一種hplc法分析分離酒石酸福莫特羅中間體的方法

2023-12-10 05:57:47

專利名稱：一種hplc法分析分離酒石酸福莫特羅中間體的方法
技術領域：
本發明屬涉及一種高效液相色譜法，尤其是一種分析分離酒石酸福莫特羅中 間體及其對映異構體的高效液相色譜法。
背景技術：
酒石酸福莫特羅為一種平喘藥，主要用於緩解支氣管哮喘、慢性支氣管炎、 喘息性支氣管炎及肺氣腫所致呼吸困難，中間體的分子式為C17H21NO，化學名 為(R)-4-甲氧基-a-甲基-N-(苄萄苯乙胺，結構式為
該分子中含1個手性碳原子，在通過定向合成目標化合物酒石酸福莫特羅的過程 中需要控制其對映異構體的含量。
對於酒石酸福莫特羅中間體的對映異構體雜質，在藥物合成過程當中是需要 進行質量控制的。含手性碳原子的對映異構體的分離一直是手性藥物合成和製劑 過程中質量控制的難點，實現酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構體的分離在酒 石酸福莫特羅藥物的合成和製劑過程的質量控制方面具有現實意義。

發明內容
本發明的目的在於提供一種分析分離酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構 體雜質的高效液相色譜方法，從而實現酒石酸福莫特羅中間體與其對映異構體雜 質的分離測定。
申請人發現，以纖維素類手性柱，以加入一定比例胺的正相混合溶劑為流動 相低溫條件下，可以將酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構體進行有效分離，從 而可以準確控制酒石酸福莫特羅中間體的質量。本發明的方法能簡單、快速、準確地分析分離酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構體雜質。
進一步地，選用纖維素類手性柱OJ-H (DACEL250mmx4.6mm， 5pm)，可 以獲得更好的分析分離效果。OJ-H (DACEL250mmx4.6mm， 5pm)纖維素類手
性柱是以對甲苯基甲酸酯鍵合纖維素為填料。
進一步地，本發明的正相溶劑選用正己烷和無水乙醇的混合溶劑。
本發明的方法中的流動相選用體積比為90 : 10 95 : 5正己烷和無水乙醇的
混合溶劑。
本發明的方法中的流動相中的胺選用二乙胺。
本發明的方法中的低溫是指9-15X:。
本發明所述的分析分離方法，可按照以下方法實現
(1) 取酒石酸福莫特羅樣品適量，用無水乙醇溶解樣品，配製成每lmL含 酒石酸福莫特羅0.1mg 0.5mg的樣品溶液。
(2) 設置流動相流速為0.4 1.2mL/min，檢測波長為270-278 nm，最佳檢測 波長為275nm，色譜柱柱溫箱為9-12°C ，色譜柱柱溫的最佳溫度為10°C。
(3) 取(l)的樣品溶液2-50pL注入液相色譜儀，完成酒石酸福莫特羅中間體 及其對映異構體的分析與分離。
其中
高效液相色譜儀島津LC-10ATv; ， SPD-M10Av; ， SCL-10Av/ ， DGU-12A; 色譜柱OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5pm)纖維素手性色譜柱； 流動相正己烷-無水乙醇-二乙胺==95 : 5 : 0.1; 檢測波長275nm; 流速1.0mL/min;
柱溫10°C; 進樣體積10|iL。
本發明採用纖維素類OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5|am)手性色譜柱，能 夠有效的分析分離酒石酸福莫特羅及其對映異構體(雜質)；選擇流動相溶解樣 品，確保了溶液的穩定性；選擇進樣體積10pL，柱溫為室溫，提高了色譜峰的 對稱性。本發明解決了含酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構體的原料及製劑的 分析與分離問題，從而確保了酒石酸福莫特羅中間體及其製劑的質量可控。


圖1實施例1，正己烷-無水乙醇-二乙胺=95 : 5 : 0.1，柱溫l(TC的HPLC圖； 圖2實施例2，正己烷-無水乙醇-二乙胺=90 : 10 : 0.1，柱溫l(TC的HPLC圖； 圖3實施例3，正己烷-無水乙醇-二乙胺二95 : 5 : 0.4，柱溫9。C的HPLC圖； 圖4實施例4，正己烷-無水乙醇-二乙胺=95 : 5 : 0.1，柱溫12。C的HPLC圖。
具體實施例方式
實施例l儀器與條件高效液相色譜儀島津LC-10ATv; ， SPD-M10Av; ， SCL-10A甲，DGU-12A; 色譜柱OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5pm);流動相正己垸-無水乙醇_二乙胺=95 : 5 : 0.1;流速1.0mL/min;柱溫10°C; 進樣體積10pL。檢測波長275nm;實驗步驟分別稱取酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構體各5mg，置於25mL容量瓶 中，加無水乙醇溶解並稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。並分別稱取酒石 酸福莫特羅中間體及其對映異構體各5mg，分別置於2個25mL容量瓶中，加無 水乙醇溶解並稀釋置刻度，搖勻，作為定性對照溶液。分別取各對照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進行高效液相色譜分析，記 錄色譜圖。結果見附圖l，圖中1號峰為酒石酸福莫特羅中間體，2號峰為異構 體，可以看出在該條件下酒石酸福莫特羅中間體主峰可以和異構體完全分離開 來，且酒石酸福莫特羅中間體主峰在15.65min左右。實施例2儀器與條件高效液相色譜儀島津LC-10AT甲，SPD-M10Av; ， SCL-10Av; ， DGU-12A; 色譜柱OJ-H (DACEL4.6腿x250匪，5nm);流動相正己烷-無水乙醇-二乙胺=90 : io : o.i;流速1.0mL/min;檢測波長275nm;柱溫10°C; 進樣體積10pL。實驗步驟分別稱取酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構體各5mg，置於25mL容量瓶 中，加無水乙醇溶解並稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。並分別稱取酒石 酸福莫特羅中間體及其對映異構體各5mg，分別置於2個25mL容量瓶中，加無 水乙醇溶解並稀釋置刻度，搖勻，作為定性對照溶液。分別取各對照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進行高效液相色譜分析，記 錄色譜圖。結果見附圖l，圖中1號峰為酒石酸福莫特羅中間體，2號峰為異構 體，可以看出在該條件下酒石酸福莫特羅主峰可以和異構體完全分離開來，且酒 石酸福莫特羅中間體主峰在12.25min左右。實施例3儀器與條件高效液相色譜儀島津LC-10ATv/ ， SPD-M10Avp， SCL-10Av/ ， DGU-12A; 色譜柱OJ陽H (DACEL4.6mmx250mm， 5pm);流動相正己烷-無水乙醇_二乙胺=95 : 5 : 0.4;流速1.0mL/min; 檢測波長275nm; 柱溫9°C; 進樣體積l(HlL。實驗步驟分別稱取酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構體各5mg，置於25mL容量瓶 中，加無水乙醇溶解並稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。並分別稱取酒石 酸福莫特羅中間體及其對映異構體各5mg，分別置於2個25mL容量瓶中，加無 水乙醇溶解並稀釋置刻度，搖勻，作為定性對照溶液。分別取各對照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進行高效液相色譜分析，記 錄色譜圖。結果見附圖l，圖中1號峰為酒石酸福莫特羅中間體，2號峰為異構 體，可以看出在該條件下酒石酸福莫特羅主峰可以和異構體完全分離開來，且酒 石酸福莫特羅中間體主峰在17.10min左右。實施例4儀器與條件高效液相色譜儀島津LC-10AT甲，SPD-M10Ayp， SCL-10Avp， DGU-12A; 色譜柱OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5nm);流動相正己垸-無水乙醇_二乙胺=95 : 5 : 0.1;流速1.0mL/min; 檢測波長275nm;柱溫12°C; 進樣體積10pL。實驗步驟分別稱取酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構體各5mg，置於25mL容量瓶 中，加無水乙醇溶解並稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。並分別稱取酒石 酸福莫特羅中間體及其對映異構體各5mg，分別置於2個25mL容量瓶中，加無 水乙醇溶解並稀釋置刻度，搖勻，作為定性對照溶液。分別取各對照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進行高效液相色譜分析，記 錄色譜圖。結果見附圖l，圖中1號峰為酒石酸福莫特羅中間體，2號峰為異構 體，可以看出在該條件下酒石酸福莫特羅主峰可以和異構體完全分離開來，且酒 石酸福莫特羅中間體主峰在16.58min左右。
權利要求
1. 一種分離酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構體的HPLC方法，其特徵在於採用以纖維素類手性柱，以含有胺的正相混合溶劑為流動相，在低溫條件下進行分離。
2. 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述纖維素類手性柱為OJ-H(DACEL250mmx4.6mm， 5pm)。
3. 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於採用正相色譜法。
4. 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述的正相混合溶劑為正己烷和無 水乙醇的混合溶劑。
5. 根據權利要求3所述的方法，其特徵在於所述的正己烷和無水乙醇的體積比 為95 : 5~90 : 10。
6. 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述的胺為二乙胺。
7. 根據權利要求6所述的方法，其特徵在於所述的二乙胺的加入量為 O.lo/o~0.5%。
8. 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於所述的低溫為9'C-15'C。
9. 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於包括以下步驟(1) 取酒石酸福莫特羅中間體樣品適量，用無水乙醇溶解樣品，得到lmL含 酒石酸福莫特羅中間體0.1mg 0.5mg的樣品溶液。(2) 設置流動相流速為0.4 1.2mL/min，檢測波長為275nm，色譜柱柱溫箱 為9 15°C。(3) 取步驟(l)的樣品溶液2-50pL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
全文摘要
本發明公開了一種HPLC法分析分離酒石酸福莫特羅中間體及其對映異構體的測定方法，採用纖維素類手性柱，以加入一定比例胺的正相混合溶劑為流動相的正相色譜法低溫條件下進行分離，用該方法可以快速的分離分析酒石酸福莫特羅中間體以及含酒石酸福莫特羅中間體製劑的對映異構體雜質。
文檔編號B01J20/281GK101531602SQ200810101628
公開日2009年9月16日 申請日期2008年3月10日 優先權日2008年3月10日
發明者牟淑慧 申請人:北京德眾萬全醫藥科技有限公司