禽用高表達脂肪酶枯草芽孢桿菌微生態製劑及其製備方法
2024-03-01 19:07:15 1
禽用高表達脂肪酶枯草芽孢桿菌微生態製劑及其製備方法
【專利摘要】本發明提供一種禽用高表達脂肪酶枯草芽孢桿菌微生態製劑，由以下重量份數的原料製備而成：聚乙二醇400：8-15份；羧甲基纖維素鈉：1-10份；瓜兒膠：1-5份；水：70-100份；枯草芽孢桿菌在上述溶液中的濃度為106-12/ml。本發明製劑可在禽類腸道體內有效降解飼料中的脂肪，使其分解成為易於吸收的脂肪酸和甘油,提高飼料利用率，有效幫助禽類消化吸收飼料中的油脂，大幅度提高禽類生長速度和肉料比。
【專利說明】禽用高表達脂肪酶枯草芽孢桿菌微生態製劑及其製備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於獸藥製劑領域，尤其是一種促進禽生長及腸道疾病預防的高表達脂肪酶枯草芽孢桿菌微生態製劑及其製備方法。
【背景技術】
[0002]目前我國禽類養殖業已廣泛使用高營養飼料進行餵養，尤其是在禽類飼養後期會在飼料中加入油脂用於增肥。動物本身依靠分泌膽汁消化脂肪，由於禽類飼養後期飼料中添加油脂量過大，動物自身消化能力不能滿足消化脂肪的需要，會出現飼料利用率低，消化不良，腸炎拉稀等現象，進而造成大面積腸道疾病的發作，給養殖業帶來巨大的損失。目前解決這一問題的方法主要有兩種:(I)禽類發生腸炎拉稀後，在治療疾病時，同時服用幾種抗生素，短時間內禽類死亡率雖然降低，但易造成腸道中微生物菌群失衡，停藥後很快出現反彈，禽類採食量和體重增速明顯下降，甚至體重出現負增長。此種方法無法從根本上解決問題，反而會經常適得其反。(2)添加諸如酵母菌、枯草芽孢桿菌、乳酸菌等益生菌，提高禽類腸道內營養物質的消化吸收能力。此種方法固然可以起到一定的效果，但是由於此類菌株胞外分泌的生物酶活低，動物每日攝入飼料中營養物質過高，達不到有效分解吸收，因此很難達到滿意的效果。
[0003]尋找胞外高表達脂肪酶的益生菌，在禽類腸道內利用其高酶活性將脂肪降解為易於吸收的小分子脂肪酸、甘油。提高飼料的生物利用度，同時預防由於長期餵養飼料造成的消化不良、拉稀、腸炎等疾病具有重要的現實意義。
【發明內容】
[0004]本發明克服現有技術的不足，提供了一種促進禽生長及腸道疾病預防的高表達脂肪酶枯草芽孢桿菌微生態製劑。
[0005]為解決上述技術問題，本發明採用的技術方案是:一種禽用高表達脂肪酶枯草芽孢桿菌微生態製劑，其特徵在於，由以下重量份數的原料製備而成:聚乙二醇400:8-15份；羧甲基纖維素鈉:1-10份；瓜兒膠:1-5份；水:70-100份；枯草芽孢桿菌在上述溶液中的濃度為 IO6-1Vml。
[0006]優選的，由以下重量份數的原料製備而成:聚乙二醇400:10份；羧甲基纖維素鈉:5份；瓜爾膠:1份；水:80份；枯草芽孢桿菌在上述溶液中的濃度為IOicVmlt5
[0007]進一步，所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌BH1205。
[0008]本發明的另一目的在於提供一種枯草芽孢桿菌微生態製劑的製備方法，包括如下步驟:(1)將聚乙二醇400加熱溶於水，混合均勻；(2)加入提前以5倍量水泡製過夜的羧甲基纖維素鈉，混合均勻；(3)加入瓜兒膠混合均勻；(4)向溶液中加入枯草芽孢桿菌BH1205，製成菌懸液；(5)包裝即得產品。
[0009]本發明具有的優點和積極效果是:本發明所使用的枯草芽孢桿菌BH1205為枯草芽孢桿菌中篩選的胞外高表達脂肪酶菌株。其發酵液中胞外脂肪酶活性可高達5.5U/ml，是目前普通芽孢桿菌的200倍以上。可在禽類腸道體內有效降解飼料中的脂肪，使其分解成為易於吸收的脂肪酸和甘油，提高飼料利用率，有效幫助禽類消化吸收飼料中的油脂，大幅度提高禽類生長速度和肉料比，防止出現過料拉稀等現象。同時作為益生菌在腸道內定居，可有效抑制有害菌群的生長繁殖，保護腸道健康。
【具體實施方式】
[0010]實施例1 一種高表達脂肪酶枯草芽孢桿菌BH1205的篩選:
[0011]改良中性紅培養基:IOg蛋白腖，5g牛肉膏，5gNaCl，20g花生油，15g瓊脂，加蒸餾水至1000ml，調pH為7.2，最後加2ml濃度為1.6%的中性紅水溶液。
[0012](I)、以BH1205-E、coli穿梭質粒pUBC19和pHP13為基礎，分別連接強重組體。⑵、用兩類載體分別構建了表達I ipA基因的四個重組質粒:pUBCPL、pUBCVL、pHPPL、pHPVL。(3)、四個重組質粒轉化 BH1205，得到轉化子 BH1205/pHPPL, BH1205/pHPVL, BH1205/pUBCPL，BH 120 5/pUBCVL。(4)、將轉化子均勻塗布於改良中性紅培養基上，3 7 °C培養36h。
(5)、轉化子BH1205/pUBCPL在中性紅油脂平板上的菌落紅色最明顯，表明其脂肪酶表達量最聞。
[0013]實施例2:—種禽用高表達脂肪酶的枯草芽孢桿菌微生態製劑製備方法:
[0014](I)將聚乙二醇400加熱溶於水，混合均勻；(2)加入提前以5倍量水泡製過夜的羧甲基纖維素鈉，混合均勻；(3)加入瓜兒膠混合均勻；(4)向溶液中加入枯草芽孢桿菌BH1205/pUBCPL，製成 菌懸液；(5)包裝即得產品。
[0015]試驗例1:
[0016]取實施例2所得產品，餵養肉雞五萬、肉鴨兩萬隻和鵝三萬隻，全程連續餵養，試
驗結果如下:
[0017]
【權利要求】
1.一種禽用高表達脂肪酶枯草芽孢桿菌微生態製劑，其特徵在於，由以下重量份數的原料製備而成:聚乙二醇400:8-15份；羧甲基纖維素鈉:1-10份；瓜兒膠:1-5份；水:70-100份；枯草芽孢桿菌在上述溶液中的濃度為106_12/ml。
2.根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌微生態製劑，其特徵在於，由以下重量份數的原料製備而成:聚乙二醇400:10份；羧甲基纖維素鈉:5份；瓜爾膠:1份冰:80份；枯草芽孢桿菌在上述溶液中的濃度為IOltVmL
3.根據權利要求1或2所述的枯草芽孢桿菌微生態製劑，其特徵在於:所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌BH1205。
4.一種製備如權利要求4所述的枯草芽孢桿菌微生態製劑的方法，其特徵在於，包括如下步驟:(I)將聚乙二醇400加熱溶於水，混合均勻；(2)加入提前以5倍量水泡製過夜的羧甲基纖維素鈉，混合均勻；(3)加入瓜兒膠混合均勻；(4)向溶液中加入枯草芽孢桿菌BH1205，製成菌懸液； (5)包裝即得產品。
【文檔編號】A61P1/14GK104013651SQ201410268485
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2014年6月16日 優先權日:2014年6月16日
【發明者】曲薈芬, 李琳, 桑慧霞, 陳麗, 董麗紅, 王志強 申請人:格特生物製藥（天津）有限公司