複方紫參顆粒含量的檢測方法

2023-11-11 13:00:27

專利名稱：：複方紫參顆粒含量的檢測方法
技術領域：
：本發明涉及一種檢測複方紫參顆粒中丹參含量的方法。
背景技術：
：《部頒標準》一九八九版第一冊，書頁號Z1-115標準編號WS3-B-0113-89的複方紫參顆粒，是將鱉甲150g加水煎煮二次，每次4小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮；將石見穿250g、丹參250g、雞血騰250g、歸150g、香附150g鬱金150g、紅花100g加水煎煮二次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液適當濃縮後，加乙醇使沉澱，濾過，濾液回收乙醇後，加入鱉甲濃縮液中，濃縮至相當密度為1.381.40(8085°C)的清膏。取清膏1份，加糖3份，糊精1份與乙醇適量，製成顆粒，乾燥，即得。其舒肝理氣，活血散結。用於晚期吸血蟲病引起的肝脾腫大。在部頒標準中指出，應符合附錄7頁衝劑項下有關的各項規定，但在實際掌握規定上還沒有具體的手段。
發明內容本發明的目的是針對上述現狀，旨在提供一種檢測準確、簡捷、快速、重複性好、靈敏度高的複方紫參顆粒含量的檢測方法。本發明目的的實現方式為，複方紫參顆粒含量的檢測方法，檢測方法包括以下步驟(1)色譜條件與系統適用性試驗以十八垸基矽鍵合矽膠為填充劑；以甲醇一水一冰醋酸(8:91:1)為流動相；檢測波長為281nm。理論板數按丹參素峰計算應不低於2000。(2)供試品溶液的製備精密稱定1.0g複方紫參顆粒，研細，置25ml量瓶中加50%甲醇至約15ml，進行功率50W，頻率50kHz，水浴溫度25'C的超聲處理10分鐘使溶解，放冷，加50%甲醇至刻度，搖勻，過濾，取續濾液，作為供試品溶液，(3)對照品溶液的製備取丹參素鈉對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每lml含50ug的溶液，作為對照品溶液，(4)含量測定法分別精密吸取對照品溶液5ul和供試品溶液5—10ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，由丹參素鈉峰的面積計算丹參素鈉含量。本發明使用一種流動相條件檢測複方紫參顆粒含量，檢測準確、簡捷、快速、重複性好、靈敏度高，可用於監測產品的穩定性和工業化生產的質量控制，也可以用於考察產品質量穩定性。具體實施例方式本發明的檢測方法包括以下步驟(1)色譜條件與系統適用性試驗以十八垸基矽鍵合矽膠為填充劑；以甲醇一水一冰醋酸(8:91:1)為流動相；檢測波長為281nm。理論板數按丹參素峰計算應不低於2000。(2)供試品溶液的製備精密稱定1.0g複方紫參顆粒，研細，置25ml量瓶中加50%甲醇至約15ml，進行功率50W,頻率50kHz，水浴溫度25'C的超聲處理10分鐘使溶解，放冷，加50%甲醇至刻度，搖勻，過濾，取續濾液，作為供試品溶液，(3)對照品溶液的製備取丹參素鈉對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每lml含50ug的溶液，作為對照品溶液，(4)含量測定法分別精密吸取對照品溶液5ul和供試品溶液5—10ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，由丹參素鈉峰的面積計算丹參素鈉含量。下面詳述檢測方法1、儀器與試藥島津高效液相色譜，二元梯度泵，紫外檢測器，LC-solution化學工作站(日本島津)。甲醇、冰醋酸為色譜純，水為純淨水。丹參素鈉對照品(供含量測定用)由中國藥品生物製品檢定所提供。2、方法1)色譜條件與系統適用性試驗取濃度為50ug/ml丹參素鈉的對照品溶液，在200nm400nm進行掃描，結果在281mn有最大吸收，結合藥典中丹參素鈉的含量測定，將檢測波長定為281nin。分別採用乙腈-0.5%醋酸(20:80)、甲醇-0.2%磷酸水溶液(40:60)、甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59)、甲醇一水一冰醋酸(8:91:1)等為流動相進行試驗，結果所得圖譜顯示乙腈-0.5%醋酸(20:80)、甲醇-0.2%磷酸水溶液(40:60)、甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59)、未能達到較好的分離度，但採用甲醇一水一冰醋酸(8:91:1)為流動相則峰形較對稱，主峰保留時間適中，理論塔板數較高，故選用甲醇一水一冰醋酸(8:91:1)為流動相。以十八垸基矽鍵合矽膠為填充劑；以甲醇一水一冰醋酸(8:91:1)為流動相；檢測波長為281rnn，理論板數按丹參素峰計算應不低於2000。3、對照品溶液的製備取丹參素鈉對照品適量，精密稱定，加50^甲醇製成每lml含50ng的溶液，作為對照品溶液，對照品溶液線性範圍的考察精密稱取丹參素鈉對照品加50%甲醇製成每lml含L091mg的溶液，分別取l.Oml、2.Oml、4.Oml、6.Oml、8,Oml、10.Oml至10ml容量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，分別進樣10yl，記錄色譜圖，以進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標，進行回歸處理。具體結果見表l:表l線性關係tableseeoriginaldocumentpage5從表1可見，丹參素鈉的進樣量在1.091-10.91ug範圍內時呈良好線性關係.回歸方程y=0.056+2.154x,R=0.9999。4、供試品溶液的製備1)樣品提取溶劑的確定取複方紫參顆粒4份，置50ml量瓶中，分別加70%乙醇、50%乙醇、50%甲醇、70X甲醇50ml，各溶液含量(mg/g)見表2，表2提取溶劑的考察tableseeoriginaldocumentpage5從表2可見，採用70%乙醇與50%甲醇提取的含量較高、含量一致，但70%乙醇提取的雜質較多，故本發明選用50%甲醇作為提取溶劑。2)供試品溶液的製備取裝量差異項下的本品，研細，精密稱取約1.0g,置具塞錐形瓶中，精密加入5(m甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，精密稱定，用50%甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，取續濾液，作為供試品溶液。本申請人作了提取時間試驗，取1.0g複方紫參顆粒3份，分別置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，分別超聲處理3、5、10分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，取續濾液，作為供試品溶液，結果見表3。表3提取時間的考察tableseeoriginaldocumentpage6從表3可見，超聲10分鐘能提取完全。本申請人作了色譜柱選擇試驗，選用不同廠家的同類型色譜柱進行試驗，結果表明採用不同廠家的色譜柱進行系統性試驗和含量測定，其結果(見表4)均能達到系統性實驗的要求，能保證含量測定結果。表4不同色譜柱測定結果tableseeoriginaldocumentpage6本申請人作了樣品溶液的穩定性試驗，取同一份供試品溶液分別在O，2，4，6，8，IO小時進樣，測定丹參素鈉峰面積積分值。表5所示結果表明，供試品在10h內穩定，能保證含量測定的時間要求。表5穩定性試驗tableseeoriginaldocumentpage6本申請人作了重複性試驗取含丹參素鈉量為2.48mg/g複方紫參顆粒6份，照上述方法測定含量，結果見表6。結果表明，重複性較好。(見表IO)表6重複性試驗complextableseeoriginaldocumentpage7本申請人作了加樣回收實驗(批號061101)，取丹參含量為2.48mg/g的複方紫參1.0g，5份，分別精密加入丹參素鈉對照品1.98mg,按供試品溶液製備方法製備，並按上述色譜條件測定，計算加樣回收率，結果見表7。表7complextableseeoriginaldocumentpage7從表中可見，回收率平均值為969&，RSD為0.6%，符合有關回收規定。5、樣品測定分別吸取對照品溶液5ul和供試品溶液5—10ul，注入液相色譜儀，按上述色譜條件，進樣測定，計算丹參素鈉的含量(mg/袋)，結果見下表ll表8樣品測定結果complextableseeoriginaldocumentpage7根據藥材及樣品測定結果和考慮到在生產提取過程會有一定損失將含量限度定為每袋含丹參以丹參素鈉計，不得少於10.0mg061101、061102、061103表示由本公司生產的三批次樣品。權利要求1.複方紫參顆粒含量的檢測方法，其特徵在於檢測方法包括以下步驟(1)色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽鍵合矽膠為填充劑；以甲醇—水—冰醋酸(8911)為流動相；檢測波長為281nm。理論板數按丹參素峰計算應不低於2000。(2)供試品溶液的製備精密稱定1.0g複方紫參顆粒，研細，置25ml量瓶中加50％甲醇至約15ml，進行功率50W，頻率50kHz，水浴溫度25℃的超聲處理10分鐘使溶解，放冷，加50％甲醇至刻度，搖勻，過濾，取續濾液，作為供試品溶液，(3)對照品溶液的製備取丹參素鈉對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每1ml含50ug的溶液，作為對照品溶液，(4)含量測定法分別精密吸取對照品溶液5ul和供試品溶液5—10ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，由丹參素鈉峰的面積計算丹參素鈉含量。全文摘要本發明涉及檢測複方紫參顆粒中丹參含量的方法。以十八烷基矽鍵合矽膠為填充劑，以甲醇-水-冰醋酸(8∶91∶1)為流動相，檢測波長為281nm，精密稱定複方紫參顆粒，研細，加甲醇進行超聲處理使溶解，放冷，再加50％甲醇至刻度，搖勻，過濾，取續濾液，作為供試品溶液，取丹參素鈉對照品適量，精密稱定，加甲醇製成對照品溶液，含量測定法分別精密吸取對照品溶液5ul和供試品溶液5-10ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，由丹參素鈉峰的面積計算丹參素鈉含量。本發明利用高效液相，應用一種特別的流動相，檢測複方紫參顆粒含量，檢測準確、簡捷、快速、重複性好、靈敏度高，可用於監測產品的穩定性和工業化生產的質量控制，也可以用於考察產品質量穩定性。文檔編號G01N30/00GK101368935SQ200810196818公開日2009年2月18日申請日期2008年8月29日優先權日2008年8月29日發明者付振傑,張家剛,山韋申請人:武漢華光藥物開發有限公司