D-Dimer試劑及測試方法與流程
2024-04-14 20:57:05
d-dimer試劑及測試方法
技術領域
1.本發明涉及生物醫藥技術領域，特別涉及試劑及測試，具體的，是一種d-dimer試劑盒及測試方法。
背景技術：
2.d-dimer又稱二聚體，是交聯纖維蛋白的特異性降解產物，其生成或增高反映了凝血和纖溶系統的雙重激活，可作為體內血栓形成的重要指標之一，也是目前鑑別原發性和繼發性纖溶以及監測溶栓治療等方面頗有價值的重要指標。
3.d-dimer的主要臨床意義在於作為排除靜脈血栓栓塞的診斷方案，其中以深靜脈血栓(dvt)、肺栓塞(pte)和彌散性血管內凝血(dic)為主要診斷目標。
4.另外，腦血栓，急性心肌梗死，纖溶亢進，白血病，溶栓治療，肝臟疾病，外科手術，妊娠，組織損傷，惡性實體腫瘤等均會引起d-二聚體含量的增加。
5.體外定量測定人血漿樣本中的d-dimer含量，進行輔助診斷，對於判斷病因有著一定的幫助。
6.因此，有必要提供一種d-dimer試劑盒及測試方法來實現上述目的。
技術實現要素：
7.本發明的目的是提供一種d-dimer試劑盒及測試方法。
8.本發明通過如下技術方案實現上述目的：
9.技術方案一：
10.一種d-dimer試劑盒，包括試劑一，試劑二，試劑三，試劑四；
11.試劑一為d-dimerr1包括＞20mmol/l三羥甲基氨基甲烷緩衝液、防腐劑；
12.試劑二包括＞2mg/ml鼠抗人d-dimer單克隆抗體膠乳；
13.試劑三為d-dimer稀釋液，包括0.9％氯化鈉、防腐劑；
14.試劑四為d-dimer校準品，包括d-dimer、穩定劑、防腐劑。
15.進一步的，試劑一100mmol/l三羥甲基氨基甲烷緩衝液、0.05％防腐劑。
16.進一步的，試劑二2.5mg/ml鼠抗人d-dimer單克隆抗體膠乳。
17.進一步的，試劑三包括0.9％氯化鈉、0.05％防腐劑。
18.進一步的，試劑四包括d-dimer、穩定劑、0.05％防腐劑。
19.技術方案二：
20.一種d-dimer測試方法，步驟為：
21.1)配置血凝儀，並進行測試參數設置：
22.2)將各濃度d-dimer校準品用標示體積蒸餾水復溶，室溫靜置5分鐘，使用前輕旋混勻，並作為樣本在血凝儀上測定相應的吸光度差值(
△
a＝a2-al)，獲得「濃度一吸光度差值」校準曲線；
23.3)以d-dimer試劑盒承載待測樣本，置入測定位置後，獲得d-dimer含量測定結果。
24.進一步的，選用適當的質控品進行質量管理，質控品的測定值應在其規定的質控範圍內，若超出範圍則要採取相應的措施。
25.進一步的，靜脈採血，置於含有1/10體積0.109mol/l枸櫞酸鈉抗凝液的試管中，3000rpm離心10分鐘，收集上層血漿。
26.優選的，樣本採集後，請於當日測定。若當日不能測定，-20℃可保存30天。
27.優選的，本產品中d-dimer校準品經hbsag、hiv抗體、hcv抗體檢測，結果為陰性，但仍需如病人樣本一樣小心處理。
28.優選的，用不同型號血凝儀測定時，各參數隨儀器不同應作相應調整。
29.優選的，d-dimer稀釋液可直接使用或將其轉移至試劑盒中的備用空瓶後使用，但應注意避免汙染。
30.與現有技術相比，本發明的有益效果為：
31.1)測試準確性、重複性、穩定性、特異性良好，對實驗和輔助診斷都有著很大的幫助；
32.2)配置有相應的緩衝液等，使得此試劑在使用時更加的穩定和方便，並且方便運輸和貯存。
具體實施方式
33.所屬領域普通技術人員通常理解的相同的含義。當存在矛盾時，以本說明書中的定義為準下面對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。
34.實施例1
35.一種d-dimer檢測試劑盒，包括試劑一，試劑二，試劑三，試劑四；所述試劑一為d-dimerr1包括＞20mmol/l三羥甲基氨基甲烷緩衝液、防腐劑；所述試劑二包括》2mg/ml鼠抗人d-dimer單克隆抗體膠乳；試劑三為d-dimer稀釋液包括0.9％氯化鈉、防腐劑；試劑四為d-dimer校準品包括d-dimer、穩定劑、防腐劑等；
36.試劑一包括90mmol/l三羥甲基氨基甲烷緩衝液、0.05％防腐劑；
37.試劑二包括2.0mg/ml鼠抗人d-dimer單克隆抗體膠乳；
38.試劑三包括0.9％氯化鈉、0.05％防腐劑；
39.試劑四包括d-dimer、穩定劑、0.05％防腐劑。
40.實施例2
41.一種d-dimer檢測試劑盒，包括試劑一，試劑二，試劑三，試劑四；所述試劑一為d-dimerr1包括＞20mmol/l三羥甲基氨基甲烷緩衝液、防腐劑；所述試劑二包括》2mg/ml鼠抗人d-dimer單克隆抗體膠乳；試劑三為d-dimer稀釋液包括0.9％氯化鈉、防腐劑；試劑四為d-dimer校準品包括d-dimer、穩定劑、防腐劑等；
42.試劑一包括110mmol/l三羥甲基氨基甲烷緩衝液、0.05％防腐劑；
43.試劑二包括3.4mg/ml鼠抗人d-dimer單克隆抗體膠乳；
44.試劑三包括0.9％氯化鈉、0.05％防腐劑；
45.試劑四包括d-dimer、穩定劑、0.05％防腐劑。
46.實施例3
47.一種d-dimer檢測試劑盒，包括試劑一，試劑二，試劑三，試劑四；所述試劑一為d-dimerr1包括＞20mmol/l三羥甲基氨基甲烷緩衝液、防腐劑；所述試劑二包括》2mg/ml鼠抗人d-dimer單克隆抗體膠乳；試劑三為d-dimer稀釋液包括0.9％氯化鈉、防腐劑；試劑四為d-dimer校準品包括d-dimer、穩定劑、防腐劑等；
48.試劑一包括70mmol/l三羥甲基氨基甲烷緩衝液、0.05％防腐劑；
49.試劑二包括4mg/ml鼠抗人d-dimer單克隆抗體膠乳；
50.試劑三包括0.9％氯化鈉、0.05％防腐劑；
51.試劑四包括d-dimer、穩定劑、0.05％防腐劑。
52.實施例4
53.一種d-dimer檢測試劑盒，包括試劑一，試劑二，試劑三，試劑四；所述試劑一為d-dimerr1包括＞20mmol/l三羥甲基氨基甲烷緩衝液、防腐劑；所述試劑二包括》2mg/ml鼠抗人d-dimer單克隆抗體膠乳；試劑三為d-dimer稀釋液包括0.9％氯化鈉、防腐劑；試劑四為d-dimer校準品包括d-dimer、穩定劑、防腐劑等；
54.試劑一包括65mmol/l三羥甲基氨基甲烷緩衝液、0.05％防腐劑；
55.試劑二包括5.5mg/ml鼠抗人d-dimer單克隆抗體膠乳；
56.試劑三包括0.9％氯化鈉、0.05％防腐劑；
57.試劑四包括d-dimer、穩定劑、0.05％防腐劑。
58.利用實施例1-4所展示的試劑盒進行d-dimer含量測試，包括如下步驟：
59.s1、儀器主要參數設定，參照下表以日本sysmex ca1500血凝儀為例；
[0060][0061]
s2、將各濃度d-dimer校準品用標示體積蒸餾水復溶，室溫靜置5分鐘，使用前輕旋混勻，並作為樣本在儀器上測定其相應的吸光度差值(
△
a＝a
2-a
l
)，儀器自動製作「濃度一吸光度差值」校準曲線。
[0062]
s3、將待測樣本置於儀器相應位置後進行測定，儀器自動計算並輸出測定結果。
[0063]
s4、選用適當的質控品進行質量管理。質控品的測定值應在其規定的質控範圍內，若超出範圍則要採取相應的措施。
[0064]
其中：
[0065]
優選靜脈採血，置於含有1/10體積0.109mol/l枸櫞酸鈉抗凝液的試管中，3000rpm離心10分鐘，收集上層液(血漿)。
[0066]
優選的，樣本採集後，請於當日測定。若當日不能測定，-20℃可保存30天。
[0067]
優選的，本產品中d-dimer校準品經hbsag、hiv抗體、hcv抗體檢測，結果為陰性，但仍需如病人樣本一樣小心處理。
[0068]
優選的，用不同型號儀器測定時，各參數隨儀器不同應作相應調整。
[0069]
優選的，d-dimer稀釋液可直接使用或將其轉移至試劑盒中的備用空瓶後使用，但應注意避免汙染。
[0070]
實施例1-4及校準測試的測試結果下表的測試數據記錄，數據可清楚的得出：
[0071][0072]
實施例1-4的d-dimer檢測試劑盒，在試劑實驗中具有良好的穩定性，有著良好的實驗結果。
[0073]
以上顯示和描述了本發明的基本原理和主要特徵和本發明的優點,對於本領域技術人員而言，顯然本發明不限於上述示範性實施例的細節，而且在不背離本發明的精神或基本特徵的情況下，能夠以其他的具體形式實現本發明。因此，無論從哪一點來看，均應將實施例看作是示範性的，而且是非限制性的，本發明的範圍由所附權利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權利要求的等同要件的含義和範圍內的所有變化囊括在本發明內。
[0074]
此外，應當理解，雖然本說明書按照實施方式加以描述，但並非每個實施方式僅包含一個獨立的技術方案，說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見，本領域技術人員應當將說明書作為一個整體，各實施例中的技術方案也可以經適當組合，形成本領域技術人員可以理解的其他實施方式。