一種清真牛羊肉生物毒素檢測方法與流程
2023-10-31 12:36:57
本發明屬於食品檢測技術領域,涉及一種食品檢測方法,具體是一種清真牛羊肉生物毒素檢測方法。
背景技術:
生物毒素是由動物、植物、微生物等在一定條件下產生的對其他生物物種有毒害並不可複製的化學物質,是一類重要的天然汙染物。生物毒素又稱天然毒素,種類繁多,分布廣泛.已知化學結構的生物毒素有數千種,依據來源把生物毒素分為細菌毒素、真菌毒素、藻毒素、動物毒素、植物毒素等。生物毒素能夠引起人和動物的急性中毒、致癌、致畸或致突變。
中國是牛羊肉生產大國,隨著城鄉居民的肉類消費結構的變化,牛羊肉消費量不斷提高,牛羊肉消費在肉類消費結構中所佔的比重總體也在提高,上市供應的牛羊肉生物毒素控制環節薄弱,牛羊肉的生物毒素汙染比較普遍。
要從根本上解決這類食品安全問題,就必須對牛羊肉的生物毒素進行檢測,而目前傳統的生物毒素檢測方法主要包括高效液相色譜、質譜和免疫學檢測法等,大多需要依賴抗體,檢測設備昂貴、操作繁瑣且非常耗時,很難滿足對現代食品安全檢測技術快速、靈敏、便捷的要求,目前,急需建立了一種快速、準確、靈敏、便捷的新型檢測方法用於生物毒素檢測。
技術實現要素:
本發明的目的在於提供一種清真牛羊肉生物毒素檢測方法。
本發明的目的可以通過以下技術方案實現:
一種清真牛羊肉生物毒素檢測方法,該檢測方法包括下述步驟:
製備待測溶液:取20g牛羊肉絞碎形成肉糜液,加入純化水5ml混合攪拌,1000rpm離心10min;取上清液於無菌離心管中,1000rpm離心10min,棄上清液;沉澱用540μL無菌蛋白腖水懸浮,製得待測溶液;
製備檢測溶液:將摩爾比為1:5-1:20的羅丹明B與水合肼混合,持續在80℃的條件下加熱回流8-10小時,待到紅色消失,蒸發溶劑,得到N-氨基-羅丹明醯胺,然後將與羅丹明B等摩爾的苯甲醛溶於乙醇,在100℃的條件下加熱反應10分鐘,反應後冷卻至室溫,得到檢測溶液;
向檢測溶液中加入待測溶液,以二重蒸餾水補足到3mL,顯色15分鐘後測定,對反應體系進行螢光掃描測定生物毒素。
本發明的有益效果:本發明通過檢測溶液與牛羊肉中生物毒素在較短的時間內反應,從而達到快速檢測的目的,提高了檢測的準確性,將檢測時間大幅縮短,滿足對牛羊肉的快速檢測。
具體實施方式
下面將結合實施例對本發明的技術方案進行清楚、完整地描述,顯然,所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例,而不是全部的實施例。基於本發明中的實施例,本領域普通技術人員在沒有作出創造性勞動前提下所獲得的所有其它實施例,都屬於本發明保護的範圍。
實施例1
一種清真牛羊肉生物毒素檢測方法,該檢測方法包括下述步驟:
首先,製備待測溶液:取20g牛羊肉絞碎形成肉糜液,加入純化水5ml混合攪拌,1000rpm離心10min;取上清液於無菌離心管中,1000rpm離心10min,棄上清液;沉澱用540μL無菌蛋白腖水懸浮,製得待測溶液;
其次,製備檢測溶液:將摩爾比為1:5的羅丹明B與水合肼混合,持續在80℃的條件下加熱回流10小時,待到紅色消失,蒸發溶劑,得到N-氨基-羅丹明醯胺,然後將與羅丹明B等摩爾的苯甲醛溶於乙醇,在100℃的條件下加熱反應10分鐘,反應後冷卻至室溫,得到檢測溶液;
最後,向2ml(0.5μmol)檢測溶液中加入20mL、40mL的待測溶液,以二重蒸餾水補足到3mL,顯色15分鐘後測定,對系列反應體系進行螢光掃描測定,得出在激發光波長365nm,發射波長在590nm處相應最強。
實施例2
一種清真牛羊肉生物毒素檢測方法,該檢測方法包括下述步驟:
首先,製備待測溶液:取15g牛羊肉絞碎形成肉糜液,加入純化水6ml混合攪拌,1500rpm離心10min;取上清液於無菌離心管中,1000rpm離心10min,棄上清液;沉澱用540μL無菌蛋白腖水懸浮,製得待測溶液;
其次,製備檢測溶液:將摩爾比為1:20的羅丹明B與水合肼混合,持續在80℃的條件下加熱回流8小時,待到紅色消失,蒸發溶劑,得到N-氨基-羅丹明醯胺,然後將與羅丹明B等摩爾的苯甲醛溶於乙醇,在100℃的條件下加熱反應10分鐘,反應後冷卻至室溫,得到檢測溶液;
最後,向2ml(0.5μmol)檢測溶液中加入80mL、160mL的待測溶液,以二重蒸餾水補足到3mL,顯色15分鐘後測定,對系列反應體系進行螢光掃描測定,得出在激發光波長365nm,發射波長在590nm處相應最強。
實施例3
一種清真牛羊肉生物毒素檢測方法,該檢測方法包括下述步驟:
首先,製備待測溶液:取15g牛羊肉絞碎形成肉糜液,加入純化水5ml混合攪拌,1000rpm離心10min;取上清液於無菌離心管中,1000rpm離心10min,棄上清液;沉澱用520μL無菌蛋白腖水懸浮,製得待測溶液;
其次,製備檢測溶液:將摩爾比為1:10的羅丹明B與水合肼混合,持續在80℃的條件下加熱回流9小時,待到紅色消失,蒸發溶劑,得到N-氨基-羅丹明醯胺,然後將與羅丹明B等摩爾的苯甲醛溶於乙醇,在100℃的條件下加熱反應10分鐘,反應後冷卻至室溫,得到檢測溶液;
最後,向2ml檢測溶液中加入320mL、640mL的待測溶液,以二重蒸餾水補足到3mL,顯色19分鐘後測定,對系列反應體系進行螢光掃描測定,得出在激發光波長365nm,發射波長在590nm處相應最強。
以上內容僅僅是對本發明所作的舉例和說明,所屬本技術領域的技術人員對所描述的具體實施例做各種各樣的修改或補充或採用類似的方式替代,只要不偏離發明或者超越本權利要求書所定義的範圍,均應屬於本發明的保護範圍。