149.56，149.33，142.77，141.80，110.93，109.40，44.26。
MS(ES)m/z 249(M+1)。
實施例183-(4-甲氧基苄基)-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(a)的一般方法製備題列化合物，只是反應在回流溫度下進行2.5小時，繼而在室溫下進行16小時，利用稀乙酸沉澱產物。用(4-甲氧基苄基)硫脲(1.0g，5.1mmol)起始，得到所要的產物(1.2g，92％)。
1H NMR(CD3OD)δ7.19(d，2H，J8.6Hz)，6.89(d，2H，J8.6Hz)，5.72(brs，2H)，5.06(s，1H)，3.77(s，3H)。
MS(ES)m/z 264(M+1)。
b)6-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(b)的一般方法製備題列化合物，但是使用2.5小時的反應時間。利用6-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.2g，4.7mmol)得到產物(1.2g，88％)，藍綠色固體，不用進一步純化用於下一反應中。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.9(s，1H)，7.18-7.12(m，2H)，6.95-6.83(m，2H)，5.58(br s，2H)，3.70(s，3H)。
c)5，6-二氨基-1-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(c)的一般方法製備題列化合物，只是使用稀乙酸來中和反應混合物。由6-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.2g，4.1mmol)起始製備所要的產物(0.83g，73％)，黃色固體。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.7(br s，2H)，7.20-7.12(m，2H)，6.92-6.85(m，2H)，6.06(s，2H)，5.73(br s，2H)，3.71(s，3H)。
MS(ES)m/z 279(M+1)。
d)3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代黃嘌呤5，6-二氨基-1-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.83g，3.0mmol)溶解於甲酸(3.0mL)中，所得的溶液在100℃下加熱1小時。減壓分出過量的甲酸，殘餘物溶解於10％的氫氧化鉀溶液(8mL)中，在100℃下加熱15分鐘。反應混合物用10％的乙酸中和，過濾收集所得的沉澱。沉澱物由乙醇∶二甲基甲醯胺中重結晶，所分離的結晶溶解於1M的氫氧化鉀溶液中，用10％的乙酸中和來沉澱並過濾收集。乾燥後，獲得題列化合物(0.14g，16％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.9(br s，1H)，12.5(s，1H)，8.15(s，1H)，7.36(d，2H，J8.6Hz)，6.84(d，2H，J8.9Hz)，5.63(s，2H)，3.70(s，3H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.85，158.52，152.45，149.36，141.41，129.35，127.97，113.58，110.83，55.01，49.63.
MS(ES)m/z 289(M+1)。
實施例193-(4-氟苄基)-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-(4-氟苄基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(a)的一般方法製備題列化合物，只是反應時間為16小時，用稀乙酸處理來沉澱產物。(4-氟苄基)硫脲(1.0g，5.4mmol)得到白色固體產物(1.2g，86％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.9(br s，1H)，7.27-7.11(m，4H)，6.91(s，2H)，5.67(br s，2H)，4.89(s，1H)。
MS(ES)m/z 252(M+1)。
b)6-氨基-1-(4-氟苄基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(b)的一般方法製備題列化合物，只是反應時間增加至共8小時。6-氨基-1-(4-氟苄基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.2g，4.7mmol)得到所要的產物(0.88g，67％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.1(br s，1H)，12.8(br s，1H)，7.33-7.08(m，2H)，7.13(t，2H，J8.7Hz)，5.62(br s，2H)。
c)5，6-二氨基-1-(4-氟苄基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(c)的一般方法製備題列化合物，只是反應在75℃下保持1小時，然後在室溫下保持20分鐘，用稀乙酸中和反應混合物。利用6-氨基-1-(4-氟苄基)-5-亞硝基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.88g，3.1mmol)得到所要的產物(0.55g，66％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ12.1(br s，2H)，7.29-7.12(m，4H)，6.08(s，2H)，5.75(br s，2H)。
MS(ES)m/z 267(M+1)。
d)3-(4-氟苄基)-2-硫代黃嘌呤根據實施例18(d)的一般方法製備題列化合物，但是使用5，6-二氨基-1-(4-氟苄基)-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.55g，2.1mmol)，得到所要的產物(0.24g，41％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.9(br s，1H)，12.5(s，1H)，8.15(s，1H)，7.44(dd，2H，J8.6，8.6Hz)，7.12(t，2H，J8.9Hz)，5.68(s，2H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.96，160.14，152.48，149.28，141.44，132.19，129.83(d，J8.0Hz)，115.00(d，J22Hz)，110.82，49.49。
MS(ES)m/z 277(M+1)。
實施例203-苯乙基-2-硫代黃嘌呤a)6-氨基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(a)的一般方法製備題列化合物，只是回流3.5小時的反應時間，然後在室溫下反應16小時。用稀乙酸處理來沉澱產物。苯乙基硫脲(1.0g，5.6mmol)得到白色固體產物(1.3g，95％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ11.8(br s，1H)，7.37(d，2H，J7.1Hz)，7.31(t，2H，J7.4Hz)，7.22(t，1H，J7.2Hz)，7.08(br s，2H)，4.88(s，2H)，4.52(br s，1H)，3.32(br s，1H)，2.92(t，2H，J8.3Hz)。
MS(ES)m/z 248(M+1)。
b)6-氨基-5-亞硝基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(b)的一般方法製備題列化合物，只是增加反應時間至1.5小時。6-氨基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.3g，5.3mmol)得到所要的產物(1.3g，92％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.5(br s，1H)，12.8(br s，1H)，9.34(br s，1H)，7.37-7.28(m，4H)，7.25-7.20(m，1H)，4.55(br s，2H)，2.90(t，2H，J8.4Hz)。
c)5，6-二氨基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮根據實施例14(c)的一般方法製備題列化合物，只是反應在75℃下保持15分鐘，然後室溫下保持1小時20分鐘，用稀乙酸中和反應混合物。使用6-氨基-5-亞硝基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(1.3g，4.8mmol)分離到所要的產物(1.1g，88％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ10.1(br s，2H)，7.46-7.16(m，5H)，6.25(s，2H)，4.56(br s，2H)，2.94(t，2H，J8.3Hz)。
MS(ES)m/z 263(M+1)。
d)3-苯乙基-2-硫代黃嘌呤根據實施例18(d)的一般方法製備題列化合物，只是最後用1M的鹽酸中和。使用5，6-二氨基-1-苯乙基-2-硫代-2，3-二氫-1H-嘧啶-4-酮(0.55g，2.1mmol)得到所要的產物(0.39g，34％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ7.53(s，1H)，7.32(d，4H，J4.5Hz)，7.22(m，1H)，4.63(m，2H)，3.01(m，2H)，1.88br s，2H)。
13C NMR(DMSO-d6)δ170.56，155.20，150.51，146.41，138.54，128.58，128.46，126.34，117.49，48.82，32.59。
MS(ES)m/z 273(M+1)。
實施例213-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤的對映體3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤的外消旋物溶液(3mg/mL)通過手性HPLC在Chirapak AD-RH柱(4.6×150mm；5μm)上進行分離。流動相是甲醇∶乙酸∶三乙胺(100∶0.1∶0.1)，流速1mL/min。加樣體積為20μL。
對映體1e.e.93.6％；MS(ES)m/z 253(M+1)。
對映體2e.e.97.3％；MS(ES)m/z 253(M+1)。
實施例223-正丁基-2-硫代黃嘌呤利用實施例6所描述的方法製備題列化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.82(s，1H)，12.40(s，1H)，8.15(s，1H)，4.45(m，2H)，1.73(m，2H)，1.34(sextet，2H，J＝7.5)，0.92(t，3H，J＝7.5)。
13C NMR(DMSO-d6)δ173.31，152.62，149.30，141.47，110.84，47.37，28.61，19.48，13.72。
MS(ES)m/z 225(M+1)。
篩選測定MPO抑制活性的方法公開在共同未決的專利申請WO02/090575中。本發明化合物的藥物活性在下面的篩選中進行測試測定緩衝液20mM的磷酸鈉/鉀緩衝液pH6.5，含有10mM牛磺酸和100mM NaCl。
展開試劑2mM的3，3′，5，5′-四甲基聯苯胺(TMB)，200μM KI，帶有20％DMF的200mM乙酸鹽緩衝液pH5.4。
向10μl用測定緩衝液稀釋的化合物中，室溫下10分鐘內加入10μl人體MPO(最後濃度2.5nM)。然後室溫下10分鐘內加入50μl的H2O2(最後濃度100μM)，或測定緩衝液單獨作為對照。5分鐘內加入10μl的0.2mg/ml的過氧化氫酶(最後濃度18μg/ml)來停止反應，再加入100μl的TMB展開試劑(2mM TMB的含有20％二甲基甲醯胺(DMF)的200mM乙酸鹽緩衝液pH5.4和200μM KI的溶液)。調製平板，然後利用吸收光譜法在約650nM處約5分鐘後測量所形成的氧化3，3′，5，5′-四甲基聯苯胺的量。然後利用標準方法測定IC50值。
在進行上述的篩選試驗時，實施例1-22的化合物得到了小於60μM的IC50值，它們表現出了有用的治療活性。有代表性的結果列在下表中

權利要求
1.通式(Ia)或(Ib)化合物 或 其中X和Y中的一個代表S，另一個代表O或S；R1代表氫或C1-6烷基；R2代表氫或C1-6烷基；所述烷基可任選的被以下基團所取代i)飽和或部分不飽和的3-7元環，該環任選的加入一個或兩個獨立的選自O、N和S的雜原子，和任選的加入羰基；該環可任選的被一個或多個選自滷素、羥基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；該烷基可任選的再被羥基或C1-6烷氧基所取代；或ii)C1-6烷氧基；或iii)選自苯基、呋喃基或噻吩基的芳環；該芳環可任選的再被滷素、C1-6烷基或C1-6烷氧基所取代；R3和R4獨立的代表氫或C1-6烷基；或其藥學上可接受的鹽，在製備用於治療或預防MPO酶被抑制有益時的疾病或症狀的藥物中的用途。
2.權利要求1的用途，其中的疾病或症狀是神經炎性疾病。
3.權利要求1或2的用途，其中X代表S，Y代表O。
4.權利要求1-3中任一的用途，其中R3代表H。
5.權利要求1-4中任一的用途，其中R2代表任選的取代的C1-6烷基。
6.權利要求1-5中任一的用途，其中R4代表H。
7.一種藥物製劑，包含治療有效量的權利要求1的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的助劑、稀釋劑或載體混合，用於治療或預防神經炎性疾病。
8.通式(Ia)或(Ib)的化合物 或 其中X代表S，Y代表O；R1代表氫或C1-6烷基；R2代表被飽和或部分不飽和的3-7元環取代的C1-6烷基，該環任選的加入一個或兩個獨立的選自O、N和S的雜原子，和任選的加入羰基；該環可任選的被一個或多個選自滷素、羥基、C1-6烷氧基和C1-6烷基的取代基所取代；該烷基可任選的再被羥基或C1-6烷氧基所取代；R3和R4獨立的代表氫或C1-6烷基；及其藥學上可接受的鹽。
9.通式(Ia)或(Ib)的化合物，它們是1，3-二異丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤；1，3-二丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤；3-異丁基-1，8-二甲基-6-硫代黃嘌呤；3-(2-甲基丁基)-6-硫代黃嘌呤；3-異丁基-8-甲基-6-硫代黃嘌呤；3-異丁基-2-硫代黃嘌呤；3-異丁基-2，6-二硫代黃嘌呤；3-異丁基-8-甲基-2-硫代黃嘌呤；3-異丁基-7-甲基-2-硫代黃嘌呤；3-環己基甲基-2-硫代黃嘌呤；3-(3-甲氧基丙基)-2-硫代黃嘌呤；3-環丙基甲基-2-硫代黃嘌呤；3-異丁基-1-甲基-2-硫代黃嘌呤；3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；3-(2-甲氧基乙基)-2-硫代黃嘌呤；3-(3-(1-嗎啉基)丙基)-2-硫代黃嘌呤；3-(2-呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代黃嘌呤；3-(4-氟苄基)-2-硫代黃嘌呤；3-苯乙基-2-硫代黃嘌呤；(+)-3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；(-)-3-(2-四氫呋喃基甲基)-2-硫代黃嘌呤；3-正丁基-2-硫代黃嘌呤；或其藥學上可接受的鹽。
10.權利要求8或9中的化合物作為藥物的用途。
11.一種藥物組合物，含有權利要求8或9的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的助劑、稀釋劑或載體混合。
12.製備權利要求8或9中所定義的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其藥學上可接受的鹽、對映體、非對映體或外消旋物的方法，其中該方法包括(a)通式(IIa)或(IIb)化合物 或 其中R1、R2、R3和R4如權利要求1所定義，X代表O或S，Y代表O；與硫化作用化合物如Lawesson試劑或五硫化二磷反應；得到其中Y代表S的相應化合物；或(b)通式(IIIa)或(IIIb)的二胺 或 其中R1、R2、R3、X和Y如權利要求1中所定義；與甲酸或與三烷基原酸酯反應；其中，根據需要將所得的通式(Ia)或(Ib)化合物，或其另一種鹽轉化成其藥學上可接受的鹽；或將所得的通式(Ia)或(Ib)化合物轉化成另一種通式(Ia)或(Ib)化合物；其中根據需要將所得的通式(Ia)或(Ib)化合物轉化成其光學異構體。
全文摘要
公開了通式(Ia)或(Ib)化合物，其中R
文檔編號A61P17/02GK1646531SQ03808355
公開日2005年7月27日 申請日期2003年4月15日 優先權日2002年4月19日
發明者S·漢松, G·諾德瓦爾, A·-K·蒂登 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司