尿酸的檢測試劑及尿酸的檢測試紙的製作方法

2023-10-11 23:27:59 2

本發明涉及尿酸檢測的技術領域，具體而言，涉及尿酸的檢測試劑及尿酸的檢測試紙。

背景技術：

目前，用於檢測血液中是否存在某種成分或該成分的含量的方法包括液體試劑檢測和幹化學試紙檢測。幹化學試紙具有使用方便、操作簡單、快速出結果的特點。

根據檢測液體樣本在幹化學試紙上的流動路程，可以將幹化學試紙分為多種類型，縱向垂直檢測試紙是幹化學試紙的一種。縱向垂直檢測試紙包括將帶有反應試劑的載體相互疊加在一起，液體樣本自上而下的流經各個反應試劑層，最終顯示檢測結果。例如美國專利US4816224採用縱向垂直檢測試紙的方法。

縱向垂直檢測試紙其反應試劑載體的面積都較小，因此只需要較少的液體樣本用量就可以完成檢測。因為個體差異，在指尖採血的過程中，採集的樣本量是很難控制的，例如，歐美人的指尖採血量往往會比亞洲人多。而反應試劑載體對液體的吸收有一定的飽和度，當滴加在試紙上的血樣過多時，現有的幹化學檢測試紙沒辦法及時處理多餘的血樣。如現有技術中的縱向垂直檢測試紙，該試紙包括：底板粘附並支撐著反應層，反應層上覆蓋有樣本分離層、玻纖層和網格層。當液體滴加到網格層後垂直流經玻纖和樣本分離層，最終達到反應層發生化學反應。若加入的血液樣本量較多，達到液體飽和的反應層不能再吸收多餘的樣本時，這些多餘的血樣就會溢出檢測試紙，汙染環境或者接觸到檢測者。多餘的血液還會聚集在反應試劑層上形成液滴，不僅影響光學等檢測儀器對結果的判讀，還會嚴重的汙染檢測儀器。

專利CN 102128918A採用了一種鎖液結構，此結構試紙包括：底板上粘附並支撐著反應層，在反應層相對於底板的另一側覆蓋有加樣層，加樣層上有一加樣口。反應層沿著底板方向的至少一側搭接著鎖液部件，鎖液部件被固定在底板上。在底板相對於反應層處有一用於讀取反應結果的檢測窗。所有結構通過粘合片更牢固的固定他們之間的位置。當液體樣本加到加樣層時，先垂直流入反應層並被反應層所吸收。當反應層液體飽和時，液體通過橫向測流的方式擴散到與反應層搭接的鎖液部件中。由於鎖液部件吸收液體的速度小於或等於反應層的吸收液體速度，所以當多餘液體擴散到鎖液部件時，反應層上的液體已經足夠進行相關的檢測反應，從而並不影響檢測反應所需的有效用量。當加入過量的樣本時，多餘的樣本被鎖液部件所吸收，因此多餘的樣本不會形成液滴溢出試紙之外。但此種鎖液結構工藝複雜，要求鎖液部件吸收液體的速度小於或等於反應層吸收液體的速度，對鎖液部件的材料要求較高，且在試紙生產工藝上增加了工序，使試紙生產工藝更為複雜。

另外，以上現有技術中，檢測準確度有待提高，檢測不夠快速。

技術實現要素：

有鑑於此，本發明一方面在於提供一種尿酸的檢測試劑及尿酸的檢測試紙，該檢測試紙可快速檢測尿酸的含量，具有操作簡單、檢測快速、檢測準確度較高和方便測試的優點。

一種尿酸的檢測試劑，其包含12～18KU/L的脲酸氧化酶、5～10KU/L的辣根過氧化物酶、15～20KU/L的抗壞血酸氧化酶、0.20～0.35g/L的4-氨基安替比林和0.20～0.30g/L顯色物質。

進一步地，所述檢測試劑還包含0.15～0.25mmol/L且pH為6.0～8.0的PBS緩衝液。

進一步地，所述檢測試劑還包含1.0～1.3g/L海藻糖和0.15～0.35g/L的牛血清白蛋白；

進一步地，所述顯色物質為TOOS、TODB、DAOS、MOAS、酚類、TMB中的一種或多種。

進一步地，包括反應基層、設置於所述反應基層一表面的反應層、設置於反應層一表面的濾血層，和設置於所述濾血層一表面的親水層；所述反應基層設有通孔；所述反應層覆蓋所述通孔，所述反應層由上述任意一項所述的檢測試劑塗覆在膜材料上所形成。

進一步地，所述反應基層的材質為聚氯乙烯、聚碳酸酯、聚醯胺酯或聚酯。

進一步地，所述反應基層與反應層之間設有一雙面膠。

進一步地，所述親水層和濾血層之間設有一雙面膠。

進一步地，所述親水層為親水膜或網紗。

進一步地，所述反應基層與反應層之間的雙面膠設有與所述通孔對應的孔。

與現有技術相比，本發明的尿酸的檢測試劑及尿酸的檢測試紙的有益效果是：

本發明尿酸的檢測試劑，其含有多種特定酶進行特定配比，能達到快速和較為準確檢測尿酸的含量的目的。本發明尿酸的檢測試紙包括反應基層、反應層、濾血層和吸樣層，這些層疊加構成一個虹吸體系，抗幹擾能力更強，有效的消除了內源性物質的幹擾，進一步保證了快速和較為準確檢測尿酸的含量。

附圖說明

圖1為本發明實施例檢測試紙的分解結構示意圖。

主要元件符號說明：

1 檢測試紙

100 反應基層

110 通孔

200，500 雙面膠

210 孔

300 反應層

310 檢測試劑

320 膜材料

400 濾血層

600 親水層

具體實施方式

除非另有限定，本文使用的所有技術以及科學術語具有與本發明所屬領域普通技術人員通常理解的相同的含義。當存在矛盾時，以本說明書中的定義為準。

如本文所用之術語：

「由……製備」與「包含」同義。本文中所用的術語「包含」、「包括」、「具有」、「含有」或其任何其它變形，意在覆蓋非排它性的包括。例如，包含所列要素的組合物、步驟、方法、製品或裝置不必僅限於那些要素，而是可以包括未明確列出的其它要素或此種組合物、步驟、方法、製品或裝置所固有的要素。

連接詞「由……組成」排除任何未指出的要素、步驟或組分。如果用於權利要求中，此短語將使權利要求為封閉式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但與其相關的常規雜質除外。當短語「由……組成」出現在權利要求主體的子句中而不是緊接在主題之後時，其僅限定在該子句中描述的要素；其它要素並不被排除在作為整體的所述權利要求之外。

當量、濃度、或者其它值或參數以範圍、優選範圍、或一系列上限優選值和下限優選值限定的範圍表示時，這應當被理解為具體公開了由任何範圍上限或優選值與任何範圍下限或優選值的任一配對所形成的所有範圍，而不論該範圍是否單獨公開了。例如，當公開了範圍「1～5」時，所描述的範圍應被解釋為包括範圍「1～4」、「1～3」、「1～2」、「1～2和4～5」、「1～3和5」等。當數值範圍在本文中被描述時，除非另外說明，否則該範圍意圖包括其端值和在該範圍內的所有整數和分數。

「質量份」指表示多個組分的質量比例關係的基本計量單位，1份可表示任意的單位質量，如可以表示為1g，也可表示2.689g等。假如我們說A組分的質量份為a份，B組分的質量份為b份，則表示A組分的質量和B組分的質量之比a：b。或者，表示A組分的質量為aK，B組分的質量為bK(K為任意數，表示倍數因子)。不可誤解的是，與質量分數不同的是，所有組分的質量份之和並不受限於100份之限制。

「和/或」用於表示所說明的情況的一者或兩者均可能發生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)；

此外，本發明要素或組分前的不定冠詞「一種」和「一個」對要素或組分的數量要求(即出現次數)無限制性。因此「一個」或「一種」應被解讀為包括一個或至少一個，並且單數形式的要素或組分也包括複數形式，除非所述數量明顯旨指單數形式。

本發明尿酸的檢測試劑52，其包含一種尿酸的檢測試劑，其包含12～18KU/L的脲酸氧化酶、5～10KU/L的辣根過氧化物酶、15～20KU/L的抗壞血酸氧化酶、0.20～0.35g/L的4-氨基安替比林和0.20～0.30g/L顯色物質。

具體地，脲酸氧化酶(又稱為過氧化物酶)的含量可以列舉為12KU/L、13KU/L、14KU/L、15KU/L、16KU/L、17KU/L或18KU/L等；辣根過氧化物酶(又稱為尿酸酶)的含量可以列舉為5KU/L、6KU/L、7KU/L、8KU/L、9KU/L或10KU/L等；抗壞血酸氧化酶的含量可以列舉為15KU/L、16KU/L、17KU/L、18KU/L、19KU/L或20KU/L等；4-氨基安替比林的含量可以為0.20g/L、0.22g/L、0.25g/L、0.28g/L、0.30g/L、0.33g/L或0.35g/L等；顯色物質的含量可以為0.20g/L、.022g/L、0.25g/L、0.28g/L、0.29g/L或0.30g/L等。

其中，顯色物質可以列舉出TOOS、TODB、DAOS、MOAS、酚類、TMB中的一種或多種。這裡，TOOS即N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽，其CAS號為82692-93-1；TODB即N,N-雙(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二鈉鹽，其CAS號為127544-88-1；DAOS即N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3'5-二甲氧基苯胺鈉鹽，其CAS號為83777-30-4；TMB即3,3',5,5'-四甲基聯苯胺，其CAS號為54827-17-7；酚類即酚類顯色劑。

優選地，本發明尿酸的檢測試劑310，除了可以包含上述原料，還可以包含PBS緩衝液，以維持體系的pH穩定性。PBS緩衝液的含量以0.15～0.25mmol/L為佳，如0.15mmol/L、0.18mmol/L、0.20mmol/L、0.22mmol/L、0.24mmol/L或0.25mmol/L等，優選為0.20mmol/L等。

PBS緩衝液的pH較好地為6.0～8.0，如6.0、6.2、6.5、7、7.5、7.8或8.0等。

優選地，本發明尿酸的檢測試劑310，除了可以包含上述原料，還可以包含1.0～1.3g/L的海藻糖，例如海藻糖的含量可以為1.0g/L、1.1g/L、1.2g/L或1.3g/L等。

優選地，本發明尿酸的檢測試劑310，除了可以包含上述原料，還可以包含0.15～0.35g/L牛血清白蛋白(BSA)，如0.15g/L、0.18g/L、0.20g/L、0.22g/L、0.25g/L、0.28g/L、0.30g/L、0.33g/L或0.35mmol/L等，優選為0.20g/L等。牛血清白蛋白，其又稱第五組分，是牛血清中的一種白蛋白，包含583個胺基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點為4.7，在本發明中主要起維持體系的滲透壓作用、PH緩衝作用、載體作用和營養作用。

本發明的尿酸的檢測試紙1，包括反應基層100、設置於所述反應基層100一表面的反應層300、設置於反應層300的一表面的濾血層500，和設置於所述濾血層500一表面的親水層600；所述反應基層100設有通孔110；所述反應層300覆蓋所述通孔110，所述反應層300由上述任意一項所述的檢測試劑310塗覆在膜材料320上所形成。

需要理解的是，上述反應基層100的作用是支撐整個檢測試紙1。反應基層100的材質可列舉為聚氯乙烯(PVC)、聚碳酸酯(PC)、聚醯胺酯(PA)或聚酯(PBT和PET的統稱)，優選為聚酯，進一步優選為PET基板。

反應基層100的形式可以為薄膜或薄板，反應基層100上設有通孔110，以作為光反射檢測之用。

優選地，反應層300與反應基層100之間可設置一雙面膠200。該雙面膠200的面積可以小於反應基層100，可大於反應層300。反應層300通過雙面膠200粘結在所述反應基層100上，反應層300與反應基層100的粘結處避開通孔110。該雙面膠200也可以設置與所述通孔對應的孔210。

所述膜材料320可列舉為聚丙烯纖維素膜或、乙烯纖維膜硝酸纖維素膜、尼龍膜、羧化纖維素膜或純纖維素膜中的一種。較佳地，膜材料320為聚丙烯纖維素膜或聚乙烯纖維膜。所述膜材料的表面用來滴附上述檢測試劑310。

作為本發明的檢測試紙1，濾血層400的形式可以為薄膜。濾血層400的面積可大於反應層，這樣濾血層400覆蓋在反應層300上時其兩端粘貼在雙面膠200。濾血層400的面積可小於粘合其的雙面膠200的大小。

優選地，親水層600和濾血層400之間可以設有一雙面膠500。該雙面膠可以為U型雙面膠或方形雙面膠，並分別粘貼在濾血層400的上下兩端。需要說明的是，親水層600和雙面膠400的U型口構建的虹吸槽到達濾血層400。

優選地，親水層600可以為親水膜或網紗。

以上未述及之處適用於現有技術。

實施例1

一種尿酸的檢測試紙1，其製作方法包括以下步驟：

步驟一、在一定的硬度的PET材質的反應基層100貼上雙面膠200打通孔110後備用。

步驟二、撕掉反應基層100上雙面膠200的油紙，將膜材料320粘貼在PET板的雙面膠200上，膜材料320需要完全覆蓋住PET基板上的通孔110。

步驟三、先配製檢測試劑310：包含12KU/L的脲酸氧化酶、10KU/L的辣根過氧化物酶、15KU/L的抗壞血酸氧化酶、0.20g/L的4-氨基安替比林、0.15mmol/L的PBS緩衝液、1.0g/L的海藻糖、0.35g/L BSA和0.30g/L顯色物質。將配製好的檢測試劑310用點膠機滴加到膜材料320對應通孔110處，每孔滴加量為6mg，滴完液的膜板放入烘道乾燥，乾燥溫度：37℃，乾燥時間20min，得反應層300。

步驟四、在反應層300上貼上濾血膜，並將濾血膜完全覆蓋住反應層300。

步驟五、再在濾血膜上圍繞通孔110貼上U型雙面膠，利用虹吸原理，用U型雙面膠和親水層600(親水膜或網紗)組成一個微量吸樣裝置，可以固定吸樣的量。

實施例2

本實施例尿酸的檢測試紙1的製作方法中，檢測試劑310包含14KU/L的脲酸氧化酶、9KU/L的辣根過氧化物酶、16KU/L的抗壞血酸氧化酶、0.25g/L的4-氨基安替比林、0.18mmol/L的PBS緩衝液、1.1g/L的海藻糖、0.33g/L BSA和0.28g/L顯色物質。其它步驟均同實施例1。

實施例3

本實施例尿酸的檢測試紙1的製作方法中，檢測試劑310包含15KU/L的脲酸氧化酶、8KU/L的辣根過氧化物酶、18KU/L的抗壞血酸氧化酶、0.28g/L的4-氨基安替比林、0.19mmol/L的PBS緩衝液、1.2g/L的海藻糖、0.30g/L BSA和0.25g/L顯色物質。其它步驟均同實施例1。

實施例4

本實施例尿酸的檢測試紙1的製作方法中，檢測試劑310包含16KU/L的脲酸氧化酶、6KU/L的辣根過氧化物酶、19KU/L的抗壞血酸氧化酶、0.30g/L的4-氨基安替比林、0.19mmol/L的PBS緩衝液、1.3g/L的海藻糖、0.28g/L BSA和0.22g/L顯色物質。其它步驟均同實施例1。

實施例5

本實施例尿酸的檢測試紙1的製作方法中，檢測試劑310包含18KU/L的脲酸氧化酶、5KU/L的辣根過氧化物酶、20KU/L的抗壞血酸氧化酶、0.35g/L的4-氨基安替比林、0.20mmol/L的PBS緩衝液、1.2g/L的海藻糖、0.25g/L BSA和0.20g/L顯色物質。其它步驟均同實施例1。

對比例

某醫院測試樣本。

評價方法：

將實施例5的尿酸的檢測試紙1直接插入自製乾式化學分析儀中，6分鐘後結果在儀器上顯示出來。表1為自製乾式化學分析儀的測試結果跟對比例測試結果對比圖，其相關性達到0.998。可直接用於臨床上測試。

表1、醫院測試樣品的測試結果與本發明甘油三酯測試結果相比

本發明尿酸的檢測試紙100具有以下優勢：抗幹擾能力更強，有效的消除了紅細胞及內源性物質的幹擾，並且能在6分鐘內能準確的測試全血的尿酸的濃度，測試結果與傳統的方法相比測試結果更準確。與公司自製的可攜式乾式化學分析儀一起使用，更符合臨床旁邊的要求，適合醫院急診、病房、社區醫院、家庭用戶等使用。

由於本發明中所涉及的各工藝參數的數值範圍在上述實施例中不可能全部體現，但本領域的技術人員完全可以想像到只要落入上述該數值範圍內的任何數值均可實施本發明，當然也包括若干項數值範圍內具體值的任意組合。此處，出於篇幅的考慮，省略了給出某一項或多項數值範圍內具體值的實施例，此不應當視為本發明的技術方案的公開不充分。

申請人聲明，本發明通過上述實施例來說明本發明的詳細工藝設備和工藝流程，但本發明並不局限於上述詳細工藝設備和工藝流程，即不意味著本發明必須依賴上述詳細工藝設備和工藝流程才能實施。所屬技術領域的技術人員應該明了，對本發明的任何改進，對本發明產品各原料的等效替換及輔料組分成分的添加、具體方式選擇等，落在本發明的保護範圍內。