一種微生物殺菌劑及其製備方法
2024-04-04 04:42:05 1
專利名稱：一種微生物殺菌劑及其製備方法
技術領域：
本發明涉及促進植物生長、防治植物真菌病害及防蟲的微生物殺菌劑及其製備方法。
植物的真菌病害如菸草赤星病(tobacco bromn spot)、菸草黑脛病、菸草炭疽病、菸草猝倒病等菸草真菌病害以及立枯病、炭疽病等是世界各地乃至我國菸草等植物從苗期到成熟期造成危害的主要真菌病害。近年來，由於受氣候、施肥條件、移栽品種等條件變化的影響，這些病害的發生與危害日益嚴重。在目前無優良抗病品種的情況下，主要採取化學防治即化學殺菌劑(化學農藥)作為控制上述病害流行的主要方法。但化學殺菌劑如菌核淨、保利安、甲霜寧等的大量使用，一方面會汙染環境，另一方面長期、反覆使用會導致病菌產生抗藥性，藥劑對病菌無效，以及造成菸草葉片的嚴重藥害，菸草葉片上化學農藥的殘留，影響菸草吸食的安全性。
本發明的目的是克服化學殺菌劑存在的問題，提供一種微生物殺菌劑，其製作成本低，能改善土壤結構，促進土壤中有機質轉化，促進植物生長，抑制病菌生長，對病害防治效果達80％以上。
本發明的另一目的是提供上述微生物殺菌劑的製備方法。
本發明是這樣實現的以菸草根際、葉面微生態學理論為基礎，篩選高效優良菌株，採用獨特的發酵工藝，經濃縮活化製成活菌製劑。
本殺菌劑含重量百分比煙梗末或木屑、麥麩等植物粉碎材料85-90％，木黴菌孢子粉8-12％。
所述的木黴菌為TV-1，或T918、Tr13、A405。
所述的微生物殺菌劑的製備方法按下列步驟製取1)基料的製備①將煙梗經粉碎機粉碎成煙梗末後，過20目篩，按過篩煙梗末∶水＝1∶0.4-0.5的比例加入水，混勻，作為基料裝入棉布袋中；②將裝好基料的布袋放入蒸飯車內，0.4磅壓力下滅菌，待蒸汽從蒸飯車密封門的底部冒出時開始計時，5-6小時後，關閉蒸汽閥門，打開蒸飯車密封門，待蒸汽散盡後，將已滅菌的煙梗末倒入消毒好的塑料桶內蓋嚴備用；2)菌漿的製備①菌種培養一級斜面菌種培養，採用固體PDA馬鈴薯培養基，將木黴菌種接種在試管培養基上，26-29℃下培養46-50小時，得一級斜面菌種；二級搖瓶菌種培養，採用液體PDA馬鈴薯培養液，將一級斜面菌種接入上述滅菌搖瓶培養液中，26-28℃下振蕩光照培養72-76小時作為種子液；②液體發酵培養採用理查氏酵母膏高溫滅菌培養液，待培養液冷卻至27.5℃時，將錐形瓶中的種子液按5‰的比例接種入500升發酵罐，保持27±1℃，通氣量每小時8立方米，保壓0.05Mpa，培養48-72小時得到相應拮抗菌的菌漿；3)菌漿的處理製備好的菌漿經過板框過濾機過濾後，得到濾渣，將製備好的基料與濾渣以重量比1∶0.8-1的比例混合均勻後，再以體積比3％加入抗菌素利福平母液，加入體積比2％的鏈黴素母液攪勻，備用；4)窗紗培養片、用具和培養室的消毒滅菌處理；5)培養將攪勻處理過的菌漿用刷均勻地刷在培養片上，刷時厚度為1-2mm，將刷好的培養片放在下鋪滅菌蒸餾水浸潤的脫脂紗布培養盤上，保持相對溼度在90％以上，26±1℃光照培養2天後，室溫控制在27-28℃，待表面產生孢子較多時，室溫保持30±1℃，通氣、換氣、晾乾培養片；6)菌劑的製備將培養片上樣品晾乾至含水量2-3％後，取下粉碎，過100目篩後，進行孢子含量測定，達到109個/克，即為合格成品。
圖1為本發明的生產工藝流程圖。
本發明與現有技術相比具有以下積極效果在植物侵染性病害中，80％以上是真菌引起的。採用本發明的微生物殺菌劑進行植物病害的生物防治，其效果持久，病害難以產生抗藥性，對人體和作物無危害，對病害的選擇性大，具有廣譜殺菌劑效果，不汙染環境，不會對植物產生藥害，安全、無毒、無殘留。對土壤及葉部真菌，特別是疫黴菌、腐黴菌、鐮刀菌及絲核菌、鏈格孢菌、毛盤孢菌等有顯著防治效果，同時對菸草有一定的促生作用。此外本發明的殺菌劑還有投入低，充分利用廢棄煙梗、麥杆、木屑、麥麩等作為原料，變廢為寶，減少煙梗積壓，以及煙梗、麥杆焚燒帶來的環境汙染，煙梗燃燒後焦油阻塞管道等問題，具有易於工業化和商品化開發的優勢。
以下結合實施例對本發明作進一步的詳述。
實施例本殺菌劑的製備方法按下列步驟製取1)基料的製備①將煙梗經粉碎機粉碎成煙梗末後，過20目篩，按過篩煙梗末∶水＝1∶0.5的比例加入水，混勻，作為基料裝入棉布袋中；②將裝好基料的布袋放入蒸飯車內，0.4磅壓力下滅菌，待蒸汽從蒸飯車密封門的底部冒出時開始計時，5-6小時後，關閉蒸汽閥門，打開蒸飯車密封門，待蒸汽散盡後，將已滅菌的煙梗末倒入消毒好的塑料桶內蓋嚴備用；2)菌漿的製備①菌種培養一級斜面菌種培養，採用固體PDA馬鈴薯培養基，將木黴菌種(TV-1，或T918、Tr13、A405)接種在試管培養基上，26-29℃下培養46-50小時，得一級斜面菌種；二級搖瓶菌種培養，採用液體PDA馬鈴薯培養液(121℃滅菌30-45分鐘)，將一級斜面菌種接入上述滅菌搖瓶培養液中，26-28℃下振蕩光照培養72-76小時作為種子液；②液體發酵培養採用理查氏酵母膏高溫滅菌培養液(121℃滅菌30-45分鐘)，待培養液冷卻至27.5℃時，將錐形瓶中的種子液按5‰的比例接種入500升發酵罐，保持27±1℃，通氣量每小時8立方米，保壓0.05Mpa，培養48小時得到相應拮抗菌的菌漿；3)菌漿的處理製備好的菌漿經過板框過濾機過濾後，得到濾渣，將製備好的基料與濾渣以重量比1∶0.8的比例混合均勻後，再以體積比3％加入抗菌素利福平母液(濃度為10mg/l)，加入體積比2％的鏈黴素母液(濃度為10mg/l)攪勻，備用；4)窗紗培養片、用具和培養室的消毒滅菌處理①窗紗培養片、用具的消毒窗紗培養片採用烤種用的不鏽鋼紗網，用75％酒精噴霧進行表面消毒，刷子，勺子用75％酒精泡5-10分鐘；②培養室的消毒採用燻蒸消毒，用甲醛∶高錳酸鉀＝2∶1進行燻蒸5-7小時，然後通風10小時左右後備用；5)培養將攪勻處理過的菌漿用刷子均勻地刷在培養片上，刷時厚度在1-2mm將刷好的培養片放在下鋪滅菌蒸餾水浸潤的脫脂紗布培養盤上，保持相對溼度在90％以上，26±1℃光照培養2夭後，室溫控制在27-28℃，待表面產生孢子較多時，室溫保持30±1℃，通氣、換氣、晾乾培養片；6)菌劑的製備將培養片上樣品晾乾至含水量2-3％後，取下用粉碎機粉碎，過100目篩後，採用血球計數器進行孢子含量測定，達到109個/克(樣品)，即為合格成品，用分裝機分裝入袋中。
本發明的殺菌劑防治對象是菸草立枯病、猝倒病、黑脛病、赤星病等真菌病害。
權利要求
1.一種微生物殺菌劑，其特徵在於含重量百分比煙梗末或木屑、麥麩等植物粉碎材料85-90％，木黴菌孢子粉8-12％。
2.根據權利要求1所述的微生物殺菌劑，其特徵在於所述的木黴菌為TV-1，或T918、Tr13、A405。
3.根據權利要求1所述的微生物殺菌劑的製備方法，其特徵在於按下列步驟製取1)基料的製備①將煙梗經粉碎機粉碎成煙梗末後，過20目篩，按過篩煙梗末∶水＝1∶0.4-0.5的比例加入水，混勻，作為基料裝入棉布袋中；②將裝好基料的布袋放入蒸飯車內，0.4磅壓力下滅菌，待蒸汽從蒸飯車密封門的底部冒出時開始計時，5-6小時後，關閉蒸汽閥門，打開蒸飯車密封門，待蒸汽散盡後，將已滅菌的煙梗末倒入消毒好的塑料桶內蓋嚴備用；2)菌漿的製備①菌種培養一級斜面菌種培養，採用固體PDA馬鈴薯培養基，將木黴菌種接種在試管培養基上，26-29℃下培養46-50小時，得一級斜面菌種；二級搖瓶菌種培養，採用液體PDA馬鈴薯培養液，將一級斜面菌種接入上述滅菌搖瓶培養液中，26-28℃下振蕩光照培養72-76小時作為種子液；②液體發酵培養採用理查氏酵母膏高溫滅菌培養液，待培養液冷卻至27.5℃時，將錐形瓶中的種子液按5‰的比例接種入500升發酵罐，保持27±1℃，通氣量每小時8立方米，保壓0.05Mpa，培養48-72小時得到相應拮抗菌的菌漿；3)菌漿的處理製備好的菌漿經過板框過濾機過濾後，得到濾渣，將製備好的基料與濾渣以重量比1∶0.8-1的比例混合均勻後，再以體積比3％加入抗菌素利福平母液，加入體積比2％的鏈黴素母液攪勻，備用；4)窗紗培養片、用具和培養室的消毒滅菌處理；5)培養將攪勻處理過的菌漿用刷均勻地刷在培養片上，刷時厚度在1-2mm，將刷好的培養片放在下鋪滅菌蒸餾水浸潤的脫脂紗布培養盤上，保持相對溼度在90％以上，26±1℃光照培養2夭後，室溫控制在27-28℃，待表面產生孢子較多時，室溫保持30±1℃，通氣、換氣、晾乾培養片；6)菌劑的製備將培養片上樣品晾乾至含水量2-3％後，取下粉碎，過100目篩後，進行孢子含量測定，達到109個/克，即為合格成品。
全文摘要
本發明是一種微生物殺菌劑及其製備方法。其特徵在於含重量百分比煙梗末或木屑、麥麩等植物粉碎材料85－90%,木黴菌孢子粉8－12%。該殺菌劑按一定的步驟製取。採用本發明的微生物殺菌劑進行植物病害的生物防治,其效果持久,病害難以產生抗藥性,對人體和作物無危害,對病害的選擇性大,具有廣譜殺菌劑效果,不汙染環境,不會對植物產生藥害,安全、無毒、無殘留。對土壤及葉部真菌,特別是疫黴菌、腐黴菌、鐮刀菌及絲核菌、鏈格孢菌、毛盤孢菌等有顯著防治效果,同時對菸草有一定的促生作用。
文檔編號A01N63/00GK1337164SQ0010999
公開日2002年2月27日 申請日期2000年8月9日 優先權日2000年8月9日
發明者王革 申請人:玉溪紅塔菸草(集團)有限責任公司, 雲南菸草科學研究院農業研究所