作為治療劑的修飾肽的製作方法

2023-09-22 13:09:35 2

專利名稱：作為治療劑的修飾肽的製作方法
本申請是申請日為1999年10月25日，申請號為99814727.3，發明名稱為「作為治療劑的修飾肽」的發明專利申請的分案申請。
背景技術：
重組蛋白是一類新興的治療劑。這種重組治療劑已經引起蛋白生成和化學修飾的進步。這種修飾可以保護治療蛋白，主要通過阻斷它們暴露於蛋白水解酶。蛋白修飾也可以提高治療蛋白的穩定性、循環時間和生物活性。描述蛋白修飾和融合蛋白的綜述文章是Francis(1992)，Focus on Growth Factors34-10(Mediscript，London)，其通過引用結合到本文中。
一種有用的修飾是與抗體的「Fc」區結合。抗體包括兩個功能獨立的部分一個結合抗體的稱為「Fab」的可變區和一個稱為「Fc」的恆定區，恆定區與諸如補體激活和由吞噬細胞攻擊的效應子功能有關。Fc的血清半壽期長，而Fab是短壽的。Capon等(1989)，Nature337525-31。當Fc區與治療蛋白一起構建時，Fc區可以提供較長的半壽期，或加入一些功能，諸如Fc受體結合、A蛋白結合、補體固定，也許甚至加入胎盤轉運(出處同前)。表1總結了本領域已知的Fc融合體的應用。
表1-Fc與治療蛋白的融合體
研製治療劑的一種相當不同的方法是肽文庫篩選。蛋白配體與其受體的相互作用通常發生在相對大的界面上。然而，正如用人生長激素及其受體所證明的，界面上僅少數關鍵殘基提供大部分結合能。Clackson等(1995)，Science267383-6。大多數蛋白配體僅在適當的拓撲結構下展示結合表位，或用於與結合無關的功能。因此，僅「肽」長度(2-40個胺基酸)的分子可以結合於特定大蛋白配體的受體蛋白。這種肽可以模擬所述大蛋白配體的生物活性(「肽激動劑」)，或通過競爭結合抑制所述大蛋白配體的生物活性(「肽拮抗劑」)。
噬菌體展示肽文庫已經作為鑑定這種肽激動劑和肽拮抗劑的有力的方法出現。參見例如Scott等(1990)，Science249386；Devlin等(1990)，Science249404；1993年6月29日授予的美國專利第5,223,409號；1998年3月31日授予的美國專利第5,733,731號；1996年3月12日授予的美國專利第5,498,530號；1995年7月11日授予的美國專利第5,432,018號；1994年8月16日授予的美國專利第5,338,665號；1999年7月13日授予的美國專利5,922,545號；1996年12月19日公開的WO 96/40987；和1998年4月16日公開的WO 98/15833(每個文獻均通過引用結合到本文中)。在這種文庫中，通過與絲狀噬菌體的外被蛋白融合呈現隨機肽序列。通常，對抗體固定的受體胞外域親和洗脫所述呈現的肽。可以通過連續數輪親和純化和再繁殖富集保留的噬菌體。可以對最佳結合肽測序，以鑑定一個或多個結構相關肽家族內的關鍵殘基。參見例如Cwirla等(1997)，Science2761696-9，其中鑑定了兩個不同的家族。所述肽序列也可以提示哪些殘基可以通過丙氨酸掃描或通過在DNA水平上誘變來置換。可以創造誘變文庫並對其篩選，以進一步優化最佳結合物的序列。Lowman(1997)，Ann.Rev.Biophys.Biomol.Struct.26401-24。
蛋白-蛋白相互作用的結構分析也可以用來提示模擬大蛋白配體結合活性的肽。在這種分析中，晶體結構可以提示所述大蛋白配體關鍵殘基的身份和相對方向，據此可以設計肽。參見例如Takasaki等(1997)，Nature Biotech.151266-70。這些分析方法也可以用來研究受體蛋白和通過噬菌體展示選擇的肽之間的相互作用，這可以提示對所述肽的進一步修飾以增加結合親和性。
其它方法在肽研究方面與噬菌體展示競爭。可以將肽文庫與lac阻抑物羧基端融合併在大腸桿菌中表達。另一基於大腸桿菌的方法允許通過與肽聚糖結合的脂蛋白(PAL)融合而呈現在細胞外膜上。在下文中，這些方法和相關方法被統稱為「大腸桿菌展示」。在另一方法中，在核糖體釋放之前停止隨機RNA的翻譯，產生仍附著有其結合的RNA的多肽文庫。在下文，該方法和相關方法被統稱為「核糖體展示」。其它方法利用肽與RNA的化學鍵；參見例如Robert和Szostak(1997)，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，9412297-303。在下文，該方法和相關方法統稱為「RNA-肽篩選」。已經開發了化學衍生的肽文庫，其中肽固定在穩定的非生物材料上，諸如聚乙烯棒或溶劑可滲透的樹脂。另一化學衍生肽文庫使用光刻法來篩選固定到玻璃玻片上的肽。在下文，這些方法和相關方法稱為「化學肽篩選」。化學肽篩選可能是有利的，因為它允許利用D-胺基酸和其它非天然類似物以及非肽組分。在Wells和Lowman(1992)，Curr.Opin.Biotechnol.3355-62中綜述了生物方法和化學方法。
在概念上，採用噬菌體展示和上述的其它方法，人們可以發現任何蛋白的肽模擬物。這些方法已經用於表位作圖、鑑定蛋白-蛋白相互作用中關鍵的殘基，並且用作發現新治療劑的指導。例如Cortese等(1996)，Curr.Opin.Biotech.7616-21。現在肽文庫最常用於免疫學研究，例如表位作圖。Kreeger(1996)，The Scientist10(13)19-20。
本文特別關注的是肽文庫和其它技術在發現藥理學活性肽方面的應用。在表2中總結了本領域鑑定的許多這種肽。在所列出的出版物中描述了所述肽，每個出版物通過引用結合到本文中。描述了所述肽的藥理學活性，並且在許多情況下在括號內後接其簡寫術語。這些肽中的某些肽已經進行了修飾(例如形成C末端交聯二聚體)。通常，根據與藥理學活性蛋白受體(例如EPO受體)的結合篩選肽文庫。在至少一種情況下(CTLA4)，根據與單克隆抗體的結合篩選所述肽文庫。
表2-藥理學活性肽
a在該欄中所列出的蛋白可以被相關的肽(例如EPO受體，IL-1受體)結合或被相關的肽模擬。
所列出的參考文獻分別用來說明該分子是被所述肽結合還是被所述肽模擬。
bFST是由本發明分子模擬的一種胸腺激素，而不是由本發明分子結合受體。
通過肽文庫篩選鑑定的肽已經被認為是研製治療劑的指導，而不是被認為是治療劑本身。同其它蛋白和肽一樣，它們將在體內通過腎過濾、網狀內皮系統中的細胞清除機制或蛋白水解降解而被快速去除。Francis(1992)，Focus on Growth Factors34-11。結果，本領域目前應用所鑑定的肽來確證藥物靶或作為設計尚不能通過化學文庫篩選容易或快速鑑定的有機化合物的腳手架。Lowman(1997)，Ann.Rev.Biophys.Biomol.Struct.26401-24；Kay等(1998)，Drug Disc.Today3370-8。本領域將從一種方法中獲益，通過該方法這種肽可以更容易產生治療劑。
發明概述本發明涉及一種方法，採用該方法，通過與載體融合增加一種或多種生物活性肽的體內半壽期。在本發明中，藥理學活性化合物的製備方法包括a)選擇調節目的蛋白活性的至少一種肽；和b)製備一種藥物，其包含至少一種共價連接於至少一種選定肽的胺基酸序列的載體。
優選的載體是Fc區。步驟(a)中篩選的肽最好在噬菌體展示文庫中表達。所述載體和所述肽可以通過所述肽或所述載體的N末端或C末端連接，如下文進一步描述的。本發明也包括上述化合物的衍生物(在下文描述)。
本發明的化合物可以通過標準合成法、重組DNA技術或製備肽和融合蛋白的任何其它方法來製備。除合適時採用標準肽化學反應外，包含非肽部分的本發明化合物還可以通過標準有機化學反應合成。
設想的主要用途是作為治療劑或預防劑。載體連接肽具有的活性可能與該肽模擬的天然配體相當，或甚至活性更高。另外，某些基於天然配體的治療劑可能誘導針對患者自身內源配體的抗體；所述載體連接肽通過幾乎不具有或通常不具有所述天然配體鑑定的序列，而避免了這種缺陷。
雖然主要設想本發明化合物作為治療劑，但本發明的化合物也可以用於篩選這種治療劑。例如，在使用抗Fc包被板的測定中人們可以應用Fc-肽(例如Fc-SH2結構域肽)。所述載體，尤其是Fc可以使不溶性肽成為可溶性，並因此可用於許多測定中。
通過將本發明的化合物與合適的藥用載體物質一起配製，並將其以有效量給予有需要的患者例如人(或其它哺乳動物)，可以將本發明化合物用於治療或預防目的。其它相關方法也包括在本發明中。
考慮到附圖和發明詳述，本發明的許多其它方面和優點將是顯而易見的。
附圖簡述

圖1顯示本發明示例性方法的圖解說明。在該優選方法中，載體為Fc區，Fc區通過從編碼所述Fc區和所述肽的DNA構成物表達而共價連接於所述肽。如圖1所示，在該方法中Fc區自發地形成二聚體。
圖2顯示了可以衍生自IgG1抗體的示例性Fc二聚體。該圖中的「Fc」代表本文「Fc結構域」含義內的任何Fc變體。「X1」和「X2」代表肽或下文限定的接頭-肽組合。具體的二聚體如下A、D單二硫鍵連接的二聚體。IgG1抗體通常在恆定區和可變區之間的鉸鏈區具有兩個二硫鍵。圖2A和圖2D中的Fc區可以通過在兩個二硫鍵位點之間截斷而形成，或通過用一個非反應性殘基(例如丙氨醯)取代一個半胱氨醯殘基而形成。在圖2A中，Fc區連接於肽的氨基末端；在2D中，連接於羧基末端。
B、E雙二硫鍵連接的二聚體。該Fc區可以通過將母體抗體截短以保留Fc區鏈中的兩個半胱氨醯殘基而形成，或通過從包含編碼這樣的Fc區的序列的構成物表達而形成。在圖2B中，Fc區連接於肽的氨基末端；在2E中，連接於羧基末端。
C、F非共價二聚體。可以經或者截短或者取代消除所述半胱氨醯殘基，形成該Fc區。人們可能希望消除所示半胱氨醯殘基，以避免通過所述半胱氨醯殘基與宿主細胞中存在的其它蛋白的半胱氨醯殘基反應形成的雜質。Fc區的非共價結合足以將所述二聚體保持在一起。通過採用衍生自不同類型抗體(例如IgG2、IgM)的Fc區，可以形成其它二聚體。
圖3顯示本發明優選化合物的結構，其特徵是所述藥理學活性肽的串聯重複。圖3A顯示一種單鏈分子，也可以代表該分子的DNA構成物。圖3B顯示一種二聚體，其中二聚體的僅一條鏈上存在接頭-肽部分。圖3C顯示在兩條鏈上均具有所述肽部分的二聚體。在編碼圖3A所示單鏈的DNA構成物表達時，在某些宿主細胞中自發形成圖3C的二聚體。在其它宿主細胞中，所述細胞可以被置於適於形成二聚體的條件中，或可以在體外形成所述二聚體。
圖4顯示了可以用於本發明的人IgG1 Fc的示例性核酸序列和胺基酸序列(分別為SEQ ID NO1和2)。
圖5顯示了製備PEG化(PEGylated)肽19(SEQ ID NO3)的合成方案。
圖6顯示了製備PEG化肽20(SEQ ID NO4)的合成方案。
圖7顯示了在下文實施例2中被鑑定為「Fc-TMP」的分子的核苷酸序列和胺基酸序列(分別為SEQ ID NO5和6)。
圖8顯示了在下文實施例2中被鑑定為「Fc-TMP-TMP」的分子的核苷酸序列和胺基酸序列(分別為SEQ ID NO7和8)。
圖9顯示了在下文實施例2中被鑑定為「TMP-TMP-Fc」的分子的核苷酸序列和胺基酸序列(分別為SEQ ID NO9和10)。
圖10顯示了在下文實施例2中被鑑定為「TMP-Fc」的分子的核苷酸序列和胺基酸序列(分別為SEQ ID NO11和12)。
圖11顯示在用一次100μg/kg大劑量注射各種化合物處理的正常雌性BDF1小鼠中體內產生的血小板數，所述術語如下定義PEG-MGDF通過還原胺化連接於天然人TPO胺基酸1-163的N末端氨基的20kD平均分子量的PEG，它在大腸桿菌中表達(因此它未被糖基化)；TMP具有胺基酸序列IEGPTLRQWLAARA(SEQ ID NO13)的TPO-模擬肽；TMP-TMP具有胺基酸序列IEGPTLRQWLAARA-GGGGGGGG-IEGPTLRQWLAARA(SEQ ID NO14)的TPO-模擬肽；PEG-TMP-TMPSEQ ID NO14的肽，其中所述PEG基團是如圖6所示連接的5kD平均分子量的PEG；Fc-TMP-TMP與相同的第二單體二聚的SEQ ID NO8的化合物(圖8)(即殘基7和殘基10的Cys連接於第二單體中相應的Cys殘基，形成二聚體，如圖2所示)；和TMP-TMP-FcSEQ ID NO10的化合物(圖9)，其二聚方式與TMP-TMP-Fc相同，只是Fc區於TMP-TMP肽的C末端連接，而不是於N末端連接。
圖12顯示在用通過植入等滲泵傳遞的各種化合物處理的正常BDF1小鼠中在7天內體內產生的血小板數。所述化合物如圖7定義。
圖13顯示在下文實施例3中被鑑定為「Fc-EMP」的分子的核苷酸序列和胺基酸序列(分別為SEQ ID NO15和16)。
圖14顯示在下文實施例3中被鑑定為「EMP-Fc」的分子的核苷酸序列和胺基酸序列(分別為SEQ ID NO17和18)。
圖15顯示在下文實施例3中被鑑定為「EMP-EMP-Fc」的分子的核苷酸序列和胺基酸序列(分別為SEQ ID NO19和20)。
圖16顯示在下文實施例3中被鑑定為「Fc-EMP-EMP」的分子的核苷酸序列和胺基酸序列(分別為SEQ ID NO21和22)。
圖17A和17B顯示插入pCFM1656的單一AtaII(在pCFM1656中的位置#4364)和SacII(在pCFM1656中的位置#4585)限制位點之間以形成表達質粒pAMG21(ATCC保藏號98113)的DNA序列(SEQ ID NO23)。
圖18A顯示在用一次100μg/kg大劑量注射各種化合物處理的正常雌性BDF1小鼠體內產生的血紅蛋白、紅細胞和血細胞比容。圖18B顯示在如下處理的小鼠中獲得的相同的結果經7天微量等滲泵以100μg/kg/天傳遞相同劑量，用以100μg/kg傳遞的EMP、30U/小鼠的rhEPO進行處理。(在兩個實驗中，嗜中性粒細胞、淋巴細胞和血小板未受影響。)在這些圖中，術語如下定義Fc-EMP與相同的第二單體二聚的SEQ ID NO16的化合物(圖13)(即殘基7和殘基10的Cys連接於第二單體中相應的Cys殘基，形成二聚體，如圖2所示)；EMP-Fc以與Fc-EMP相同的方式二聚的SEQ ID NO18的化合物(圖14)，但其中Fc區連接於所述EMP肽的C末端而不是N末端。
「EMP-EMP-Fc」是指通過所述肽的羧基末端連接於同一Fc區的相同肽的串聯重複(SEQ ID NO20)。「Fc-EMP-EMP」是指所述肽的同一串聯重複，但同一Fc區於所述串聯重複的氨基末端連接。所有分子均在大腸桿菌中表達，因此未被糖基化。圖19A和19B顯示了下文實施例4中所述Fc-TNF-α抑制劑融合分子的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1055和1056)。
圖20A和20B顯示了下文實施例4中所述TNF-α抑制劑-Fc融合分子的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1057和1058)。
圖21A和21B顯示了下文實施例5中所述Fc-IL-1拮抗劑融合分子的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1059和1060)。
圖22A和22B顯示了下文實施例5中所述IL-1拮抗劑-Fc融合分子的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1061和1062)。
圖23A、23B和23C顯示了下文實施例6中所述Fc-VEGF拮抗劑融合分子的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1063和1064)。
圖24A和24B顯示了下文實施例6中所述VEGF拮抗劑-Fc融合分子的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1065和1066)。
圖25A和25B顯示了下文實施例7中所述Fc-MMP抑制劑融合分子的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1067和1068)。
圖26A和26B顯示了下文實施例7中所述MMP抑制劑-Fc融合分子的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1069和1070)。
發明詳述術語的定義在整個本說明書中使用的術語定義如下，除非在具體情況下另外限定。
術語「包含」是指化合物可以在給定序列的N末端或C末端上包括另外的胺基酸。當然，這些另外的胺基酸應該不顯著幹擾該化合物的活性。
術語「載體」是指防止治療蛋白降解和/或增加其半壽期、降低其毒性、降低其免疫原性或提高其生物活性的分子。典型的載體包括Fc區(最好使用Fc區)以及線性聚合物(例如聚乙二醇(PEG)、聚賴氨酸、葡聚糖等)；支鏈聚合物(參見例如1981年9月15日授予Denkenwalter等的美國專利第4,289,872號；1993年7月20日授予Tam的5,229,490；1993年10月28日公開的Frechet等的WO 93/21259)；脂質；膽固醇基團(例如類固醇)；糖或寡糖；或與補救受體結合的任何天然或合成蛋白、多肽或肽。在下文進一步描述載體。
術語「天然Fc」是指包含通過消化完整抗體產生的、無論是單體形式或是多聚體形式的非抗原結合片段序列的分子或序列。天然Fc的原始免疫球蛋白源最好來源於人類，可以是所述免疫球蛋白中的任一種，儘管優選IgG1和IgG2。天然Fc由可以通過共價連接(例如二硫鍵)和非共價連接而連接為二聚體或多聚體形式的單體多肽構成。天然Fc分子單體亞基之間的分子間二硫鍵數目在1-4內變動，取決於類別(例如IgG、IgA、IgE)或亞類(例如IgG1、IgG2、IgG3、IgA1、IgGA2)。天然Fc的一個實例是通過用木瓜蛋白酶消化IgG產生的二硫鍵連接的二聚體(參見Ellison等(1982)，Nucleic Acids Res.104071-9)。本文所用的術語「天然Fc」一般是指單體、二聚體和多聚體形式。
術語「Fc變體」是指由天然Fc修飾、但仍包含補救受體FcRn結合位點的分子或序列。國際申請WO 97/34631(於1997年9月25日公開)和WO 97/32478描述了典型的Fc變體以及與所述補救受體的相互作用，所述國際申請通過引用結合到本文中。因此，術語「Fc變體」包括從非人類天然Fc人源化的分子或序列。此外，天然Fc包含可以去除的位點，因為所述位點提供本發明融合分子不需要的結構特徵或生物活性。因此，術語「Fc變體」包括缺乏影響或參與下列作用的一種或多種天然Fc位點或殘基的分子或序列(1)二硫鍵的形成，(2)與選定宿主細胞不親和性，(3)在選定宿主細胞中表達時N末端異質性，(4)糖基化，(5)與補體相互作用，(6)與非補救受體的Fc受體結合，或(7)依賴抗體的細胞的細胞毒性(ADCC)。在下文進一步描述Fc變體。
術語「Fc區」包括以上定義的天然Fc和Fc變體分子和序列。關於Fc變體和天然Fc，術語「Fc區」包括單體或多聚體形式的分子，無論其通過消化完整抗體產生還是用其它方法產生。
應用於Fc區或包含Fc區的分子的術語「多聚體」是指具有兩條或兩條以上共價、非共價或通過共價和非共價相互作用結合的多肽鏈的分子。IgG分子通常形成二聚體；IgM形成五聚體；IgD形成二聚體；而IgA形成單體、二聚體、三聚體、或四聚體。通過利用Fc天然Ig源的所述序列和所產生的活性、或通過衍生(如下定義)這種天然Fc，可以形成多聚體。
應用於Fc區或包含Fc區的分子的術語「二聚體」是指具有兩條共價或非共價連接的多肽鏈的分子。因此，本發明範圍內的典型的二聚體示於圖2中。
術語「衍生」和「衍生物」或「衍生的」分別包括這樣的過程和所產生的化合物，其中(1)該化合物具有環狀部分；例如在該化合物內的半胱氨醯殘基之間交聯；(2)該化合物是交聯的或具有交聯位點；例如，該化合物具有半胱氨醯殘基並因此在培養中或在體內形成交聯的二聚體；(3)一個或多個肽鍵被非肽鍵取代；(4)N末端被-NRR1、NRC(O)R1、-NRC(O)OR1、-NRS(O)2R1、-NHC(O)NHR、琥珀醯亞胺基團、或取代或未取代的苄氧羰基-NH-取代，其中R和R1和所述環取代基如下文定義；(5)C末端被-C(O)R2或NR3R4取代，其中R2、R3和R4如下文定義；和(6)其中個別胺基酸部分通過用能夠與選定側鏈或末端殘基反應的試劑處理來修飾的化合物。
術語「肽」是指具有2-40個胺基酸的分子，優選具有3-20個胺基酸的分子，最優選具有6-15個胺基酸的分子。通過任一上述方法、在肽文庫(例如噬菌體展示文庫)中進行或通過消化蛋白衍生，可以隨機產生典型的肽。
用來指肽序列的術語「隨機化」是指完全隨機的序列(例如通過噬菌體展示法選擇的)和其中天然存在的分子的一個或多個殘基被不出現在天然存在的分子中該位置的胺基酸殘基取代的序列。鑑定肽序列的典型方法包括噬菌體展示、大腸桿菌展示、核糖體展示、RNA-肽篩選、化學篩選等。
術語「藥理學活性」是指如此描述的物質被確定具有影響醫學參數(例如血壓、血細胞計數、膽固醇水平)或疾病狀態(例如癌症、自身免疫病)的活性。因此，藥理學活性肽包括如下定義的激動肽或模擬肽和拮抗肽。
術語「-模擬肽」和「-激動肽」指生物活性同與目的蛋白互作的蛋白(例如EPO、TPO、G-CSF)相當的肽。這些術語還包括間接模擬目的蛋白活性的肽，例如通過增強目的蛋白的天然配體效應；參見例如表2和表7中所列出的G-CSF-模擬肽。因此，術語「EPO-模擬肽」包括可以如Wrighton等(1996)，Science273458-63，Naranda等(1999)，Proc.Natl.Acad.Sci.USA967569-74或表2中鑑定為具有EPO-模擬主題的任何其它參考文獻中描述的方法鑑定或衍生的肽。本領域技術人員會認識到，這些參考文獻中的每一個均使得人們能夠採用所公開的方法，利用不同的肽文庫，選擇不同於文獻中實際公開的肽。
術語「TPO-模擬肽」包括可以按以下參考文獻中描述的方法鑑定或衍生的肽Cwirla等(1997)Science2761696-9；美國專利第5,869,451號和第5,932,946號和表2中鑑定為具有TPO-模擬主題的任何其它參考文獻以及與此同一日期申請的美國專利申請「血小板生成化合物」，它們通過引用結合到本文中。本領域技術人員會認識到，這些參考文獻中的每一個均使得人們能夠採用所公開的方法，利用不同的肽文庫，選擇不同於文獻中實際公開的肽。
術語「G-CSF-模擬肽」包括可以按以下參考文獻中描述的方法鑑定或衍生的肽Paukovits等(1984)，Hoppe-Seylers Z.Physiol.Chem.365303-11或表2中鑑定為具有G-CSF-模擬主題的任何其它參考文獻。本領域技術人員會認識到，這些參考文獻中的每一個均使得人們能夠採用所公開的方法，利用不同的肽文庫，選擇不同於文獻中實際公開的肽。
術語「CTLA4-模擬肽」包括可以按Fukumoto等(1998)，NatureBiotech.16267-70中描述的方法鑑定或衍生的肽。本領域技術人員會認識到，這些參考文獻中的每一個均使得人們能夠採用所公開的方法，利用不同的肽文庫，選擇不同於文獻中實際公開的肽。
術語「-拮抗肽」或「抑制肽」是指阻斷或以某些方式幹擾所結合的目的蛋白生物活性的肽、或生物活性與所結合的目的蛋白的已知拮抗劑或抑制劑的活性相當的肽。因此，術語「TNF-拮抗肽」包括可以按以下參考文獻中描述的方法鑑定或衍生的肽Takasaki等(1997)，Nature Biotech.151266-70或表2中鑑定為具有TNF-拮抗主題的任何其它參考文獻。本領域技術人員會認識到，這些參考文獻中的每一個均使得人們能夠採用所公開的方法，利用不同的肽文庫，選擇不同於文獻中實際公開的肽。
術語「IL-1-拮抗肽」和「IL-1ra-模擬肽」包括抑制或向下調節由IL-1對IL-1受體活化的肽。由於在IL-1、IL-1受體和IL-1受體輔助蛋白之間形成複合體，導致IL-1受體活化。IL-1拮抗劑或IL-1ra-模擬肽與IL-1、IL-1受體或IL-1受體輔助蛋白結合，並妨礙所述複合體的任何兩個或三個組分之間形成複合體。典型的IL-1拮抗劑或IL-1ra-模擬肽可以按以下參考文獻中描述的方法鑑定或衍生美國專利5,608,035、5,786,331、5,880,096或表2中鑑定為具有IL-1ra-模擬或IL-1拮抗主題的任何其它參考文獻。本領域技術人員會認識到，這些參考文獻中的每一個均使得人們能夠採用所公開的方法，利用不同的肽文庫，選擇不同於文獻中實際公開的肽。
術語「VEGF-拮抗肽」包括可以按以下參考文獻中描述的方法鑑定或衍生的肽Fairbrother(1998)，Biochem.3717754-64和表2中鑑定為具有VEGF-拮抗主題的任何其它參考文獻。本領域技術人員會認識到，這些參考文獻中的每一個均使得人們能夠採用所公開的方法，利用不同的肽文庫，選擇不同於文獻中實際公開的肽。
術語「MMP-抑制肽」包括可以按以下參考文獻中描述的方法鑑定或衍生的肽Koivunen(1999)，Nature Biotech.17768-74和表2中鑑定為具有MMP-抑制主題的任何其它參考文獻。本領域技術人員會認識到，這些參考文獻中的每一個均使得人們能夠採用所公開的方法，利用不同的肽文庫，選擇不同於文獻中實際公開的肽。
另外，本發明也包括本發明化合物的生理學上可接受的鹽。所謂「生理學上可接受的鹽」是指已知或以後發現為藥學上可接受的任何鹽。某些具體實例是乙酸鹽、三氟乙酸鹽、氫滷酸鹽，例如鹽酸鹽和氫溴酸鹽；硫酸鹽；檸檬酸鹽；酒石酸鹽、羥乙酸鹽和草酸鹽。
化合物的結構通用結構在按照發明製備的物質組合物中，所述肽可以通過肽的N末端或C末端連接於所述載體。因此，本發明的載體-肽分子可以用以下式I描述I(X1)a-F1-(X2)b其中F1是載體(最好是Fc區)；X1和X2分別獨立地選自-(L1)c-P1、-(L1)c-P1-(L2)d-P2、-(L1)c-P1-(L2)d-P2-(L3)e-P3和-(L1)c-P1-(L2)d-P2-(L3)e-P3-(L4)f-P4，P1、P2、P3和P4分別獨立地為藥理學活性肽的序列；L1、L2、L3和L4分別獨立地為接頭；而a、b、c、d、e和f分別獨立地為0或1，前提是a和b中至少一個為1。
因此，化合物I包括優選的式II化合物及其多聚體IIX1-F1其中F1為Fc區，並於X1的C末端連接；式III化合物及其多聚體IIIF1-X2其中F1為Fc區，並於X2的N末端連接；式IV化合物及其多聚體IVF1-(L1)c-P1
其中F1為Fc區，並於-(L1)c-P1的N末端連接；式V化合物及其多聚體VF1-(L1)c-P1-(L2)d-P2其中F1為Fc區，並於-L1-P1-L2-P2的N末端連接。
肽.結合本發明可以使用任何數目的肽。特別有價值的是模擬以下物質活性的肽EPO、TPO、生長激素、G-CSF、GM-CSF、IL-1ra、leptin、CTLA4、TRAIL、TGF-α和TGF-β。肽拮抗劑也有價值，特別是拮抗以下物質的肽拮抗劑TNF、leptin、任一種白介素(IL-1、2、3...)和參與補體激活的蛋白(例如C3b)。引導肽也有價值，包括腫瘤尋靶肽、膜轉運肽等。採用本說明書中引用的參考文獻和其它參考文獻中描述的方法，可以發現所有這些類別的肽。
噬菌體展示尤其可用於產生用於本發明的肽。已經陳述了從隨機肽文庫中進行親和篩選可以用來鑑定任何基因產物的任何位點的肽配體。Dedman等(1993)，J.Biol.Chem.26823025-30。噬菌體展示尤其適合於鑑定與諸如細胞表面受體的目的蛋白或具有線性表位的任何蛋白結合的肽。Wilson等(1998)，Can.J.Microbiol.44313-29；Kay等(1998)，Drug Disc.Today3370-8。在Herz等(1997)，J.Receptor SignalTransduction Res.17(5)671-776中對這種蛋白進行了廣泛的綜述，該文獻通過引用結合到本文中。這種目的蛋白優選用於本發明中。
特別優選的一組肽是與細胞因子受體結合的肽。最近已經根據受體代碼，對細胞因子進行了分類。參見Inglot(1997)，ArchivumImmunologiae et Therapiae Experimentalis45353-7，其通過引用結合到本文中。在這些受體中，最優選CKR(表3中的家族I)。受體分類示於表3中。
表3-根據受體代碼分類的細胞因子受體細胞因子(配體)受體類型
cIL-17R屬於CKR家族，但未分配到4個指定亞家族中的任何一個家族。
d其它I型IFN亞型仍未確定。造血細胞因子、IL-10配體和幹擾素不具有功能性內在蛋白激酶。所述細胞因子的信號分子是JAK、STAT和相關的非受體分子。IL-14、IL-16和IL-18已被克隆，但根據受體代碼它們仍未確定。
eTNF受體使用多個不同的胞內分子來進行信號轉導，包括FASR的「死亡域」和參與其細胞毒性效應的55kDa TNF-αR。NGF/TNF R可以既結合NGF和相關因子，又結合TNF配體。趨化因子受體是G蛋白偶聯的、7個跨膜(7TM，蛇狀的)結構域的受體。
fDuffy血型抗原(DARC)是可以結合幾種不同趨化因子的紅細胞受體。它屬於免疫球蛋白超家族，但其信號轉導事件的特徵仍不清楚。
g神經營養細胞因子也可結合NGF/TNF受體。
hSTKS可以包括許多其它仍未分配的TGF-β相關因子。該蛋白激酶是受體激酶家族(RKF)胞內域的固有部分。所述酶參與通過所述受體的信號傳遞。
本發明的典型的肽出現在以下表4-20中。這些肽可以通過本領域公開的方法製備。使用單字母胺基酸縮寫。這些序列(和整個本說明書中，除非在具體情況下另有說明)中的X意味著可能存在20種天然存在的胺基酸中的任何一種。這些肽中的任一種可以用或不用接頭串聯連接，在所述表中提供幾種串聯連接的實施例。接頭以「Λ」列出，並且可以是本文所述接頭中的任一種。為了清楚起見串聯重複和接頭用破折號隔開顯示。任何含有一個半胱氨醯殘基的肽均可以與另一含Cys的肽交聯，這兩種肽中的任一種或兩者可以連接於載體。在所述表中提供幾個交聯實施例。任何含有一個以上Cys殘基的肽也可以形成肽內二硫鍵；參見例如表5中的EPO-模擬肽。在該表中具體說明了幾個肽內二硫鍵連接的肽的實施例。這些肽中的任一種均可以按本文所述方法衍生，在該表中提供的幾個衍生實施例。所述表中的衍生肽是示例性的，而不是限制性的，因為所結合的未衍生肽也可以用於本發明中。對於羧基末端用氨基封端的衍生物，封端氨基以-NH2顯示。對於胺基酸殘基被非胺基酸殘基的部分取代的衍生物，所述取代以σ表示，它代表以下文獻中所述部分中的任一種Bhatnagar等(1996)，J.Med.Chem.392814-9和Cuthbertson等(1997)，J.Med.Chem.402876-82，所述文獻通過引用結合到本文中。J取代基和Z取代基(Z5、Z6、...Z40)如美國專利第5,608,035號、第5,786,331號和5,880,096號中定義，所述專利通過引用結合到本文中。對於EPO-模擬物序列(表5)，取代基X2-X11和整數「n」如WO 96/40772中定義，所述文獻通過引用結合到本文中。取代基「Ψ」、「Θ」和「+」如Sparks等(1996)，Proc.Natl.Acad.Sci.931540-4中定義，所述文獻通過引用結合到本文中。X4、X5、X6和X7如美國專利第5,773,569號中定義，所述文獻通過引用結合到本文中，例外是對於整聯蛋白結合肽，X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7和X8如1995年6月1日公開的國際申請WO 95/14714和1997年3月6日公開的WO97/08203中定義，所述文獻通過引用結合到本文中；對於VIP模擬肽，X1、X1』、X1」、X2、X3、X4、X5、X6和Z以及整數m和n如1997年10月3日公開的WO 97/40070中定義，所述文獻也通過引用結合到本文中。以下Xaa和Yaa如1998年3月12日公開的WO 98/09985中定義，所述文獻通過引用結合到本文中。AA1、AA2、AB1、AB2和AC如1998年12月30日公開的國際申請WO 98/53842中定義，所述文獻通過引用結合到本文中。僅表17中的X1、X2、X3、X4如1999年4月28日公開的歐洲申請EP 0 911 393所定義。以粗體字出現的殘基是D-胺基酸。所有肽均通過肽鍵連接，除非另有說明。在本說明書結尾處列出了縮寫。在「SEQ IDNO.」一欄中，「NR」意味著對於所述特定序列不需要序列表。
表4-IL-1拮抗肽序列
表5-EPO-模擬肽序列
表6-TPO-模擬肽序列
表7-G-CSF-模擬肽序列
表8-TNF-拮抗肽序列
表9-整聯蛋白結合肽序列
表10-選擇蛋白拮抗肽序列
表11-抗病原物質肽序列
表12-VIP-模擬肽序列

表13-Mdm/hdm拮抗肽序列
表14-鈣調蛋白拮抗肽序列
表15-肥大細胞拮抗肽/肥大細胞蛋白酶抑制肽序列
表16-SH3拮抗肽序列
表17-促生長素抑制素或crotistatin模擬肽序列
表18-UKR拮抗肽序列
表19-巨噬細胞和/或T細胞抑制肽序列
表20-另外的典型藥理學活性肽序列
本發明也尤其可用具有活性的肽治療●癌症，其中所述肽為VEGF模擬物或VEGF受體拮抗劑、HER2激動劑或拮抗劑、CD20拮抗劑等；●哮喘，其中所述目的蛋白為CKR3拮抗劑、IL-5受體拮抗劑等；●血栓形成，其中所述目的蛋白是GPIIb拮抗劑、GPIIIa拮抗劑等；●自身免疫病和其它涉及免疫調節的病症，其中所述目的蛋白是IL-2受體拮抗劑、CD40激動劑或拮抗劑、CD40L激動劑或拮抗劑、胸腺生成素模擬物等。
載體.本發明需要存在連接於N末端或C末端或所述胺基酸殘基之一的側鏈的至少一種載體(F1、F2)。也可以使用多種載體；例如Fc位於每個末端，或Fc位於一種末端，而一個PEG基團位於另一末端或一個側鏈。
Fc區是優選的載體。Fc區可以與所述肽的N末端或C末端融合，或在N末端和C末端均融合。對於TPO-模擬肽，具有融合於所述分子肽部分N末端的Fc區的分子的生物活性高於其它這樣的融合體，因此優選融合於N末端。
如上所述，Fc變體是本發明範圍內合適的載體。可以對天然Fc進行廣泛的修飾，以形成按照本發明的Fc變體，前提是保持與補救受體的結合；參見例如WO 97/34631和WO 96/32478。在這種Fc變體中，人們可以去除天然Fc的提供本發明融合分子不需要的結構特徵或功能活性的一個或多個位點。通過例如置換或缺失殘基、將殘基插入該位點，或截去含所述位點的部分，人們可以去除這些位點。所插入或置換的殘基也可以是改變的胺基酸，例如肽模擬物或D-胺基酸。可以由於多種原因希望有Fc變體，以下描述其中幾個原因。典型的Fc變體包括這樣的分子和序列，其中1.去除參與二硫鍵形成的位點。這種去除可以避免與用來產生本發明分子的宿主細胞中存在的其它含半胱氨酸蛋白的反應。為此，可以截去N末端含半胱氨酸的區段，或可以缺失半胱氨酸殘基，或用其它胺基酸(例如丙氨醯、絲氨醯)置換半胱氨酸殘基。特別是，人們可以截去SEQ ID NO2的N末端20個胺基酸的區段，或缺失或置換SEQID NO2的位置7和10的半胱氨酸殘基。甚至當去除半胱氨酸殘基時，單鏈Fc區仍可能形成非共價保持在一起的二聚Fc區。
2.對天然Fc進行修飾，以使其與選定的宿主細胞更加相容。例如，人們可以去除典型天然Fc N末端附近的PA序列，該序列可能由大腸桿菌中的消化酶例如脯氨酸亞氨基肽酶識別。人們也可以加入一個N末端甲硫氨酸殘基，尤其是當該分子在細菌細胞例如大腸桿菌中重組表達時。SEQ ID NO2(圖4)的Fc區是一個這種Fc變體。
3.去除天然Fc N末端的一部分，以在選定的宿主細胞中表達時防止N末端異質性。為此，人們可以缺失N末端的前20個胺基酸殘基中的任何一個，特別是位置1、2、3、4和5的胺基酸殘基。
4.去除一個或多個糖基化位點。通常被糖基化的殘基(例如天冬醯胺)可以賦予溶細胞反應。可以缺失這種殘基，或用非糖基化殘基(例如丙氨酸)置換這種殘基。
5.去除參與與補體互作的位點，例如Clq結合位點。例如，人們可以缺失或置換人IgG1的EKK序列。對於本發明的分子而言，補體募集可能是不利的，因此可以用這樣的Fc變體避免補體募集。
6.去除影響與非補救受體的Fc受體結合的位點。天然Fc可能具有本發明融合分子不需要的與某些白細胞互作的位點，因此可以去除這些位點。
7.去除ADCC位點。ADCC位點是本領域已知的；參見例如Molec.Immunol.29(5)；633-9(1992)有關IgG1中ADCC位點的內容。這些位點也是本發明融合分子不需要的，因此可以除去。
8.當天然Fc衍生自非人類抗體時，可以將所述天然Fc人源化。通常，為了將天然Fc人源化，人們可以用在人類天然Fc中通常發現的殘基取代非人類天然Fc中的選定殘基。用於抗體人源化的技術是本領域眾所周知的。
優選的Fc變體包括以下變體。在SEQ ID NO2(圖4)中，位置15的亮氨酸用穀氨酸取代；位置99的穀氨酸用丙氨酸取代；而位置101和103的賴氨酸用丙氨酸取代。另外，可以由苯丙氨酸殘基取代一個或多個酪氨酸殘基。
可選擇的載體可以是蛋白、多肽、肽、抗體、抗體片段、或能夠結合於補救受體的小分子(例如肽模擬化合物)。例如，人們可以將1998年4月14日授予Presta等的美國專利第5,739,277號中所述的多肽作為載體。也可以根據與FcRn補救受體的結合，通過噬菌體展示選擇肽。這種補救受體-結合化合物也包括在「載體」含義中，並且屬於本發明的範圍。應該根據半壽期增加(例如通過避免被蛋白酶識別的序列)和免疫原性降低(例如通過給予非免疫原性序列，如在抗體人源化中發現的)選擇這種載體。
如上所述，聚合物載體也可以用於F1和F2。目前可利用連接可用作載體的化學部分的各種方法，參見例如題為「N末端化學修飾蛋白組合物和方法」的專利合作條約(「PCT」)國際說明書WO 96/11953，該文獻通過引用完整地結合到本文中。該PCT說明書其中公開了將水溶性聚合物選擇性地連接於蛋白N末端。
優選的聚合物載體是聚乙二醇(PEG)。所述PEG基團可以是任何方便的分子量的PEG基團，並且可以是直鏈或支鏈的。所述PEG的平均分子量的範圍優選為約2千道爾頓(「kD」)至約100kDa，更優選為約5kDa至約50kDa，最優選為約5kDa至約10kDa。一般通過將PEJ部分上的一個反應基(例如醛、氨基、巰基或酯基)醯化或還原胺化至本發明化合物上的一反應基(例如醛、氨基或酯基)，將PEG基團與本發明化合物連接。
將合成肽PEG化(PEGylation)的一個有用的策略包括通過在溶液中形成共軛鍵，將肽和PEG部分結合，所述肽和PEG部分各帶有一個相互之間可反應的官能團。用常規的固相合成(參見例如圖5和6和其中伴有的內容)，可以容易地製備所述肽。用合適的官能團於特定位點「預活化」所述肽。在與PEG部分反應之前，純化所述前體並對其進行全面鑑定。所述肽與PEG的連接通常在水相中進行，並且可以通過反相分析型HPLC容易地監測。PEG化肽可以容易地經製備型HPLC純化，並通過分析型HPLC、胺基酸分析和雷射解吸質譜來鑑定。
多糖聚合物是另一種類型的可用於修飾蛋白的水溶性聚合物。葡聚糖是由主要通過α1-6鍵連接的葡萄糖的單個亞單位構成的多糖聚合物。葡聚糖本身可以在許多分子量範圍內獲得，並且容易以約1kD至約70kD的分子量獲得。葡聚糖是一種在本發明中以其本身或與另一載體(例如Fc)結合作為載體的合適的水溶性聚合物。參見例如WO96/11953和WO 96/05309。已經報導了與治療性或診斷性免疫球蛋白綴合的葡聚糖的應用；參見例如歐洲專利公開第0 315 456號，其通過引用結合到本文中。當葡聚糖用作按照本發明的載體時，優選約1kD至約20kD的葡聚糖。
接頭.任何「接頭」基團都是可選擇的。當存在時，其化學結構不是關鍵，因為它主要用作間隔區。所述接頭最好由通過肽鍵連接在一起的胺基酸構成。因此，在優選實施方案中，所述接頭由通過肽鍵連接的1-20個胺基酸構成，其中所述胺基酸選自20種天然存在的胺基酸。這些胺基酸中的某些胺基酸可以被糖基化，正如本領域技術人員充分理解的。在一個更優選的實施方案中，所述1-20個胺基酸選自甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、天冬醯胺、穀氨醯胺和賴氨酸。甚至更優選的是，接頭由許多非位阻胺基酸例如甘氨酸和丙氨酸構成。因此，優選的接頭是聚甘氨酸(特別是(Gly)4、(Gly)5)、聚(Gly-Ala)和聚丙氨酸。接頭的其它具體實例是(Gly)3Lys(Gly)4(SEQ ID NO333)；(Gly)3AsnGlySer(Gly)2(SEQ ID NO334)；(Gly)3Cys(Gly)4(SEQ ID NO335)；和GlyProAsnGlyGly(SEQ ID NO336)。
為了解釋上述命名法，例如(Gly)3Lys(Gly)4是指Gly-Gly-Gly-Lys-Gly-Gly-Gly-Gly。也優選Gly和Ala的組合。本文所示的接頭是示例性的；本發明範圍內的接頭可以長得多，並且可以包括其它殘基。
也可以是非肽接頭。例如，可以使用烷基接頭例如-NH-(CH2)s-C(O)-，其中s＝2-20。這些烷基接頭可以進一步用例如以下的任何非位阻基團取代低級烷基(例如C1-C6)低級醯基、滷素(例如Cl、Br)、CN、NH2、苯基等。一個示例性的非肽接頭是PEG接頭， 其中n使得接頭分子量為100-5000kD，優選為100-500KD。可以改變所述肽接頭，以與上述相同的方式形成衍生物。
衍生物.本發明也包括使所述化合物的肽和/或載體部分衍生。這種衍生物可以改進所述化合物的溶解性、吸收、生物半壽期等。所述部分可以或者消除或者減弱所述化合物的不希望有的副作用等。示例性的衍生物包括這樣的化合物，其中1.所述化合物或其某一部分是環狀的。例如，可以修飾所述肽部分，以使其含有兩個或兩個以上的Cys殘基(例如在接頭中)，所述肽可以通過形成二硫鍵環化。關於對製備環化衍生物的參考文獻的引用，請參見表2。
2.將所述化合物在分子之間交聯，或使其能夠在分子之間交聯。例如，可以修飾所述肽部分，以使其含有一個Cys殘基，並因此能夠與類似的分子形成分子間二硫鍵。也可以通過所述化合物的C末端使所述化合物交聯，如在以下所示的分子中。
3.
4.用非肽鍵取代一個或多個肽[-C(O)NR-]鍵。示例性的非肽鍵是-CH2-氨基甲酸酯[-CH2-OC(O)NR-]、膦酸酯、-CH2-氨磺醯[-CH2-S(O)2NHR-]、脲[-NHC(O)NH-]、-CH2-仲胺和烷基化肽[-C(O)NR6-，其中R6為低級烷基]。
5.將N末端衍生。通常，可以將N末端醯化或修飾為取代的胺。示例性N末端衍生基團包括-NRR1(非-NH2-)、-NRC(O)R1、-NRC(O)OR1、-NRS(O)2R1、-NHC(O)NHR1、琥珀醯亞胺或苄氧羰基-NH-(CBZ-NH-)，其中R和R1分別獨立地為氫或低級烷基，並且其中所述苯環可以用1-3個選自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氯基和溴基的取代基取代。
6.將游離C末端衍生物。通常，將C末端酯化或醯胺化。例如，人們可以使用本領域描述的方法，將(NH-CH2-CH2-NH2)2於C末端加入具有SEQ ID NO504-508中任一序列的本發明化合物中。同樣，人們可以利用本領域描述的方法，以將-NH2於C末端加入具有SEQ ID NO924-955、963-972、1005-1013或1018-1023中任一序列的本發明化合物中。示例性的C末端衍生基團包括例如-C(O)R2(其中R2是低級烷氧基)或-NR3R4，其中R3和R4獨立地為氫或C1-C8烷基(最好為C1-C4烷基)。
7.用另一交聯部分、優選更穩定的交聯部分(例如亞烷基)取代二硫鍵。參見例如Bhatnagar等(1996)，J.Med.Chem.393814-9；Alberts等(1993)Thirteenth Am.Pep.Symp.，357-9。
8.修飾一個或多個個別胺基酸殘基。已知各種衍生劑與選定的側鏈或末端殘基特異性反應，如以下詳述的。
賴氨醯殘基和氨基末端殘基可以與琥珀酸酐或其它羧酸酐反應，這將賴氨醯殘基的電荷逆轉。用於衍生含α-氨基的殘基的其它合適的試劑包括亞氨酸酯，例如吡啶甲亞氨酸甲酯(methylpicolinimidate)；磷酸吡哆醛；吡哆醛；氯硼氫化物(chloroborohydride)；三硝基苯磺酸；O-甲基異脲；2，4戊二酮；和轉氨酶催化的與乙醛酸的反應。
精氨醯殘基可以通過幾種常規試劑中的任一種或組合來修飾，所述常規試劑包括苯甲醯甲醛、2，3-丁二酮、1，2-環己二酮和茚三酮。精氨醯殘基的衍生需要在鹼性條件下進行該反應，因為胍官能團的pKa高。此外，這些試劑可以與賴氨酸的基團以及精氨酸ε-氨基反應。
已經廣泛研究了酪氨醯殘基的特異性修飾，特別感興趣的是通過與芳族重氮化合物或四硝基甲烷反應將廣譜標記引入酪氨醯殘基中。最常見的是分別使用N-乙醯咪唑和四硝基甲烷來生成O-乙醯酪氨醯物質和3-硝基衍生物。
通過與碳二亞胺(R』-N＝C＝N-R』)反應，可以選擇性地修飾羧基側鏈(天冬氨醯或穀氨醯)，所述碳二亞胺例如1-環己基-3-(2-嗎啉基-(4-乙基)碳二亞胺或1-乙基-3-(4-azonia-4，4-二甲基戊基)碳二亞胺。此外，通過與銨離子反應可以將天冬氨醯和穀氨醯殘基轉化為天冬醯胺醯和谷醯胺醯殘基。
可以將谷醯胺醯和天冬醯胺醯殘基脫醯胺為相應的穀氨醯和天冬氨醯殘基。或者，可以將這些殘基在溫和的酸性條件下脫醯胺。這些殘基中的任一種形式均屬於本發明範圍。
半胱氨醯殘基可以用胺基酸殘基或其它部分取代，以獲得消除二硫鍵，或者相反使交聯穩定化。參見例如Bhatnagar等(1996)，J.Med.Chem.393814-9。
用雙官能試劑衍生可用於使所述肽或其功能衍生物與水不溶性支持基質或其它大分子載體交聯。常用的交聯劑包括例如1，1-雙(重氮乙醯)-2-苯基乙烷、戊二醛、N-羥基琥珀醯亞胺酯例如與4-重氮水楊酸的酯；同雙官能亞氨酸酯，包括雙琥珀醯亞胺基酯，例如3，3』-二硫代雙(丙酸琥珀醯亞胺基酯)和雙官能馬來醯亞胺，例如雙-N-馬來醯亞胺基-1，8-辛烷。衍生劑例如甲基-3-[(對-重氮苯基)二硫代]丙亞胺酸酯產生能夠在光存在下形成交聯的光可活性中間體。或者，對於蛋白固定化，可使用美國專利第3,969,287、3,691,016、4,195,128、4,247,642、4,229,537和4,330,440號中描述的反應性水不溶性基質，例如溴化氰活化的糖類和反應底物。
糖(寡糖)基團可以方便地連接於已知在蛋白中為糖基化位點的位點。一般而言，當絲氨酸、蘇氨酸和天冬醯胺是序列Asn-X-Ser/Thr的部分(其中X可以是除脯氨酸外的任何胺基酸)時，O-聯寡糖連接於絲氨酸(Ser)或蘇氨酸(Thr)殘基上，而N-聯寡糖連接於天冬醯胺(Asn)殘基上。X最好是除脯氨酸外19種天然存在的胺基酸中的任何一種。在每種類型中發現的N-聯寡糖和O-聯寡糖和所述糖殘基的結構是不同的。在N-聯寡糖和O-聯寡糖中通常發現的一種類型的糖是N-乙醯神經氨酸(稱為唾液酸)。唾液酸通常是N-聯寡糖和O-聯寡糖兩者的末端殘基，並且由於其帶有負電荷，可以賦予糖基化化合物酸性特性。這種位點可以加入本發明化合物的接頭中，並且最好在重組產生所述多肽化合物期間由細胞(例如在哺乳動物細胞，例如CHO、BHK、COS)糖基化。然而，這種位點可以通過本領域已知的合成法或半合成法進一步糖基化。
其它可能的修飾包括脯氨酸和賴氨酸的羥基化、絲氨醯或蘇氨醯殘基的羥基的磷酸化、Cys中硫原子的氧化、賴氨酸、精氨酸的α-氨基和組氨酸側鏈的甲基化。Creighton，ProteinsStructure and MoleculeProperties(W.H.Freeman Co.，San Francisco)，第79-86頁(1983)。
本發明的化合物也可以在DNA水平上改變。可以將所述化合物任何部分的DNA序列改變為與選定宿主細胞更相容的密碼子。對於為優選宿主細胞的大腸桿菌而言，優化密碼子是本領域已知的。可以將密碼子置換以消除限制位點或包括沉默限制位點，這可能有助於該DNA在選定宿主細胞中的加工。可以修飾所述載體、接頭和肽DNA序列，以包括任何上述序列變化。
製備方法主要採用重組DNA技術，在轉化宿主細胞中製備本發明化合物。為此，製備編碼該肽的重組DNA分子。製備這種DNA分子的方法是本領域已知的。例如，可以採用合適的限制酶從DNA切下編碼該肽的序列。或者，可以採用化學合成技術，例如氨基磷酸酯法，合成所述DNA分子。也可以採用這些技術的組合。
本發明也包括能夠在合適宿主中表達所述肽的載體。該載體包含有效連接於合適表達控制序列的、編碼該肽的DNA分子。在將該DNA分子插入載體之前或之後實現這種有效連接的方法是本領域眾所周知的。表達控制序列包括啟動子、激活子、增強子、操縱基因、核糖體結合位點、起始信號、終止信號、加帽信號、聚腺苷酸化信號和涉及轉錄或翻譯控制的其它信號。
所產生的具有所述DNA分子的載體用來轉化合適的宿主。這種轉化可以採用本領域眾所周知的方法進行。
許多可利用和熟知的宿主細胞中的任一種均可以用於實施本發明。具體宿主的選擇取決於本領域公認的許多因素。這些包括例如與選定表達載體的相容性、該DNA分子所編碼的肽的毒性、轉化率、所述肽回收的容易程度、表達特性、生物安全性和費用。對於表達具體DNA序列而言，不是所有的宿主均是同等有效的，根據這一理解必須保持這些因素的平衡。在這些一般指導中，有用的微生物宿主包括細菌(例如大腸桿菌菌種)、酵母(例如酵母屬菌種)和其它真菌、昆蟲、植物、哺乳動物(包括人類)的培養細胞或本領域已知的其它宿主。
接下來，培養轉化宿主並將其純化。宿主細胞可以在常規發酵條件下培養，使得表達所需的化合物。這種發酵條件是本領域眾所周知的。最後，採用本領域熟知的方法，從培養物中純化所述肽。
所述化合物也可以通過合成法製備。例如，可以使用固相合成技術。合適的技術是本領域熟知的，包括描述於以下文獻的方法Merrifield(1973)，Chem.Polypeptides，第335-61(Katsoyannis和Panayotis編輯)；Merrifield(1963)，J.Am.Chem.Soc.852149；Davis等(1985)，Biochem.Intl.10394-414；Stewart和Young(1969)，Solid PhasePeptide Synthesis；美國專利第3,941,763號；Finn等(1976)，The Proteins(第三版)，2105-253；和Erickson等(1976)，The Proteins(第三版)2257-527。固相合成是製備個別肽的優選技術，因為它是製備小肽的成本最有效的方法。
含有衍生肽或含有非肽基團的化合物可以眾所周知的有機化學技術合成。
化合物的應用概述.由於本發明化合物結合目的蛋白的能力，因此本發明化合物具有作為這種目的蛋白天然配體的激動劑、模擬物或拮抗劑的藥理學活性。具體化合物的用途示於表2。這些化合物的活性可以通過本領域已知的分析來測量。對於TPO-模擬化合物和EPO-模擬化合物，在本文實施例一節進一步描述體內測定。
除治療用途外，本發明化合物可用於診斷特徵為其相關的目的蛋白功能異常的疾病。在一個實施方案中，在生物樣品中監測能夠被活化的目的蛋白(如受體)的方法包括以下步驟(a)使所述樣品與本發明化合物接觸；和(b)檢測該化合物對所述蛋白的活化。生物樣品包括組織標本、完整細胞或它們的提取物。本發明的化合物可以用作診斷試劑盒的部分，以檢測在生物樣品中其相關目的蛋白的存在。這種試劑盒使用具有便於檢測的標記的本發明化合物。所述化合物可用來鑑定正常或異常的目的蛋白。例如對於EPO-模擬化合物，生物樣品中異常目的蛋白的存在指示諸如先天性再生障礙性貧血的疾病，據信在該病中EPO受體的功能異常。
EPO-模擬化合物的治療用途.本發明的EPO-模擬化合物可用來治療特徵為紅細胞水平低的疾病。本發明包括調節哺乳動物中EPO受體內源活性的方法，最好是提高EPO受體活性的方法。一般而言，可用紅細胞生成素治療的任何病症例如貧血也可以用本發明的EPO-模擬化合物治療。通過適合於該治療病症性質和嚴重程度、並且可以由本領域技術人員確定的傳遞量和傳遞途徑給予這些化合物。最好通過注射給予，即或者皮下注射、肌內注射或靜脈內注射給予。
TPO-模擬化合物的治療用途.對於所述TPO-模擬化合物，人們可以利用諸如描述於題為「刺激巨核細胞生長和分化的組合物和方法」的WO95/26746中描述的標準測定。體內測定也示於下文的實施例中。
治療的病症一般是涉及存在的巨核細胞/血小板缺乏或預期巨核細胞/血小板缺乏的病症(例如由於計劃的手術或血小板捐獻)。這種病症通常是體內缺乏活性Mpl配體的結果。血小板缺乏的術語是血小板減少，因此，本發明的方法和組合物一般可用來治療需要治療的患者的血小板減少。
血小板減少(血小板缺乏)可以因各種原因出現，包括化療和其它使用多種藥物的治療、放療、手術、意外失血和其它特定的病症。涉及血小板減少並且可以按照本發明治療的典型的特定病症是再生障礙性貧血、特發性血小板減少、導致血小板減少的轉移性腫瘤、全身性紅斑狼瘡、脾大、Franconi症候群、維生素B12缺乏、葉酸缺乏、May-Hegglin異常、Wiskott-Aldrich症候群和陣發性夜間血紅蛋白尿。此外，對AIDS的某些療法導致血小板減少(例如AZT)。某些傷口癒合性疾病也可能得益於血小板數目的增加。
關於預期的血小板缺乏，例如由於未來的手術，可以在需要血小板之前數天至數小時給予本發明的化合物。關於急性情況，例如意外失血和大量失血，可以將本發明化合物與血液或純化的血小板一起給予。
本發明的TPO-模擬化合物也可以用來刺激非巨核細胞的某些細胞類型，只要發現這種細胞表達Mpl受體。與表達Mpl受體的這種細胞相關、對Mpl配體刺激反應的病症也在本發明範圍內。
本發明的TPO-模擬化合物可以用於需要產生血小板或血小板前體細胞或需要刺激c-Mpl受體的任何情況。因此，例如本發明的化合物可以用來在哺乳動物中治療需要血小板、巨核細胞等的任何病症。這種病症詳細描述於以下示例性來源WO95/26746、WO95/21919、WO95/18858、WO95/21920，它們通過引用結合到本文中。
本發明的TPO-模擬化合物也可以用來維持血小板和/或巨核細胞和相關細胞的活力和保存期限。因此，它可以用來在含這種細胞的組合物中包含有效量的一個或多個這種化合物。
本發明的治療方法、組合物和化合物也可以單獨地或與其它細胞因子、可溶性Mpl受體、造血因子、白介素、生長因子或抗體聯合用來治療特徵為其它症狀以及血小板缺乏的疾病狀態。預期在與血細胞生成的一般刺激物結合治療某些形式的血小板減少方面，將證明本發明的化合物是有用的，所述一般刺激物例如IL-3或GM-CSF。其他巨核細胞刺激因子，即meg-CSF、幹細胞生長因子(SCF)、白血病抑制因子(LIF)、oncostatin M(OSM)，或具有巨核細胞刺激活性的其它分子也可以與Mpl受體一起使用。另外的用於這種共給予的其它示例性細胞因子或造血因子包括IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-11、集落刺激因子-1(CSF-1)、SCF、GM-CSF、粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、EPO、幹擾素-α(INF-α)、共有幹擾素、IFN-β或IFN-γ。或者同時或者順序給予有效量的可溶性哺乳動物Mpl受體也可以是有用的，這看來具有當巨核細胞達到成熟形式後立即使得巨核細胞分裂為血小板的效應。因此，預期給予本發明化合物(以增加成熟巨核細胞數)，然後給予可溶性Mpl受體(以使所述配體失活並使成熟巨核細胞可以產生血小板)是一種特別有效的刺激血小板產生的方法。可以調節上述劑量，以補償所述治療組合物中的這種額外組分。所治療的患者的進程可以通過常規方法監測。
在將本發明化合物加入血小板和/或巨核細胞和相關細胞的組合物中的情況下，其包含的量一般採用本領域已知的技術和測定來確定。典型的量的範圍為0.1μg-1mg本發明化合物/106細胞。
藥用組合物概述.本發明也提供本發明化合物的藥用組合物的用法。這種藥用組合物可以用於注射給予或用於經口、肺、鼻、經皮或其它形式給予。一般而言，本發明包括這樣的藥用組合物，所述藥用組合物包含有效量的本發明化合物以及藥學上可接受的稀釋劑、防腐劑、增溶劑、乳化劑、輔藥和/或載體。這種組合物包括各種緩衝劑內容物(例如Tris-HCl、乙酸鹽、磷酸鹽)、pH和離子強度的稀釋物；添加劑，例如去垢劑和增溶劑(例如Tween 80、多乙氧基醚80)、抗氧化劑(例如抗壞血酸、焦亞硫酸鈉)、防腐劑(例如硫柳汞、苯甲醇)和填充物質(例如乳酸、甘露醇)；將所述物質加入聚合化合物(例如聚乳酸、聚乙醇酸等)的顆粒製劑中或加入脂質體中。可以使用透明質酸，這可能具有促進循環時間持久的效應。這種組合物可以影響本發明蛋白和衍生物的物理狀態、穩定性、體內釋放速率和體內清除速率。參見例如Remington’sPharmaceutical Sciences，第18版(1990，Mack Publishing Co.，Easton，PA18042)第1435-1712頁，將其通過引用結合到本文中。可以製備液體形式的所述組合物，或可以製備乾粉形式例如凍幹形式的所述組合物。設想了可植入可持久釋放組合物，也設想了經皮製劑。
口服劑型.對於其中的應用，設想了口服固體劑型，其一般描述於Remington’s Pharmaceutical Sciences(1990)，第18版的第89章，MackPublishing Co.，Easton，PA 18042，將其通過引用結合到本文中。固體劑型包括片劑、膠囊、丸劑、錠劑或糖錠劑、小藥囊或彈丸劑。此外，可以用脂質體或類蛋白包膠囊來配製本發明組合物(如例如美國專利第4,925,673號中報導的類蛋白微球)。也可以使用脂質體包膠囊，並且所述脂質體也可用各種聚合物衍生(如美國專利第5,013,556號)。在Marshall，K.，Modern Pharmaceutics(1979)(G.S.Banker和C.T.Rhodes編輯)的第10章(其通過引用結合到本文中)中給出了用於所述治療藥的可能的固體劑型的描述。一般而言，該製劑包括本發明化合物以及提供保護抵抗胃環境且在腸中釋放所述生物活性材料的惰性組分。
也特別設想了上述本發明化合物的口服劑型。如有必要，可以化學修飾所述化合物以使口服給予有效。一般來說，設想的化學改性是將至少一個部分連接於該化合物分子自身，其中所述部分允許(a)抑制蛋白水解；和(b)從胃或腸吸收到血液中。也需要該化合物總穩定性的增加和在機體循環時間的增加。在本發明中用作共價連接載體的部分也可用於該目的。這種部分的實例包括PEG、乙二醇和丙二醇的共聚物、羧甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮和聚脯氨酸。參見例如Abuchowski和Davis，Soluble Polymer-Enzyme Adducts，Enzymes as Drugs(1981)，Hocenberg和Roberts編輯，Wiley-Interscience，New York，NY.，第367-83頁；Newmark等(1982)，J.Appl.Biochem.4185-9。可以使用的其它聚合物是聚-1，3-二氧戊環。如上所述，對於藥物用途優選PEG部分。
對於口服傳遞劑型，也可能使用修飾的脂族胺基酸的鹽例如N-(8-[2-羥基苯甲醯基]氨基)辛酸鈉(SNAC)作為增強本發明治療化合物的吸收的載體。在Emisphere Technologies進行的II期實驗中已經證明了採用SNAC的肝素製劑的臨床效力。參見美國專利第5,792,451號「口服藥物傳遞組合物和方法」。
本發明化合物可以作為粒徑約1mm的顆粒或彈丸形式的細小的多粒子包括在所述製劑中。用於膠囊給藥的該材料的製劑也可以作為粉劑、輕輕壓制的塞型物(plug)或甚至作為片劑。可以通過壓片製備所述治療藥。
可以包括著色劑和調味劑。例如，可以配製(例如通過脂質體或微球包膠囊)所述蛋白(或衍生物)，然後進一步包含在可食用製品中，例如含有著色劑和調味劑的冷藏飲料。
人們可以用惰性材料稀釋本發明化合物，或增加其體積。這些稀釋劑可以包括糖類，尤其是甘露醇、α-乳糖、無水乳糖、纖維素、蔗糖、改性葡聚糖和澱粉。某些無機鹽也可以用作填充劑，包括三磷酸鈣、碳酸鎂和氯化鈉。某些市售稀釋劑是Fast-Flo、Emdex、STA-Rx1500、Emcompress和Avicell。
崩解劑可以包括在配製為固體劑型的該治療藥製劑中。用作崩解劑的材料包括但不限於澱粉，包括市售的基於澱粉的崩解劑Explotab。澱粉乙醇酸鈉、Amberlite、羧甲基纖維素鈉、超支鏈澱粉(ultramylopectin)、藻酸鈉、明膠、陳皮、酸性羧甲基纖維素、天然海綿和膨潤土都可以使用。另一種形式的崩解劑是不溶性的陽離子交換樹脂。粉狀膠可以用作崩解劑和粘合劑，它們可以包括粉狀膠，例如瓊脂、Karaya或西黃蓍膠。藻酸及其鈉鹽也可以用作崩解劑。
粘合劑可以用來將所述治療劑保持在一起，形成硬的片劑，包括得自天然產物的材料，例如阿拉伯膠、西黃蓍膠、澱粉和明膠。其它包括甲基纖維素(MC)、乙基纖維素(EC)和羧甲基纖維素(CMC)。聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和羥丙基甲基纖維素(HPMC)均可以用於醇溶液以將所述治療劑制粒。
可以在該治療劑製劑中包括減摩劑，以防止配製過程中的粘著。潤滑劑可以用作該治療劑和模壁之間的一層，這些可以包括但不限於硬脂酸包括其鎂鹽和鈣鹽、聚四氟乙烯(PTFE)、液體石蠟、植物油和蠟。也可以使用可溶性潤滑劑，例如十二烷基硫酸鈉、十二烷基硫酸鎂、各種分子量的聚乙二醇、Carbowax 4000和6000。
可以加入改進配製期間藥物流動特性並有助於壓片期間重排的助流劑。助流劑可以包括澱粉、滑石粉、熱解法二氧化矽和水合矽鋁酸鹽。
為了幫助本發明化合物溶解於水性環境中，可以加入表面活性劑作為潤溼劑。表面活性劑可以包括陰離子去垢劑，例如十二烷基硫酸鈉、琥珀酸二辛酯磺酸鈉和二辛基磺酸鈉。可以使用陽離子去垢劑，陽離子去垢劑可以包括苯扎氯銨或苄索氯銨。可以作為表面活性劑包括在該製劑中的潛在的非離子去垢劑一覽表是lauromacrogol 400、硬脂酸-40-聚烴氧基酯、聚氧乙烯氫化蓖麻油10、50和60、甘油單硬脂酸酯、多乙氧基醚40、60、65和80、蔗糖脂肪酸酯、甲基纖維素和羧甲基纖維素。這些表面活性劑可以單獨或作為不同比率的混合物存在於該蛋白或衍生物的製劑中。
添加劑也可以包括在該製劑中，以增強該化合物的攝入。潛在具有該特性的添加劑是例如脂肪酸油酸、亞油酸和亞麻酸。
可以希望有控釋製劑。本發明化合物可以加入惰性基質中，所述惰性基質例如為膠，允許通過或者擴散或者浸濾機制釋放。緩慢變性的基質也可以加入該製劑中，例如藻酸鹽、多糖。本發明化合物的另一種形式的控釋是通過基於Oros治療系統(Alza Corp.)的方法，所述治療系統即包裹於半透膜中的藥物，所述半透膜允許水進入並且由於滲透效應將藥物通過單個小孔推出。某些腸溶包衣也具有延遲釋放的效應。
其它包衣可以用於該製劑。這些包括各種各樣的可以應用於包衣鍋的糖。所述治療劑也可以以膜衣片劑的形式給予，用於這種情況的材料分為2組。第一組是非腸溶材料，包括甲基纖維素、乙基纖維素、羥乙基纖維素、甲基羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、吡咯烷酮和聚乙二醇。第二組包括腸溶材料，它們一般為鄰苯二甲酸酯。
可以使用材料的混合物來提供最佳的薄膜包衣。薄膜包衣可以在衣鍋包衣機(pan coater)或在流化床中進行，或通過壓片包衣進行。
肺部傳遞形式.本文也設想了本發明蛋白(或其衍生物)的肺部傳遞。當吸入時所述蛋白(或衍生物)傳遞至哺乳動物的肺部，並且越過肺上皮襯層傳遞至血流。(這種形式的其它報導包括Adjei等，Pharma.Res.(1990)7565-9；Adjei等(1990)，Internatl.J.Pharmaceutics63135-44(1euprolide acetate)；Braquet等(1989)，J.Cardiovasc.Pharmacol.13(增刊5)s.143-146(內皮縮血管肽-1)；Hubbard等(1989)，Annals Int.Med.3206-12(α1-抗胰蛋白酶)；Smith等(1989)J.Clin.Invest.841145-6(α1-蛋白酶)；Oswein等(1990年3月)，「蛋白的氣霧劑化」，Proc.Symp.Resp.Drug Delivery II，Keystone，Colorado(重組人生長激素)；Debs等(1988)J.Immunol.1403482-8(幹擾素-γ和腫瘤壞死因子α)和Platz等的美國專利第5,284,656(粒細胞集落刺激因子)。
設想用於實施本發明的是設計用於肺部傳遞治療製品的各式各樣的機械裝置，包括但不限於噴霧器、計量劑量吸入器和粉劑吸入器，所有這些都是本領域技術人員熟悉的。適用於實施本發明的市售裝置的某些具體實例是Mallinckrodt，Inc.(St.Louis，Missouri)製造的Ultravent噴霧器；Marquest Medical Products(Englewood，Colorado)製造的Acorn II噴霧器；Glaxo Inc.(Research Triangle Park，North Carolina)製造的Ventolin計量劑量吸入器；和Fisons Corp.(Bedford，Massachusetts)製造的Spinhaler粉劑吸入器。
所有這些裝置均需要應用適用於分配本發明化合物的製劑。通常，每種製劑對於所用裝置類型是專用的，除用於治療的稀釋劑、輔助劑和/或載體外，可能還涉及應用合適的噴射劑材料。
本發明化合物應該最有利地以顆粒形式製備，對於最有效的至遠端肺部傳遞，平均粒徑小於10μm(或微米)，最優選為0.5-5μm。
藥學上可接受的載體包括糖類，例如海藻糖、甘露醇、木糖醇、蔗糖、乳糖和山梨醇。用於製劑的其它組分可以包括DPPC、DOPE、DSPC和DOPC。可以使用天然或合成的表面活性劑。可以使用PEG(甚至在不考慮衍生該蛋白或類似物過程中其用途的情況下)。可以使用葡聚糖，例如環葡聚糖。可以使用膽汁鹽和其它相關的增強劑。可以使用纖維素和纖維素衍生物。可以使用胺基酸，例如用於緩衝劑製劑中。
此外，設想了應用脂質體、微膠囊或微球、包含複合物或其它類型的載體。
適於與或者噴射或者超聲噴霧器一起使用的製劑通常包含溶於水中的本發明化合物，其濃度約為0.1-25mg生物活性蛋白/ml溶液。該製劑也可以包括緩衝劑和單糖(例如用於穩定蛋白和調節滲透壓)。噴霧器製劑也可以含有表面活性劑，以減小或防止在形成氣霧劑過程中溶液霧化引起的表面誘導的所述蛋白的聚集。
與計量劑量吸入器裝置一起使用的製劑一般將包含細碎的粉劑，該粉劑包含在表面活性劑幫助下懸浮於噴射劑的本發明化合物。所述噴射劑可以是用於該目的的任何常規材料，例如含氯氟烴、氫氯氟烴、氫氟烴或烴，包括三氯一氟甲烷、二氯二氟甲烷、二氯四氟乙醇和1，1，1，2-四氟乙烷或它們的組合。合適的表面活性劑包括脫水山梨醇三油酸酯和大豆卵磷脂。油酸也可以用作表面活性劑。
用於從粉劑吸入裝置分配的製劑將包含細碎的含本發明化合物的乾粉，也可以包括促進所述粉劑從該裝置分配的量的填充劑，例如乳糖、山梨醇、蔗糖、甘露醇、海藻糖或木糖醇，所述量例如為所述製劑的50-90％(重量)。
鼻傳遞形式.也設想了本發明化合物的鼻傳遞。鼻傳遞使得在將所述治療製品給予鼻後，所述製品不必在肺中沉積，所述蛋白就可以傳遞直接傳遞至血流。用於鼻傳遞的製劑包括具有葡聚糖或環葡聚糖的那些製劑。也設想了通過跨越黏膜轉運的傳遞。
劑量.治療上述病症的方法中所涉及給藥方案將由主治醫師確定，考慮改變藥物作用的各種因素，例如患者的年齡、病症、體重、性別和飲食、任何感染的嚴重程度、給藥時間和其它臨床因素。一般而言，每日方案的範圍應該為0.1-1000微克本發明化合物/kg體重，最好為0.1-150微克/kg。
具體的優選實施方案本發明人已經確定了具有許多不同種類活性的分子的優選肽序列。本發明人已經進一步確定了與優選接頭和載體結合的這些優選肽的優選結構。這些優選肽的優選結構列於以下表21中。
表21-優選實施方案
「F」是本文先前定義的Fc區工作實施例如下所述製備上述化合物。這些實施例包括本發明的優選實施方案，是說明性的，而不是限制性的。
實施例1TPO-模擬物以下實施例使用由下文表A中出現的編號鑑別的肽。
肽19的製備.將肽17b(12mg)和MeO-PEG-SH 5000(30mg，2eq.)溶於1ml水性緩衝液(pH8)中。將混合物於室溫下保溫約30分鐘，通過分析型HPLC檢查反應，表明反應的完成＞80％。通過製備型HPLC分離PEG化物質。
肽20的製備.將肽18(14mg)和MeO-PEG-馬來醯亞胺(25mg)溶於約1.5ml水性緩衝液(pH8)中。將混合物於室溫下保溫約30分鐘，此時將一等份樣品上樣於HPLC柱，通過分析型HPLC監測約70％的轉化完成。通過製備型HPLC純化PEG化物質。
生物活性測定.TPO體外生物測定是利用已經用人mpl受體轉化的鼠32D細胞的依賴於IL-3的克隆的促細胞分裂測定。該測定更詳細地描述於WO 95/26746。將細胞保持在含有10％Fetal Clone II和1ng/mlmIL-3的MEM培養基中。在加入樣品之前，通過用缺乏mIL-3的生長培養基衝洗2次準備細胞。製作延長的12點TPO標準曲線，範圍從33至39pg/ml。每個樣品製備估計落入該標準曲線線性範圍內(100-125pg/ml)的四種稀釋液，並以三份平行測定進行。將體積為100μl的樣品的每種稀釋液或標準加入含有10,000細胞/孔的96孔微量滴定板的合適孔中。於37℃和10％CO2下44小時後，向每孔中加入MTS(一種被細胞生物還原為甲_的四唑鎓化合物)。約6小時後，在讀板儀(plate reader)上於490nm下讀出光密度。產生劑量反應曲線(log TPO濃度對O.D.-背景)，並對落入標準曲線線性範圍的點進行回歸分析。採用所產生的線性公式和稀釋因數的校正確定未知試驗樣品的濃度。
具有多甘氨酸接頭的TMP串聯重複.我們的順序連接的TMP重複序列的設計基於這樣的假設TMP與c-Mpl(TPO受體)的有效相互作用需要二聚體形式的TMP，並且根據它們在受體背景下如何相互相對纏繞，兩個TMP分子可以在C末端至N末端構型中連接在一起，其方式應該不幹擾總體二聚體構象。顯然，串聯重複設計的成功取決於連接兩個順序布置的TMP單體的C末端和N末端的接頭的長度和組成的正確選擇。由於不能得到結合於c-Mpl的TMP的結構信息，因此合成了一系列具有由0-10個和14個甘氨酸殘基構成的接頭的重複肽(表A)。選擇甘氨酸是因為其簡單和柔性，並根據這樣一個基本原理柔性多甘氨酸肽鏈可能便於兩個連接的TMP重複序列自由摺疊為所需構象，而其它胺基酸序列可以採取不希望有的二級結構，其剛性可能破壞重複肽在受體背景中的填充(packing)。
所得的肽容易為常規固相肽合成法(Merrifield(1963)，J.Amer.Chem.Soc.852149)與或者Fmoc或t-Boc化學所獲得。C末端連接的平行二聚體的合成需要應用正交保護的賴氨酸殘基作為初始分支點，以假對稱方式建立兩條肽鏈(Cwirla等(1997)，Science2761696-9)，與此不同，這些串聯重複序列的合成是筆直的、從C末端至N末端逐步裝配的連續肽鏈。由於TMP的二聚對增殖活性的效應比如用C末端二聚體顯示的結合親和力的效應更顯著(Cwirla等(1997))，在依賴於TPO的細胞增殖測定中，採用用全長c-Mpl轉染的鼠32D細胞的依賴於IL-3克隆(Palacios等，Cell 41727(1985))直接測試合成肽的生物活性。如試驗結果表明，與單體相比，所有多甘氨酸連接的串聯重複序列證明效力增加＞1000倍，在該細胞增殖測定中甚至比C末端二聚體更有效。在我們的測定中C末端二聚體的絕對活性低於天然TPO蛋白的活性，這不同於先前報導的發現C末端二聚體與天然配體一樣有效的發現(Cwirla等(1997))。這可能是由於在兩個測定中所用的條件的差異。然而，在同一測定中，串聯連接二聚體(第一個單體的C末端連接於第二個單體的N末端)和C末端二聚體(第一個單體的C末端連接於第二個單體的C末端；也稱為平行二聚體)之間活性的差異清楚地證明串聯重複策略優於平行肽二聚的優越性。有趣的是注意到接頭容許廣範圍的長度。具有選定的TMP單體的串聯肽之間的最適接頭明顯是由8個甘氨酸組成。
其它串聯重複序列.在這第一個系列的TMP串聯重複序列後，設計了或者具有不同接頭或者單體本身中含有修飾的幾種其它分子。這些分子中的第一種分子-肽13具有由GPNG組成的接頭，這是已知具有很大傾向形成β-轉角型二級結構的一種序列。雖然其效力仍比所述單體高100倍，但發現該肽的活性比等同的GGGG-連接的類似物低10倍。因此，在接頭區引入相對剛性的β-轉角似乎在這種短接頭形式中已經引起最佳激動劑構象的輕微扭轉。
在TMP序列中Trp9在由串聯肽文庫中分離的活性肽中是高度保守的殘基。在EPO模擬肽的共有序列中也有一個高度保守的Trp，並且發現該Trp殘基參與兩個EMP之間疏水核心的形成並有助於與EPO受體的疏水相互作用。Livnah等(1996)，Science273464-71)。用類推的方法，TMP中的Trp9殘基可能在肽配體二聚中具有相似的功能，作為調節和估計兩個吲哚環施加的非共價疏水力的效應的研究，製備了由該Trp突變產生的幾種類似物。因此在肽14中，在兩個TMP單體的每個單體中的該Trp殘基用Cys取代，通過氧化在兩個半胱氨酸之間形成分子內二硫鍵，設想這模擬肽二聚中在兩個Trp殘基之間的疏水相互作用。肽15是還原形式的肽14。在肽16中，所述兩個Trp殘基被Ala取代。如測定數據表明，所有三種類似物均是無活性的。這些數據進一步證明，Trp不僅對於二聚體形成是重要的，對於TPO模擬肽的活性也是關鍵性的。
下兩個肽(肽17a和18)分別在其8-胺基酸接頭中含有一個Lys或Cys殘基。這兩種化合物是其中所述Lys或Cys的側鏈被PEG部分修飾的兩種PEG化肽的前體(肽19和20)。PEG部分在相對長的接頭中間引入，因此所述大PEG組分(5kDa)距離所述肽分子中的關鍵結合位點足夠遠。PEG是已知的生物相容聚合物，它越來越多地用作共價修飾劑，以改進基於肽和蛋白的治療劑的藥代動力學分布圖(profile)。
設想了一種模塊化基於溶液的方法用於合成肽或重組肽的方便的PEG化。該方法基於現在已充分確立的化學選擇性連接策略，它利用一對交互反應性官能團之間的特異性反應。因此，對於PEG化肽19，用溴乙醯基預活化所述賴氨酸側鏈，以產生肽17b以適應與巰基衍生的PEG反應。為此，用正交保護基Dde來保護賴氨酸的ε-氨基。當整個肽鏈裝配後，N末端氨基用t-Boc再保護。然後去除Dde以便於溴乙醯化。該策略給出容易用常規反相HPLC純化的高質量的粗製肽。在pH8的水性緩衝液中發生該肽與巰基修飾的PEG的連接，該反應在30分鐘內完成。對純化的PEG化物質的MALDI-MS分析顯示一種特徵性的鐘形光譜，在所述相鄰峰之間增加44Da。對於PEG-肽20，將一個半胱氨酸殘基置於接頭區中，其側鏈巰基將用作含馬來醯亞胺PEG的連接點。使用相似的條件進行該肽的PEG化。如測定數據表明，與其未PEG化對應物相比，這兩種PEG化肽的體外生物活性甚至更高。
肽21在其8-胺基酸接頭中具有一個潛在的糖基化基序NGS。由於我們典型的串聯重複序列由肽鍵連接的天然胺基酸構成，因此這樣的分子在合適的真核細胞系統中的表達應該產生在Asn側鏈甲醯胺上加入糖部分的糖肽。糖基化是通常的翻譯後修飾過程，它可能通過增加特定蛋白的水性穩定性和體內穩定性而對所述特定蛋白具有許多積極影響。如測定數據表明，將這種糖基化基序引物加入接頭中保持高生物活性。所述潛在糖肽的合成前體具有的活性實際上與-(G)8-連接的類似物的活性相當。一旦糖基化後，則預期該肽的活性與PEG化肽的活性為同一數量級，因為PEG和糖部分表現出的化學物理特性相似。
最後一種肽是串聯重複序列的二聚體。通過將肽18氧化，在位於接頭的兩個半胱氨酸殘基之間形成分子間二硫鍵，而製備這種肽。設計該肽以應付作為四聚體的TMP有活性的可能性。測定數據表明，在調節摩爾濃度的基礎上，該肽的活性並不高於平均串聯重複序列，這間接地支持這樣一個觀點活性形式的TMP實際上是二聚體，串聯重複序列的其它二聚將進一步影響生物活性。
為了證實動物中的體外數據，將一種PEG化TMP串聯重複序列(表A中的化合物20)通過滲透泵皮下傳遞至普通小鼠。觀察到治療期間血小板數依賴於時間和劑量的增加。在第8天觀察到高於4倍基線的血小板峰值水平。10μg/kg/天劑量的PEG化TMP串聯重複序列產生與經同一途徑傳遞的100μg/kg/天的rHuMGDF(非PEG化)相似的反應。
表A-TPO模擬肽
討論.人們普遍認為，MGDF作用的方式與hGH相似，即一分子的蛋白配體結合兩分子的受體以將其激活。Wells等(1996)，Ann.Rev.Biochem.65609-34。現在，通過小得多的肽TMP的作用模擬這種相互作用。然而，本研究表明，這種模擬需要兩個TMP分子的協調作用，因為TMP或者以C-C平行方式或者以C-N順序方式共價二聚，將原始單體的體外生物效力提高了103倍以上。單體的生物效力相對低可能是因為非共價二聚體形成的效率低。預先形成的共價重複序列有能力消除形成非共價二聚體的熵勢壘，非共價二聚體的形成僅由兩分子小的14-殘基肽之間弱的非共價相互作用驅動。
有趣的是，這種串聯重複方法對增強生物活性具有相似效應，因為報導的C-C二聚是令人感興趣的。這兩種側鏈產生兩個非常不同的分子構型。C-C二聚體是準對稱分子，而串聯重複序列在其線性結構中沒有這樣的對稱。儘管在其一級結構中有這種差異，但這兩種類型的分子看來能夠有效摺疊為相似的生物活性構象，並引起c-Mpl的二聚和活化。這些實驗觀察提供了大量的關於兩個TMP分子可能在結合c-Mpl中相互之間如何相互作用的了解。首先，兩個結合的TMP分子的兩個C末端必須相互相對緊密接近，如C末端二聚體的數據所表明的。其次，在受體複合物中這兩個TMP分子相應的N末端和C末端也必須非常緊密地相互對準，使得它們可以以單個肽鍵直接連接在一起，以實現由串聯重複策略產生的接近最大的增強活性效應。在接點插入一個或多個(至多14個)甘氨酸殘基，不再顯著提高(或降低)活性。這可能是因為這樣一個事實柔性多甘氨酸肽鏈能夠容易地從接點環出(loopout)，而不引起總體構象的任何顯著變化。這種柔性似乎提供TMP肽鏈的定向自由度，以摺疊為在與受體相互作用中所需的構象，並確證其作為一個修飾位點。支持這一點的間接證據來自對肽13的研究，其中作為接頭的剛性強得多的b-轉角形式序列明顯迫使接頭周圍主鏈排列的偏離，它可能已經導致最佳構型的輕微扭轉，因此導致活性與具有4-Gly接頭的類似化合物相比中度(10倍)降低。第三，TMP中的Trp9所起的作用與EMP中的Trp13相似，它不僅參與形成二聚體的肽肽相互作用，而且對於在肽受體相互作用中形成疏水力也是重要的。用W突變為C的突變類似物-肽14獲得的結果表明，共價二硫鍵不足以接近由Trp對提供的疏水相互作用，並且共價二硫鍵是一種短鍵合，它們可能使兩個TMP單體太接近，因此幹擾最佳二聚結構的總體構象。
對TMP肽可能的二級結構的分析可以提供關於TMP和c-Mpl之間相互作用的進一步的了解。通過參考報導的EPO模擬肽結構可能有助於這種了解。Livnah等(1996)，Science273464-75。受體結合的EMP具有一個b-髮夾結構，該髮夾結構具有由其序列中心高度共有序列Gly-Pro-Leu-Thr形成的一個b-轉角。TMP不具有GPLT，而是具有高度選擇的GPTL序列，這可能形成相似的轉角。然而，這種轉角樣基序位於TMPN末端部分附近。採用Chau-Fasman法的二級結構預測表明，該肽的C末端一半具有採取螺旋構象的傾向。與位置9的高度保守的Trp一起，這種C末端螺旋可能有助於二聚體結構的穩定化。有趣的是注意到，我們串聯重複序列中的大多數比C末端平行二聚體更為有效。串聯重複似乎比C-C平行二聚給予所述分子一種更為適合的構象。串聯重複序列的這種表面看來非對稱的特徵可能使其更接近天然配體，所述天然配體作為非對稱分子，利用兩個不同的位點結合兩個相同受體分子。
設想了引入PEG部分，以通過提供抗蛋白水解降解的保護並且通過減慢通過腎過濾的清除而增強所述修飾肽的體內活性。意料不到的是，在基於細胞的增殖測定中，PEG化可以進一步提高串聯重複TMP肽的體外生物活性。
實施例2Fc-TMP融合體作為與人IgG1的Fc區的或者N末端或者C末端融合體，以或者單體形式或者二聚體形式表達TMP(和如實施例3中描述的EMP)。在所有情況下，表達構成物均利用質粒表達載體pAMG21中的luxPR啟動子。
Fc-TMP.採用標準PCR技術，構建編碼與TPO-模擬肽單體符合讀框融合的人IgG1 Fc區的DNA序列。PCR反應的模板是pFc-A3載體和一種合成TRP基因。由3種以下所示的重疊寡核苷酸(分別為SEQ ID NO364、365和366)構建所述合成基因1842-97AAA AAA GGA TCC TCG AGA TTA AGC ACG AGC AGC CAG CCACTG ACG CAG AGT CGG ACC1842-98AAA GGT GGA GGT GGT GGT ATC GAA GGT CCG ACT CTG CGT1842-99CAG TGG CTG GCT GCT CGT GCT TAA TCT CGA GGA TCC TTTTTT將這些寡核苷酸退火，形成編碼以下所示胺基酸序列(分別為SEQ IDNO367和368)的雙鏈體AAAGGTGGAGGTGGTGGTATCGAAGGTCCGACTCTGCGTCAGTGGCTGGCTGCTCGTGCT1 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 60CCAGGCTGAGACGCAGTCACCGACCGACGAGCACGAa K G G G G G I E G P T L R Q W L A A R A -TAATCTCGAGGATCCTTTTTT61 ---------+---------+- 81ATTAGAGCTCCTAGGAAAAAAa *採用1842-98和1842-97作為有義引物和反義引物，在PCR反應中擴增這種雙鏈體。
採用以下所示的引物(SEQ ID NO369和370)，用pFc-A3在PCR反應中產生該分子的Fc部分1216-52AAC ATA AGTACC TGT AGG ATC G1830-51TTCGATACCA CCACCTCCAC CTTTACCCGG AGACAGGGAG AGGCTCTTCTGC寡核苷酸1830-51和1842-98含有一個24個核苷酸的重疊，使得通過將上述PCR產物混合到採用外部引物1216-52和1842-97的第三個反應中，將這兩個基因在正確的讀框中融合在一起。
最終的PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶XbaI和BamHI消化，然後如本文中關於EMP-Fc所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#3728。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO5和6)示於圖7。
Fc-TMP-TMP.採用標準PCR技術，構建編碼與TPO-模擬肽二聚體符合讀框地融合的人IgG1的Fc區的DNA序列。PCR反應的模板是pFc-A3載體和合成TMP-TMP基因。由4種以下所示的重疊寡核苷酸(分別為SEQ ID NO371-374)構建所述合成基因1830-52 AAA GGT GGA GGT GGT GGT ATC GAA GGT CCGACT CTG CGT CAG TGG CTG GCT GCT CGT GCT1830-53 ACC TCC ACC ACC AGC ACG AGC AGC CAGCCA CTG ACG CAG AGT CGG ACC1830-54 GGT GGT GGA GGT GGC GGC GGA GGT ATT GAG GGC CCA ACCCTT CGC CAA TGG CTT GCA GCA CGC GCA1830-55 AAA AAA AGG ATC CTC GAG ATT ATG CGC GTG CTG CAA GCCATT GGC GAA GGG TTG GGC CCT CAA TAC CTC CGC CGC C將這4種寡核苷酸退火，形成編碼以下所示胺基酸序列(分別為SEQ IDNO375和376)的雙鏈體AAAGGTGGAGGTGGTGGTATCGAAGGTCCGACTCTGCGTCAGTGGCTGGCTGCTCGTGCT1 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 60CCAGGCTGAGACGCAGTCACCGACCGACGAGCACGAa K G G G G G I E G P T L R Q W L A A R A -GGTGGTGGAGGTGGCGGCGGAGGTATTGAGGGCCCAACCCTTCGCCAATGGCTTGCAGCA61 ---------+---------+--------+---------+---------+----------+ 120CCACCACCTCCACCGCCGCCTCCATAACTCCCGGGTTGGGAAGCGGTTACCGAACGTCGTa G G G G G G G G I E G P T L R Q W L A A -CGCGCA121 ---------------------------148GCGCGTATTAGAGCTCCTAGGAAAAAAAa R A *-採用1830-52和1830-55作為有義引物和反義引物，在PCR反應中擴增這種雙鏈體。
採用上述用於Fc-TMP的引物1216-52和1830-51，用pFc-A3在PCR反應中產生該分子的Fc部分。採用外部引物1216-52和1830-55，從第三個PCR反應獲得所述全長融合基因。
最終的PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶XbaI和BamHI消化，然後如實施例1所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#3727。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO7和8)示於圖8。
TMP-TMP-Fc.採用標準PCR技術，構建編碼與人IgG1的Fc區符合讀框地融合的TPO-模擬肽串聯重複序列的DNA序列。PCR反應的模板是得自菌株#3688(參見實施例3)的EMP-Fc質粒和編碼TMP二聚體的合成基因。由7種以下所示的重疊寡核苷酸(分別為SEQ ID NO377-383)構建所述串聯重複序列的合成基因1885-52TTT TTT CAT ATG ATC GAA GGT CCG ACT CTG CGT CAG TGG1885-53AGC ACG AGC AGC CAG CCA CTG ACG CAG AGT CGG ACC TTCGAT CAT ATG1885-54CTG GCT GCT CGT GCT GGT GGA GGC GGT GGG GAC AAA ACTCAC ACA1885-55CTG GCT GCT CG GCT GGC GGT GGT GGC GGA GGG GGT GGCATT GAG GGC CCA1885-56AAG CCA TTG GCG AAG GGT TGG GCC CTC AAT GCC ACC CCCTCC GCC ACC ACC GCC1885-57ACC CTT CGC CAA TGG CTT GCA GCA CGC GCA GGG GGA GGCGGT GGG GAC AAA ACT1885-58CCC ACC GCC TCC CCC TGC GCG TGC TGC將這些寡核苷酸退火，形成編碼以下所示胺基酸序列(分別為SEQ IDNO384和385)的雙鏈體TTTTTTCATATGATCGAAGGTCCGACTCTGCGTCAGTGGCTGGCTGCTCGTGCTGGCGGT1 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 60GTATACTAGCTTCCAGGCTGAGACGCAGTCACCGACCGACGAGCACGACCGCCAaM I E G P T L R Q W L A A R A G G-GGTGGCGGAGGGGGTGGCATTGAGGGCCCAACCCTTCGCCAATGGCTGGCTGCTCGTGCT61 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 120CCACCGCCTCCCCCACCGTAACTCCCGGGTTGGGAAGCGGTTACCGAACGTCGTGCGCGTa G G G G G G I E G P T L R Q W L A A R A -GGTGGAGGCGGTGGGGACAAAACTCTGGCTGCTCGTGCTGGTGGAGGCGGTGGGGACAAA121 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 180CCCCCTCCGCCACCCa G G G G G D K T L A A R A G G G G G D K -ACTCACACA181 --------- 189a T H T -採用1885-52和1885-58作為有義引物和反義引物，在PCR反應中擴增這種雙鏈體。
採用引物1885-54和1200-54，用得自EMP-Fc融合菌株#3688(參見實施例3)的DNA，在PCR反應中產生該分子的Fc部分。採用外部引物1885-52和1200-54，從第三個PCR反應獲得所述全長融合基因。
最終的PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶XbaI和BamHI消化，然後如本文關於Fc-EMP所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#3798。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO9和10)示於圖9。
TMP-Fc.在TMP-TMP-Fc的連接中，偶然獲得編碼與人IgG1的Fc區符合讀框地融合的TPO-模擬肽單體的DNA序列，推測這是由於引物1885-54退火至1885-53以及退火至1885-58的能力引起的。選擇具有TMP-Fc構成物正確核苷酸序列的單個克隆，並命名為Amgen菌株#3788。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO11和12)示於圖10。
在大腸桿菌中的表達.每種pAMG21-Fc-融合構成物在大腸桿菌GM221中的培養物在含50mg/ml卡那黴素的Luria液體培養基中於37℃培養。在將合成自誘導物N-(3-氧代己醯)-DL-高絲氨酸內酯加入培養物中至終濃度20ng/ml後，達到從luxPR啟動子的基因產物表達的誘導。培養物於37℃再培育3小時。3小時後，通過顯微鏡檢查細菌培養物內含體的存在，然後通過離心收集。在誘導的培養物中觀察到折射內含體，表明所述Fc-融合體最有可能在大腸桿菌中的不溶性部分中產生。通過將細胞沉澱再懸浮於含10％b-巰基乙醇的Laemmli樣品緩衝液中，直接裂解細胞沉澱，並通過SDS-PAGE進行分析。在所有情況下，在SDS-PAGE凝膠上均觀察到合適分子量的強考馬斯染色條帶。
pAMG21.可以從Amgen表達載體pCFM1656(ATCC #69576)衍生表達質粒pAMG21，而pCFM1656又是從描述於美國專利第4,710,473號的Amgen表達載體系統衍生的。pCFM1656質粒可以通過以下步驟衍生自描述的pCFM836質粒(專利號4,710,473)(a)通過用T4聚合酶補平末端，然後進行平端連接，破壞兩個內源NdeI限制位點；(b)單一AatII和ClaI限制位點之間含合成PL啟動子的DNA序列用得自pCFM636(專利號4,710,473)的含所述PL啟動子的相似片段(參見以下SEQ ID NO386)取代；且(c)用具有SEQ ID NO388序列的寡核苷酸置換單一ClaI和KpnI限制位點之間的小DNA序列。
SEQ ID NO386AatII5′CTAATTCCGCTCTCACCTACCAAACAATGCCCCCCTGCAAAAAATAAATTCATAT-3′TGCAGATTAAGGCGAGAGTGGATGGTTTGTTACGGGGGACGTTTTTTTATTTAAGTATA--AAAAAACATACAGATAACCATCTGCGGTGATAAATTATCTCTGGCGGTGTTGACATAAA--TTTTTTGTATGTCTATTGGTAGACGCCACTATTTAATAGAGACCGCCACAACTGTATTT--TACCACTGGCGGTGATACTGAGCACAT3′-ATGGTGACCGCCACTATGACTCGTGTAGC 5′ClaISEQ ID NO3875′CGATTTGATTCTAGAAGGAGGAATAACATATGGTTAACGCGTTGGAATTCGGTAC 3′3′ TAAACTAAGATCTTCCTCCTTATTGTATACCAATTGCGCAACCTTAAGC 5′ClaIKpnI然後通過採用PCR重疊寡核苷酸誘變製備一系列定點鹼基改變以及DNA序列置換，可以從pCFM1656衍生表達質粒pAMG21。由緊接該質粒複製啟動子PcopB5』的BglII位點(質粒bp#180)開始，並向質粒複製基因繼續，其鹼基對改變示於以下表B中。
表B-產生pAMG21的鹼基對改變DAMG21 bp#pCFM1656中的bp在pAMG21中bp改變為#204T/A C/G#428A/T G/C#509G/C A/T#617-- 插入兩G/C bp#679G/C T/A#980T/A C/G#994G/C A/T#1004 A/T C/G#1007 C/G T/A#1028 A/T T/A#1047 C/G T/A#1178 G/C T/A#1466 G/C T/A#2028 G/C bp缺失#2187 C/G T/A#2480 A/T T/A#2499-2502AGTGGTCATCACCAGT#2642TCCGAGC7bp缺失AGGCTCG#3435 G/C A/T#3446 G/C A/T#3643 A/T T/A
單一AatII(pCFM1656中的位置#4364)和SacII(pCFM1656中的位置#4585)限制位點之間的DNA序列用圖17A和18B中所示的DNA序列(SEQ ID NO23)置換。在連接該置換DNA序列的粘性末端的過程中，外部AatII和SacII位點被破壞。在置換的DNA中有單一AatII和SacII位點。
GM221(Amgen#2596).Amgen宿主菌株#2596是衍生自Amgen菌株#393的大腸桿菌K-12菌株。已經對其進行修飾，以使其在早期ebg區中含有溫度敏感型λ阻抑物cI857s7以及在晚期ebg區(68分鐘)中含有lacIQ阻抑物。這兩種阻抑物基因的存在使得可以對該宿主應用各種各樣的表達系統，然而這兩種阻抑物均與從luxPR的表達無關。未轉化宿主沒有抗生素抗性。
已經對cI857s7基因的核糖體結合位點進行修飾，以包括一個增強的RBS。已經將其插入如Genbank登錄號M64441Gb_Ba中編號的位置1170和1411之間、缺失間插ebg序列的ebg操縱子中。以下顯示所述插入片段的序列，而小寫字母代表鄰接以下所示所述插入片段的ebg序列(SEQ ID NO388)ttattttcgtGCGGCCGCACCATTATCACCGCCAGAGGTAAACTAGTCAACACGCACGGTGTTAGATATTTATCCCTTGCGGTGATAGATTGAGCACATCGATTTGATTCTAGAAGGAGGGATAATATATGAGCACAAAAAAGAAACCATTAACACAAGAGCAGCTTGAGGACGCACGTCGCCTTAAAGCAATTTATGAAAAAAAGAAAAATGAACTTGGCTTATCCCAGGAATCTGTCGCAGACAAGATGGGGATGGGGCAGTCAGGCGTTGGTGCTTTATTTAATGGCATCAATGCATTAAATGCTTATAACGCCGCATTGCTTACAAAAATTCTCAAAGTTAGCGTTGAAGAATTTAGCCCTTCAATCGCCAGAGAATCTACGAGATGTATGAAGCGGTTAGTATGCAGCCGTCACTTAGAAGTGAGTATGAGTACCCTGTTTTTTCTCATGTTCAGGCAGGGATGTTCTCACCTAAGCTTAGAACCTTTACCAAAGGTGATGCGGAGAGATGGGTAAGCACAACCAAAAAAGCCAGTGATTCTGCATTCTGGCTTGAGGTTGAAGGTAATTCCATGACCGCACCAACAGGCTCCAAGCCAAGCTTTCCTGACGGAATGTTAATTCTCGTTGACCCTGAGCAGGCTGTTGAGCCAGGTGATTTCTGCATAGCCAGACTTGGGGGTGATGAGTTTACCTTCAAGAAACTGATCAGGGATAGCGGTCAGGTGTTTTTACAACCACTAAACCCACAGTACCCAATGATCCCATGCAATGAGAGTTGTTCCGTTGTGGGGAAAGTTATCGCTAGTCAGTGGCCTGAAGAGACGTTTGGCTGATAGACTAGTGGATCCACTAGTgtttctgccc使用名為MMebg-cI857s7增強RBS#4的重組噬菌體將所述構成物傳遞至染色體進入F’tet/393。。重組和分離後，僅上述染色體插入片段保留在細胞中。將其重新命名為F’tet/GM101。然後通過將lacIQ構成物傳遞至如Genbank登錄號M64441Gb_Ba中編號的核苷酸位置2493和2937之間、缺失間插ebg序列的ebg操縱子中，修飾F’tet/GM101。以下顯示所述插入片段的序列，而小寫字母代表鄰接以下所示的所述插入片段(SEQ ID NO389)的ebg序列
ggcggaaaccGACGTCCATCGAATGGTGCAAAACCTTTCGCGGTATGGCATGATAGCGCCCGGAAGAGAGTCAATTCAGGGTGGTGAATGTGAAACCAGTAACGTTATACGATGTCGCAGAGTATGCCGGTGTCTCTTATCAGACCGTTTCCCGCGTGGTGAACCAGGCCAGCCACGTTTCTGCGAAAACGCGGGAAAAAGTCGAAGCGGCGATGGCGGAGCTGAATTACATTCCCAACCGCGTGGCACAACAACTGGCGGGCAAACAGTCGCTCCTGATTGGCGTTGCCACCTCCAGTCTGGCCCTGCACGCGCCGTCGCAAATTGTCGCGGCGATTAAATCTCGCGCCGATCAACTGGGTGCCAGCGTGGTGGTGTCGATGGTAGAACGAAGCGGCGTCGAAGCCTGTAAAGCGGCGGTGCACAATCTTCTCGCGCAACGCGTCAGTGGGCTGATCATTAACTATCCGCTGGATGACCAGGATGCCATTGCTGTGGAAGCTGCCTGCACTAATGTTCCGGCGTTATTTCTTGATGTCTCTGACCACACACCCATCAACAGTATTATTTTCTCCCATGAAGACGGTACGCGACTGGGCGTGGAGCATCTGGTCGCATTGGGTCACCAGCAAATCGCGCTGTTAGCGGGCCCATTAAGTTCTGTCTCGGCGCGTCTGCGTCTGGCTGGCTGGCATAAATATCTCACTCGCAATCAAATTCAGCCGATAGCGGAACGGGAAGGCGACTGGAGTGCCATGTCCGGTTTTCAACAAACCATGCAAATGCTGAATGAGGGCATCGTTCCCACTGCGATGCTGGTTGCCAACGATCAGATGGCGCTGGGCGCAATGCGCGCCATTACCGAGTCCGGGCTGCGCGTTGGTGCGGATATCTCGGTAGTGGGATACGACGATACCGAAGACAGCTCATGTTATATCCCGCCGTTAACCACCATCAAACAGGATTTTCGCCTGCTGGGGCAAACCAGCGTGGACCGCTTGCTGCACTCTCTCAGGGGCCAGGCGGTGAAGGGCAATCAGCTGTTGCCCGTCTCACTGGTGAAAAGAAAAACCACCCTGGCGCCCAATACGCAAACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGTTTCCCGACTGGAAAGCGGACAGTAAGGTACCATAGGATCCaggcacagga採用稱為AGebg-LacIQ#5的重組噬菌體，將該構成物傳遞至染色體中，進入F’tet/GM101。重組和分離後，僅上述染色體插入片段保留在細胞中。將其重新命名為F’tet/GM221。採用在LB中濃度為25μg/ml的吖啶橙從該菌株中消除所述F’tet附加體。根據四環素敏感鑑定消除的菌株，將其以GM221貯存。
表達.將含pAMG21-Fc-TMP-TMP的大腸桿菌GM221在含50μg/ml卡那黴素的Luria液體培養物中的培養物於37℃培育，然後進行誘導。在將合成的自誘導物N-(3-氧代己醯)-DL-高絲氨酸內酯加入培養物中至終濃度20ng/ml後，達到從luxPR啟動子的Fc-TMP-TMP基因產物表達的誘導，將培養物於37℃再培育3小時。3小時後，通過顯微鏡檢查細菌培養物內含體的存在，然後通過離心收集。在誘導的培養物中觀察到折射內含體，表明Fc-TMP-TMP最有可能在大腸桿菌中的不溶性部分中產生。通過將細胞沉澱再懸浮於含10％b-巰基乙醇的Laemmli樣品緩衝液中，直接裂解細胞沉澱，並通過SDS-PAGE進行分析。在SDS-PAGE凝膠上觀察到約30kDa的強考馬斯染色條帶。預期的基因產物長度將為269個胺基酸，預期分子量約29.5kDa。也在標準分批條件下，以10L規模進行了發酵，產生與小試規模獲得的相似的Fc-TMP-TMP的表達水平。
Fc-TMP-TMP的純化.通過高壓勻漿(以14,000PSI的2程)在水(1/10)中破碎細胞，並通過離心(J-6B中的4200PRM，1小時)收穫內含體。將內含體在6M胍、50mM Tris、8mM DTT pH8.7中以1/10的比率溶解1小時。將溶解的混合物在2M尿素、50mM tris、160mM精氨酸、3mM半胱氨酸pH8.5中稀釋20倍。將化合物在冷條件下攪拌過夜，然後通過超濾濃縮約10倍。然後用10mM Tris、1.5M尿素pH9稀釋3倍。然後用乙酸將該混合物的pH調至pH5。通過離心去除沉澱，將上清液上樣至在20mM NaAc、100mM NaCl pH5平衡的SP-Sepharose FastFlow柱(10mg/ml蛋白負載量，室溫)。用20倍柱體積的相同緩衝液中從100mM NaCl至500mM NaCl的梯度，洗脫出該蛋白。將來自該柱的合併物稀釋3倍，上樣至20mM NaAc、150mM NaCl pH5中的SP-Sepharose HP柱(10mg/ml蛋白負載量，室溫)。用20倍柱體積的相同緩衝液中從150mM NaCl至400mM NaCl的梯度，洗脫出該蛋白。合併峰部分並過濾。
Fc-TMP活性的特徵鑑定.以下是在小鼠中採用本發明各種化合物的體內數據的總結。
小鼠正常雌性BDF1，約10-12周齡。
放血時間表在第0天處理每組10隻小鼠，以4天的間隔開始2組，每組總共20隻小鼠。在每個時間點將5隻小鼠放血，小鼠一周最少放血3次。用異氟烷麻醉小鼠，通過眶後竇(orbital sinus)穿刺獲得總共140-160μl體積的血液。在運行針對鼠血的軟體的Technicon H1E血液分析儀上對血液進行計數。測量的參數是白細胞、紅細胞、血細胞比容、血紅蛋白、血小板和嗜中性粒細胞。
處理小鼠或者皮下注射進行大劑量處理，或者植入7日微型滲透泵進行連續傳遞。皮下注射傳遞的體積為0.2ml。將滲透泵插入在麻醉小鼠肩胛之間的皮膚中製造的皮下切口中。將化合物在含0.1％BSA的PBS中稀釋。所有實驗均包括一個對照組，標為「載體」，它僅用該稀釋劑處理。調節泵中試驗物的濃度，以使來自泵的校準流速給出圖中所指定的治療水平。
化合物逐漸增加劑量的所述化合物在7日微型滲透泵中傳遞至小鼠。用7日滲透泵中單劑量為100μg/kg的各種化合物處理小鼠。然後將所述相同化合物中的某些化合物作為一次大劑量注射給予小鼠。
活性試驗結果活性實驗的結果示於圖11和12中。在採用7日微型滲透泵的劑量反應測定中，用100μg/kg/天的SEQ ID NO18的化合物觀察到最大效應；10μg/kg/天的劑量的活性為最大值的約50％，而1μg/kg/天的劑量是該測定系統中可以觀察到活性的最低劑量。在同一實驗中，10μg/kg/天劑量的所述化合物的活性與100μg/kg/天未PEG化rHu-MGDF的活性大約相等。
實施例3Fc-EMP融合體Fc-EMP.採用標準PCR技術，構建編碼與EPO-模擬肽單體符合讀框融合的人IgG1 Fc區的DNA序列。PCR反應的模板是包含Fc序列的載體(pFc-A3，描述於國際申請WO 97/23614，公布於1997年7月3日)和一種編碼EPO單體的合成基因。由4種以下所示的重疊寡核苷酸(分別為SEQ ID NO390-393)構建所述單體的合成基因1798-2TAT GAA AGG TGG AGG TGG TGG TGG AGG TAC TTA CTC TTGCCA CTT CGG CCC GCT GAC TTG G1798-3CGG TTT GCA AAC CCA AGT CAG CGG GCC GAA GTG GCA ACAGTA AGT ACC TCC ACC ACC ACC TCC ACC TTT CAT1798-4GTT TGC AAA CCG CAG GGT GGC GGC GGC GGC GGC GGT GGTACC TAT TCC TGT CAT TTT1798-5CCA GGT CAG CGG GCC AAA ATA ACA GGA ATA GGT ACC ACCGCC GCC GCC GCC GCC ACC CTG將這4種寡核苷酸退火，形成編碼以下所示胺基酸序列(分別為SEQ IDNO394和395)的雙鏈體TATGAAAGGTGGAGGTGGTGGTGGAGGTACTTACTCTTGCCACTTCGGCCCGCTGACTTG1 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 60TACTTTCCACCTCCACCACCACCTCCATGAATGAGAACGGTGAAGCCGGGCGACTGAACb M K G G G G G G G T Y S C H F G P L T W -GGTTTGCAAACCGCAGGGTGGCGGCGGCGGCGGCGGTGGTACCTATTCCTGTCATTTT61 ---------+---------+---------+---------+---------+----------+----------+-- 133CCAAACGTTTGGCGTCCCACCGCCGCCGCCGCCGCCACCATGGATAAGGACAGTAAAACCGGGCGACTGGACCb V C K P Q G G G G G G G G T Y S C H F -採用1798-18和1798-19作為有義引物和反義引物(分別為SEQ IDNO396和397)，在PCR反應中擴增這種雙鏈體
1798-18GCA GAA GAG CCT CTC CCT GTC TCC GGG TAAAGG TGG AGG TGG TGG TGG AGG TAC TTACTC T和1798-19CTA ATT GGA TCC ACG AGA TTA ACC ACCCTG CGG TTT GCA A採用以下所示的引物(分別為SEQ ID NO369和399)，用pFc-A3在PCR反應中產生該分子的Fc部分1216-52AAC ATA AGT ACC TGT AGG ATC G1798-17AGA GTA AGT ACC TCC ACC ACC ACC TCC ACC TTT ACC CGGAGA CAG GGA GAG GCT CTT CTG C寡核苷酸1798-17和1798-18含有一個61個核苷酸的重疊，使得通過將上述PCR產物混合到採用外部引物1216-52和1798-19的第三個反應中，可以將這兩個基因在正確的讀框中融合在一起。
最終的PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶XbaI和BamHI消化，然後將其連接到也用XbaI和BamHI消化的載體pAMG21(以下描述的)中。將連接的DNA轉化到感受態大腸桿菌菌株2596宿主細胞(本文描述的GM221)中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#3718。
所得融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO15和16)示於圖13。
EMP-Fc.採用標準PCR技術，構建編碼與人IgG1 Fc區符合讀框融合的EPO-模擬肽單體的DNA序列。PCR反應的模板是pFc-A3a載體和一種編碼EPO單體的合成基因。由4種重疊寡核苷酸1798-4和1798-5(上述)以及1798-6和1798-7(分別為SEQ ID NO400和401)構建所述單體的合成基因1798-6GGC CCG CTG ACC TGG GTA TGT AAG CCA CAA GGG GGT GGGGGA GGC GGG GGG TAA TCT CGA G1798-7GAT CCT CGA GAT TAC CCC CCG CCT CCC CCA CCC CCT TGTGGC TTA CAT AC將這4種寡核苷酸退火，形成編碼以下所示胺基酸序列(分別為SEQ IDNO402和403)的雙鏈體
GTTTGCAAACCGCAGGGTGGCGGCGGCGGCGGCGGTGGTACCTATTCCTGTCATTTTGGC1 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 60GTCCCACCGCCGCCGCCGCCGCCACCATGGATAAGGACAGTAAAACCGA V C K P Q G G G G G G G G T Y S C H F G -CCGCTGACCTGGGTATGTAAGCCACAAGGGGGTGGGGGAGGCGGGGGGTAATCTCGAG61 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+- 122GGCGACTGGACCCATACATTCGGTGTTCCCCCACCCCCTCCGCCCCCCATTAGAGCTCCTAGA P L T W V C K P Q G G G G G G G *採用1798-21和1798-22作為有義引物和反義引物(分別為SEQ IDNO404和405)，在PCR反應中擴增這種雙鏈體1798-21TTA TTT CAT ATG AAA GGT GGT AAC TAT TCC TGT CAT TTT和1798-22TGG ACA TGT GTG AGT TTT GTC CCC CCC GCC TCC CCC ACCCCC T採用引物1798-23和1200-54(分別為SEQ ID NO406和407)，用pFc-A3在PCR反應中產生該分子的Fc部分1798-23AGG GGG TGG GGG AGG CGG GGG GGA CAA AAC TCA CAC ATGTCC A和1200-54GTT ATT GCT CAG CGG TGG CA寡核苷酸1798-22和1798-23含有一個43個核苷酸的重疊，使得通過將上述PCR產物混合到採用外部引物1787-21和1200-54的第三個反應中，可以將這兩個基因在正確的讀框中融合在一起。
最終的PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶XbaI和BamHI消化，然後如上所述將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#3688。
所得融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO17和18)示於圖14。
EMP-EMP-Fc.採用標準PCR技術，構建編碼與人IgG1的Fc區符合讀框地融合的EPO-模擬肽二聚體的DNA序列。PCR反應的模板是得自上述菌株#3688的EMP-Fc質粒和編碼所述EPO二聚體的合成基因。由8種以下所示的重疊寡核苷酸(分別為SEQ ID NO408-415)構建所述二聚體的合成基因
1869-23TTT TTT ATC GAT TTG ATT CTA GAT TTG AGT TTT AAC TTTTAG AAG GAG GAA TAA AAT ATG1869-48TAA AAG TTA AAA CTC AAA TCT AGA ATC AAA TCG ATA AAAAA1871-72GGA GGT ACT TAC TCT TGC CAC TTC GGC CCG CTG ACT TGGGTT TGC AAA CCG1871-73AGT CAG CGG GCC GAA GTG GCA AGA GTA AGT ACC TCC CATATT TTA TTC CTC CTT C1871-74CAG GGT GGC GGC GGC GGC GGC GGT GGT ACC TAT TCC TGTCAT TTT GGC CCG CTG ACC TGG1871-75AAA ATG ACA GGA ATA GGT ACC ACC GCC GCC GCC GCC GCCACC CTG CGG TTT GCA AAC CCA1871-78GTA TGT AAG CCA CAA GGG GGT GGG GGA GGC GGG GGG GACAAA ACT CAC ACA TGT CCA1871-79AGT TTT GTC CCC CCC GCC TCC CCC ACC CCC TTG TGG CTTACA TAC CCA GGT CAG CGG GCC將這8種寡核苷酸退火，形成編碼以下所示胺基酸序列(分別為SEQ IDNO416和417)的雙鏈體TTTTTTATCGATTTGATTCTAGATTTGAGTTTTAACTTTTAGAAGGAGGAATAAAATATG1 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 60AAAAAATAGCTAAACTAAGATCTAAACTCAAAATTGAAAATCTTCCTCCTTATTTTATACaM -GGAGGTACTTACTCTTGCCACTTCGGCCCGCTGACTTGGGTTTGCAAACCGCAGGGTGGC61 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 120CCTCCATGAATGAGAACGGTGAAGCCGGGCGACTGAACCCAAACGTTTGGCGTCCCACCGa G G T Y S C H F G P L T W V C K P Q G G -GGCGGCGGCGGCGGTGGTACCTATTCCTGTCATTTTGGCCCGCTGACCTGGGTATGTAAG121 ---------+---------+---------+---------+---------+---------+ 180CCGCCGCCGCCGCCACCATGGATAAGGACAGTAAAACCGGGCGACTGGACCCATACATTCa G G G G G G T Y S C H F G P L T W V C K -CCACAAGGGGGTGGGGGAGGCGGGGGGGACAAAACTCACACATGTCCA181 ---------+---------+---------+---------+--------- 228GGTGTTCCCCCACCCCCTCCGCCCCCCCTGTTTTGAa P Q G G G G G G G D K T H T C P-採用1869-23和1871-79(以上所示)作為有義引物和反義引物，在PCR反應中擴增這種雙鏈體。
採用引物1798-23和1200-54(以上所示)，用菌株3688DNA，在PCR反應中產生該分子的Fc部分。
寡核苷酸1871-79和1798-23含有一個31個核苷酸的重疊，使得通過將上述PCR產物混合到採用外部引物1869-23和1200-54的第三個反應中，可以將這兩個基因在正確的讀框中融合在一起。
最終的PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶XbaI和BamHI消化，然後如本文關於Fc-EMP所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#3813。
所得融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO19和20)示於圖15。在位置145有一個沉默突變(A變為G，以粗體顯示)，以使最終構成物的核苷酸序列不同於衍生該核苷酸序列的寡核苷酸1871-72。
Fc-EMP-EMP.採用標準PCR技術，構建編碼與EPO-模擬肽二聚體符合讀框地融合的人IgG1的Fc區的DNA序列。PCR反應的模板是得自上述菌株3688和3813的質粒。
採用引物1216-52和1798-17(以上所示)，用菌株3688DNA，在PCR反應中產生該分子的Fc部分。該分子的EMP二聚體部分是用菌株3813DNA進行的第二個PCR反應的產物，該反應採用引物1798-18(也是以上所示的)和以下所示的SEQ ID NO4181798-20CTA ATT GGA TCC TCG AGA TTA ACC CCC TTG TGG TGG CTT ACAT寡核苷酸1798-17和1798-18含有一個61個核苷酸的重疊，使得通過將上述PCR產物混合到採用外部引物1216-52和1798-20的第三個反應中，可以將這兩個基因在正確的讀框中融合在一起。
最終的PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶XbaI和BamHI消化，然後如本文關於Fc-EMP所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#3822。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(分別為SEQ ID NO21和22)示於圖16。
Fc-EMP活性的特徵鑑定.如下在體內進行特徵鑑定。
小鼠正常雌性BDF1，約10-12周齡。
放血時間表在第0天處理每組小鼠，以4天的間隔開始2組，每組總共20隻小鼠。在每個時間點將5隻小鼠放血，小鼠一周最多放血3次。用異氟烷麻醉小鼠，通過眶後竇穿刺獲得總共140-160ml體積的血液。在運用針對鼠血液的軟體的Technicon H1E血液分析儀上對血液進行計數。測量的參數是WBC、RBC、HCT、HGB、PLT、NEUT、LYMPH。
處理小鼠或者皮下注射進行大劑量處理，或者植入7日微型滲透泵進行連續傳遞。皮下注射傳遞的體積為0.2ml。將滲透泵插入在麻醉小鼠肩胛之間的皮膚中製造的皮下切口中。將化合物在含0.1％BSA的PBS中稀釋。所有實驗均包括一個對照組，標為「載體」，它僅用該稀釋劑處理。調節泵中試驗物的濃度，以使來自泵的校準流速給出圖中所指定的治療水平。
實驗以一次大劑量注射100μg/kg劑量將各種Fc-綴合的EPO模擬肽(EMP)傳遞給小鼠。在7日微型滲透泵中將Fc-EMP傳遞至小鼠。在7天結束時不取出泵。給小鼠放血直至第51天，此時HGB和HCT回到基線水平。
實施例4TNF-α抑制劑Fc-TNF-α抑制劑.採用標準PCR技術，構建編碼與TNF-α抑制肽單體符合讀框融合的人IgG1 Fc區的DNA序列。採用有義引物1216-52和反義引物2295-89(分別為SEQ ID NO369和1112)，在採用得自Fc-EMP融合體菌株#3718(參見實施例3)的DNA的PCR反應中產生該分子的Fc和5個甘氨酸接頭的部分。編碼TNF-α抑制肽的核苷酸由以下所示的PCR引物2295-89提供1216-52AAC ATA AGT ACC TGT AGG ATC G2295-89CCG CGG ATC CAT TAC GGA CGG TGA CCC AGA GAG GTG TTT TTG TAGTGC GGC AGG AAG TCA CCA CCA CCT CCA CCT TTA CCC寡核苷酸2295-89與模板的所述甘氨酸接頭和Fc部分重疊22個核苷酸，該PCR產生在正確讀框中融合的這兩個基因。
所述PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶NdeI和BamHI消化，然後如本文中關於EMP-Fc所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#4544。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1055和1056)示於圖19A和19B。
TNF-α抑制劑-Fc.採用標準PCR技術，構建編碼與人IgG1 Fc區符合讀框融合的TNF-α抑制肽的DNA序列。PCR反應的模板是含通過5個甘氨酸接頭連接於Fc的不相關肽的質粒。編碼TNF-α抑制肽的核苷酸由有義PCR引物2295-88和作為反義引物的引物1200-54(分別為SEQID NO1117和407)提供。所述引物序列在以下顯示2295-88GAA TAA CAT ATG GAC TTC CTG CCG CAC TAC AAA AAC ACC TCT CTG GGTCAC CGT CCG GGT GGA GGC GGT GGG GAC AAA ACT1200-54GTT ATT GCT CAG CGG TGG CA寡核苷酸2295-88與模板的所述甘氨酸接頭和Fc部分重疊24個核苷酸，該PCR產生在正確讀框中融合的這兩個基因。
所述PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶NdeI和BamHI消化，然後如本文中關於EMP-Fc所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#4543。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1057和1058)示於圖20A和20B。
在大腸桿菌中的表達.每種pAMG21-Fc-融合構成物在大腸桿菌GM221中的培養物在含50mg/ml卡那黴素的Luria液體培養基中於37℃培養。在將合成的自誘導物N-(3-氧代己醯)-DL-高絲氨酸內酯加入培養物中至終濃度20ng/ml後，達到從luxPR啟動子的基因產物表達的誘導。培養物於37℃再培育3小時。3小時後，通過顯微鏡檢查細菌培養物中內含體的存在，然後通過離心收集。在誘導的培養物中觀察到折射內含體，表明所述Fc-融合體最有可能在大腸桿菌中的不溶性部分中產生。通過將細胞沉澱再懸浮於含10％β-巰基乙醇的Laemmli樣品緩衝液中，直接裂解細胞沉澱，並通過SDS-PAGE進行分析。在所有情況下，在SDS-PAGE凝膠上均觀察到合適分子量的強考馬斯染色條帶。
Fc-肽融合蛋白的純化.通過高壓勻漿(以14,000PSI的2程)在水(1/10)中破碎細胞，並通過離心(J-6B中的4200PRM，1小時)收穫內含體。將內含體在6M胍、50mM Tris、8mM DTT pH8.7中以1/10的比率溶解1小時。將溶解的混合物在2M尿素、50mM tris、160mM精氨酸、3mM半胱氨酸pH8.5中稀釋20倍。將化合物在冷條件下攪拌過夜，然後通過超濾濃縮約10倍。然後用10mM Tris、1.5M尿素pH9稀釋3倍。用乙酸將該混合物的pH調至pH5。通過離心去除沉澱，將上清液上樣至在20mM NaAc、100mM NaCl pH5中平衡的SP-Sepharose Fast Flow柱(10mg/ml蛋白負載量，室溫)。用20倍柱體積的相同緩衝液中從100mM NaCl至500mM NaCl的梯度，洗脫出該蛋白。將來自該柱的合併物稀釋3倍，上樣至20mM NaAc、150mM NaCl pH5中的SP-Sepharose HP柱(10mg/ml蛋白負載量，室溫)。用20倍柱體積的相同緩衝液中從150mM NaCl至400mM NaCl的梯度，洗脫出該蛋白。合併峰部分並過濾。
Fc-TNF-α抑制劑和TNF-α抑制劑-Fc活性的特徵鑑定.通過用掌握本說明書的內容的本領域普通技術人員可利用的方法，可以通過BIAcore對這些肽融合蛋白與TNF-α的結合進行特徵鑑定。
實施例5IL-1拮抗劑Fc-IL-1拮抗劑.採用標準PCR技術，構建編碼與IL-1拮抗肽單體符合讀框融合的人IgG1 Fc區的DNA序列。採用有義引物1216-52和反義引物2269-70(分別為SEQ ID NO369和1118)，在採用得自Fc-EMP融合菌株#3718(參見實施例3)的DNA的PCR反應中產生該分子的Fc和5個甘氨酸接頭的部分。編碼IL-1拮抗肽的核苷酸由以下所示的PCR引物2269-70提供1216-52AAC ATA AGT ACC TGT AGG ATC G2269-70CCG CGG ATC CAT TAC AGC GGC AGA GCG TAC GGC TGC CAG TAA CCCGGG GTC CAT TCG AAA CCA CCA CCT CCA CCT TTA CCC寡核苷酸2269-70與模板的所述甘氨酸接頭和Fc部分重疊22個核苷酸，該PCR產生在正確讀框中融合的這兩個基因。
所述PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶NdeI和BamHI消化，然後如本文中關於EMP-Fc所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#4506。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1059和1060)示於圖21A和21B。
IL-1拮抗劑-Fc.採用標準PCR技術，構建編碼與人IgGl Fc區符合讀框融合的IL-1拮抗肽的DNA序列。PCR反應的模板是含通過5個甘氨酸接頭連接於Fc的不相關肽的質粒。編碼IL-1拮抗肽的核苷酸由有義PCR引物2269-69和作為反義引物的引物1200-54(分別為SEQ ID NO1119和407)提供。所述引物序列在以下顯示2269-69GAA TAA CAT ATG TTC GAA TGG ACC CCG GGT TAC TGG CAG CCG TAC GCTCTG CCG CTG GGT GGA GGC GGT GGG GAC AAA ACT1200-54GTT ATT GAT CAG CGG TGG CA寡核苷酸2269-69與模板的所述甘氨酸接頭和Fc部分重疊24個核苷酸，該PCR產生在正確讀框中融合的這兩個基因。
所述PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶NdeI和BamHI消化，然後如本文中關於EMP-Fc所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#4505。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1061和1062)示於圖22A和22B。表達和純化如前述實施例進行。
Fc-IL-1拮抗肽和IL-1拮抗肽-Fc活性的特徵鑑定.採用IGEN系統，進行IL-1β、IL-1RA和Fc-綴合的IL-1肽序列之間的IL-1受體結合競爭。反應含有0.4nM生物素-IL-1R+15nM IL-1-TAG+3uM競爭物+20ug/ml鏈黴抗生物素蛋白-綴合物珠粒，其中競爭物為IL-1RA、Fc-IL-1拮抗劑、IL-1拮抗劑-Fc。在從3uM至1.5pM的競爭物濃度範圍內分析競爭。結果示於以下表C中表C-IL-1受體結合競爭測定的結果IL-1肽-Fc Fc-IL-1肽 IL-raKI 281.5 59.58 1.405EC50 530.0 112.2 2.64595％置信間隔EC50 280.2-1002 54.75-229.8 1.149-6.086KI 148.9-532.5 29.08-122.1 0.6106-3.233擬合良性R20.9790 0.9687 0.9602實施例6VEGF拮抗劑Fc-VEGF拮抗劑.採用標準PCR技術，構建編碼與VEGF模擬肽單體符合讀框融合的人IgG1 Fc區的DNA序列。PCR反應的模板是pFc-A3質粒和合成的VEGF模擬肽基因。通過將以下兩種寡核苷酸引物(分別為SEQ ID NO1110和1111)退火，裝配所述合成基因2293-11GTT GAA CCG AAC TGT GAC ATC CAT GTT ATG TGG GAA TGG GAATGT TTT GAA CGT CTG2293-12CAG ACG TTC AAA ACA TTC CCA TTC CCA CAT AAC ATG GAT GTCACA GTT CGG TTC AAC將所述兩種寡核苷酸退火，形成編碼以下所示胺基酸序列(SEQ ID NO1113和1114)的雙鏈體
GTTGAACCGAACTGTGACATCCATGTTATGTGGGAATGGGAATGTTTTGAACGTCTG1 ---------+---------+---------+---------+---------+------- 57CAACTTGGCTTGACACTGTAGGTACAATACACCCTTACCCTTACAAAACTTGCAGACa V E P N C D I H V M W E W E C F E R L採用2293-05和2293-06作為有義引物和反義引物(SEQ ID NO1122和1123)，在PCR反應中擴增該雙鏈體。
採用引物2293-03和2293-04作為有義引物和反義引物(分別為SEQID NO1120和1121)，用pFc-A3質粒在PCR反應中產生該分子的Fc部分。採用外部引物2293-03和2293-06由第三個PCR反應獲得全長融合基因。這些引物在以下顯示2293-03ATT TGA TTC TAG AAG GAG GAA TAA CAT ATG GAC AAA ACT CACACA TGT2293-04GTC ACA GTT CGG TTC AAC ACC ACC ACC ACC ACC TTT ACC CGGAGA CAG GGA2293-05TCC CTG TCT CCG GGT AAA GGT GGT GGT GGT GGT GTT GAA CCGAAC TGT GAC ATC2293-06CCG CGG ATC CTC GAG TTA CAG ACG TTC AAA ACA TTC CCA所述PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶NdeI和BamHI消化，然後如本文中關於EMP-Fc所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#4523。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1063和1064)示於圖23A和23B。
VEGF拮抗劑-Fc.採用標準PCR技術，構建編碼與人IgG1 Fc區符合讀框融合的VEGF模擬肽的DNA序列。PCR反應的模板是pFc-A3質粒和上述合成的VEGF模擬肽基因。採用2293-07和2293-08作為有義引物和反義引物(分別為SEQ ID NO1124和1125)，在PCR反義中擴增該合成雙鏈體。
採用引物2293-09和2293-10作為有義引物和反義引物(分別為SEQID NO1126和1127)，用pFc-A3質粒在PCR反應中產生該分子的Fc部分。採用外部引物2293-07和2293-10由第三個PCR反應獲得全長融合基因。這些引物在以下顯示2293-07ATT TGA TTC TAG AAG GAG GAA TAA CAT ATG GTT GAA CCG AACTGT GAC2293-08ACA TGT GTG AGT TTT GTC ACC ACC ACC ACC ACC CAG ACG TTCAAA ACA TTC2293-09GAA TGT TTT GAA CGT CTG GGT GGT GGT GGT GGT GAC AAA ACTCAC ACA TGT2293-10CCG CGG ATC CTC GAG TTA TTT ACC CGG AGA CAG GGA GAG所述PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶NdeI和BamHI消化，然後如本文中關於EMP-Fc所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#4524。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1065和1066)示於圖24A和24B。表達和純化如前述實施例進行。
實施例7MMP抑制劑Fc-MMP抑制劑.採用標準PCR技術，構建編碼與MMP抑制肽單體符合讀框融合的人IgG1 Fc區的DNA序列。採用有義引物1216-52和反義引物2308-67(分別為SEQ ID NO369和1115)，在採用得自Fc-TNF-α抑制劑融合菌株#4544(參見實施例4)的DNA的PCR反應中產生該分子的Fc和5個甘氨酸接頭的部分。編碼所述MMP抑制肽的核苷酸由以下所示的PCR引物2308-67提供1216-52AAC ATA AGT ACC TGT AGG ATC G2308-67CCG CGG ATC CAT TAG CAC AGG GTG AAA CCC CAG TGG GTG GTGCAA CCA CCA CCT CCA CCT TTA CCC寡核苷酸2308-67與模板的所述甘氨酸接頭和Fc部分重疊22個核苷酸，該PCR產生在正確讀框中融合的這兩個基因。
所述PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶NdeI和BamHI消化，然後如本文中關於EMP-Fc所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#4597。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1067和1068)示於圖25A和25B。表達和純化如前述實施例進行。
MMP抑制劑-Fc.採用標準PCR技術，構建編碼與人IgG1 Fc區符合讀框融合的MMP抑制肽的DNA序列。採用得自Fc-TNF-α抑制劑融合菌株#4543(參見實施例4)的DNA，在PCR反應中產生該分子的Fc和5個甘氨酸接頭的部分。編碼所述MMP抑制肽的核苷酸由有義PCR引物2308-66和作為反義引物的引物1200-54(分別為SEQ ID NO1116和407)提供。所述引物序列在以下顯示2308-66GAA TAA CAT ATG TGC ACC ACC CAC TGG GGT TTC ACC CTG TGCGGT GGA GGC GGT GGG GAC AAA1200-54GTT ATT GCT CAG CGG TGG CA寡核苷酸2269-69與模板的所述甘氨酸接頭和Fc部分重疊24個核苷酸，該PCR產生在正確讀框中融合的這兩個基因。
所述PCR基因產物(全長融合基因)用限制性內切核酸酶NdeI和BamHI消化，然後如本文中關於EMP-Fc所述，將其連接到載體pAMG21中並轉化到感受態大腸桿菌菌株2596細胞中。根據產生所述重組蛋白產物和具有核苷酸序列正確的所述基因融合體的能力篩選克隆。選擇單個這樣的克隆，並命名為Amgen菌株#4598。
該融合蛋白的核苷酸序列和胺基酸序列(SEQ ID NO1069和1070)示於圖26A和26B。
* * *現在全面描述了本發明，對本領域技術人員顯而易見的是，在不偏離本文敘述的本發明的精神和範圍的情況下，可以作出許多改變和修改。
含有質粒pAMG21的大腸桿菌菌株K-12/FM-5已於1994年2月24日保藏於美國典型培養物保藏中心，保藏號為ATCC 69576。
縮寫在整個本說明書中使用的縮寫定義如下，除非在具體情況下另有說明。
Ac 乙醯(用來指乙醯化殘基)ACBpa乙醯化對苯甲醯-L-苯丙氨酸ADCC 依賴於抗體的細胞的細胞毒性Aib 氨基丁酸bA β-丙氨酸Bpa 對苯甲醯-L-苯丙氨酸BrAc 溴乙醯(BrCH2C(O)BSA 牛血清白蛋白Bzl 苄基Cap 己酸CTL 細胞毒性T淋巴細胞CTLA4細胞毒性T淋巴細胞抗原4DARC Duffy血型抗原受體DCC 二環己基碳二亞胺Dde 1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代-亞環己基)乙基EMP 促紅細胞生成素-模擬肽ESI-MS 電噴霧電離質譜EPO 促紅細胞生成素Fmoc 芴基甲氧羰基G-CSF粒細胞集落刺激因子GH 生長激素HCT 血細胞比容
HGB 血紅蛋白hGH 人生長激素HOBt1-羥基苯並三唑HPLC高效液相色譜IL 白介素IL-R白介素受體IL-1R 白介素-1受體IL-1ra 白介素-1受體拮抗劑Lau 月桂酸LPS 脂多糖LYMPH 淋巴細胞MALDI-MS基質輔助的(matrix-assisted)雷射解吸電離質譜Me 甲基MeO 甲氧基MHC 主要組織相容性複合體MMP 基質金屬蛋白酶MMPI基質金屬蛋白酶抑制劑1-Nap 1-萘基丙氨酸NEUT嗜中性粒細胞NGF 神經生長因子Nle 正亮氨酸NMP N-甲基-2-吡咯烷酮PAGE聚丙烯醯胺凝膠電泳PBS 磷酸緩衝鹽溶液Pbf 2，2，4，6，7-五甲基二氫苯並呋喃-5-磺醯PCR 聚合酶鏈式反應Pec 2-哌啶酸PEG 聚乙二醇
pGlu焦穀氨酸Pic 吡啶甲酸PLT 血小板pY 磷酸酪氨酸RBC 紅細胞RBS 核糖體結合位點RT 室溫(25℃)Sar 肌氨酸SDS 十二烷基硫酸鈉STK 絲氨酸-蘇氨酸激酶t-Boc 叔丁氧羰基tBu 叔丁基TGF 組織生長因子THF 胸腺體液因子TK 酪氨酸激酶TMP 血小板生成素-模擬肽TNF 組織壞死因子TPO 血小板生成素TRAIL 誘導TNF-相關的細胞凋亡的配體Trt 三苯甲基UK 尿激酶UKR 尿激酶受體VEGF血管內皮細胞生長因子VIP 血管活性腸肽WBC 白細胞序列表110FEIGE，ULRICHLIU，CHUAN-FACHEETHAM，JANET C.
BOONE，THOMAS CHARLES120作為治療劑的修飾肽130A-52714099814727.31411999-10-2515060/105,3711511998-10-231601127170PatentIn version 3.12101211684212DNA213人類220
221CDS222(1)..(684)223
4001atg gac aaa act cac aca tgt cca cct tgt cca gct ccg gaa ctc ctg48Met Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu1 5 10 15ggg gga ccg tca gtc ttc ctc ttc ccc cca aaa ccc aag gac acc ctc96Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu20 25 30atg atc tcc cgg acc cct gag gtc aca tgc gtg gtg gtg gac gtg agc144Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser35 40 45cac gaa gac cct gag gtc aag ttc aac tgg tac gtg gac ggc gtg gag192His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu50 55 60gtg cat aat gcc aag aca aag ccg cgg gag gag cag tac aac agc acg240Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr65 70 75 80tac cgt gtg gtc agc gtc crc acc gtc ctg cac cag gac tgg ctg aat288Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn85 90 95
ggc aag gag tac aag tgc aag gtc tcc aac aaa gcc ctc cca gcc ccc336Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro100 105 110atc gag aaa acc atc tcc aaa gcc aaa ggg cag ccc cga gaa cca cag384Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln115 120 125gtg tac acc ctg ccc cca tcc cgg gat gag ctg acc aag aac cag gtc432Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val130 135 140agc ctg acc tgc ctg gtc aaa ggc ttc tat ccc agc gac atc gcc gtg480Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val145 150 155 160gag tgg gag agc aat ggg cag ccg gag aac aac tac aag acc acg cct528Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro165 170 175ccc gtg ctg gac tcc gac ggc tcc ttc ttc ctc tac agc aag ctc acc576Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr180 185 190gtg gac aag agc agg tgg cag cag ggg aac gtc ttc tca tgc tcc gtg624Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val195 200 205atg cat gag gct ctg cac aac cac tac acg cag aag agc ctc tcc ctg672Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu210 215 220tct ccg ggt aaa684Ser Pro Gly Lys2252102211228212PRT213人類4002Met Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu1 5 10 15Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu20 25 30Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser35 40 45
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu50 55 60Val His Ash Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr ASn Ser Thr65 70 75 80Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn85 90 95Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro100 105 110Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln115 120 125Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val130 135 140Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val145 150 155 160Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro165 170 175Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr180 185 190Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val195 200 205Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu210 215 220Ser Pro Gly Lys225210321118212PRT213人工序列220
223製備PEG化肽的合成方案
4003Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala1 5 10 15Arg Ala210421118212PRT213人工序列220
223製備PEG化肽的合成方案4004Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala1 5 10 15Arg Ala2105211794212DNA213人工序列220
223Fc-TMP220
221CDS222(39)..(779)223
4005tctagatttg ttttaactaa ttaaaggagg aataacat atg gac aaa act cac aca 56Met Asp Lys Thr His Thr1 5tgt cca cct tgt cca gct ccg gaa ctc ctg ggg gga ccg tca gtc ttc104Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe10 15 20ctc ttc ccc cca aaa ccc aag gac acc ctc atg atc tcc cgg acc cct152Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro25 30 35gag gtc aca tgc gtg gtg gtg gac gtg agc cac gaa gac cct gag gtc200
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val40 45 50aag ttc aac tgg tac gtg gac ggc gtg gag gtg cat aat gcc aag aca248Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr55 60 65 70aag ccg cgg gag gag cag tac aac agc acg tac cgt gtg gtc agc gtc296Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val75 80 85ctc acc gtc ctg cac cag gac tgg ctg aat ggc aag gag tac aag tgc344Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys90 95 100aag gtc tcc aac aaa gcc ctc cca gcc ccc atc gag aaa acc atc tcc392Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser105 110 115aaa gcc aaa ggg cag ccc cga gaa cca cag gtg tac acc ctg ccc cca440Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro120 125 130tcc cgg gat gag ctg acc aag aac cag gtc agc ctg acc tgc ctg gtc488Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val135 140 145 150aaa ggc ttc tat ccc agc gac atc gcc gtg gag tgg gag agc aat ggg536Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly155 160 165cag ccg gag aac aac tac aag acc acg cct ccc gtg ctg gac tcc gac584Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp170 175 180ggc tcc ttc ttc ctc tac agc aag ctc acc gtg gac aag agc agg tgg632Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp185 190 195cag cag ggg aac gtc ttc tca tgc tcc gtg atg cat gag gct ctg cac680Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His200 205 210aac cac tac acg cag aag agc ctc tcc ctg tct ccg ggt aaa ggt gga728Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly215 220 225 230ggt ggt ggt atc gaa ggt ccg act ctg cgt cag tgg ctg gct gct cgt776Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu A1a Ala Arg235 240 245gct taatctcgag gatcc 794Ala
2106211247212PRT213人工序列220
223Fc-TMP4006Met Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu1 5 10 15Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu20 25 30Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser35 40 45His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu50 55 60Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr65 70 75 80Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn85 90 95Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro100 105 110Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln115 120 125Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val130 135 140Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val145 150 155 160Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro165 170 175Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr180 185 190
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val195 200 205Met His G1u Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu210 215 220Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg225 230 235 240Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala2452107211861212DNA213人工序列220
223Fc-TMP-TMP220
221CDS222(39)..(842)223
4007tctagatttg ttttaactaa ttaaaggagg aataacat atg gac aaa act cac aca 56Met Asp Lys Thr His Thr1 5tgt cca cct tgt cca gct ccg gaa ctc ctg ggg gga ccg tca gtc ttc104Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe10 15 20ctc ttc ccc cca aaa ccc aag gac acc ctc atg atc tcc cgg acc cct152Leu Phe Pro Pro Lys Pr0 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pr025 30 35gag gtc aca tgc gtg gtg gtg gac gtg agc cac gaa gac cct gag gtc200Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val40 45 50aag ttc aac tgg tac gtg gac ggc gtg gag gtg cat aat gcc aag aca248Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr55 60 65 70aag ccg cgg gag gag cag tac aac agc acg tac cgt gtg gtc agc gtc296Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val75 80 85
ctc acc gtc ctg cac cag gac tgg ctg aat ggc aag gag tac aag tgc344Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Ash Gly Lys Glu Tyr Lys Cys90 95 100aag gtc tcc aac aaa gcc ctc cca gcc ccc atc gag aaa acc atc tcc392Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser105 110 115aaa gcc aaa ggg cag ccc cga gaa cca cag gtg tac acc ctg ccc cca440Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro120 125 130tcc cgg gat gag ctg acc aag aac cag gtc agc ctg acc tgc ctg gtc488Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val135 140 145 150aaa ggc ttc tat ccc agc gac atc gcc gtg gag tgg gag agc aat ggg536Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly155 160 165cag ccg gag aac aac tac aag acc acg cct ccc gtg ctg gac tcc gac584Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp170 175 180ggc tcc ttc ttc ctc tac agc aag ctc acc gtg gac aag agc agg tgg632Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp185 190 195cag cag ggg aac gtc ttc tca tgc tcc gtg atg cat gag gct ctg cac680Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His200 205 210aac cac tac acg cag aag agc ctc tcc ctg tct ccg ggt aaa ggt gga728Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly215 220 225 230ggt ggt ggt atc gaa ggt ccg act ctg cgt cag tgg ctg gct gct cgt776Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg235 240 245gct ggt ggt gga ggt ggc ggc gga ggt att gag ggc cca acc ctt cgc824Ala Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg250 255 260caa tgg ctt gca gca cgc gcataatctc gaggatccg 861Gln Trp Leu Ala Ala Arg2652108211268212PRT213人工序列220
223Fc-TMP-TMP
4008Met Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu1 5 10 15Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu20 25 30Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser35 40 45His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu50 55 60Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr65 70 75 80Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn85 90 95Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro100 105 110Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln115 120 125Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val130 135 140Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val145 150 155 160Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro165 170 175Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr180 185 190Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val195 200 205Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
210 215 220Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg225 230 235 240Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly GIy Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile245 250 255Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg260 2652109211855212DNA213人工序列220
223TMP-TMP-Fc220
22lCDS222(39)..(845)223
4009tctagatttg ttttaactaa ttaaaggagg aataacat atg atc gaa ggt ccg act 56Met Ile Glu Gly Pro Thr1 5ctg cgt cag tgg ctg gct gct cgt gct ggc ggt ggt ggc gga ggg ggt 104Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly10 15 20ggc att gag ggc cca acc ctt cgc caa tgg ctt gca gca cgc gca ggg 152Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly25 30 35gga ggc ggt ggg gac aaa act cac aca tgt cca cct tgc cca gca cct 200Gly Gly Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro40 45 50gaa ctc ctg ggg gga ccg tca gtt ttc ctc ttc ccc cca aaa ccc aag 248Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys55 60 65 70gac acc ctc atg atc tcc cgg acc cct gag gtc aca tgc gtg gtg gtg 296Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val75 80 85gac gtg agc cac gaa gac cct gag gtc aag ttc aac tgg tac gtg gac 344Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp90 95 100
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223TMP-TMP-Fc40010
Met Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp20 25 30Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys35 40 45Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu50 55 60Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu65 70 75 80Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys85 90 95Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys100 105 110Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu115 120 125Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys130 135 140Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys145 150 155 160Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser165 170 175Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys180 185 190Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln195 200 205Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly210 215 220
Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln225 230 235 240Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn245 250 255His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys260 26521011211789212DNA213人工序列220
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Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu210 215 220Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His225 230 235 240Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly245 250 255Gly Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys260 265 270Lys Pro Gln Gly Gly275210232111546212DNA213人工序列220
223pAMG2140023gcgtaacgta tgcatggtct ccccatgcga gagtagggaa ctgccaggca tcaaataaaa 60cgaaaggctc agtcgaaaga ctgggccttt cgttttatct gttgtttgtc ggtgaacgct120ctcctgagta ggacaaatcc gccgggagcg gatttgaacg ttgcgaagca acggcccgga180gggtggcggg caggacgccc gccataaact gccaggcatc aaattaagca gaaggccatc240ctgacggatg gcctttttgc gtttctacaa actcttttgt ttatttttct aaatacattc300aaatatggac gtcgtactta acttttaaag tatgggcaat caattgctcc tgttaaaatt360gctttagaaa tactttggca gcggtttgtt gtattgagtt tcatttgcgc attggttaaa420tggaaagtga ccgtgcgctt actacagcct aatatttttg aaatatccca agagcttttt480ccttcgcatg cccacgctaa acattctttt tctcttttgg ttaaatcgtt gtttgattta540ttatttgcta tatttatttt tcgataatta tcaactagag aaggaacaat taatggtatg600ttcatacacg catgtaaaaa taaactatct atatagttgt ctttctctga atgtgcaaaa660ctaagcattc cgaagccatt attagcagta tgaataggga aactaaaccc agtgataaga720cctgatgatt tcgcttcttt aattacattt ggagattttt tatttacagc attgttttca780
aatatattcc aattaatcgg tgaatgattg gagttagaat aatctactat aggatcatat 840tttattaaat tagcgtcatc ataatattgc ctccattttt tagggtaatt atccagaatt 900gaaatatcag atttaaccat agaatgagga taaatgatcg cgagtaaata atattcacaa 960tgtaccattt tagtcatatc agataagcat tgattaatat cattattgct tctacaggct 1020ttaattttat taattattct gtaagtgtcg tcggcattta tgtctttcat acccatctct 1080ttatccttac ctattgtttg tcgcaagttt tgcgtgttat atatcattaa aacggtaata 1140gattgacatt tgattctaat aaattggatt tttgtcacac tattatatcg cttgaaatac 1200aattgtttaa cataagtacc tgtaggatcg tacaggttta cgcaagaaaa tggtttgtta 1260tagtcgatta atcgatttga ttctagattt gttttaacta attaaaggag gaataacata 1320tggttaacgc gttggaattc gagctcacta gtgtcgacct gcagggtacc atggaagctt 1380actcgaggat ccgcggaaag aagaagaaga agaagaaagc ccgaaaggaa gctgagttgg 1440ctgctgccac cgctgagcaa taactagcat aaccccttgg ggcctctaaa cgggtcttga 1500ggggtttttt gctgaaagga ggaaccgctc ttcacgctct tcacgc 15462102421114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40024Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Lys Ala1 5 102102521114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40025Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Glu Trp Leu Ala Ala Arg Ala1 5 1021026
21114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(14)..(14)223於位置14，胺基酸接頭連接於一個相同序列40026Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala1 5 102102721114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(14)..(14)223於位置14，胺基酸接頭連接於一個相同序列40027Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Lys Ala1 5 102102821114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(9)..(9)223於位置9與一個相同序列的位置9形成二硫鍵220
221misc_feature222(14)..(14)223於位置14，胺基酸接頭連接於一個相同序列
40028Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Cys Leu Ala Ala Arg Ala1 5 102102921114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(16)..(16)223位置16溴乙醯基團連接於側鏈220
221misc_feature222(14)..(14)223於位置14，胺基酸接頭以N至C連接於Lys和另一接頭與一個相同序列40029Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala1 5 102103021114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(16)..(16)223位置16，聚乙二醇連接於側鏈220
221misc_feature222(14)..(14)223於位置14，胺基酸接頭以N至C連接於Lys和另一接頭與一個相同序列40030Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala
1 5 102103121114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(9)..(9)223位置9與一個分離的相同序列的殘基9形成二硫鍵220
221misc_feature222(14)..(14)223於位置14，胺基酸接頭連接於一個相同序列40031Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Cys Leu Ala Ala Arg Ala1 5 102103221114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(14)..(14)223於位置14，胺基酸接頭連接位點40032Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala1 5 10210332119212PRT213人工序列220
223TPO模擬肽
220
221misc_feature222(6，7and)..(8)223Xaa＝任何胺基酸40033Val Arg Asp Gln Ile Xaa Xaa Xaa Leu1 5210342116212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40034Thr Leu Arg Glu Trp Leu1 52103521110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40035Gly Arg Val Arg Asp Gln Val Ala Gly Trp1 5 102103621110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40036Gly Arg Val Lys Asp Gln Ile Ala Gln Leu1 5 102103721110212PRT
213人工序列220
223TPO-模擬肽40037Gly Val Arg Asp Gln Val Ser Trp Ala Leu1 5 102103821110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40038Glu Ser Val Arg Glu Gln Val Met Lys Tyr1 5 102103921110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40039Ser Val Arg Ser Gln Ile Ser Ala Ser Leu1 5 102104021110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40040Gly Val Arg Glu Thr Val Tyr Arg His Met1 5 102104121111212PRT
213人工序列220
223TPO-模擬肽40041Gly Val Arg Glu Val Ile Val Met His Met Leu1 5 102104221111212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40042Gly Arg Val Arg Asp Gln Ile Trp Ala Ala Leu1 5 102104321111212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40043Ala Gly Val Arg Asp Gln Ile Leu Ile Trp Leu1 5 102104421111212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40044Gly Arg Val Arg Asp Gln Ile Met Leu Ser Leu1 5 102104521111212PRT
213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(8)..(10)223Xaa＝任何胺基酸40045Gly Arg Val Arg Asp Gln Ile Xaa Xaa Xaa Leu1 5 102104621110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40046Cys Thr Leu Arg Gln Trp Leu G1n Gly Cys1 5 102104721110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40047Cys Thr Leu Gln Glu Phe Leu Glu Gly Cys1 5 102104821110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40048Cys Thr Arg Thr Glu Trp Leu His Gly Cys1 5 10
2104921112212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40049Cys Thr Leu Arg Glu Trp Leu His Gly Gly Phe Cys1 5 102105021112212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40050Cys Thr Leu Arg Glu Trp Val Phe Ala Gly Leu Cys1 5 102105121113212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40051Cys Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ile Leu Leu Gly Met Cys1 5 102105221114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40052Cys Thr Leu Ala Glu Phe Leu Ala Ser Gly Val Glu Gln Cys1 5 10
2105321114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40053Cys Ser Leu Gln Glu Phe Leu Ser His Gly Gly Tyr Val Cys1 5 102105421114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40054Cys Thr Leu Arg Glu Phe Leu Asp Pro Thr Thr Ala Val Cys1 5 102105521114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40055Cys Thr Leu Lys Glu Trp Leu Val Ser His Glu Val Trp Cys1 5 102105621110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(8)..(9)223Xaa＝任何胺基酸
40056Cys Thr Leu Arg Glu Trp Leu Xaa Xaa Cys1 5 102105721111212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(8)..(10)223Xaa＝任何胺基酸40057Cys Thr Leu Arg Glu Trp Leu Xaa Xaa Xaa Cys1 5 102105821112212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(8)..(11)223Xaa＝任何胺基酸40058Cys Thr Leu Arg Glu Trp Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Cys1 5 102105921113212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(8)..(12)
223Xaa＝任何胺基酸40059Cys Thr Leu Arg Glu Trp Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Cys1 5 102106021114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(8)..(13)223Xaa＝任何胺基酸40060Cys Thr Leu Arg Glu Trp Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Cys1 5 102106121110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40061Arg Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Met1 5 102106221110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40062Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala1 5 1021063
21110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40063Glu Arg Gly Pro Phe Trp Ala Lys Ala Cys1 5 102106421110212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40064Arg Glu Gly Pro Arg Cys Val Met Trp Met1 5 102106521114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40065Cys Gly Thr Glu Gly Pro Thr Leu Ser Thr Trp Leu Asp Cys1 5 102106621114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40066Cys Glu Gln Asp Gly Pro Thr Leu Leu Glu Trp Leu Lys Cys1 5 1021067
21114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40067Cys Glu Leu Val Gly Pro Ser Leu Met Ser Trp Leu Thr Cys1 5 102106821114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40068Cys Leu Thr Gly Pro Phe Val Thr Gln Trp Leu Tyr Glu Cys1 5 102106921114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40069Cys Arg Ala Gly Pro Thr Leu Leu G1u Trp Leu Thr Leu Cys1 5 102107021114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40070Cys Ala Asp Gly Pro Thr Leu Arg Glu Trp Ile Ser Phe Cys1 5 1021071
21113212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(2)..(12)223Xaa＝任何胺基酸40071Cys Xaa Glu Gly Pro Thr Leu Arg Glu Trp Leu Xaa Cys1 5 102107221114212PRT213人工序列220
223TRO-模擬肽220
221misc_feature222(2，3)..(13)223Xaa＝任何胺基酸40072Cys Xaa Xaa Glu Gly Pro Thr Leu Arg Glu Trp Leu Xaa Cys1 5 102107321114212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(2，12)..(13)223Xaa＝任何胺基酸40073Cys Xaa G1u G1y Pro Thr Leu Arg Glu Trp Leu Xaa Xaa Cys1 5 10
2107421115212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(2，3，13)..(14)223Xaa＝任何胺基酸40074Cys Xaa Xaa Glu Gly Pro Thr Leu Arg Glu Trp Leu Xaa Xaa Cys1 5 10 152107521116212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40075Gly Gly Cys Thr Leu Arg Glu Trp Leu His Gly Gly Phe Cys Gly Gly1 5 10 152107621118212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40076Gly Gly Cys Ala Asp Gly Pro Thr Leu Arg Glu Trp Ile Ser Phe Cys1 5 10 15Gly Gly2107721119212PRT213人工序列
220
223TPO-模擬肽40077Gly Asn Ala Asp Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Glu Gly Arg Arg1 5 10 15Pro Lys Asn2107821119212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40078Leu Ala Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu His Gly Asn Gly1 5 10 15Arg Asp Thr2107921119212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40079His Gly Arg Val Gly Pro Thr Leu Arg Glu Trp Lys Thr Gln Val Ala1 5 10 15Thr Lys Lys2108021118212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽
40080Thr Ile Lys Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Lys Ser Arg Glu His1 5 10 15Thr Ser2108121118212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽40081Ile Ser Asp Gly Pro Thr Leu Lys Glu Trp Leu Ser Val Thr Arg Gly1 5 10 15Ala Ser2108221118212PRT213人工序列220
223TPO模擬肽40082Ser Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Glu Trp Leu Thr Ser Arg Thr Pro1 5 10 15His Ser2108321114212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(2，4，5，8，11)..(13)223Xaa＝任何胺基酸40083Tyr Xaa Cys Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Cys Xaa Pro1 5 102108421128212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(2，4，5，8，11，13，16，18，19，22，25)..(27)223Xaa＝任何胺基酸40084Tyr Xaa Cys Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Cys Xaa Pro Tyr Xaa1 5 10 15Cys Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Cys Xaa Pro20 252108521114212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(14)..(14)223於位置14，胺基酸接頭連接於一個相同序列220
221misc_feature222(2，4，5，8，11)..(13)223Xaa＝任何胺基酸40085Tyr Xaa Cys Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Cys Xaa Pro
1 5 102108621114212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(2，4，5，8，11)..(13)223Xaa＝任何胺基酸40086Tyr Xaa Cys Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Cys Xaa Pro1 5 102108721120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽40087Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly202108821120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽40088Gly Gly Asp Tyr His Cys Arg Met Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Leu Gly Gly20
2108921120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽40089Gly Gly Val Tyr Ala Cys Arg Met G1y Pro Ile Thr Trp Val Cys Ser1 5 10 15Pro Leu Gly G1y202109021120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽40090Val Gly Asn Tyr Met Cys His Phe Gly Pro Ile Thr Trp Val Cys Arg1 5 10 15Pro Gly Gly Gly202109121120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽40091Gly Gly Leu Tyr Leu Cys Arg Phe Gly Pro Val Thr Trp Asp Cys Gly1 5 10 15Tyr Lys Gly Gly20
2109221140212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽40092Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr20 25 30Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly35 402109321120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(20)..(20)223位置20，胺基酸接頭連接於一個相同序列40093Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly202109421123212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽40094Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys
1 5 10 15Pro Gln Gly Gly Ser Ser Lys202109521146212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽40095Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly Ser Ser Lys Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly20 25 30Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Ser Ser Lys35 40 452109621123212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(23)..(23)223位置23，胺基酸接頭連接於一個相同序列40096Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly Ser Ser Lys202109721122212PRT213人工序列
220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(22)..(22)223位置22通過ε胺連接於賴氨醯，後者通過一個分離的相同序列的α胺與該序列連接40097Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly Ser Ser202109821123212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(23)..(23)223於位置23，生物素通過一個接頭連接於所述側鏈40098Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly Ser Ser Lys20210992115212PRT213人工序列220
223G-CSF-模擬肽220
221misc_feature222(4)..(4)223於位置4與一個分離的相同序列的殘基4形成二硫鍵40099
Glu Glu Asp Cys Lys1 52101002115212PRT213人工序列220
223G-CSF-模擬肽220
221misc_feature222(4)..(4)223於位置4，Xaa是連接於一個分離相同序列的isoteric乙烯間隔區400100Glu Glu Asp Xaa Lys1 52101012116212PRT213人工序列220
223G-CSF-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是焦穀氨酸殘基220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa是連接於一個分離相同序列的isoteric乙烯間隔區400101Xaa Gly Glu Asp Xaa Lys1 52101022115212PRT213人工序列220
223G-CSF-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是吡啶甲酸殘基220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，Xaa是連接於一個分離相同序列的isoteric乙烯間隔區400102Xaa Ser Asp Xaa Lys1 52101032115212PRT213人工序列220
223G-CSF-模擬肽220
221misc_feature222(5)..(5)223於位置5，胺基酸接頭連接於一個相同序列400103Glu Glu Asp Cys Lys1 52101042115212PRT213人工序列220
223G-CSF-模擬肽220
221misc_feature222(5)..(5)223於位置5，胺基酸接頭連接於一個相同序列220
221mise_feature
222(4)..(4)223Xaa＝任何胺基酸400104Glu Glu Asp Xaa Lys1 52101052116212PRT213人工序列220
223抗病毒肽(HBV)400105Leu Leu Gly Arg Met Lys1 521010621111212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400106Tyr Cys Phe Thr Ala Ser Glu Ash His Cys Tyr1 5 1021010721111212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400107Tyr Cys Phe Thr Asn Ser Glu Asn His Cys Tyr1 5 1021010821111212PRT213人工序列
220
223TNF拮抗肽400108Tyr Cys Phe Thr Arg Ser Glu Asn His Cys Tyr1 5 102101092119212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400109Phe Cys Ala Ser Glu Asn His Cys Tyr1 52101102119212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400110Tyr Cys Ala Ser Glu Asn His Cys Tyr1 52101112119212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400111Phe Cys Asn Ser Glu Asn His Cys Tyr1 52101122119212PRT213人工序列
220
223TNF拮抗肽400112Phe Cys Asn Ser Glu Asn Arg Cys Tyr1 521011321110212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400113Phe Cys Asn Ser Val Glu Asn Arg Cys Tyr1 5 1021011421111212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400114Tyr Cys Ser Gln Ser Val Ser Asn Asp Cys Phe1 5 102101152119212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400115Phe Cys Val Ser Asn Asp Arg Cys Tyr1 521011621111212PRT213人工序列
220
223TNF拮抗肽400116Tyr Cys Arg Lys Glu Leu Gly Gln Val Cys Tyr1 5 102101172119212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400117Tyr Cys Lys Glu Pro Gly Gln Cys Tyr1 52101182119212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400118Tyr Cys Arg Lys G1u Met Gly Cys Tyr1 52101192119212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400119Phe Cys Arg Lys Glu Met Gly Cys Tyr1 52101202119212PRT213人工序列
220
223TNF拮抗肽400120Tyr Cys Trp Ser Gln Asn Leu Cys Tyr1 521012121110212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400121Tyr Cys Glu Leu Ser Gln Tyr Leu Cys Tyr1 5 102101222119212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400122Tyr Cys Trp Ser Gln Asn Tyr Cys Tyr1 52101232119212PRT213人工序列220
223TNF拮抗肽400123Tyr Cys Trp Ser Gln Tyr Leu Cys Tyr1 521012421110212PRT213人工序列
220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(1)223Xaa(位置1)可以是C、A、a-氨基-g-溴丁酸或Hoc。
220
221misc_feature222(2)..(2)223Xaa可以是R、H、L或W。
220
221misc_feature222(3)..(3)223Xaa可以是M、F或I。
220
221misc_feature222(6)..(6)223Xaa可以是20種L-胺基酸或立體異構體D-胺基酸中的任一種。
220
221misc_feature222(9)..(9)223Xaa可以是D、E、I、L或V.
220
221misc_feature222(10)..(10)223Xaa可以是a-氨基-g-溴丁酸或Hoc，前提是或Xaa(位置1)或Xaa(位置10)是C或Hoc。
400124Xaa Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Xaa1 5 1021012521115212PRT213人工序列
220
222CTLA4-模擬肽400125Gly Phe Val Cys Ser Gly Ile Phe Ala Val Gly Val Gly Arg Cys1 5 10 1521012621115212PRT213人工序列220
223CTLA4-模擬肽400126Ala Pro Gly Val Arg Leu Gly Cys Ala Val Leu Gly Arg Tyr Cys1 5 10 1521012721127212PRT213人工序列220
223C3B拮抗劑400127Ile Cys Val Val Gln Asp Trp Gly His His Arg Cys Thr Ala Gly His1 5 10 15Met Ala Asn Leu Thr Ser His Ala Ser Ala Ile20 2521012821113212PRT213人工序列220
223C3B拮抗劑400128Ile Cys Val Val Gln Asp Trp Gly His His Arg Cys Thr1 5 10210129
21111212PRT213人工序列220
223C3B拮抗劑400129Cys Val Val Gln Asp Trp Gly His His Ala Cys1 5 102101302116212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400130Thr Phe Ser Asp Leu Trp1 521013121112212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400131Gln Glu Thr Phe Ser Asp Leu Trp Lys Leu Leu Pro1 5 1021013221112212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400132Gln Pro Thr Phe Ser Asp Leu Trp Lys Leu Leu Pro1 5 10210133
21112212PRT213人工序列220
222MDM/HDM拮抗肽400133Gln Glu Thr Phe Ser Asp Tyr Trp Lys Leu Leu Pro1 5 1021013421112212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400134Gln Pro Thr Phe Ser Asp Tyr Trp Lys Leu Leu Pro1 5 1021013521112212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400135Met Pro Arg Phe Met Asp Tyr Trp Glu Gly Leu Asn1 5 1021013621112212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400136Val Gln Asn Phe Ile Asp Tyr Trp Thr Gln G1n Phe1 5 10210137
21112212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400137Thr Gly Pro Ala Phe Thr His Tyr Trp Ala Thr Phe1 5 1021013821115212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400138Ile Asp Arg Ala Pro Thr Phe Arg Asp His Trp Phe Ala Leu Val1 5 10 1521013921115212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400139Pro Arg Pro Ala Leu Val Phe Ala Asp Tyr Trp Glu Thr Leu Tyr1 5 10 1521014021115212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400140Pro Ala Phe Ser Arg Phe Trp Ser Asp Leu Ser Ala Gly Ala His1 5 10 15210141
21115212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400141Pro Ala Phe Ser Arg Phe Trp Ser Lys Leu Ser Ala Gly Ala His1 5 10 1521014221110212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽220
221misc_feature222(2，4，8)..(9)223Xaa＝任何胺基酸400142Pro Xaa Phe Xaa Asp Tyr Trp Xaa Xaa Leu1 5 1021014321112212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400143Gln Glu Thr Phe Ser Asp Leu Trp Lys Leu Leu Pro1 5 1021014421112212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400144
Gln Pro Thr Phe Ser Asp Leu Trp Lys Leu Leu Pro1 5 1021014521112212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400145Gln Glu Thr Phe Ser Asp Tyr Trp Lys Leu Leu Pro1 5 1021014621112212PRT213人工序列220
223MDM/HDM拮抗肽400146Gln Pro Thr Phe Ser Asp Tyr Trp Lys Leu Leu Pro1 5 1021014721112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400147Asp Ile Thr Trp Asp Gln Leu Trp Asp Leu Met Lys1 5 1021014821112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400148
Asp Ile Thr Trp Asp Glu Leu Trp Lys Ile Met Asn1 5 1021014921112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400149Asp Tyr Thr Trp Phe Glu Leu Trp Asp Met Met Gln1 5 1021015021112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400150Gln Ile Thr Trp Ala Gln Leu Trp Asn Met Met Lys1 5 1021015121112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400151Asp Met Thr Trp His Asp Leu Trp Thr Leu Met Ser1 5 1021015221112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400152
Asp Tyr Ser Trp His Asp Leu Trp Glu Met Met Ser1 5 1021015321112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400153Glu Ile Thr Trp Asp Gln Leu Trp Glu Val Met Asn1 5 1021015421112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400154His Val Ser Trp GIu Gln Leu Trp Asp Ile Met Asn1 5 1021015521112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400155His Ile Thr Trp Asp Gln Leu Trp Arg Ile Met Thr1 5 1021015621113212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400156
Arg Asn Met Ser Trp Leu Glu Leu Trp Glu His Met Lys1 5 1021015721118212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400157Ala Glu Trp Thr Trp Asp Gln Leu Trp His Val Met Asn Pro Ala Glu1 5 10 15Ser Gln21015821114212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400158His Arg Ala Glu Trp Leu Ala Leu Trp Glu Gln Met Ser Pro1 5 1021015921114212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400159Lys Lys Glu Asp Trp Leu Ala Leu Trp Arg Ile Met Ser Val1 5 1021016021111212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400160Ile Thr Trp Asp Gln Leu Trp Asp Leu Met Lys1 5 1021016121112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400161Asp Ile Thr Trp Asp Gln Leu Trp Asp Leu Met Lys1 5 1021016221112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400162Asp Ile Thr Trp Asp Gln Leu Trp Asp Leu Met Lys1 5 1021016321112212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400163Asp Ile Thr Trp Asp Gln Leu Trp Asp Leu Met Lys1 5 1021016421113212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400164Ser Cys Val Lys Trp Gly Lys Lys Glu Phe Cys Gly Ser1 5 1021016521112212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400165Ser Cys Trp Lys Tyr Trp Gly Lys Glu Cys Gly Ser1 5 1021016621113212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400166Ser Cys Tyr Glu Trp Gly Lys Leu Arg Trp Cys Gly Ser1 5 1021016721113212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400167Ser Cys Leu Arg Trp Gly Lys Trp Ser Asn Cys Gly Ser1 5 1021016821113212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400168Ser Cys Trp Arg Trp Gly Lys Tyr Gln Ile Cys Gly Ser1 5 1021016921113212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400169Ser Cys Val Ser Trp Gly Ala Leu Lys Leu Cys Gly Ser1 5 1021017021113212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400170Ser Cys Ile Arg Trp Gly Gln Asn Thr Phe Cys Gly Ser1 5 1021017121113212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400171Ser Cys Trp Gln Trp Gly Asn Leu Lys Ile Cys Gly Ser1 5 1021017221113212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400172Ser Cys Val Arg Trp Gly Gln Leu Ser Ile Cys Gly Ser1 5 1021017321121212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400173Leu Lys Lys Phe Asn Ala Arg Arg Lys Leu Lys Gly Ala Ile Leu Thr1 5 10 15Thr Met Leu Ala Lys2021017421118212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400174Arg Arg Trp Lys Lys Asn Phe Ile Ala Val Ser Ala Ala Asn Arg Phe1 5 10 15Lys Lys21017521118212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400175Arg Lys Trp Gln Lys Thr Gly His Ala Val Arg Ala Ile Gly Arg Leu1 5 10 15
Ser Ser21017621114212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400176Ile Asn Leu Lys Ala Leu Ala Ala Leu Ala Lys Lys Ile Leu1 5 1021017721118212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400177Lys Ile Trp Ser Ile Leu Ala Pro Leu Gly Thr Thr Leu Val Lys Leu1 5 10 15Val Ala21017821114212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400178Leu Lys Lys Leu Leu Lys Leu Leu Lys Lys Leu Leu Lys Leu1 5 1021017921118212PRT213人工序列
220
223鈣調蛋白拮抗肽400179Leu Lys Trp Lys Lys Leu Leu Lys Leu Leu Lys Lys Leu Leu Lys Lys1 5 10 15Leu Leu21018021117212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400180Ala Glu Trp Pro Ser Leu Thr Glu Ile Lys Thr Leu Ser His Phe Ser1 5 10 15Val21018121117212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400181Ala Glu Trp Pro Ser Pro Thr Arg Val Ile Ser Thr Thr Tyr Phe Gly1 5 10 15Ser21018221117212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400182Ala Glu Leu Ala His Trp Pro Pro Val Lys Thr Val Leu Arg Ser Phe1 5 10 15Thr21018321117212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400183Ala Glu Gly Ser Trp Leu Gln Leu Leu Asn Leu Met Lys Gln Met Asn1 5 10 15Asn21018421110212PRT213人工序列220
223鈣調蛋白拮抗肽400184Ala Glu Trp Pro Ser Leu Thr Glu Ile Lys1 5 1021018521127212PRT213人工序列220
223粘著斑蛋白結合肽400185Ser Thr Gly Gly Phe Asp Asp Val Tyr Asp Trp Ala Arg Gly Val Ser1 5 10 15
Ser Ala Leu Thr Thr Thr Leu Val Ala Thr Arg20 2521018621127212PRT213人工序列220
223粘著斑蛋白結合肽400186Ser Thr Gly Gly Phe Asp Asp Val Tyr Asp Trp Ala Arg Arg Val Ser1 5 10 15Ser Ala Leu Thr Thr Thr Leu Val Ala Thr Arg20 2521018721130212PRT213人工序列220
223粘著斑蛋白結合肽400187Ser Arg Gly Val Asn Phe Ser Glu Trp Leu Tyr Asp Met Ser Ala Ala1 5 10 15Met Lys Glu Ala Ser Asn Val Phe Pro Ser Arg Arg Ser Arg20 25 3021018821130212PRT213人工序列220
223粘著斑蛋白結合肽400188Ser Ser Gln Asn Trp Asp Met Glu Ala Gly Val Glu Asp Leu Thr Ala1 5 10 15
Ala Met Leu Gly Leu Leu Ser Thr Ile His Ser Ser Ser Arg20 25 3021018921131212PRT213人工序列220
223粘著斑蛋白結合肽400189Ser Ser Pro Ser Leu Tyr Thr Gln Phe Leu Val Asn Tyr Glu Ser Ala1 5 10 15Ala Thr Arg Ile Gln Asp Leu Leu Ile Ala Ser Arg Pro Ser Arg20 25 3021019021131212PRT213人工序列220
223粘著斑蛋白結合肽400190Ser Ser Thr Gly Trp Val Asp Leu Leu Gly Ala Leu Gln Arg Ala Ala1 5 10 15Asp Ala Thr Arg Thr Ser Ile Pro Pro Ser Leu Gln Asn Ser Arg20 25 3021019121118212PRT213人工序列220
223粘著斑蛋白結合肽400191Asp Val Tyr Thr Lys Lys Glu Leu Ile Glu Cys Ala Arg Arg Val Ser1 5 10 15Glu Lys
21019221122212PRT213人工序列220
223C4BP結合肽400192Glu Lys Gly Ser Tyr Tyr Pro Gly Ser Gly Ile Ala Gln Phe His Ile1 5 10 15Asp Tyr Asn Asn Val Ser2021019321122212PRT213人工序列220
223C4BP結合肽400193Ser Gly Ile Ala Gln Phe His Ile Asp Tyr Asn Asn Val Ser Ser Ala1 5 10 15Glu Gly Trp His Val Asn2021019421134212PRT213人工序列220
223C4BP結合肽400194Leu Val Thr Val Glu Lys Gly Ser Tyr Tyr Pro Gly Ser Gly Ile Ala1 5 10 15Gln Phe His Ile Asp Tyr Asn Asn Val Ser Ser Ala Glu Gly Trp His20 25 30
Val Asn21019521114212PRT213人工序列220
223C4BP結合肽400195Ser Gly Ile Ala Gln Phe His Ile Asp Tyr Asn Asn Val Ser1 5 1021019621117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400196Ala Glu Pro Met Pro His Ser Leu Asn Phe Ser Gln Tyr Leu Trp Tyr1 5 10 15Thr21019721117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400197Ala Glu His Thr Tyr Ser Ser Leu Trp Asp Thr Tyr Ser Pro Leu Ala1 5 10 15Phe21019821117
212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400198Ala Glu Leu Asp Leu Trp Met Arg His Tyr Pro Leu Ser Phe Ser Asn1 5 10 15Arg21019921117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400199Ala Glu Ser Ser Leu Trp Thr Arg Tyr Ala Trp Pro Ser Met Pro Ser1 5 10 15Tyr21020021117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400200Ala Glu Trp His Pro Gly Leu Ser Phe Gly Ser Tyr Leu Trp Ser Lys1 5 10 15Thr21020121117212PRT213人工序列
220
223UKR拮抗肽400201Ala Glu Pro Ala Leu Leu Asn Trp Ser Phe Phe Phe Asn Pro Gly Leu1 5 10 15His21020221117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400202Ala Glu Trp Ser Phe Tyr Asn Leu His Leu Pro Glu Pro Gln Thr Ile1 5 10 15Phe21020321117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400203Ala Glu Pro Leu Asp Leu Trp Ser Leu Tyr Ser Leu Pro Pro Leu Ala1 5 10 15Met21020421117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400204Ala Glu Pro Thr Leu Trp Gln Leu Tyr Gln Phe Pro Leu Arg Leu Ser1 5 10 15Gly21020521117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400205Ala Glu Ile Ser Phe Ser Glu Leu Met Trp Leu Arg Ser Thr Pro Ala1 5 10 15Phe21020621117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400206Ala Glu Leu Ser Glu Ala Asp Leu Trp Thr Thr Trp Phe Gly Met Gly1 5 10 15Ser21020721117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽
400207Ala Glu Ser Ser Leu Trp Arg Ile Phe Ser Pro Ser Ala Leu Met Met1 5 10 15Ser21020821117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400208Ala Glu Ser Leu Pro Thr Leu Thr Ser Ile Leu Trp Gly Lys Glu Ser1 5 10 15Val21020921117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400209Ala Glu Thr Leu Phe Met Asp Leu Trp His Asp Lys His Ile Leu Leu1 5 10 15Thr21021021117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400210
Ala Glu Ile Leu Asn Phe Pro Leu Trp His Glu Pro Leu Trp Ser Thr1 5 10 15Glu21021121117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400211Ala Glu Ser Gln Thr Gly Thr Leu Asn Thr Leu Phe Trp Asn Thr Leu1 5 10 15Arg2102122119212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223Xaa是V、L、I、E、P、G、Y、M、T或D。
220
221misc_feature222(2)..(2)223Xaa是Y、W或F。
220
221misc_feature222(3)..(3)223Xaa是F、W或Y。
220
221misc_feature222(5)..(5)223Xaa是P或氮雜環丁烷。
220
221misc_feature222(7)..(7)223Xaa是S、A、V或L。
220
221misc_feature222(8)..(8)223Xaa是V、L、I或E。
220
221misc_feature222(9)..(9)223Xaa是Q或P。
400212Xaa Xaa Xaa Gln Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa1 521021321121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400213Thr Ala Asn Val Ser Ser Phe Glu Trp Thr Pro Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021021421118212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽
400214Ser Trp Thr Asp Tyr Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Ile Ser1 5 10 15Gly Leu21021521121212PRT213人工的400215Glu Thr Pro Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021021621121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400216Glu Asn Thr Tyr Ser Pro Asn Trp Ala Asp Ser Met Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021021721121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400217Ser Val Gly Glu Asp His Asn Phe Trp Thr Ser Glu Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15
Tyr Ala Leu Pro Leu2021021821121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400218Asp Gly Tyr Asp Arg Trp Arg Gln Ser Gly Glu Arg Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021021921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400219Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr1 5 1021022021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400220Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln His Tyr1 5 1021022121111212PRT213人工序列
220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400221Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021022221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，任選地在N末端乙醯化220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400222Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021022321112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，Xaa＝氮雜環丁烷400223
Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Pro Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021022421111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400224Phe Ala Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021022521111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400225Phe Glu Trp Ala Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021022621111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400226
Phe Glu Trp Val Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021022721111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400227Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021022821111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，任選地在N末端乙醯化220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400228Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021022921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa產物＝″MeGly″220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400229Phe Glu Trp Thr Pro Xaa Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021023021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa＝MeGly220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400230Phe Glu Trp Thr Pro Xaa Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021023121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400231
Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Pro Tyr1 5 1021023221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400232Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Trp Gln Pro Tyr1 5 1021023321111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400233Phe Glu Trp Thr Pro Asn Tyr Trp Gln Pro Tyr1 5 1021023421111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa＝2-哌啶酸220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400234
Phe Glu Trp Thr Xaa Val Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021023521111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa＝2-哌啶酸220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400235Phe Glu Trp Thr Xaa Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021023621111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa＝Aib220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400236Phe Glu Trp Thr Pro Xaa Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 10
21023721111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa＝MeGly220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400237Phe Glu Trp Thr Xaa Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021023821111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400238Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr1 5 1021023921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽
220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400239Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln His Tyr1 5 1021024021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基位置11，在C末端加入氨基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400240Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021024121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，任選地在N末端乙醯化220
221misc_feature222(10)..(10)
223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400241Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021024221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(8)..(8)223位置8，Xaa是磷酸酪氨酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400242Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Xaa Gln Xaa Tyr1 5 1021024321111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽
220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400243Phe Ala Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021024421111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400244Phe Glu Trp Ala Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021024521111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基
220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400245Phe Glu Trp Val Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021024621111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400246Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021024721111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，在N末端乙醯化220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400247Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021024821111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，D胺基酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400248Phe Glu Trp Thr Pro Ala Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021024921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa是肌氨酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400249Phe Glu Trp Thr Pro Xaa Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021025021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400250Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Pro Tyr1 5 1021025121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature
222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400251Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Trp Gln Pro Tyr1 5 1021025221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400252Phe Glu Trp Thr Pro Asn Tyr Trp Gln Pro Tyr1 5 1021025321111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，D胺基酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400253
Phe Glu Trp Thr Pro Val Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021025421111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa是2-哌啶酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400254Phe Glu Trp Thr Xaa Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021025521111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa＝2-哌啶酸220
221misc_feature222(10)..(10)
223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400255Phe Glu Trp Thr Pro Xaa Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021025621111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa＝MeGly220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷400256Phe Glu Trp Thr Xaa Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021025721115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400257Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521025821111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽
220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是1-萘丙氨酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400258Xaa Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021025921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400259Tyr Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021026021111212PRT213人工的
220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400260Phe Glu Trp Val Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021026121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，D胺基酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400261Phe Glu Trp Thr Pro Ser Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021026221111212PRT213人工序列
220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，D胺基酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，在C末端加入氨基400262Phe Glu Trp Thr Pro Asn Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 102102632114212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400263Thr Lys Pro Arg12102642115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400264Arg Lys Ser Ser Lys1 5
2102652115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400265Arg Lys Gln Asp Lys1 52102662116212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400266Asn Arg Lys Gln Asp Lys1 52102672116212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400267Arg Lys Gln Asp Lys Arg1 52102682119212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400268Glu Asn Arg Lys Gln Asp Lys Arg Phe1 5
2102692116212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400269Val Thr Lys Phe Tyr Phe1 52102702115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400270Val Thr Lys Phe Tyr1 52102712115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400271Val Thr Asp Phe Tyr1 521027221117212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400272Ser Gly Ser Gly Val Leu Lys Arg Pro Leu Pro Ile Leu Pro Val Thr1 5 10 15
Arg21027321117212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400273Arg Trp Leu Ser Ser Arg Pro Leu Pro Pro Leu Pro Leu Pro Pro Arg1 5 10 15Thr21027421120212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400274Gly Ser Gly Ser Tyr Asp Thr Leu Ala Leu Pro Ser Leu Pro Leu His1 5 10 15Pro Met Ser Ser2021027521120212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400275Gly Ser Gly Ser Tyr Asp Thr Arg Ala Leu Pro Ser Leu Pro Leu His1 5 10 15Pro Met Ser Ser20
21027621120212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400276Gly Ser Gly Ser Ser Gly Val Thr Met Tyr Pro Lys Leu Pro Pro His1 5 10 15Trp Ser Met Ala2021027721120212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400277Gly Ser Gly Ser Ser Gly Val Arg Met Tyr Pro Lys Leu Pro Pro His1 5 10 15Trp Ser Met Ala2021027821120212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400278Gly Ser Gly Ser Ser Ser Met Arg Met Val Pro Thr Ile Pro Gly Ser1 5 10 15Ala Lys His Gly20
2102792116212PRT213人工序列220
223抗HBV400279Leu Leu Gly Arg Met Lys1 52102802118212PRT213人工序列220
223抗HBV400280Ala Leu Leu Gly Arg Met Lys Gly1 52102812116212PRT213人工序列220
223抗HBV400281Leu Asp Pro Ala Phe Arg1 52102822117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400282Arg Pro Leu Pro Pro Leu Pro1 5
2102832117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400283Arg Glu Leu Pro Pro Leu Pro1 52102842117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400284Ser Pro Leu Pro Pro Leu Pro1 52102852117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400285Gly Pro Leu Pro Pro Leu Pro1 52102862117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400286Arg Pro Leu Pro Ile Pro Pro1 5
2102872117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400287Arg Pro Leu Pro Ile Pro Pro1 52102882117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400288Arg Arg Leu Pro Pro Thr Pro1 52102892117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400289Arg Gln Leu Pro Pro Thr Pro1 52102902117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400290Arg Pro Leu Pro Ser Arg Pro1 5
2102912117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400291Arg Pro Leu Pro Thr Arg Pro1 52102922117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400292Ser Arg Leu Pro Pro Leu Pro1 52102932117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400293Arg Ala Leu Pro Ser Pro Pro1 52102942117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400294Arg Arg Leu Pro Arg Thr Pro1 5
2102952117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400295Arg Pro Val Pro Pro Ile Thr1 52102962117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400296Ile Leu Ala Pro Pro Val Pro1 52102972117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400297Arg Pro Leu Pro Met Leu Pro1 52102982117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400298Arg Pro Leu Pro Ile Leu Pro1 5
2102992117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400299Arg Pro Leu Pro Ser Leu Pro1 52103002117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400300Arg Pro Leu Pro Ser Leu Pro1 52103012117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400301Arg Pro Leu Pro Met Ile Pro1 52103022117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400302Arg Pro Leu Pro Leu Ile Pro1 5
2103032117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400303Arg Pro Leu Pro Pro Thr Pro1 52103042117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400304Arg Ser Leu Pro Pro Leu Pro1 52103052117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400305Arg Pro Gln Pro Pro Pro Pro1 52103062117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽400306Arg Gln Leu Pro Ile Pro Pro1 5
21030721112212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(1，2，3)..(11)223Xaa＝任何胺基酸400307Xaa Xaa Xaa Arg Pro Leu Pro Pro Leu Pro Xaa Pro1 5 1021030821112212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(1，2，3，11)..(12)223Xaa＝任何胺基酸400308Xaa Xaa Xaa Arg Pro Leu Pro Pro Ile Pro Xaa Xaa1 5 1021030921112212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(1，2，3，11，)..(12)223Xaa＝任何胺基酸400309Xaa Xaa Xaa Arg Pro Leu Pro Pro Leu Pro Xaa Xaa1 5 10
21031021112212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(2，3，10)..(11)223Xaa＝任何胺基酸400310Arg Xaa Xaa Arg Pro Leu Pro Pro Leu Pro Xaa Pro1 5 1021031121112212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(2)..(3)223Xaa＝任何胺基酸400311Arg Xaa Xaa Arg Pro Leu Pro Pro Leu Pro Pro Pro1 5 1021031221112212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(11)..(12)223Xaa＝任何胺基酸400312Pro Pro Pro Tyr Pro ProPro Pro Ile Pro Xaa Xaa1 5 10
21031321112212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(11)..(12)223Xaa＝任何胺基酸400313Pro Pro Pro Tyr Pro Pro Pro Pro Val Pro Xaa Xaa1 5 1021031421110212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(2，3)..(8)223Xaa(位置2，3，8)是任何胺基酸220
221misc_feature222(9)..(9)223Xaa(位置9)代表脂族胺基酸殘基400314Leu Xaa Xaa Arg Pro Leu Pro Xaa Xaa Pro1 5 1021031521110212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是脂族胺基酸殘基220
221misc_feature222(2，3)..(8)223位置2、3和8，Xaa是任何胺基酸400315Xaa Xaa Xaa Arg Pro Leu Pro Xaa Leu Pro1 5 1021031621110212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(3)..(3)223位置3，Xaa是任何胺基酸殘基220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，Xaa芳族胺基酸殘基220
221misc_feature222(9)..(9)223位置9，Xaa是脂族胺基酸殘基400316Pro Pro Xaa Xaa Tyr Pro Pro Pro Xaa Pro1 5 1021031721111212PRT213人工序列
220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是鹼性胺基酸殘基220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，Xaa是脂族胺基酸殘基220
221misc_feature222(6)..(9)223位置6和9，Xaa是任何胺基酸殘基400317Xaa Pro Pro Xaa Pro Xaa Lys Pro Xaa Trp Leu1 5 1021031821111212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(3，4)..(6)223位置3、4和6，Xaa是脂族胺基酸殘基220
221misc_feature222(8)..(8)223位置8，Xaa是鹼性胺基酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)
223位置10，Xaa是任何胺基酸殘基400318Arg Pro Xaa Xaa Pro Xaa Arg Xaa Ser Xaa Pro1 5 1021031921111212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(8)..(9)223Xaa＝任何胺基酸400319Pro Pro Val Pro Pro Arg Pro Xaa Xaa Thr Leu1 5 102103202117212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature222(1，3)..(6)223位置1、3和6，Xaa是脂族胺基酸殘基400320Xaa Pro Xaa Leu Pro Xaa Lys1 521032121110212PRT213人工序列220
223SH3拮抗肽220
221misc_feature
222(1)..(1)223位置1，Xaa是鹼性胺基酸殘基220
221misc_feature222(2)..(2)223位置2，Xaa芳族胺基酸殘基220
221misc_feature222(4)..(8)223位置4和8，Xaa是任何胺基酸殘基400321Xaa Xaa Asp Xaa Pro Leu Pro Xaa Leu Pro1 5 102103222117212PRT213人工序列220
223血小板聚集的抑制220
221misc_feature222(2)..(3)223Xaa＝任何胺基酸400322Cys Xaa Xaa Arg Gly Asp Cys1 52103232117212PRT213人工序列220
223SRC拮抗劑400323Arg Pro Leu Pro Pro Leu Pro1 5
2103242116212PRT213人工序列220
223SRC拮抗劑400324Pro Pro Val Pro Pro Arg1 521032521111212PRT213人工序列220
223抗癌(尤其是肉瘤)220
221misc_feature222(1，3，5，7，8，10)..(11)223Xaa＝任何胺基酸400325Xaa Phe Xaa Asp Xaa Trp Xaa Xaa Leu Xaa Xaa1 5 1021032621120212PRT213人工序列220
223P16-模擬物400326Lys Ala Cys Arg Arg Leu Phe Gly Pro Val Asp Ser Glu Gln Leu Ser1 5 10 15Arg Asp Cys Asp2021032721120212PRT213人工序列
220
223P16-模擬物400327Arg Glu Arg Trp Asn Phe Asp Phe Val Thr Glu Thr Pro Leu Glu Gly1 5 10 15Asp Phe Ala Trp2021032821120212PRT213人工序列220
223P16-模擬物400328Lys Arg Arg Gln Thr Ser Met Thr Asp Phe Tyr His Ser Lys Arg Arg1 5 10 15Leu Ile Phe Ser2021032921120212PRT213人工序列220
223P16-模擬物400329Thr Ser Met Thr Asp Phe Tyr His Ser Lys Arg Arg Leu Ile Phe Ser1 5 10 15Lys Arg Lys Pro202103302115212PRT213人工序列220
223P16-模擬物400330Arg Arg Leu Ile Phe1 521033121136212PRT213人工序列220
223P16-模擬物400331Lys Arg Arg Gln Thr Ser Ala Thr Asp Phe Tyr His Ser Lys Arg Arg1 5 10 15Leu Ile Phe Ser Arg Gln Ile Lys Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Met20 25 30Lys Trp Lys Lys3521033221124212PRT213人工序列220
223P16-模擬物400332Lys Arg Arg Leu Ile Phe Ser Lys Arg Gln Ile Lys Ile Trp Phe Gln1 5 10 15Asn Arg Arg Met Lys Trp Lys Lys202103332118212PRT213人工序列220
223優選的接頭
400333Gly Gly Gly Lys Gly Gly Gly Gly1 52103342118212PRT213人工序列220
223優選的接頭400334Gly Gly Gly Asn Gly Ser Gly Gly1 52103352118212PRT213人工序列220
223優選的接頭400335Gly Gly Gly Cys Gly Gly Gly Gly1 52103362115212PRT213人工序列220
223優選的接頭400336Gly Pro Asn Gly Gly1 521033721141212PRT213人工序列220
223TPO-模擬物
220
221misc_feature222(1)..(1)223Fc區連接於N末端的位置1400337Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala1 5 10 15Ala Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr20 25 30Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala35 4021033821141212PRT213人工序列220
223TPO-模擬物220
221misc_feature222(41)..(41)223Fc區連接於C末端的位置41400338Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu20 25 30Ala Ala Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly35 4021033921149212PRT213人工序列220
223EPO-模擬物220
221misc_feature
222(1)..(1)223Fc區連接於N末端的位置1400339Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu1 5 10 15Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr20 25 30Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly35 40 45Gly21034021149212PRT213人工序列220
223EPO-模擬物220
221misc_feature222(49)..(49)223Fc區連接於C末端的位置49400340Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe20 25 30Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly Gly35 40 45Gly21034121128212PRT213人工序列
220
223TPO-模擬肽400341Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Ile Glu1 5 10 15Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala20 2521034221129212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400342Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Ile1 5 10 15Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala20 2521034321130212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400343Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala20 25 3021034421131212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400344Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala20 25 3021034521132212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400345Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala20 25 3021034621133212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400346Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg20 25 30Ala21034721134212PRT213人工序列
220
223TPO-模擬肽400347Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala20 25 30Arg Ala21034821135212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400348Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala20 25 30Ala Arg Ala3521034921136212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400349Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu20 25 30
Ala Ala Arg Ala3521035021137212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400350Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp20 25 30Leu Ala Ala Arg Ala3521035121138212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400351Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln20 25 30Trp Leu Ala Ala Arg Ala3521035221142212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400352Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro20 25 30Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala35 4021035321132212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400353Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Pro1 5 10 15Asn Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala20 25 3021035421136212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400354Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu20 25 30Ala Ala Arg Ala35
21035521136212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400355Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu20 25 30Ala Ala Arg Ala3521035621136212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400356Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu20 25 30Ala Ala Arg Ala3521035721136212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400357Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15
Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu20 25 30Ala Ala Arg Ala3521035821137212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(19)..(19)223位置19，Xaa＝溴乙醯400358Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Lys Xaa Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp20 25 30Leu Ala Ala Arg Ala3521035921136212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400359Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Cys Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu20 25 30Ala Ala Arg Ala
3521036021137212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(19)..(19)223位置19，Xaa＝聚乙二醇400360Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Lys Xaa Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp20 25 30Leu Ala Ala Arg Ala3521036121137212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽220
221misc_feature222(19)..(19)223位置19，Xaa＝聚乙二醇400361Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Cys Xaa Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp20 25 30Leu Ala Ala Arg Ala35
21036221136212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400362Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Asn Gly Ser Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu20 25 30Ala Ala Arg Ala3521036321136212PRT213人工序列220
223TPO-模擬肽400363Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Cys Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu20 25 30Ala Ala Arg Ala3521036421157212DNA213人工序列220
223Fc-TMP400364aaaaaaggat cctcgagatt aagcacgagc agccagccac tgacgcagag tcggacc57
21036521139212DNA213人工序列220
223Fc-TMP400365aaaggtggag gtggtggtat cgaaggtccg actctgcgt3921036621142212DNA213人工序列220
223Fc-TMP400366cagtggctgg ctgctcgtgc ttaatctcga ggatcctttt tt4221036721181212DNA213人工序列220
223Fc-TMP220
221CDS222(1)..(60)223
400367aaa ggt gga ggt ggt ggt atc gaa ggt ccg act ctg cgt cag tgg ctg 48Lys Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu1 5 10 15gct gct cgt gct taatctcgag gatccttttt t 81Ala Ala Arg Ala2021036821120212PRT213人工序列220
223Fc-TMP
400368Lys Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu1 5 10 15Ala Ala Arg Ala2021036921122212DNA213人工序列220
223Fc-TMP400369aacataagta cctgtaggat cg 2221037021152212DNA213人工序列220
223Fc-TMP400370ttcgatacca ccacctccac ctttacccgg agacagggag aggctcttct gc 5221037121160212DNA213人工序列220
223Fc-TMP-TMP400371aaaggtggag gtggtggtat cgaaggtccg actctgcgtc agtggctggc tgctcgtgct 6021037221148212DNA213人工序列220
223Fc-TMP-TMP400372acctccacca ccagcacgag cagccagcca ctgacgcaga gtcggacc 48
21037321166212DNA213人工序列220
223Fc-TMP-TMP400373ggtggtggag gtggcggcgg aggtattgag ggcccaaccc ttcgccaatg gcttgcagca 60cgcgca6621037421176212PRT213人工序列220
223Fc-TMP-TMP400374Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Gly Gly Ala Thr Cys Cys Thr Cys Gly1 5 10 15Ala Gly Ala Thr Thr Ala Thr Gly Cys Gly Cys Gly Thr Gly Cys Thr20 25 30Gly Cys Ala Ala Gly Cys Cys Ala Thr Thr Gly Gly Cys Gly Ala Ala35 40 45Gly Gly Gly Thr Thr Gly Gly GlyCys Cys Cys Thr Cys Ala Ala Thr50 55 60Ala Cys Cys Thr Cys Cys Gly Cys Cys Gly Cys Cys65 70 75210375211126212DNA213人工序列220
223Fc-TMP-TMP220
221CDS
222(1)..(126)223
400375aaa ggt gga ggt ggt ggt atc gaa ggt ccg act ctg cgt cag tgg ctg 48Lys Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu1 5 10 15gct gct cgt gct ggt ggt gga ggt ggc ggc gga ggt att gag ggc cca 96Ala Ala Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro20 25 30acc ctt cgc caa tgg ctt gca gca cgc gca126Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala35 4021037621142212PRT213人工序列220
223Fc-TMP-TMP400376Lys Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu1 5 10 15Ala Ala Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro20 25 30Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala35 4021037721139212PRT213人工序列220
223TMP-TMP-Fc400377Thr Thr Thr Thr Thr Thr Cys Ala Thr Ala Thr Gly Ala Thr Cys Gly1 5 10 15Ala Ala Gly Gly Thr Cys Cys Gly Ala Cys Thr Cys Thr Gly Cys Gly20 25 30
Thr Cys Ala Gly Thr Gly Gly3521037821148212PRT213人工序列220
223TMP-TMP-Fc400378Ala Gly Cys Ala Cys Gly Ala Gly Cys Ala Gly Cys Cys Ala Gly Cys1 5 10 15Cys Ala Cys Thr Gly Ala Cys Gly Cys Ala Gly Ala Gly Thr Cys Gly20 25 30Gly Ala Cys Cys Thr Thr Cys Gly Ala Thr Cys Ala Thr Ala Thr Gly35 40 4521037921145212DNA213人工序列220
223TMP-TMP-Fc400379ctggctgctc gtgctggtgg aggcggtggg gacaaaactc acaca 4521038021151212DNA213人工序列220
223TMP-TMP-Fc400380ctggctgctc gtgctggcgg tggtggcgga gggggtggca ttgagggccc a 5121038121154212DNA213人工序列
220
223TMP-TMP-Fc400381aagccattgg cgaagggttg ggccctcaat gccaccccct ccgccaccac cgcc 5421038221154212DNA213人工序列220
223TMP-TMP-Fc400382acccttcgcc aatggcttgc agcacgcgca gggggaggcg gtggggacaa aact 5421038321127212DNA213人工序列220
223TMP-TMP-Fc400383cccaccgcct ccccctgcgc gtgctgc 27210384211189212DNA213人工序列220
223TMP-TMP-Fc220
221CDS222(10)..(180)223
400384ttttttcat atg atc gaa ggt ccg act ctg cgt cag tgg ctg gct gct cgt 51Met Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg1 5 10gct ggc ggt ggt ggc gga ggg ggt ggc att gag ggc cca acc ctt cgc 99Ala Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg15 20 25 30caa tgg ctg gct gct cgt gct ggt gga ggc ggt ggg gac aaa act ctg 147Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly Asp Lys Thr Leu35 40 45
gct gct cgt gct ggt gga ggc ggt ggg gac aaa actcacaca 189Ala Ala Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly Asp Lys50 5521038521157212PRT213人工序列220
223TMP-TMP-Fc400385Met Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp20 25 30Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly Asp Lys Thr Leu Ala Ala35 40 45Arg Ala Gly Gly Gly Gly Gly Asp Lys50 55210386211141212DNA213人工序列220
223pAMG21400386ctaattccgc tctcacctac caaacaatgc ccccctgcaa aaaataaatt catataaaaa 60acatacagat aaccatctgc ggtgataaat tatctctggc ggtgttgaca taaataccac120tggcggtgat actgagcaca t 14121038721155212DNA213人工序列220
223pAMG21
400387cgatttgatt ctagaaggag gaataacata tggttaacgc gttggaattc ggtac 55210388211872212DNA213人工序列220
223GM221400388ttattttcgt gcggccgcac cattatcacc gccagaggta aactagtcaa cacgcacggt 60gttagatatt tatcccttgc ggtgatagat tgagcacatc gatttgattc tagaaggagg120gataatatat gagcacaaaa aagaaaccat taacacaaga gcagcttgag gacgcacgtc180gccttaaagc aatttatgaa aaaaagaaaa atgaacttgg cttatcccag gaatctgtcg240cagacaagat ggggatgggg cagtcaggcg ttggtgcttt atttaatggc atcaatgcat300taaatgctta taacgccgca ttgcttacaa aaattctcaa agttagcgtt gaagaattta360gcccttcaat cgccagagaa tctacgagat gtatgaagcg gttagtatgc agccgtcact420tagaagtgag tatgagtacc ctgttttttc tcatgttcag gcagggatgt tctcacctaa480gcttagaacc tttaccaaag gtgatgcgga gagatgggta agcacaacca aaaaagccag540tgattctgca ttctggcttg aggttgaagg taattccatg accgcaccaa caggctccaa600gccaagcttt cctgacggaa tgttaattct cgttgaccct gagcaggctg ttgagccagg660tgatttctgc atagccagac ttgggggtga tgagtttacc ttcaagaaac tgatcaggga720tagcggtcag gtgtttttac aaccactaaa cccacagtac ccaatgatcc catgcaatga780gagttgttcc gttgtgggga aagttatcgc tagtcagtgg cctgaagaga cgtttggctg840atagactagt ggatccacta gtgtttctgc cc 8722103892111197212DNA213人工序列220
223GM221400389ggcggaaacc gacgtccatc gaatggtgca aaacctttcg cggtatggca tgatagcgcc 60cggaagagag tcaattcagg gtggtgaatg tgaaaccagt aacgttatac gatgtcgcag 120
agtatgccgg tgtctcttat cagaccgttt cccgcgtggt gaaccaggcc agccacgttt 180ctgcgaaaac gcgggaaaaa gtcgaagcgg cgatggcgga gctgaattac attcccaacc 240gcgtggcaca acaactggcg ggcaaacagt cgctcctgat tggcgttgcc acctccagtc 300tggccctgca cgcgccgtcg caaattgtcg cggcgattaa atctcgcgcc gatcaactgg 360gtgccagcgt ggtggtgtcg atggtagaac gaagcggcgt cgaagcctgt aaagcggcgg 420tgcacaatct tctcgcgcaa cgcgtcagtg ggctgatcat taactatccg ctggatgacc 480aggatgccat tgctgtggaa gctgcctgca ctaatgttcc ggcgttattt cttgatgtct 540ctgaccagac acccatcaac agtattattt tctcccatga agacggtacg cgactgggcg 600tggagcatct ggtcgcattg ggtcaccagc aaatcgcgct gttagcgggc ccattaagtt 660ctgtctcggc gcgtctgcgt ctggctggct ggcataaata tctcactcgc aatcaaattc 720agccgatagc ggaacgggaa ggcgactgga gtgccatgtc cggttttcaa caaaccatgc 780aaatgctgaa tgagggcatc gttcccactg cgatgctggt tgccaacgat cagatggcgc 840tgggcgcaat gcgcgccatt accgagtccg ggctgcgcgt tggtgcggat atctcggtag 900tgggatacga cgataccgaa gacagctcat gttatatccc gccgttaacc accatcaaac 960aggattttcg cctgctgggg caaaccagcg tggaccgctt gctgcaactc tctcagggcc1020aggcggtgaa gggcaatcag ctgttgcccg tctcactggt gaaaagaaaa accaccctgg1080cgcccaatac gcaaaccgcc tctccccgcg cgttggccga ttcattaatg cagctggcac1140gacaggtttc ccgactggaa agcggacagt aaggtaccat aggatccagg cacagga 119721039021161212DNA213人工序列220
223Fc-EMP400390tatgaaaggt ggaggtggtg gtggaggtac ttactcttgc cacttcggcc cgctgacttg60g6121039121172212DNA213人工序列
220
223Fc-EMP400391cggtttgcaa acccaagtca gcgggccgaa gtggcaagag taagtacctc caccaccacc 60tccacctttc at 7221039221157212DNA213人工序列220
223Fc-EMP400392gtttgcaaac cgcagggtgg cggcggcggc ggcggtggta cctattcctg tcatttt5721039321160212DNA213人工序列220
223Fc-EMP400393ccaggtcagc gggccaaaat gacaggaata ggtaccaccg ccgccgccgc cgccaccctg 60210394211118212DNA213人工序列220
223Fc-EMP220
221CDS222(2)..(118)223
400394t atg aaa ggt gga ggt ggt ggt gga ggt act tac tct tgc cac ttc ggc49Met Lys Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly1 5 10 15ccg ctg act tgg gtt tgc aaa ccg cag ggt ggc ggc ggc ggc ggc ggt 97Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly20 25 30
ggt acc tat tcc tgt cat ttt 118Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe3521039521139212PRT213人工序列220
223Fc-EMP400395Met Lys Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly1 5 10 15Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly20 25 30Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe3521039621161212DNA213人工序列220
223Fc-EMP400396gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtaa aggtggaggt ggtggtggag gtacttactc60t6121039721140212DNA213人工序列220
223Fc-EMP400397ctaattggat ccacgagatt aaccaccctg cggtttgcaa 4021039821118212PRT
213人工序列220
223Fc-EMP400398Gly Glu Arg Trp Cys Phe Asp Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Gly Glu1 5 10 15Glu Ser21039921161212DNA213人工序列220
223Fc-EMP400399agagtaagta cctccaccac cacctccacc tttacccgga gacagggaga ggctcttctg60c6121040021161212DNA213人工序列220
223EMP-Fc400400ggcccgctga cctgggtatg taagccacaa gggggtgggg gaggcggggg gtaatctcga60g6121040121150212DNA213人工序列220
223EMP-Fc400401gatcctcgag attacccccc gcctccccca cccccttgtg gcttacatac 50210402
211118212DNA213人工序列220
223EMP-Fc220
221CDS222(1)..(108)223
400402gtt tgc aaa ccg cag ggt ggc ggc ggc ggc ggc ggt ggt acc tat tcc 48Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Ser1 5 10 15tgt cat ttt ggc ccg ctg acc tgg gta tgt aag cca caa ggg ggt ggg 96Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly20 25 30gga ggc ggg ggg taatctcgag 118Gly Gly Gly Gly3521040321136212PRT213人工序列220
223EMP-Fc400403Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Ser1 5 10 15Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly20 25 30Gly Gly Gly Gly3521040421139212DNA213人工序列220
223EMP-Fc
400404ttatttcata tgaaaggtgg taactattcc tgtcatttt3921040521143212DNA213人工序列220
223EMP-Fc400405tggacatgtg tgagttttgt cccccccgcc tcccccaccc cct 4321040621143212DNA213人工序列220
223EMP-Fc400406agggggtggg ggaggcgggg gggacaaaac tcacacatgt cca 4321040721120212DNA213人工序列220
223EMP-Fc400407gttattgctc agcggtggca 2021040821160212DNA213人工序列220
223EMP-EMP-Fc400408ttttttatcg atttgattct agatttgagt tttaactttt agaaggagga ataaaatatg 6021040921141212DNA213人工序列
220
223EMP-EMP-Fc400409taaaagttaa aactcaaatc tagaatcaaa tcgataaaaa a 4121041021151212DNA213人工序列220
223EMP-EMP-Fc400410ggaggtactt actcttgcca cttcggcccg ctgacttggg tttgcaaacc g 5121041121155212DNA213人工序列220
223EMP-EMP-Fc400411agtcagcggg ccgaagtggc aagagtaagt acctcccata ttttattcct ccttc 5521041221160212DNA213人工序列220
223EMP-EMP-Fc400412cagggtggcg gcggcggcgg cggtggtacc tattcctgtc attttggccc gctgacctgg 6021041321160212DNA213人工序列220
223EMP-EMP-Fc400413aaaatgacag gaataggtac caccgccgcc gccgccgcca ccctgcggtt tgcaaaccca 60
21041421157212DNA213人工序列220
223EMP-EMP-Fc400414gtatgtaagc cacaaggggg tgggggaggc gggggggaca aaactcacac atgtcca 5721041521160212DNA213人工序列220
223EMP-EMP-Fc400415agttttgtcc cccccgcctc ccccaccccc ttgtggctta catacccagg tcagcgggcc 60210416211228212DNA213人工序列220
223EMP-EMP-Fc220
221CDS222(58)..(228)223
400416ttttttatcg atttgattct agatttgagt tttaactttt agaaggagga ataaaat 57atg gga ggt act tac tct tgc cac ttc ggc ccg ctg act tgg gtt tgc105Met Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys1 5 10 15aaa ccg cag ggt ggc ggc ggc ggc ggc ggt ggt acc tat tcc tgt cat153Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His20 25 30ttt ggc ccg ctg acc tgg gta tgt aag cca caa ggg ggt ggg gga ggc201Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly35 40 45ggg ggg gac aaa act cac aca tgt cca228Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro50 55
21041721157212PRT213人工序列220
223EMP-EMP-Fc400417Met Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys1 5 10 15Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His20 25 30Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly35 40 45Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro50 5521041821140212DNA213人工序列220
223Fc-EMP-EMP400418ctaattggat cctcgagatt aacccccttg tggcttacat 4021041921116212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(1，3，9，14，15)..(16)223Xaa(位置1、3、9、14、15和16)可以是20種L-胺基酸中的任一種220
221misc_feature
222(5)..(5)223Xaa可以是R、H、L或W220
221misc_feature222(6)..(6)223Xaa可以是M、F或I220
221misc_feature222(12)..(12)223Xaa可以是D、E、I、L或V220
221misc_feature222(13)..(13)223Xaa可以是C、A、a-氨基-y-溴丁酸或Hoc400419Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa1 5 10 1521042021116212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(1，3，5，6，9，12，14，15)..(16)223Xaa＝任何胺基酸殘基400420Xaa Tyr Xaa Cys Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Cys Xaa Xaa Xaa1 5 10 1521042121110212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽
220
221misc_feature222(2)..(2)223Xaa可以是R、H、L或W220
221misc_feature222(3)..(3)223Xaa可以是M、F或I220
221misc_feature222(6)..(6)223Xaa獨立地選自20種遺傳編碼的L-胺基酸或立體異構體D-胺基酸中的任一種220
221misc_feature222(9)..(9)223Xaa可以是D、E、I、L或V。
400421Cys Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Cys1 5 1021042221119212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽400422Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys Pro1 5 10 15Gln Gly Gly21042321119212PRT213人工序列
220
223EPO-模擬肽400423Val Gly Asn Tyr Met Ala His Met Gly Pro Ile Thr Trp Val Cys Arg1 5 10 15Pro Gly Gly21042421118212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽400424Gly Gly Pro His His Val Tyr Ala Cys Arg Met Gly Pro Leu Thr Trp1 5 10 15Ile Cys21042521118212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽400425Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln21042621120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽
400426Gly Gly Leu Tyr Ala Cys His Met Gly Pro Met Thr Trp Val Cys Gln1 5 10 15Pro Leu Arg Gly2021042721122212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽400427Thr Ile Ala Gln Tyr Ile Cys Tyr Met Gly Pro Glu Thr Trp Glu Cys1 5 10 15Arg Pro Ser Pro Lys Ala2021042821113212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽400428Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 1021042921111212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽400429Tyr Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys1 5 10
21043021117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400430Ala Glu Pro Val Tyr Gln Tyr Glu Leu Asp Ser Tyr Leu Arg Ser Tyr1 5 10 15Tyr21043121117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400431Ala Glu Leu Asp Leu Ser Thr Phe Tyr Asp Ile Gln Tyr Leu Leu Arg1 5 10 15Thr21043221117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400432Ala Glu Phe Phe Lys Leu Gly Pro Asn Gly Tyr Val Tyr Leu His Ser1 5 10 15Ala210433
21111212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽220
221misc_feature222(4，5)..(6)223Xaa＝任何胺基酸400433Phe Lys Leu Xaa Xaa Xaa Gly Tyr Val Tyr Leu1 5 1021043421117212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽400434Ala Glu Ser Thr Tyr His His Leu Ser Leu Gly Tyr Met Tyr Thr Leu1 5 10 15Asn21043521111212PRT213人工序列220
223UKR拮抗肽220
221misc_feature222(3，5)..(6)223Xaa＝任何胺基酸400435Tyr His Xaa Leu Xaa Xaa Gly Tyr Met Tyr Thr1 5 10210436
2116212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400436Arg Asn Arg Gln Lys Thr1 52104372114212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400437Arg Asn Arg Gln12104382115212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400438Arg Asn Arg Gln Lys1 52104392115212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400439Asn Arg Gln Lys Thr1 5210440
2114212PRT213人工序列220
223肥大細胞拮抗肽/蛋白酶抑制肽400440Arg Gln Lys Thr12104412117212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽220
221misc_feature222(2，5)..(7)223Xaa＝任何胺基酸400441Arg Xaa Glu Thr Xaa Trp Xaa1 52104422117212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽220
221misc_feature222(2，5)..(7)223Xaa＝任何胺基酸400442Arg Xaa Glu Thr Xaa Trp Xaa1 52104432115212PRT213人工序列
220
223整聯蛋白結合肽220
221misc_feature222(5)..(6)223Xaa＝任何胺基酸400443Arg Gly Asp Gly Xaa1 52104442117212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽220
221misc_feature222(6)..(6)223Xaa＝任何胺基酸400444Cys Arg Gly Asp Gly Xaa Cys1 521044521115212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽220
221misc_feature222(2，3，4，8，9，10，11，12，13)..(14)223Xaa＝任何胺基酸400445Cys Xaa Xaa Xaa Arg Leu Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Cys1 5 10 152104462119212PRT213人工序列
220
223整聯蛋白結合肽400446Cys Ala Arg Arg Leu Asp Ala Pro Cys1 52104472119212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽400447Cys Pro Ser Arg Leu Asp Ser Pro Cys1 52104482119212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽220
221misc_feature222(1，2，3，7，8)..(9)223Xaa能夠形成一個環化鍵220
221misc_feature222(2)..(5)223於1、5的特徵是能夠形成一個環化鍵並與1-5個胺基酸的接頭連接的胺基酸400448Xaa Xaa Xaa Arg Gly Asp Xaa Xaa Xaa1 52104492119212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽220
221misc_feature222(2)..(8)223Xaa＝任何胺基酸400449Cys Xaa Cys Arg Gly Asp Cys Xaa Cys1 52104502119212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽400450Cys Asp Cys Arg Gly Asp Cys Phe Cys1 52104512119212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽400451Cys Asp Cys Arg Gly Asp Cys Leu Cys1 52104522119212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽400452Cys Leu Cys Arg Gly Asp Cys Ile Cys1 5210453
2118212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽220
221misc_feature222(1，2，5，6，7)..(8)223Xaa＝任何胺基酸400453Xaa Xaa Asp Asp Xaa Xaa Xaa Xaa1 521045421110212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽220
221misc_feature222(1，2，3，6，7，8，9)..(10)223Xaa＝任何胺基酸400454Xaa Xaa Xaa Asp Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa1 5 102104552118212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽400455Cys Trp Asp Asp Gly Trp Leu Cys1 52104562119212PRT213人工序列
220
223整聯蛋白結合肽400456Cys Trp Asp Asp Leu Trp Trp Leu Cys1 52104572118212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽400457Cys Trp Asp Asp Gly Leu Met Cys1 52104582118212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽400458Cys Trp Asp Asp Gly Trp Met Cys1 52104592119212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽400459Cys Ser Trp Asp Asp Gly Trp Leu Cys1 52104602119212PRT213人工序列
220
223整聯蛋白結合肽400460Cys Pro Asp Asp Leu Trp Trp Leu Cys1 521046121112212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(2)..(8)223Xaa可以是20種L-胺基酸中的任一種220
221misc_feature222(3)..(3)223Xaa可以是C、A、a-氨基-y-溴丁酸或Hoc220
221misc_feature222(4)..(4)223Xaa可以是R、H、L或W220
221misc_feature222(5)..(5)223Xaa可以是M、F或I；Xaa220
221misc_feature222(11)..(11)223Xaa可以是D、E、I、L或V220
221misc_feature222(12)..(12)223Xaa可以是C、A、a-氨基-y-溴丁酸或Hoc；前提是Xaa(位置3或12)是C或Hoc。
400461Tyr Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Xaa1 5 1021046221116212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400462Cys Gln Asn Arg Tyr Thr Asp Leu Val Ala Ile Gln Asn Lys Asn Glu1 5 10 1521046321117212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400463Ala Glu Asn Trp Ala Asp Asn Glu Pro Asn Asn Lys Arg Asn Asn Glu1 5 10 15Asp21046421119212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400464Arg Lys Asn Asn Lys Thr Trp Thr Trp Val Gly Thr Lys Lys Ala Leu1 5 10 15Thr Asn Glu
21046521113212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽400465Lys Lys Ala Leu Thr Asn Glu Ala Glu Asn Trp Ala Asp1 5 1021046621116212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽220
221misc_feature222(3)..(15)223Xaa＝任何胺基酸400466Cys Gln Xaa Arg Tyr Thr Asp Leu Val Ala Ile Gln Asn Lys Xaa Glu1 5 10 1521046721119212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽220
221misc_feature222(3，5，6，13)..(15)223Xaa＝任何胺基酸400467Arg Lys Xaa Asn Xaa Xaa Trp Thr Trp Val Gly Thr Xaa Lys Xaa Leu1 5 10 15Thr Glu Glu
21046821117212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽220
221misc_feature222(13)..(15)223Xaa＝任何胺基酸400468Ala Glu Asn Trp Ala Asp Gly Glu Pro Asn Asn Lys Xaa Asn Xaa Glu1 5 10 15Asp21046921116212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽220
221misc_feature222(2，3，4，7)..(15)223Xaa＝任何胺基酸400469Cys Xaa Xaa Xaa Tyr Thr Xaa Leu Val Ala Ile Gln Asn Lys Xaa Glu1 5 10 1521047021119212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽220
221misc_feature222(3，4，5，6，8，13，15)..(18)223Xaa＝任何胺基酸
400470Arg Lys Xaa Xaa Xaa Xaa Trp Xaa Trp Val Gly Thr Xaa Lys Xaa Leu1 5 10 15Thr Xaa Glu21047121116212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽220
221misc_feature222(2，5，6，7，12，13)..(14)223Xaa＝任何胺基酸400471Ala Xaa Asn Trp Xaa Xaa Xaa Glu Pro Asn Asn Xaa Xaa Xaa Glu Asp1 5 10 1521047221113212PRT213人工序列220
223選擇蛋白拮抗肽220
221misc_feature222(1，3，6，9，12)..(13)223Xaa＝任何胺基酸400472Xaa Lys Xaa Lys Thr Xaa Glu Ala Xaa Asn Trp Xaa Xaa1 5 1021047321112212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽
220
221misc_feature222(1)..(1)223Xaa是Asp-Arg-Met-Pro-Cys，Arg-Met-Pro-Cys，Met-Pro-Cys，Pro-Cys或Cys220
221misc_feature222(2)..(2)223Xaa是Arg或Lys220
221misc_feature222(10)..(10)223Xaa是Ser或Thr220
221misc_feature222(12)..(12)223Xaa是Cys-Lys或Cys400473Xaa Xaa Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Xaa Ser Xaa1 5 1021047421117212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400474Asp Arg Met Pro Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys1 5 10 15Lys21047521115212PRT213人工序列
220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400475Met Pro Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys Lys1 5 10 1521047621113212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400476Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys Lys1 5 1021047721116212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400477Asp Arg Met Pro Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys1 5 10 1521047821114212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400478Met Pro Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys1 5 1021047921112212PRT213人工序列
220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400479Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys1 5 1021048021116212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400480Asp Arg Met Pro Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys1 5 10 1521048121115212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400481Met Pro Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys Lys1 5 10 1521048221113212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400482Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys Lys1 5 1021048321116212PRT213人工序列
220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400483Asp Arg Met Pro Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys1 5 10 1521048421114212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400484Met Pro Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys1 5 1021048521112212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400485Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Ser Ser Cys1 5 1021048621117212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400486Asp Arg Met Pro Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys1 5 10 15Lys210487
21115212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400487Met Pro Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys Lys1 5 10 1521048821113212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400488Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys Lys1 5 1021048921116212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400489Asp Arg Met Pro Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys1 5 10 1521049021114212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400490Met Pro Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys1 5 10210491
21112212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400491Cys Arg Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys1 5 1021049221117212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400492Asp Arg Met Pro Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys1 5 10 15Lys21049321115212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400493Met Pro Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys Lys1 5 10 1521049421113212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400494Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys Lys
1 5 1021049521116212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400495Asp Arg Met Pro Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys1 5 10 1521049621114212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400496Met Pro Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys1 5 1021049721112212PRT213人工序列220
223促生長激素抑制素或CORTISTATIN模擬肽400497Cys Lys Asn Phe Phe Trp Lys Thr Phe Thr Ser Cys1 5 1021049821125212PRT213人工序列220
223CAP37模擬物/LPS結合肽400498Asn Gln Gly Arg His Phe Cys Gly Gly Ala Leu Ile His Ala Arg Phe
1 5 10 15Val Met Thr Ala Ala Ser Cys Phe Gln20 2521049921120212PRT213人工序列220
223CAP37模擬物/LPS結合肽400499Arg His Phe Cys Gly Gly Ala Leu Ile His Ala Arg Phe Val Met Thr1 5 10 15Ala Ala Ser Cys2021050021127212PRT213人工序列220
223CAP37模擬物/LPS結合肽400500Gly Thr Arg Cys Gln Val Ala Gly Trp Gly Ser Gln Arg Ser Gly Gly1 5 10 15Arg Leu Ser Arg Phe Pro Arg Phe Val Asn Val20 2521050121118212PRT213人工序列220
223VEGF-拮抗劑400501Gly Glu Arg Trp Cys Phe Asp Gly Pro Arg Ala Trp Val Cys Gly Trp1 5 10 15
Glu Ile21050221118212PRT213人工序列220
223VEGF-拮抗劑400502Glu Glu Leu Trp Cys Phe Asp Gly Pro Arg Ala Trp Val Cys Gly Tyr1 5 10 15Val Lys21050321133212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400503Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser Ser Pro Leu Phe Lys1 5 10 15Thr Leu Leu Ser Ala Val Gly Ser Ala Leu Ser Ser Ser Gly Gly Gln20 25 30Gln21050421133212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(7，18，)..(19)
223位置7、18和19，D胺基酸殘基400504Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser Ser Pro Leu Phe Lys1 5 10 15Thr Leu Leu Ser Ala Val Gly Ser Ala Leu Ser Ser Ser Gly Gly Gln20 25 30Glu21050521122212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(18)..(19)223位置18和19，D胺基酸殘基400505Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser Ser Pro Leu Phe Lys1 5 10 15Thr Leu Leu Ser Ala Val2021050621122212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(7，18)..(19)223位置7、18和19，D胺基酸殘基400506Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser Ser Pro Leu Phe Lys1 5 10 15
Thr Leu Leu Ser Ala Val2021050721123212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(8，19)..(20)223位置8、19和20，D胺基酸殘基400507Lys Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser Ser Pro Leu Phe1 5 10 15Lys Thr Leu Leu Ser Ala Val2021050821124212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(9，20)..(21)223位置9、20和21，D胺基酸殘基400508Lys Lys Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser Ser Pro Leu1 5 10 15Phe Lys Thr Leu Leu Ser Ala Val2021050921124212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(9，20)..(21)223位置9、20和21，D胺基酸殘基400509Lys Lys Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser Ser Pro Leu1 5 10 15Phe Lys Thr Leu Leu Ser Ala Val2021051021111212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(7)..(7)223位置7，D胺基酸殘基400510Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser1 5 1021051121126212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400511Gly Ile Gly Ala Val Leu Lys Val Leu Thr Thr Gly Leu Pro Ala Leu1 5 10 15Ile Ser Trp Ile Lys Arg Lys Arg Gln Gln20 25
21051221126212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(5，8，17)..(23)223位置5、8、17和23，D胺基酸殘基400512Gly Ile Gly Ala Val Leu Lys Val Leu Thr Thr Gly Leu Pro Ala Leu1 5 10 15Ile Ser Trp Ile Lys Arg Lys Arg Gln Gln20 2521051321126212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(5，18，17)..(23)223位置5、18、17和23，D胺基酸殘基400513Gly Ile Gly Ala Val Leu Lys Val Leu Thr Thr Gly Leu Pro Ala Leu1 5 10 15Ile Ser Trp Ile Lys Arg Lys Arg Gln Gln20 2521051421122212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature
222(5，8，17)..(21)222位置5、8、17和21，D胺基酸殘基400514Gly Ile Gly Ala Val Leu Lys Val Leu Thr Thr Gly Leu Pro Ala Leu1 5 10 15Ile Ser Trp Ile Lys Arg2021051521119212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(2，5，14)..(18)223位置2、5、14和18，D胺基酸殘基400515Ala Val Leu Lys Val Leu Thr Thr Gly Leu Pro Ala Leu Ile Ser Trpl 5 10 15Ile Lys Arg21051621112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(3，4，8)..(10)223位置3、4、8和10，D胺基酸殘基400516Lys Leu Leu Leu Leu Leu Lys Leu Leu Leu Leu Lys1 5 10210517
21112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(3，4，8)..(10)223位置3、4、8和10，D胺基酸殘基400517Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Lys1 5 1021051821112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(3，4，8)..(10)223位置3、4、8和10，D胺基酸殘基400518Lys Leu Leu Leu Lys Leu Lys Leu Lys Leu Leu Lys1 5 1021051921112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400519Lys Lys Leu Leu Lys Leu Lys Leu Lys Leu Lys Lys1 5 1021052021112212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400520Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Lys1 5 1021052121112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400521Lys Leu Leu Leu Lys Leu Lys Leu Lys Leu Leu Lys1 5 102105222116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400522Lys Leu Leu Leu Leu Lys1 52105232118212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400523Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Lys1 521052421112212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400524Lys Leu Leu Leu Lys Leu Lys Leu Lys Leu Leu Lys1 5 1021052521112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400525Lys Leu Leu Leu Lys Leu Lys Leu Lys Leu Leu Lys1 5 1021052621112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400526Lys Leu Leu Leu Lys Leu Lys Leu Lys Leu Leu Lys1 5 1021052721112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400527Lys Ala Ala Ala Lys Ala Ala Ala Lys Ala Ala Lys1 5 1021052821112212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400528Lys Val Val Val Lys Val Val Val Lys Val Val Lys1 5 1021052921112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400529Lys Val Val Val Lys Val Lys Val Lys Val Val Lys1 5 1021053021111212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400530Lys Val Val Val Lys Val Lys Val Lys Val Lys1 5 1021053121112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400531Lys Val Val Val Lys Val Lys Val Lys Val Val Lys1 5 102105322116212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400532Lys Leu Ile Leu Lys Leu1 52105332116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400533Lys Val Leu His Leu Leu1 52105342116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400534Leu Lys Leu Arg Leu Leu1 52105352116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400535Lys Pro Leu His Leu Leu1 52105362118212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400536Lys Leu Ile Leu Lys Leu Val Arg1 52105372118212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400537Lys Val Phe His Leu Leu His Leu1 52105382118212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400538His Lys Phe Arg Ile Leu Lys Leu1 52105392118212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400539Lys Pro Phe His Ile Leu His Leu1 521054021112212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400540Lys Ile Ile Ile Lys Ile Lys Ile Lys Ile Ile Lys1 5 1021054121112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400541Lys Ile Ile Ile Lys Ile Lys Ile Lys Ile Ile Lys1 5 1021054221112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400542Lys Ile Ile Ile Lys Ile Lys Ile Lys Ile Ile Lys1 5 1021054321112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400543Lys Ile Pro Ile Lys Ile Lys Ile Lys Ile Pro Lys1 5 1021054421112212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400544Lys Ile Pro Ile Lys Ile Lys Ile Lys Ile Val Lys1 5 1021054521112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400545Arg Ile Ile Ile Arg Ile Arg Ile Arg Ile Ile Arg1 5 1021054621112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400546Arg Ile Ile Ile Arg Ile Arg Ile Arg Ile Ile Arg1 5 1021054721112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400547Arg Ile Ile Ile Arg Ile Arg Ile Arg Ile Ile Arg1 5 1021054821112212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400548Arg Ile Val Ile Arg Ile Arg Ile Arg Leu Ile Arg1 5 1021054921112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400549Arg Ile Ile Val Arg Ile Arg Leu Arg Ile Ile Arg1 5 1021055021112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400550Arg Ile Gly Ile Arg Leu Arg Val Arg Ile Ile Arg1 5 1021055121112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400551Lys Ile Val Ile Arg Ile Arg Ile Arg Leu Ile Arg1 5 1021055221112212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400552Arg Ile Ala Val Lys Trp Arg Leu Arg Phe Ile Lys1 5 1021055321112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400553Lys Ile Gly Trp Lys Leu Arg Val Arg Ile Ile Arg1 5 1021055421112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400554Lys Lys Ile Gly Trp Leu Ile Ile Arg Val Arg Arg1 5 1021055521114212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400555Arg Ile Val Ile Arg Ile Arg Ile Arg Leu Ile Arg Ile Arg1 5 1021055621114212PRT213人工的
400556Arg Ile Ile Val Arg Ile Arg Leu Arg Ile Ile Arg Val Arg1 5 1021055721114212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400557Arg Ile Gly Ile Arg Leu Arg Val Arg Ile Ile Arg Arg Val1 5 1021055821116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400558Lys Ile Val Ile Arg Ile Arg Ala Arg Leu Ile Arg Ile Arg Ile Arg1 5 10 1521055921116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400559Arg Ile Ile Val Lys Ile Arg Leu Arg Ile Ile Lys Lys Ile Arg Leu1 5 10 1521056021116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽
400560Lys Ile Gly Ile Lys Ala Arg Val Arg Ile Ile Arg Val Lys Ile Ile1 5 10 1521056121116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400561Arg Ile Ile Val His Ile Arg Leu Arg Ile Ile His His Ile Arg Leu1 5 10 1521056221116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400562His Ile Gly Ile Lys Ala His Val Arg Ile Ile Arg Val His Ile Ile1 5 10 1521056321116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400563Arg Ile Tyr Val Lys Ile His Leu Arg Tyr Ile Lys Lys Ile Arg Leu1 5 10 1521056421116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽
400564Lys Ile Gly His Lys Ala Arg Val His Ile Ile Arg Tyr Lys Ile Ile1 5 10 1521056521116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400565Arg Ile Tyr Val Lys Pro His Pro Arg Tyr Ile Lys Lys Ile Arg Leu1 5 10 1521056621116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400566Lys Pro Gly His Lys Ala Arg Pro His Ile Ile Arg Tyr Lys Ile Ile1 5 10 1521056721119212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400567Lys Ile Val Ile Arg Ile Arg Ile Arg Leu Ile Arg Ile Arg Ile Arg1 5 10 15Lys Ile Val21056821119212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400568Arg Ile Ile Val Lys Ile Arg Leu Arg Ile Ile Lys Lys Ile Arg Leu1 5 10 15Ile Lys Lys21056921119212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400569Lys Ile Gly Trp Lys Leu Arg Val Arg Ile Ile Arg Val Lys Ile Gly1 5 10 15Arg Leu Arg21057021125212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400570Lys Ile Val Ile Arg Ile Arg Ile Arg Leu Ile Arg Ile Arg Ile Arg1 5 10 15Lys Ile Val Lys Val Lys Arg Ile Arg20 2521057121126212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400571Arg Phe Ala Val Lys Ile Arg Leu Arg Ile Ile Lys Lys Ile Arg Leu1 5 10 15Ile Lys Lys Ile Arg Lys Arg Val Ile Lys20 2521057221130212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400572Lys Ala Gly Trp Lys Leu Arg Val Arg Ile Ile Arg Val Lys Ile Gly1 5 10 15Arg Leu Arg Lys Ile Gly Trp Lys Lys Arg Val Arg Ile Lys20 25 3021057321116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400573Arg Ile Tyr Val Lys Pro Hi s Pro Arg Tyr Ile Lys Lys Ile Arg Leu1 510 1521057421116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400574Lys Pro Gly His Lys Ala Arg Pro His Ile Ile Arg Tyr Lys Ile Ile1 5 10 15
21057521119212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400575Lys Ile Val Ile Arg Ile Arg Ile Arg Leu Ile Arg Ile Arg Ile Arg1 5 10 15Lys Ile Val21057621119212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400576Arg Ile Ile Val Lys Ile Arg Leu Arg Ile Ile Lys Lys Ile Arg Leu1 5 10 15Ile Lys Lys21057721116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400577Arg Ile Tyr Val Ser Lys Ile Ser Ile Tyr Ile Lys Lys Ile Arg Leu1 5 10 1521057821119212PRT213人工序列
220
223抗病原體肽400578Lys Ile Val Ile Phe Thr Arg Ile Arg Leu Thr Ser Ile Arg Ile Arg1 5 10 15Ser Ile Val21057921116212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400579Lys Pro Ile His Lys Ala Arg Pro Thr Ile Ile Arg Tyr Lys Met Ile1 5 10 1521058021126212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，二硫鍵連接於位置26220
221misc_feature222(26)..(26)223位置26，二硫鍵連接於位置1400580Xaa Cys Lys Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser Ser Pro1 5 10 15Leu Phe Lys Thr Leu Leu Ser Ala Val Cys20 25
21058121126212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400581Cys Lys Lys Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser Ser Pro1 5 10 15Leu Phe Lys Thr Leu Leu Ser Ala Val Cys20 2521058221127212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400582Cys Lys Lys Lys Gly Phe Phe Ala Leu Ile Pro Lys Ile Ile Ser Ser1 5 10 15Pro Leu Phe Lys Thr Leu Leu Ser Ala Val Cys20 2521058321117212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，二硫鍵連接於位置17220
221misc_feature222(17)..(17)
223位置17，二硫鍵連接於位置1400583Xaa Cys Arg Ile Val Ile Arg Ile Arg Ile Arg Leu Ile Arg Ile Arg1 5 10 15Cys21058421119212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，二硫鍵連接於位置19220
221misc_feature222(19)..(19)223位置19，二硫鍵連接於位置1400584Xaa Cys Lys Pro Gly Hi s Lys Ala Arg Pro His Ile Ile Arg Tyr Lys1 510 15Ile Ile Cys21058521129212PRT213人工序列220
223抗病原體肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，二硫鍵連接於位置29
220
221misc_feature222(29)..(29)223位置29，二硫鍵連接於位置1400585Xaa Cys Arg Phe Ala Val Lys Ile Arg Leu Arg Ile Ile Lys Lys Ile1 5 10 15Arg Leu Ile Lys Lys Ile Arg Lys Arg Val Ile Lys Cys20 2521058621113212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400586Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Lys Cys1 5 1021058721112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400587Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Lys1 5 1021058821113212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400588Lys Leu Leu Leu Lys Leu Lys Leu Lys Leu Leu Lys Cys1 5 10
21058921112212PRT213人工序列220
223抗病原體肽400589Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Leu Lys Leu Leu Lys1 5 1021059021128212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400590His Ser Asp Ala Val Phe Tyr Asp Asn Tyr Thr Arg Leu Arg Lys Gln1 5 10 15Met Ala Val Lys Lys Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn20 2521059121128212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400591His Ser Asp Ala Val Phe Tyr Asp Asn Tyr Thr Arg Leu Arg Lys Gln1 5 10 15Met Ala Val Lys Lys Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn20 252105922113212PRT213人工序列
220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是L-Lys、D-Lys或鳥氨醯殘基220
221misc_feature222(2)..(2)223位置2，Xaa是L-Tyr、D-Tyr、Phe、Trp或對氨基苯丙氨醯殘基220
221misc_feature222(3)..(3)223位置3是疏水脂族胺基酸殘基，位置3，任選地連接於Leu、正亮氨酸、D-Ala、Asn-Ser、Asn-Ser-Ile-、Asn-Ser-Tyr、Ser-Ile-Leu、Asn-Ser-Tyr-Leu或Asn-Ser-Tyr-Leu-Asn400592Xaa Xaa Xaa12105932115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(3)223位置1，Xaa或者不存在，或者是疏水脂族胺基酸殘基(X5)，X5-Asn、Tyr-X5、Lys-X5、Lys-X5-Asn、Lys-Tyr-X5、Lys-Tyr-X5-Asn、Lys-Lys-Tyr-X5、Lys-Lys-Tyr-X5-Asn、Val-Lys-Lys-Tyr-X5、Val-Ala-Lys-Lys-Tyr-X5-Asn或Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-X5-Asn400593Xaa Ser Xaa Leu Asn1 52105942117212PRT
213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(1，5，6)..(7)223位置1和6，Xaa是如WO97/40070中定義的交聯胺基酸殘基220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa是疏水脂族胺基酸殘基220
221misc_feature222(7)..(7)223位置7，是共價鍵或Asn、Ser、Ile、Tyr、Leu、Asn-Ser、Asn-Ser-Ile、Asn-Ser-Tyr、Asn-Ser-Ile-Leu、Asn-Ser-Tyr-Leu、Asn-Ser-Ile-Leu-Asn或Asn-Ser-Tyr-Leu-Asn。
400594Xaa Lys Lys Tyr Xaa Xaa Xaa1 52105952114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400595Lys Lys Tyr Leu12105962115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400596
Asn Ser Ile Leu Asn1 52105972114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400597Lys Lys Tyr Leu12105982114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400598Lys Lys Tyr Ala12105992116212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400599Ala Val Lys Lys Tyr Leu1 52106002114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400600
Ser Ile Leu Asn12106012114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400601Lys Lys Tyr Val12106022114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(3)..(3)223位置3，Xaa是月桂酸殘基400602Ser Ile Xaa Asn12106032115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa是正亮氨醯殘基400603Lys Lys Tyr Leu Xaa1 5
2106042115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400604Asn Ser Tyr Leu Asn1 52106052115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400605Asn Ser Ile Tyr Asn1 521060621111212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400606Lys Lys Tyr Leu Pro Pro Asn Ser Ile Leu Asn1 5 102106072115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是月桂酸殘基400607
Xaa Lys Lys Tyr Leu1 52106082115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是己酸殘基400608Xaa Lys Lys Tyr Leu1 52106092114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，Xaa是正亮氨醯殘基400609Lys Lys Tyr Xaa12106102115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400610Val Lys Lys Tyr Leu1 5
2106112116212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400611Leu Asn Ser Ile Leu Asn1 52106122117212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400612Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn1 52106132115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400613Lys Lys Tyr Leu Asn1 52106142116212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400614Lys Lys Tyr Leu Asn Ser1 5
2106152117212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400615Lys Lys Tyr Leu Asn Ser Ile1 52106162118212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400616Lys Lys Tyr Leu Asn Ser Ile Leu1 52106172114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400617Lys Lys Tyr Leu12106182115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400618Lys Lys Tyr Asp Ala1 5
2106192116212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400619Ala Val Lys Lys Tyr Leu1 52106202115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400620Asn Ser Ile Leu Asn1 52106212114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400621Lys Lys Tyr Val12106222114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(3)223位置3，Xaa是月桂酸殘基
400622Xaa Ile Xaa Asn12106232115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400623Asn Ser Tyr Leu Asn1 52106242115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400624Asn Ser Ile Tyr Asn1 52106252115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa是正亮氨醯殘基400625Lys Lys Tyr Leu Xaa1 521062621111212PRT
213人工序列220
223VIP-模擬肽400626Lys Lys Tyr Leu Pro Pro Asn Ser Ile Leu Asn1 5 102106272114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400627Lys Lys Tyr Leu12106282115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400628Lys Lys Tyr Asp Ala1 52106292116212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400629Ala Val Lys Lys Tyr Leu1 52106302115212PRT
213人工序列220
223VIP-模擬肽400630Asn Ser Ile Leu Asn1 52106312114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400631Lys Lys Tyr Val12106322114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(3)223位置3，Xaa是月桂酸殘基400632Xaa Ile Xaa Asn12106332115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是月桂酸殘基
400633Xaa Lys Lys Tyr Leu1 52106342115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是己酸殘基400634Xaa Lys Lys Tyr Leu1 52106352114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，Xaa是正亮氨醯殘基400635Lys Lys Tyr Xaa12106362115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400636Val Lys Lys Tyr Leu
1 52106372116212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400637Leu Asn Ser Ile Leu Asn1 52106382117212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400638Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn1 52106392115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa是正亮氨醯殘基400639Lys Lys Tyr Leu Xaa1 52106402115212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400640Lys Lys Tyr Leu Asn1 52106412116212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400641Lys Lys Tyr Leu Asn Ser1 52106422117212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400642Lys Lys Tyr Leu Asn Ser Ile1 52106432118212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400643Lys Lys Tyr Leu Asn Ser Ile Leu1 52106442116212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400644Lys Lys Lys Tyr Leu Asp1 52106452117212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1和6通過二硫鍵交聯400645Xaa Cys Lys Lys Tyr Leu Cys1 52106462116212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature223位置1和6通過S-CH2-CO交聯400646Cys Lys Lys Tyr Leu Lys1 52106472114212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽220
221misc_feature223位置4，D胺基酸殘基
400647Lys Lys Tyr Ala12106482118212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400648Trp Trp Thr Asp Thr Gly Leu Trp1 52106492118212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400649Trp Trp Thr Asp Asp Gly Leu Trp1 521065021112212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400650Trp Trp Asp Thr Arg Gly Leu Trp Val Trp Thr Ile1 5 1021065121112212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽
400651Phe Trp Gly Asn Asp Gly Ile Trp Leu Glu Ser Gly1 5 1021065221112212PRT213人工的400652Asp Trp Asp Gln Phe Gly Leu Trp Arg Gly Ala Ala1 5 1021065321112212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400653Arg Trp Asp Asp Asn Gly Leu Trp Val Val Val Leu1 5 1021065421112212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400654Ser Gly Met Trp Ser His Tyr Gly Ile Trp Met Gly1 5 1021065521112212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400655
Gly Gly Arg Trp Asp Gln Ala Gly Leu Trp Val Ala1 5 1021065621112212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400656Lys Leu Trp Ser Glu Gln Gly Ile Trp Met Gly Glu1 5 1021065721110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400657Cys Trp Ser Met His Gly Leu Trp Leu Cys1 5 1021065821112212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400658Gly Cys Trp Asp Asn Thr Gly Ile Trp Val Pro Cys1 5 1021065921110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400659
Asp Trp Asp Thr Arg Gly Leu Trp Val Tyr1 5 1021066021110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400660Ser Leu Trp Asp Glu Asn Gly Ala Trp Ile1 5 1021066121110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400661Lys Trp Asp Asp Arg Gly Leu Trp Met His1 5 1021066221110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400662Gln Ala Trp Asn Glu Arg Gly Leu Trp Thr1 5 1021066321110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400663
Gln Trp Asp Thr Arg Gly Leu Trp Val Ala1 5 102106642119212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400664Trp Asn Val His Gly Ile Trp Gln Glu1 521066521110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400665Ser Trp Asp Thr Arg Gly Leu Trp Val Glu1 5 1021066621110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400666Asp Trp Asp Thr Arg Gly Leu Trp Val Ala1 5 1021066721110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400667
Ser Trp Gly Arg Asp Gly Leu Trp Ile Glu1 5 1021066821110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400668Glu Trp Thr Asp Asn Gly Leu Trp Ala Leu1 5 1021066921110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400669Ser Trp Asp Glu Lys Gly Leu Trp Ser Ala1 5 1021067021110212PRT213人工序列220
223VIP-模擬肽400670Ser Trp Asp Ser Ser Gly Leu Trp Met Asp1 5 1021067121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400671
Ser His Leu Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln1 5 1021067221112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400672Thr Leu Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Leu Gln Thr1 5 1021067321112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400673Arg Gly Asp Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Ser1 5 1021067421112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400674Val His Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Thr1 5 1021067521112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400675
Arg Leu Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Thr1 5 1021067621112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400676Ser Arg Val Trp Phe Gln Pro Tyr Ser Leu Gln Ser1 5 1021067721112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400677Asn Met Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Ile Gln Thr1 5 1021067821112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400678Ser Val Val Phe Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Thr1 5 1021067921112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400679
Thr Phe Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021068021112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400680Thr Leu Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Ile Gln Arg1 5 1021068121112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400681Arg Leu Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Arg1 5 1021068221112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400682Ser Pro Val Phe Trp Gln Pro Tyr Ser Ile Gln Ile1 5 1021068321112212PRT213人工的400683Trp Ile Glu Trp Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Ser1 5 10210684
21112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400684Ser Leu Ile Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Leu Gln Met1 5 1021068521112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400685Thr Arg Leu Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Arg1 5 1021068621112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400686Arg Cys Asp Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Thr1 5 1021068721112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400687Met Arg Val Phe Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Asn1 5 10210688
21112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400688Lys Ile Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Thr1 5 1021068921112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400689Arg His Leu Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Arg1 5 1021069021112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400690Ala Leu Val Trp Trp Gln Pro Tyr Ser Glu Gln Ile1 5 1021069121112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400691Ser Arg Val Trp Phe Gln Pro Tyr Ser Leu Gln Ser1 5 10210692
21110212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400692Trp Glu Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu Glu1 5 1021069321112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400693Gln Leu Val Trp Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Arg1 5 1021069421112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400694Asp Leu Arg Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Val1 5 1021069521112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400695Glu Leu Val Trp Trp Gln Pro Tyr Ser Leu Gln Leu1 5 10210696
21112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400696Asp Leu Val Trp Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Trp1 5 1021069721112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400697Asn Gly Asn Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Phe Gln Val1 5 1021069821112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400698Glu Leu Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Ile Gln Arg1 5 1021069921112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400699Glu Leu Met Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Glu1 5 10210700
21112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400700Asn Leu Leu Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Met Gln Asp1 5 1021070121112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400701Gly Tyr Glu Trp Tyr Gln Pro Tyr Ser Val Gln Arg1 5 1021070221112212PRT213人工序列220
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220
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221misc_feature222(5)..(6)223Xaa＝任何胺基酸400830Ser Arg Ile Trp Xaa Xaa Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021083121112212PRT213人工序列220
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223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(6)223Xaa＝任何胺基酸
400832Trp Gly Tyr Tyr Xaa Xaa Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021083321112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400833Thr Ser Gly Trp Tyr Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021083421112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(6)223Xaa＝任何胺基酸400834Val His Pro Tyr Xaa Xaa Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021083521112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400835Glu His Ser Tyr Phe Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021083621112
212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(2)223Xaa＝任何胺基酸400836Xaa Xaa Ile Trp Tyr Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021083721112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400837Ala Gln Leu His Ser Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021083821112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400838Trp Ala Asn Trp Phe Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021083921112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400839Ser Arg Leu Tyr Ser Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu
1 5 1021084021112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400840Gly Val Thr Phe Ser Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021084121112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400841Ser Ile Val Trp Ser Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021084221112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400842Ser Arg Asp Leu Val Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021084321117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400843His Trp Gly His Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Asp Asp Leu
1 5 10 15Gly21084421117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400844Ser Trp His Ser Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Ser Val Pro1 5 10 15Glu21084521117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400845Trp Arg Asp Ser Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Pro Glu Ser1 5 10 15Ala21084621117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400846Thr Trp Asp Ala Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Lys Trp Leu1 5 10 15
Asp21084721117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400847Thr Pro Pro Trp Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Ser Leu Asp1 5 10 15Pro21084821117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400848Tyr Trp Ser Ser Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Ser Val His1 5 10 15Ser21084921110212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400849Tyr Trp Tyr Gln Pro Tyr Ala Leu Gly Leu1 5 10210850
21110212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400850Tyr Trp Tyr Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021085121110212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400851Glu Trp Ile Gln Pro Tyr Ala Thr Gly Leu1 5 1021085221110212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400852Asn Trp Glu Gln Pro Tyr Ala Lys Pro Leu1 5 1021085321110212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400853Ala Phe Tyr Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10210854
21110212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400854Phe Leu Tyr Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021085521110212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400855Val Cys Lys Gln Pro Tyr Leu Glu Trp Cys1 5 1021085621121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400856Glu Thr Pro Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021085721121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400857Gln Gly Trp Leu Thr Trp Gln Asp Ser Val Asp Met Tyr Trp Gln Pro
1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021085821121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400858Phe Ser Glu Ala Gly Tyr Thr Trp Pro Glu Asn Thr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021085921121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400859Thr Glu Ser Pro Gly Gly Leu Asp Trp Ala Lys Ile Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021086021121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400860Asp Gly Tyr Asp Arg Trp Arg Gln Ser Gly Glu Arg Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15
Tyr Ala Leu Pro Leu2021086121121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400861Thr Ala Asn Val Ser Ser Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021086221121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400862Ser Val Gly Glu Asp His Asn Phe Trp Thr Ser Glu Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021086321121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400863Met Asn Asp Gln Thr Ser Glu Val Ser Thr Phe Pro Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu
2021086421121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400864Ser Trp Ser Glu Ala Phe Glu Gln Pro Arg Asn Leu Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021086521121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400865Gln Tyr Ala Glu Pro Ser Ala Leu Asn Asp Trp Gly Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021086621121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400866Asn Gly Asp Trp Ala Thr Ala Asp Trp Ser Asn Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu20
21086721115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400867Thr His Asp Glu His Ile Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521086821121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400868Met Leu Glu Lys Thr Tyr Thr Thr Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021086921120212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400869Trp Ser Asp Pro Leu Thr Arg Asp Ala Asp Leu Tyr Trp Gln Pro Tyr1 5 10 15Ala Leu Pro Leu2021087021121212PRT213人工序列
220
223IL-1拮抗肽400870Ser Asp Ala Phe Thr Thr Gln Asp Ser Gln Ala Met Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021087121121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400871Gly Asp Asp Ala Ala Trp Arg Thr Asp Ser Leu Thr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021087221121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400872Ala Ile Ile Arg Gln Leu Tyr Arg Trp Ser Glu Met Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021087321121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽
400873Glu Asn Thr Tyr Ser Pro Asn Trp Ala Asp Ser Met Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021087421121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400874Met Asn Asp Gln Thr Ser Glu Val Ser Thr Phe Pro Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021087521121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400875Ser Val Gly Glu Asp His Asn Phe Trp Thr Ser Glu Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021087621121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400876
Gln Thr Pro Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021087721121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400877Glu Asn Pro Phe Thr Trp Gln Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021087821121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400878Val Thr Pro Phe Thr Trp Glu Asp Ser Asn Val Phe Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021087921121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400879Gln Ile Pro Phe Thr Trp Glu Gln Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro
1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021088021121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400880Gln Ala Pro Leu Thr Trp Gln Glu Ser Ala Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021088121121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400881Glu Pro Thr Phe Thr Trp Glu Glu Ser Lys Ala Thr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021088221121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400882Thr Thr Thr Leu Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15
Tyr Ala Leu Pro Leu2021088321121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400883Glu Ser Pro Leu Thr Trp Glu Glu Ser Ser Ala Leu Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021088421121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400884Glu Thr Pro Leu Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021088521121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400885Glu Ala Thr Phe Thr Trp Ala Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu
2021088621121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400886Glu Ala Leu Phe Thr Trp Lys Glu Ser Thr Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021088721120212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400887Ser Thr Pro Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro Tyr1 5 10 15Ala Leu Pro Leu2021088821121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400888Glu Thr Pro Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu20
21088921121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400889Lys Ala Pro Phe Thr Trp Glu Glu Ser Gln Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021089021121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400890Ser Thr Ser Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021089121121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400891Asp Ser Thr Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu20210892
21121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400892Tyr Ile Pro Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021089321121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400893Gln Thr Ala Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021089421121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400894Glu Thr Leu Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Thr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021089521121212PRT
213人工序列220
223IL-1拮抗肽400895Val Ser Ser Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu202108962117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400896Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 521089721111212PRT213人工的220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是磷酸酪氨醯殘基220
221misc_feature222(2)..(2)223位置2，Xaa是1-萘丙氨醯殘基220
221mise_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa是氮雜環丁烷殘基400897
Xaa Xaa Pro Tyr Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021089821121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400898Thr Ala Asn Val Ser Ser Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021089921115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400899Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521090021115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400900Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 15210901
21115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400901Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521090221121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400902Glu Thr Pro Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021090321118212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(13)..(13)223位置13，Xaa是氮雜環丁烷殘基400903Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Xaa Tyr Ala Leu1 5 10 15Pro Leu
21090421116212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400904Ala Asp Val Leu Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Pro Val Thr Leu Trp Val1 5 10 1521090521117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗劑400905Gly Asp Val Ala Glu Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu Thr Ser1 5 10 15Leu21090621118212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400906Ser Trp Thr Asp Tyr Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Ile Ser1 5 10 15Gly Leu2109072118212PRT
213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1，2，7)..(8)223Xaa是任何胺基酸220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，Xaa是脯氨醯或氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa是S、A、V或L400907Xaa Xaa Gln Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa1 52109082118212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是Y、W或F220
221misc_feature222(2，7)..(8)223Xaa是任何胺基酸220
221misc_feature
222(4)..(4)223位置4，Xaa是脯氨醯或氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa是S、A、V或L400908Xaa Xaa Gln Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa1 52109092118212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是Y、W或F220
221misc_feature222(2)..(2)223位置2，Xaa是E、F、V、W或Y220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，Xaa是脯氨醯或氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa是S、A、V或L220
221misc_feature222(7)..(7)223位置7，Xaa是M、F、V、R、Q、K、T、S、D、L、I或E
220
221misc_feature222(8)..(8)223位置8，Xaa是E、L、W、V、H、I、G、A、D、L、Y、N、Q或P400909Xaa Xaa Gly Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa1 52109102119212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是V、L、I、E、P、G、Y、M、T或D220
221misc_feature222(2)..(2)223位置2，Xaa是Y、W或F220
221misc_feature222(3)..(3)223位置3，Xaa是E、F、V、W或Y220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa是脯氨醯或氮雜環丁烷殘基；220
221misc_feature222(7)..(7)223位置7，Xaa是S、A、V或L
220
221misc_feature222(8)..(8)223位置8，Xaa是M、F、V、R、Q、K、T、S、D、L、I或E；220
221misc_feature222(9)..(9)223位置9，Xaa是E、L、W、V、H、I、G、A、D、L、Y、N、Q或P400910Xaa Xaa Xaa Gln Xaa Tyr Xaa Xaa Xaa1 521091121115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400911Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521091221115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223Xaa＝任何胺基酸400912Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521091321115212PRT213人工序列
220
223IL-1拮抗肽400913Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521091421115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400914Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521091521115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400915Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521091621115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基
400916Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521091721121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa是A、D、E、F、G、K、Q、S、T、V或Y220
221misc_feature222(2)..(2)223位置2，Xaa是A、D、G、I、N、P、S、T、V或W220
221misc_feature222(3)..(3)223位置3，Xaa是A、D、G、L、N、P、S、T、W或Y220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，Xaa是A、D、E、F、L、N、R、V或Y220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa是A、D、E、Q、R、S或T220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa是H、I、L、P、S、T或W
220
221misc_feature222(7)..(7)223位置7，Xaa是A、E、F、K、N、Q、R、S或Y；220
221misc_feature222(8)..(8)223位置8，Xaa是D、E、F、Q、R、T或W220
221misc_feature222(9)..(9)223位置9，Xaa是A、D、P、S、T或W220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是A、D、G、K、N、Q、S或T220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，Xaa是A、E、L、P、S、T、V或Y220
221misc_feature222(12)..(12)223位置12，Xaa是V、L、I、E、P、G、Y、M、T或D220
221misc_feature222(13)..(13)223位置13，Xaa是Y、W或F220
221misc_feature222(14)..(14)223位置14，Xaa是E、F、V、W或Y
220
221misc_feature222(16)..(16)223位置16，Xaa是P或氮雜環丁烷殘基；220
221misc_feature222(18)..(18)223位置18，Xaa是S、A、V或L220
221misc_feature222(19)..(19)223位置19，Xaa是M、F、V、R、Q、K、T、S、D、L、I或E220
221misc_feature222(20)..(20)223位置20，Xaa是Q或P。
400917Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gln Xaa1 5 10 15Tyr Xaa Xaa Xaa Leu2021091821121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400918Thr Ala Asn Val Ser Ser Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021091921118
212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400919Ser Trp Thr Asp Tyr Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Ile Ser1 5 10 15Gly Leu21092021121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400920Glu Thr Pro Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021092121121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400921Glu Asn Thr Tyr Ser Pro Asn Trp Ala Asp Ser Met Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021092221121212PRT213人工序列
220
223IL-1拮抗肽400922Ser Val Gly Glu Asp His Asn Phe Trp Thr Ser Glu Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021092321121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400923Asp Gly Tyr Asp Arg Trp Arg Gln Ser Gly Glu Arg Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu2021092421115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400924Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 1521092521111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400925
Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr1 5 1021092621111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400926Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021092721110212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400927Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr1 5 1021092821111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400928Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 10
21092921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400929Ala Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021093021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400930Phe Ala Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021093121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400931Phe Glu Ala Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 10
21093221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400932Phe Glu Trp Ala Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021093321111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400933Phe Glu Trp Thr Ala Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021093421111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400934Phe Glu Trp Thr Pro Ala Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 10
21093521111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400935Phe Glu Trp Thr Pro Gly Ala Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021093621111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400936Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Ala Gln Xaa Tyr1 5 1021093721111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400937Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Ala
1 5 1021093821111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400938Phe Glu Trp Thr Gly Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021093921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置5，D胺基酸殘基位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400939Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021094021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400940
Phe Glu Trp Thr Xaa Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021094121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa是2-哌啶酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400941Phe Glu Trp Thr Xaa Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021094221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa是氨基異丁酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400942Phe Glu Trp Thr Pro Xaa Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 10
21094321111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa是肌氨酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400943Phe Glu Trp Thr Pro Xaa Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021094421111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa是肌氨酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400944Phe Glu Trp Thr Xaa Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021094521111212PRT
213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400945Phe Glu Trp Thr Pro Asn Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021094621111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5、D胺基酸殘基400946Phe Glu Trp Thr Pro Val Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021094721111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400947
Phe Glu Trp Thr Val Pro Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 1021094821111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，乙醯化Phe220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400948Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021094921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，乙醯化Phe220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400949Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 10
21095021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa＝1-萘丙氨酸220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400950Xaa Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021095121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400951Tyr Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021095221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature
222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400952Phe Glu Trp Val Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021095321111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400953Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021095421111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400954Phe Glu Trp Thr Pro Ser Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021095521111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400955Phe Glu Trp Thr Pro Asn Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021095621112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa＝萘丙氨酸400956Ser His Leu Tyr Xaa Gln Pro Tyr Ser Val Gln Met1 5 1021095721112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa＝萘丙氨酸400957Thr Leu Val Tyr Xaa Gln Pro Tyr Ser Leu Gln Thr1 5 1021095821112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽
220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa＝萘丙氨酸400958Arg Gly Asp Tyr Xaa Gln Pro Tyr Ser Val Gln Ser1 5 1021095921112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa＝萘丙氨酸400959Asn Met Val Tyr Xaa Gln Pro Tyr Ser Ile Gln Thr1 5 102109602119212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400960Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln1 52109612119212PRT213人工的220
221mise_feature222(3)..(3)223位置3，Xaa＝萘丙氨酸400961
Val Tyr Xaa Gln Pro Tyr Ser Val Gln1 521096221112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(7)..(7)223位置7，Xaa是氮雜環丁烷殘基400962Thr Phe Val Tyr Trp Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 1021096321111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，Xaa＝對苯甲醯基-L-苯丙氨酸400963Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Xaa1 5 1021096421111212PRT213人工的220
221misc_feature
222(1)..(1)223位置1，Xaa＝乙醯化Phe220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，Xaa＝對苯甲醯基-L-苯丙氨酸.
400964Xaa Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Xaa1 5 1021096521111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(8)..(10)223位置8，Xaa＝對苯甲醯基-L-苯丙氨酸位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基400965Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Xaa Gln Xaa Tyr1 5 1021096621111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa＝乙醯化Phe220
221misc_feature222(8)..(8)223位置8，Xaa＝對苯甲醯基-L-苯丙氨酸220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基。
400966Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Xaa Gln Xaa Tyr1 5 1021096721111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(7)..(7)223位置7，Xaa＝對苯甲醯基-L-苯丙氨酸220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基。
400967Phe Glu Trp Thr Pro Gly Xaa Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021096821111212PRT
213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa＝乙醯化Phe220
221misc_feature222(7)..(7)223位置7，Xaa＝對苯甲醯基-L-苯丙氨酸220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基。
400968Phe Glu Trp Thr Pro Gly Xaa Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021096921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa＝乙醯化Phe220
221misc_feature222(3)..(3)223位置3，Xaa＝對苯甲醯基-L-苯丙氨酸220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基。
400969Phe Glu Xaa Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021097021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa＝乙醯化Phe220
221misc_feature222(3)..(3)223位置3，Xaa＝對苯甲醯基-L-苯丙氨酸220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基。
400970Phe Glu Xaa Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021097121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa＝對苯甲醯基-L-苯丙氨酸220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基。
400971Xaa Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 1021097221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa＝乙醯化對苯甲醯基-L-苯丙氨酸220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa是氮雜環丁烷殘基。
400972Xaa Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 102109732119212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400973Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln1 521097421112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400974Arg Leu Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Arg1 5 1021097521112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa＝萘丙氨酸400975Arg Leu Val Tyr Xaa Gln Pro Tyr Ser Val Gln Arg1 5 1021097621112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400976Arg Leu Asp Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Val Gln Arg1 5 1021097721112212PRT213人工的400977Arg Leu Val Trp Phe Gln Pro Tyr Ser Val Gln Arg1 5 1021097821112212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400978Arg Leu Val Tyr Trp Gln Pro Tyr Ser Ile Gln Arg1 5 1021097921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa＝D或Y220
221misc_feature222(3)..(3)223位置3，Xaa＝D或S220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，Xaa＝S、T或A220
221misc_feature222(5)..(5)223位置5，Xaa＝S或W220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa＝S或Y220
221misc_feature222(7)..(7)223Xaa是任何胺基酸
220
221misc_feature222(8)..(8)223位置8，Xaa＝N、S、K、H或W220
221misc_feature222(9)..(9)223位置9，Xaa＝F或L220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝D、N、S或L220
221misc_feature222(11)..(11)223位置11，Xaa＝L、I、Q、M或A.
400979Xaa Asn Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa1 5 1021098021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400980Asp Asn Ser Ser Trp Tyr Asp Ser Phe Leu Leu1 5 1021098121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽
400981Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Ser Phe Leu Ala1 5 1021098221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400982Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Asn Phe Leu Leu1 5 1021098321117212PRT213人工的400983Pro Ala Arg Glu Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Asp Ser Phe Leu Ile Trp1 5 10 15Cys21098421117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400984Thr Ser Glu Tyr Asp Asn Thr Thr Trp Tyr Glu Lys Phe Leu Ala Ser1 5 10 15Gln21098521117212PRT
213人工序列220
223IL-1拮抗肽400985Ser Gln Ile Pro Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Gln Ser Phe Leu Leu His1 5 10 15Gly21098621117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400986Ser Pro Phe Ile Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Asn Phe Leu Leu Thr1 5 10 15Tyr21098721117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400987Glu Gln Ile Tyr Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Asp His Phe Leu Leu Ser1 5 10 15Tyr21098821117212PRT213人工序列
220
223IL-1拮抗肽400988Thr Pro Phe Ile Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Asn Phe Leu Leu Thr1 5 10 15Tyr21098921117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400989Thr Tyr Thr Tyr Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Arg Phe Leu Met Ser1 5 10 15Tyr21099021117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400990Thr Met Thr Gln Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Asn Phe Leu Leu Ser1 5 10 15Tyr21099121117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽
400991Thr Ile Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Ala Asn Leu Val Gln Thr Tyr Pro1 5 10 15Gln21099221117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400992Thr Ile Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Arg Phe Leu Ala Gln Tyr Pro1 5 10 15Asp21099321117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400993His Ile Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Asn Phe Leu Leu Thr Tyr Thr1 5 10 15Pro21099421117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400994
Ser Gln Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Asn Phe Leu Leu Ser Tyr Lys1 5 10 15Ala21099521117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400995Gln Ile Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Arg Phe Leu Leu Gln Tyr Asn1 5 10 15Ala21099621117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400996Asn Gln Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Ser Phe Leu Leu Gln Tyr Asn1 5 10 15Thr21099721117212PRT213人工序列220
223Il-1拮抗肽400997Thr Ile Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Asn Phe Leu Leu Asn His Asn
1 5 10 15Leu21099821117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400998His Tyr Asp Asn Thr Ala Trp Tyr Glu Arg Phe Leu Gln Gln Gly Trp1 5 10 15His21099921121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽400999Glu Thr Pro Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu20210100021121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽4001000Tyr Ile Pro Phe Thr Trp Glu Glu Ser Asn Ala Tyr Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15
Tyr Ala Leu Pro Leu20210100121121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽4001001Asp Gly Tyr Asp Arg Trp Arg Gln Ser Gly Glu Arg Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu20210100221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1，Xaa＝磷酸酪氨酸220
221misc_feature222(2)..(2)223位置2，Xaa＝萘丙氨酸220
221misc_feature222(3)..(3)223位置3，Xaa＝磷酸酪氨酸220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，Xaa是氮雜環丁烷殘基。
4001002Xaa Xaa Xaa Gln Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10210100321121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽4001003Thr Ala Asn Val Ser Ser Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu20210100421115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001004Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 15210100521117212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽4001005Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu Ser1 5 10 15
Asp210100621115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001006Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 15210100721111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221mise_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001007Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 10210100821111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe
220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001008Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 10210100921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置1是乙醯化Phe位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001009Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 10210101021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001010
Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 10210101121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001011Phe Glu Trp Thr Pro Ala Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 10210101221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001012Phe Glu Trp Thr Pro Ala Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 10
210101321111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001013Phe Glu Trp Thr Pro Ala Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 10210101421115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001014Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 15210101521115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)
223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001015Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 15210101621115212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001016Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Xaa Tyr Ala Leu Pro Leu1 5 10 15210101721121212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽4001017Thr Ala Asn Val Ser Ser Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro1 5 10 15Tyr Ala Leu Pro Leu20210101821111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(10)..(10)
223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe4001018Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 10210101921111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001019Phe Glu Trp Thr Pro Gly Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 10210102021111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe
220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷4001020Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 10210102121111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，D胺基酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷.
4001021Phe Glu Trp Thr Pro Ala Tyr Trp Gln Xaa Tyr1 5 10210102221111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe
220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，D胺基酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷。
4001022Phe Glu Trp Thr Pro Ala Trp Tyr Gln Xaa Tyr1 5 10210102321111212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗肽220
221misc_feature222(1)..(1)223位置1是乙醯化Phe220
221misc_feature222(6)..(6)223位置6，D胺基酸殘基220
221misc_feature222(10)..(10)223位置10，Xaa＝氮雜環丁烷。
4001023Phe Glu Trp Thr Pro Ala Tyr Tyr Gln Xaa Tyr1 5 10210102421120
212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001024Gly Gly Leu Tyr Leu Cys Arg Phe Gly Pro Val Thr Trp Asp Cys Gly1 5 10 15Tyr Lys Gly Gly20210102521120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001025Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly20210102621120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001026Gly Gly Asp Tyr His Cys Arg Met Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Leu Gly Gly20210102721119212PRT213人工序列
220
223VEGF拮抗劑4001027Val Glu Pro Asn Cys Asp Ile His Val Met Trp Glu Trp Glu Cys Phe1 5 10 15Glu Arg Leu210102821110212PRT213人工序列220
223MMP抑制劑4001028Cys Thr Thr His Trp Gly Phe Thr Leu Cys1 5 10210102921120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001029Val Gly Asn Tyr Met Cys His Phe Gly Pro Ile Thr Trp Val Cys Arg1 5 10 15Pro Gly Gly Gly20210103021120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001030
Gly Gly Val Tyr Ala Cys Arg Met Gly Pro Ile Thr Trp Val Cys Ser1 5 10 15Pro Leu Gly Gly20210103121120212PRT213人工序列220
223VEGF-拮抗劑4001031Arg Gly Trp Val Glu Ile Cys Ala Ala Asp Asp Tyr Gly Arg Cys Leu1 5 10 15Thr Glu Ala Gln20210103221119212PRT213人工序列220
223TPO-模擬物220
221misc_feature222(1)..(1)223Fc區連接於N末端的位置14001032Gly Gly Gly Gly Gly Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala1 5 10 15Ala Arg Ala210103321119212PRT213人工序列220
223TPO-模擬物
220
221misc_feature222(19)..(19)223Fc區連接於C末端的位置194001033Ile Glu Gly Pro Thr Leu Arg Gln Trp Leu Ala Ala Arg Ala Gly Gly1 5 10 15Gly Gly Gly210103421125212PRT213人工序列220
223EPO-模擬物220
221misc_feature222(25)..(25)223Fc區連接於C末端的位置254001034Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly20 25210103521119212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001035Val Gly Asn Tyr Met Ala His Met Gly Pro Ile Thr Trp Val Cys Arg1 5 10 15Pro Gly Gly
210103621118212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001036Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln210103721120212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001037Gly Gly Leu Tyr Ala Cys His Met Gly Pro Met Thr Trp Val Cys Gln1 5 10 15Pro Leu Arg Gly20210103821122212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001038Thr Ile Ala Gln Tyr Ile Cys Tyr Met Gly Pro Glu Thr Trp Glu Cys1 5 10 15Arg Pro Ser Pro Lys Ala202101039
21113212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001039Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10210104021111212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001040Tyr Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys1 5 10210104121112212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽4001041Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10210104221111212PRT213人工序列220
223EPO-模擬肽220
221misc_feature222(1)..(1)223Xaa(位置1)可以是20種L-胺基酸中的任一種；只是Xaa(位置1)可以是/不是Y，並且當Xaa(位置1)是Y時，Xaa(位置1)可以是任何非天然存在的芳族酸類似物。
220
221misc_feature222(2)..(8)223Xaa(位置2、8)可以是20種L-胺基酸中的任一種220
221misc_feature222(3)..(3)223Xaa(位置3)可以是C、A、a-氨基-y-溴丁酸或Hoc；220
221misc_feature222(4)..(4)223Xaa(位置4)可以是R、H、L或W220
221misc_feature222(5)..(5)223Xaa(位置5)可以是M、F或I220
221misc_feature222(10)..(10)223Xaa是任何胺基酸220
221misc_feature222(11)..(11)223Xaa(位置11)可以是D、E、I、L或V220
221misc_feature222(12)..(12)223Xaa(位置12)可以是C、A、a-氨基-y-溴丁酸或Hoc，前提是任一個Xaa(位置3、12)是C或Hoc。
4001042Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Pro Xaa Thr Trp Xaa Xaa1 5 10
21010432115212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽220
221misc_feature222(3)..(4)223Xaa＝任何胺基酸4001043Asp Leu Xaa Xaa Leu1 5210104421112212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001044Arg Thr Asp Leu Asp Ser Leu Arg Thr Tyr Thr Leu1 5 10210104521120212PRT213人工序列220
223TNF-ALPHA抑制劑220
221misc_feature222(1)..(1)223Fc區連接於N末端的位置14001045Gly Gly Gly Gly Gly Asp Phe Leu Pro His Tyr Lys Asn Thr Ser Leu1 5 10 15Gly His Arg Pro20
210104621120212PRT213人工序列220
223TNF-α抑制劑220
221misc_feature222(20)..(20)223Fc區連接於C末端的位置204001046Asp Phe Leu Pro His Tyr Lys Asn Thr Ser Leu Gly His Arg Pro Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly20210104721120212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗劑220
221misc_feature222(1)..(1)223Fc區連接於N末端的位置14001047Gly Gly Gly Gly Gly Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr1 5 10 15Ala Leu Pro Leu20210104821120212PRT213人工序列220
223IL-1拮抗劑220
221misc_feature
222(20)..(20)223Fc區連接於C末端的位置204001048Phe Glu Trp Thr Pro Gly Tyr Trp Gln Pro Tyr Ala Leu Pro Leu Gly1 5 10 15Gly Gly Gly Gly20210104921124212PRT213人工序列220
223VEGF拮抗劑220
221misc_feature222(1)..(1)223Fc區連接於N末端的位置14001049Gly Gly Gly Gly Gly Val Glu Pro Asn Cys Asp Ile His Val Met Trp1 5 10 15Glu Trp Glu Cys Phe Glu Arg Leu20210105021124212PRT213人工序列220
223VEGF拮抗劑220
221misc_feature222(24)..(24)223Fc區連接於C末端的位置244001050Val Glu Pro Asn Cys Asp Ile His Val Met Trp Glu Trp Glu Cys Phe1 5 10 15Glu Arg Leu Gly Gly Gly Gly Gly
20210105121115212PRT213人工序列220
223MMP抑制劑220
221misc_feature222(1)..(1)223Fc區連接於N末端的位置14001051Gly Gly Gly Gly Gly Cys Thr Thr His Trp Gly Phe Thr Leu Cys1 5 10 15210105221115212PRT213人工序列220
223MMP抑制劑220
221misc_feature222(15)..(15)223Fc區連接於C末端的位置154001052Cys Thr Thr His Trp Gly Phe Thr Leu Cys Gly Gly Gly Gly Gly1 5 10 15210105321110212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001053Arg Thr Asp Leu Asp Ser Leu Arg Thr Tyr1 5 102101054
2119212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001054Arg Thr Asp Leu Asp Ser Leu Arg Thr1 52101055211757212DNA213人工序列220
223FC-TNF-α抑制劑220
221CDS222(4)..(747)223
4001055cat atg gac aaa act cac aca tgt cca cct tgt cca gct ccg gaa ctc 48Met Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu1 5 10 15ctg ggg gga ccg rca gtc ttc ctc ttc ccc cca aaa ccc aag gac acc 96Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr20 25 30ctc atg atc tcc cgg acc cct gag gtc aca tgc gtg gtg gtg gac gtg144Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val35 40 45agc cac gaa gac cct gag gtc aag ttc aac tgg tac gtg gac ggc gtg192Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asa Trp Tyr Val Asp Gly Val50 55 60gag gtg cat aat gcc aag aca aag ccg cgg gag gag cag tac aac agc240Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser65 70 75acg tac cgt gtg gtc agc gtc ctc acc gtc ctg cac cag gac tgg ctg288Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu80 85 90 95aat ggc aag gag tac aag tgc aag gtc tcc aac aaa gcc ctc cca gcc336Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala100 105 110ccc atc gag aaa acc atc tcc aaa gcc aaa ggg cag ccc cga gaa cca384
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro115 120 125cag gtg tac acc ctg ccc cca tcc cgg gat gag ctg acc aag aac cag432Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln130 135 140gtc agc ctg acc tgc ctg gtc aaa ggc ttc tat ccc agc gac atc gcc480Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala145 150 155gtg gag tgg gag agc aat ggg cag ccg gag aac aac tac aag acc acg528Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr160 165 170 175cct ccc gtg ctg gac tcc gac ggc tcc ttc ttc ctc tac agc aag ctc576Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu180 185 190acc gtg gac aag agc agg tgg cag cag ggg aac gtc ttc tca tgc tcc624Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser195 200 205gtg atg cat gag gct ctg cac aac cac tac acg cag aag agc ctc tcc672Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser210 215 220ctg tct ccg ggt aaa ggt gga ggt ggt ggt gac ttc ctg ccg cac tac720Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Gly Asp Phe Leu Pro His Tyr225 230 235aaa aac acc tct ctg ggt cac cgt ccg taatggatcc 757Lys Asn Thr Ser Leu Gly His Arg Pro240 2452101056211248212PRT213人工序列220
223FC-TNF-α抑制劑4001056Met Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu1 5 10 15Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu20 25 30Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser35 40 45
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu50 55 60Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr65 70 75 80Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn85 90 95Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro100 105 110Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln115 120 125Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val130 135 140Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val145 150 155 160Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro165 170 175Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr180 185 190Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val195 200 205Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu210 215 220Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Gly Asp Phe Leu Pro His Tyr Lys225 230 235 240Asn Thr Ser Leu Gly His Arg Pro2452101057211761
212DNA213人工序列220
223TNF-α抑制劑-Fc220
221CDS222(4)..(747)223
4001057cat atg gac ttc ctg ccg cac tac aaa aac acc tct ctg ggt cac cgt 48Met Asp Phe Leu Pro His Tyr Lys Asn Thr Ser Leu Gly His Arg1 5 10 15ccg ggt gga ggc ggt ggg gac aaa act cac aca tgt cca cct tgc cca 96Pro Gly Gly Gly Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro20 25 30gca cct gaa ctc ctg ggg gga ccg tca gtt ttc ctc ttc ccc cca aaa144Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys35 40 45ccc aag gac acc ctc atg atc tcc cgg acc cct gag gtc aca tgc gtg192Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val50 55 60gtg gtg gac gtg agc cac gaa gac cct gag gtc aag ttc aac tgg tac240Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr65 70 75gtg gac ggc gtg gag gtg cat aat gcc aag aca aag ccg cgg gag gag288Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu80 85 90 95cag tac aac agc acg tac cgt gtg gtc agc gtc ctc acc gtc ctg cac336Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His100 105 110cag gac tgg ctg aat ggc aag gag tac aag tgc aag gtc tcc aac aaa384Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys115 120 125gcc ctc cca gcc ccc atc gag aaa acc atc tcc aaa gcc aaa ggg cag432Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln130 135 140ccc cga gaa cca cag gtg tac acc ctg ccc cca tcc cgg gat gag ctg480Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu145 150 155acc aag aac cag gtc agc ctg acc tgc ctg gtc aaa ggc ttc tat ccc528Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro160 165 170 175
agc gac atc gcc gtg gag tgg gag agc aat ggg cag ccg gag aac aac576Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn180 185 190tac aag acc acg cct ccc gtg ctg gac tcc gac ggc tcc ttc ttc ctc624Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu195 200 205tac agc aag ctc acc gtg gac aag agc agg tgg cag cag ggg aac gtc672Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val210 215 220ttc tca tgc tcc gtg atg cat gag gct ctg cac aac cac tac acg cag720Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln225 230 235aag agc ctc tcc ctg tct ccg ggt aaa taatggatcc gcgg761Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys240 2452101058211248212PRT213人工序列220
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ctg ggg gga ccg tca gtc ttc ctc ttc ccc cca aaa ccc aag gac acc 96Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr20 25 30ctc atg atc tcc cgg acc cct gag gtc aca tgc gtg gtg gtg gac gtg144Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val35 40 45agc cac gaa gac cct gag gtc aag ttc aac tgg tac gtg gac ggc gtg192Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val50 55 60gag gtg cat aat gcc aag aca aag ccg cgg gag gag cag tac aac agc240Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser65 70 75acg tac cgt gtg gtc agc gtc ctc acc gtc ctg cac cag gac tgg ctg288Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu80 85 90 95aat ggc aag gag tac aag tgc aag gtc tcc aac aaa gcc ctc cca gcc336Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala100 105 110ccc atc gag aaa acc atc tcc aaa gcc aaa ggg cag ccc cga gaa cca384Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro115 120 125cag gtg tac acc ctg ccc cca tcc cgg gat gag ctg acc aag aac cag432Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln130 135 140gtc agc ctg acc tgc ctg gtc aaa ggc ttc tat ccc agc gac atc gcc480Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala145 150 155gtg gag tgg gag agc aat ggg cag ccg gag aac aac tac aag acc acg528Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr160 165 170 175cct ccc gtg ctg gac tcc gac ggc tcc ttc ttc ctc tac agc aag ctc576Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu180 185 190acc gtg gac aag agc agg tgg cag cag ggg aac gtc ttc tca tgc tcc624Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser195 200 205gtg atg cat gag gct ctg cac aac cac tac acg cag aag agc ctc tcc672Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser210 215 220ctg tct ccg ggt aaa ggt gga ggt ggt ggt tgc acc acc cac tgg ggt720Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Gly Cys Thr Thr His Trp Gly225 230 235
ttc acc ctg tgc taatggatcc ctcgag748Phe Thr Leu Cys2402101068211243212PRT213人工序列220
223Fc MMP抑制劑4001068Met Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu1 5 10 15Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu20 25 30Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser35 40 45His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu50 55 60Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr65 70 75 80Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn85 90 95Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro100 105 110Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln115 120 125Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val130 135 140Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val145 150 155 160
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro165 170 175Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr180 185 190Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val195 200 205Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu210 215 220Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Gly Cys Thr Thr His Trp Gly Phe225 230 235 240Thr Leu Cys2101069211763212DNA213人工序列220
223MMP抑制劑-Fc220
221CDS222(4)..(753)223
4001069cat atg tgc acc acc cac tgg ggt ttc acc ctg tgc ggt gga ggc ggt 48Met Cys Thr Thr His Trp Gly Phe Thr Leu Cys Gly Gly Gly Gly1 5 10 15ggg gac aaa ggt gga ggc ggt ggg gac aaa act cac aca tgt cca cct 96Gly Asp Lys Gly Gly Gly Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro20 25 30tgc cca gca cct gaa ctc ctg ggg gga ccg tca gtt ttc ctc ttc ccc144Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro35 40 45cca aaa ccc aag gac acc ctc atg atc tcc cgg acc cct gag gtc aca192Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr50 55 60tgc gtg gtg gtg gac gtg agc cac gaa gac cct gag gtc aag ttc aac240Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn
65 70 75tgg tac gtg gac ggc gtg gag gtg cat aat gcc aag aca aag ccg cgg288Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg80 85 90 95gag gag cag tac aac agc acg tac cgt gtg gtc agc gtc ctc acc gtc336Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val100 105 110ctg cac cag gac tgg ctg aat ggc aag gag tac aag tgc aag gtc tcc384Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser115 120 125aac aaa gcc ctc cca gcc ccc atc gag aaa acc atc tcc aaa gcc aaa432Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys130 135 140ggg cag ccc cga gaa cca cag gtg tac acc ctg ccc cca tcc cgg gat480Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp145 150 155gag ctg acc aag aac cag gtc agc ctg acc tgc ctg gtc aaa ggc ttc528Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe160 165 170 175tat ccc agc gac atc gcc gtg gag tgg gag agc aat ggg cag ccg gag576Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu180 185 190aac aac tac aag acc acg cct ccc gtg ctg gac tcc gac ggc tcc ttc624Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe195 200 205ttc ctc tac agc aag ctc acc gtg gac aag agc agg tgg cag cag ggg672Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly210 215 220aac gtc ttc tca tgc tcc gtg atg cat gag gct ctg cac aac cac tac720Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr225 230 235acg cag aag agc ctc tcc ctg tct ccg ggt aaa taatggatcc 763Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys240 245 2502101070211250212PRT213人工序列220
223MMP抑制劑-Fc4001070
Met Cys Thr Thr His Trp Gly Phe Thr Leu Cys Gly Gly Gly Gly Gly1 5 10 15Asp Lys Gly Gly Gly Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys20 25 30Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro35 40 45Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys50 55 60Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp65 70 75 80Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu85 90 95Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu100 105 110His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn115 120 125Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly130 135 140Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu145 150 155 160Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr165 170 175Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn180 185 190Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe195 200 205Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn210 215 220
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr225 230 235 240Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys245 250210107121113212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001071Cys Gly Arg Glu Cys Pro Arg Leu Cys Gln Ser Ser Cys1 5 10210107221113212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001072Cys Asn Gly Arg Cys Val Ser Gly Cys Ala Gly Arg Cys1 5 1021010732118212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001073Cys Leu Ser Gly Ser Leu Ser Cys1 521010742116212PRT213人工序列
220
223整聯蛋白結合肽4001074Asn Gly Arg Ala His Ala1 521010752115212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001075Cys Asn Gly Arg Cys1 521010762119212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001076Cys Asp Cys Arg Gly Asp Cys Phe Cys1 521010772117212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001077Cys Gly Ser Leu Val Arg Cys1 521010782118212PRT213人工序列
220
223整聯蛋白結合肽4001078Arg Thr Asp Leu Asp Ser Leu Arg1 5210107921112212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001079Gly Asp Leu Asp Leu Leu Lys Leu Arg Leu Thr Leu1 5 10210108021112212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001080Gly Asp Leu His Ser Leu Arg Gln Leu Leu Ser Arg1 5 10210108121112212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001081Arg Asp Asp Leu His Met Leu Arg Leu Gln Leu Trp1 5 10210108221112212PRT213人工序列
220
223整聯蛋白結合肽4001082Ser Ser Asp Leu His Ala Leu Lys Lys Arg Tyr Gly1 5 10210108321112212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001083Arg Gly Asp Leu Lys Gln Leu Ser Glu Leu Thr Trp1 5 10210108421112212PRT213人工序列220
223整聯蛋白結合肽4001084Arg Gly Asp Leu Ala Ala Leu Ser Ala Pro Pro Val1 5 10210108521120212PRT213人工序列220
223VEGF拮抗劑4001085Arg Gly Trp Val Glu Ile Cys Val Ala Asp Asp Asn Gly Met Cys Val1 5 10 15Thr Glu Ala Gln202101086
21119212PRT213人工序列220
223VEGF拮抗劑4001086Gly Trp Asp Glu Cys Asp Val Ala Arg Met Trp Glu Trp Glu Cys Phe1 5 10 15Ala Gly Val210108721116212PRT213人工序列220
223VEGF拮抗劑4001087Arg Gly Trp Val Glu Ile Cys Glu Ser Asp Val Trp Gly Arg Cys Leu1 5 10 15210108821116212PRT213人工序列220
223VEGF拮抗劑4001088Arg Gly Trp Val Glu Ile Cys Glu Ser Asp Val Trp Gly Arg Cys Leu1 5 10 15210108921119212PRT213人工序列220
223VEGF拮抗劑4001089Gly Gly Asn Glu Cys Asp Ile Ala Arg Met Trp Glu Trp Glu Cys Phe
1 5 10 15Glu Arg Leu210109021116212PRT213人工序列220
223VEGF拮抗劑4001090Arg Gly Trp Val Glu Ile Cys Ala Ala Asp Asp Tyr Gly Arg Cys Leu1 5 10 1521010912118212PRT213人工序列220
223MMP抑制劑220
221misc_feature222(6)..(6)223Xaa＝任何胺基酸4001091Cys Leu Arg Ser Gly Xaa Gly Cys1 5210109221110212PRT213人工序列220
223MMP抑制劑220
221misc_feature222(2、3、8)..(9)223Xaa＝任何胺基酸.
4001092Cys Xaa Xaa His Trp Gly Phe Xaa Xaa Cys
1 5 1021010932115212PRT213人工序列220
223MMP抑制劑220
221misc_feature222(2)..(4)223Xaa＝任何胺基酸4001093Cys Xaa Pro Xaa Cys1 5210109421110212PRT213人工序列220
223MMP抑制劑4001094Cys Arg Arg His Trp Gly Phe Glu Phe Cys1 5 10210109521110212PRT213人工序列220
223MMP抑制劑4001095Ser Thr Thr His Trp Gly Phe Thr Leu Ser1 5 10210109621110212PRT213人工序列220
223CTLA4-模擬肽4001096Cys Ser Leu His Trp Gly Phe Trp Trp Cys1 5 10210109721115212PRT213人工序列220
223糖類(GD1α)模擬肽4001097Trp His Trp Arg His Arg Ile Pro Leu Gln Leu Ala Ala Gly Arg1 5 10 1521010982116212PRT213人工序列220
223β2GPI AB結合肽4001098Leu Lys Thr Pro Arg Val1 521010992118212PRT213人工序列220
223β2GPI AB結合肽4001099Asn Thr Leu Lys Thr Pro Arg Val1 5210110021111212PRT213人工序列220
223β2GPI AB結合肽4001100Asn Thr Leu Lys Thr Pro Arg Val Gly Gly Cys1 5 1021011012116212PRT213人工序列220
223β2GPI AB結合肽4001101Lys Asp Lys Ala Thr Phe1 5210110221110212PRT213人工序列220
223β2GPI AB結合肽4001102Lys Asp Lys Ala Thr Phe Gly Cys His Asp1 5 10210110321112212PRT213人工序列220
223β2GPI AB結合肽4001103Lys Asp Lys Ala Thr Phe Gly Cys His Asp Gly Cys1 5 1021011042116212PRT213人工序列220
223β2GPI AB結合肽4001104Thr Leu Arg Val Tyr Lys1 521011052119212PRT213人工序列220
223β2GPI AB結合肽4001105Ala Thr Leu Arg Val Tyr Lys Gly Gly1 5210110621110212PRT213人工序列220
223β2GPI AB結合肽4001106Cys Ala Thr Leu Arg Val Tyr Lys Gly Gly1 5 10210110721114212PRT213人工序列220
223膜轉運肽4001107Ile Asn Leu Lys Ala Leu Ala Ala Leu Ala Lys Lys Ile Leu1 5 10210110821112212PRT213人工序列220
223膜轉運肽4001108Gly Trp Thr Leu Asn Ser Ala Gly Tyr Leu Leu Gly1 5 10210110921127212PRT213人工序列220
223膜轉運肽4001109Gly Trp Thr Leu Asn Ser Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Lys Ile Asn Leu1 5 10 15Lys Ala Leu Ala Ala Leu Ala Lys Lys Ile Leu20 25210111021157212DNA213人工序列220
223Fc VEGF拮抗劑4001110gttgaaccga actgtgacat ccatgttatg tgggaatggg aatgttttga acgtctg57210111121157212DNA213人工序列220
223Fc VEGF拮抗劑4001111cagacgttca aaacattccc attcccacat aacatggatg tcacagttcg gttcaac57210111221181212DNA213人工序列220
223Fc-TNA-ALPHA抑制劑4001112ccgcggatcc attacggacg gtgacccaga gaggtgtttt tgtagtgcgg caggaagtca 60ccaccacctc cacctttacc c 81210111321157212DNA213人工序列220
223Fc VEGF拮抗劑220
221CDS222(1)..(57)223
4001113gtt gaa ccg aac tgt gac atc cat gtt atg tgg gaa tgg gaa tgt ttt48Val Glu Pro Asn Cys Asp Ile His Val Met Trp Glu Trp Glu Cys Phe1 5 10 15gaa cgt ctg57Glu Arg Leu210111421119212PRT213人工序列220
223Fc VEGF拮抗劑4001114Val Glu Pro Asn Cys Asp Ile His Val Met Trp Glu Trp Glu Cys Phe1 5 10 15Glu Arg Leu210111521166212DNA213人工序列220
223Fc MMP抑制劑
4001115ccgcggatcc attagcacag ggtgaaaccc cagtgggtgg tgcaaccacc acctccacct60ttaccc 66210111621163212DNA213人工序列220
223MMP抑制劑Fc4001116gaataacata tgtgcaccac ccactggggt ttcaccctgt gcggtggagg cggtggggac60aaa 63210111721181212DNA213人工序列220
223TNF-ALPHA抑制劑Fc4001117gaataacata tggacttcct gccgcactac aaaaacacct ctctgggtca ccgtccgggt60ggaggcggtg gggacaaaac t 81210111821181212DNA213人工序列220
223Fc IL-1拮抗劑4001118ccgcggatcc attacagcgg cagagcgtac ggctgccagt aacccggggt ccattcgaaa60ccaccacctc cacctttacc c 81210111921181212DNA213人工序列220
223IL-1拮抗劑Fc
4001119gaataacata tgttcgaatg gaccccgggt tactggcagc cgtacgctct gccgctgggt60ggaggcggtg gggacaaaac t 81210112021148212DNA213人工序列220
223Fc VEGF拮抗劑4001120atttgattct agaaggagga ataacatatg gacaaaactc acacatgt 48210112121151212DNA213人工序列220
223Fc VEGF拮抗劑4001121gtcacagttc ggttcaacac caccaccacc acctttaccc ggagacaggg a 51210112221154212DNA213人工序列220
223Fc VEGF拮抗劑4001122tccctgtctc cgggtaaagg tggtggtggt ggtgttgaac cgaactgtga catc 54210112321139212DNA213人工序列220
223Fc VEGF拮抗劑4001123ccgcggatcc tcgagttaca gacgttcaaa acattccca 392101124
21148212DNA213人工序列220
223VEGF拮抗劑Fc4001124atttgattct agaaggagga ataacatatg gttgaaccga actgtgac 48210112521151212DNA213人工序列220
223VEGF拮抗劑Fc220
221misc_feature222(2)..(2)223位置2，Xaa是L-lys、D-lys或鳥氨醯殘基220
221misc_feature222(3)..(3)223位置3，Xaa是L-tyr、D-ytr、phe、trp或對氨基苯丙氨醯殘基220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，Xaa是疏水脂族胺基酸殘基220
221misc_feature222(4)..(4)223位置4，任選地連接於leu、正亮氨醯、D-ala、Asn-Ser、asn-ser-ile、asn-ser-tyr、asn-ser-ile-leu、asn-ser-tyr-leu或asn-ser-tyr-leu-asn4001125acatgtgtga gttttgtcac caccaccacc acccagacgt tcaaaacatt c 51210112621151212DNA213人工序列
220
223VEGF拮抗劑Fc4001126gaatgttttg aacgtctggg tggtggtggt ggtgacaaaa ctcacacatg t 51210112721139212DNA213人工序列220
223VEGF拮抗劑Fc4001127ccgcggatcc tcgagttatt tacccggaga cagggagag39
權利要求
1.下式物質及其多聚體的組合物(X1)a-F1-(X2)b其中F1是Fc區；X1和X2分別獨立地選自-(L1)c-P1、-(L1)c-P1-(L2)d-P2、-(L1)c-P1-(L2)d-P2-(L3)e-P3和-(L1)c-P1-(L2)d-P2-(L3)e-P3-(L4)f-P4，P1、P2、P3和P4分別獨立地為隨機化的EPO模擬肽的序列；L1、L2、L3和L4分別獨立地為接頭；而a、b、c、d、e和f分別獨立地為0或1，前提是a和b中至少一個為1，其中肽指的是2至40個胺基酸的分子，並且X1或X2都不是天然蛋白。
2.權利要求1的下式物質的組合物X1-F1或F1-X2。
3.權利要求1的下式物質的組合物F1-(L1)c-P1。
4.權利要求1的下式物質的組合物F1-(L1)c-P1-(L2)d-P2。
5.權利要求1的物質的組合物，其中F1為IgG Fc區。
6.權利要求1的物質的組合物，其中F1為IgG1 Fc區。
7.權利要求1的物質的組合物，其中F1包含SEQ ID NO2的序列。
8.編碼權利要求1的物質組合物的DNA。
9.包含權利要求8的DNA的表達載體。
10.包含權利要求9的表達載體的宿主細胞。
11.權利要求10的細胞，其中所述細胞為大腸桿菌細胞。
12.製備EPO模擬化合物的方法，所述方法包括a)選擇至少一種隨機化的EPO模擬肽；並且b)製備EPO模擬化合物，其包含共價連接於一種或多種所述選定肽的至少一種胺基酸序列的至少一個Fc區。
13.權利要求12的方法，其中所述肽的選擇方法包括篩選噬菌體展示文庫、大腸桿菌展示文庫、核糖體文庫或化學肽文庫。
14.權利要求12的方法，其中所述Fc區是IgG Fc區。
15.權利要求12的方法，其中所述載體是IgG1 Fc區。
16.權利要求12的方法，其中所述載體包含SEQ ID NO2的序列。
17.權利要求12的方法，其中所述製備的化合物具有下式或其多聚體(X1)a-F1-(X2)b其中F1是Fc區；X1和X2分別獨立地選自-(L1)c-P1、-(L1)c-P1-(L2)d-P2、-(L1)c-P1-(L2)d-P2-(L3)e-P3和-(L1)c-P1-(L2)d-P2-(L3)e-P3-(L4)f-P4，P1、P2、P3和P4分別獨立地為藥理學活性肽的序列；L1、L2、L3和L4分別獨立地為接頭；而a、b、c、d、e和f分別獨立地為0或1，前提是a和b中至少一個為1。
18.權利要求17的方法，其中所述製備的化合物具有下式X1-F1或F1-X2。
19.權利要求17的方法，其中所述製備的化合物具有下式F1-(L1)c-P1或F1-(L1)c-P1-(L2)d-P2。
20.權利要求17的方法，其中F1為IgG Fc區。
21.權利要求17的方法，其中F1為IgG1 Fc區。
22.權利要求17的方法，其中F1包含SEQ ID NO2的序列。
全文摘要
本發明涉及Fc區與生物活性肽的融合體和採用生物活性肽製備藥物的方法。在本發明中，通過包括以下步驟的方法製備藥理學活性化合物a)選擇至少一種調節目的蛋白活性的肽；和b)製備一種藥理學因子，其包含共價連接於所述選定肽的至少一個胺基酸的至少一個Fc區。與載體的連接增加所述肽的半壽期，所述肽在其它情況下可能在體內快速降解。優選的載體是Fc區。所述肽最好通過噬菌體展示、大腸桿菌展示、核糖體展示、RNA－肽篩選或化學－肽篩選進行選擇。
文檔編號C07K14/505GK1746189SQ20051008369
公開日2006年3月15日 申請日期1999年10月25日 優先權日1998年10月23日
發明者U·菲格, C·-F·劉, J·徹塔姆, T·C·波尼 申請人:安姆根有限公司