臨床生化質控品及其製備工藝的製作方法

2023-12-05 20:27:36 1

專利名稱：臨床生化質控品及其製備工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及人或動物新鮮血清或血漿多項臨床生化指標的保護液和穩定劑的配 制及其生化質控品或質控物製備工藝技術。
背景技術：
隨著生化分析儀及其生化試劑廣泛地應用於臨床醫學檢驗，配套的多項臨床生化 質控品對其質量控制顯得尤為重要。在臨床生化分析質量控制過程中，生化分析儀的定期 校準及其質量控制是必不可少的，新儀器安裝、更換不同批次的試劑、室間或室內質控出現 異常、每次維修後都應進行儀器的校準。生化分析儀配套使用的質控品是用於體外診斷的 質量控制物質(定值和非定值)，是一種旨在用於醫學用途的檢測系統中使用的物質、材 料、物品或設備，其目的是評價或驗證測量精密度、測量準確度、由於試劑或分析儀器的變 化檢測系統可能產生的分析偏差等性能特徵。質量控制物質，可用於能力驗證、實驗室內質 量控制。生化分析儀與生化試劑組合的檢測結果的可靠性依賴於質控品的監測，才能保證 報告結果的準確性和不同實驗室檢測結果的可比性。質控品作為生化分析儀測量結果的計 量學溯源性，評價與確保臨床實驗結果準確性唯一依據。目前，生化分析儀質控方法通常採 用①適用的校準品校準生化分析儀及配套試劑，②使用適用的質控品進行質量監測，③分 析判斷生化檢測結果的可靠性。

發明內容
本發明目的是提供一種臨床生化質控品及其製備工藝。本發明臨床生化質控品的 凍幹質控品粘稠度低，容易復溶與混勻，基質效應較小。本發明利用海藻糖以及多種複合酶穩定劑和複合蛋白保護劑、複合酶保護劑的組 合效應；包括保護劑(代號為SH001)、穩定劑(代號為SH060)；兩者按適當比例與人或動物 血清(或血漿)組合凍幹成為多項臨床生化質控品。本發明生化質控品配方組成包括SH001保護劑、SH060穩定劑；兩者按適當比例與 人或動物血清(或血漿)組合而成
(1)、SH001保護劑按以下組分和濃度範圍配製化學試劑為分析純，氯化鈉4. 0 6. Og/L、枸櫞酸0. 1 0. 5g/L、枸櫞酸鈉1. 0 2. 5g/L、磷酸二氫鈉0. 5 1. 5g/L、腺嘌呤 0. 1 0. 8g/L、複合蛋白保護劑 HPD (Protein protectant HPD) 0· 5 2. Og/L、二硫蘇糖 醇(DTT) 1. 0 5. Og/L,生物抑菌劑適量。(2)、SH060穩定劑按以下組分和濃度範圍配製化學試劑為分析純，其濃度範 圍分別為甘露醇6.0 16. 0g/L、海藻糖5.0 10g/L、丙三醇2.0 5. 0g/L、複合酶保 護劑HP 1. 0 5. 0g/L、複合酶穩定劑AES 2. 5 6. 0g/L、牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA) 1· 0 2. 5g/L、迭氮鈉 0· 2 0. 6g/g。(3)、SHOOl保護劑和SH060穩定劑配製後放置2 8 °C冰箱保存待用。本發明多項臨床生化質控品製備工藝步驟如下⑴、基質來源血液中心健康人義務獻血或動物源性全血或血清或血漿。(2)、質量要求生物源性病原體如B型肝炎病毒(HBsAg)、抗一 HCV、抗一 HIV等傳 染性指標均為陰性。⑶、血細胞分離取人類(或動物源性)新鮮全血200 400mL，置水平離心機3000 轉離心30min使血細胞成分與血清或血漿分離，緩慢吸取上清液，計其體積X mL(X為100 250mL)待用。(4)、生化成分保護在200mL血清或血漿基質中緩慢加入SH001保護劑50 60
mL，輕輕搖勻置2°C 8°C 4 8h保存待用。(5)、生化成分穩定上述步驟⑷經保護處理的血清或血漿，再緩慢加入SH060穩 定劑30 40mL，充分混勻後密封置2°C 8°C 4 8h保存。(6)、取樣檢測取1 2mL兩支同時在TC6060全自動生化分析儀檢測，觀察ALT、 AST、TBIL、DBIL、TBA、ALP、γ -GT、CHO、TP、ALB、BUN、CR、UA、GLU、TG、HDL-C、LDL-C、Apo-A 1、 Apo-B, LDH、CK、CK-MB、AMY、ADA、Ca、IP、K、Na、CL、Mg等臨床生化指標是否符合多項臨床生 化質控品標示值要求。如不符合則添加相應的生化成分分別配製成三水平的高、中、低值質 控品。(7)、分裝和凍幹保存採用棕色玻璃瓶將多項臨床生化質控品按一定規格，如 lml、2ml、4ml、5ml等定量分裝、快速冷凍，置醫用冷凍乾燥機內24 30h凍幹、封口保存。血細胞分離時避免溶血，所使用的實驗器具必需潔淨並高壓消毒滅菌；質控品制 備全過程必需無菌操作或在10萬級淨化環境中進行。本發明臨床生化質控品質量監測
(1)、復溶取質控品2. OmLX 20支，精確加2. Oml重蒸餾水使其復溶； ⑵、均一性測定參照「體外診斷試劑校準品、質控品研究技術指導原則」進行。⑶、定值質控品賦值選擇具有實溯源性的校準品(如Roche或Randox)校準生化 分析儀(如TC6060)及配套的生化試劑，然後按儀器使用說明書進行測定20支復溶的質控 品，統計分析計算質控品參考值範圍。本發明臨床生化質控品採用海藻糖以及多種複合酶穩定劑和複合蛋白保護劑、復 合酶保護劑的組合效應；具有對血液中蛋白質、酶和脂類等物質保護和穩定作用，一方面， 保持了酶與蛋白質結構生理活性所需要的環境；另一方面，穩定劑能夠為酶和蛋白提高效 能；再次是採用凍幹技術更利於各種生化成分的長期保存。因此，製備好的質控品，經過生 物溯源性連結程序及其參考方法賦值；在有效期內可作為生化分析儀和相配套生化試劑的 質控品，滿足臨床生化檢驗需求。本發明研製的凍幹質控品粘稠度低，容易復溶與混勻，基質效應較小；密閉後 置-20°C以下保存有效期為12各月，2°C 8°C保存有限期至少為6個月，開瓶使用2°C 8 °C保存可穩定一周。
具體實施例本發明臨床生化質控品包括SH001保護劑和SH060穩定劑。本發明臨床生化質控品配方組成如下
(1)、SH001保護劑氯化鈉5. Og/L、枸櫞酸0. 25g/L、枸櫞酸鈉2. Og/L、磷酸二氫鈉
41. Og/L、腺 嘌呤0. 5g/L、複合蛋白保護劑HPD 1. Og/L、二硫蘇糖醇(DTT) 2. 5g/L、生物抑菌 劑適量(0. 5%)。(2)、SH060穩定劑甘露醇8. Og/L、海藻糖7. 5g/L、丙三醇4. Og/L、複合酶保護劑 HP 2. 5g/L、複合酶穩定劑 AES 4. Og/L、BSA 2. 0g/L 迭氮鈉 0. 5g/g。本發明多項臨床生化質控品製備工藝步驟如下
⑴、基質來源血液中心健康人義務獻血或動物源性全血或血清或血漿。(2)、質量要求生物源性病原體如B型肝炎病毒(HBsAg)、抗一 HCV、抗一 HIV等傳 染性指標均為陰性。(3)、血細胞分離取人類(或動物源性)新鮮全血200mL，置水平離心機3000轉離 心30min使血細胞成分與血清(血漿)分離，緩慢吸取上清液，計其體積為IOOmL待用。(4)、生化成分保護在IOOmL血清(血漿)基質中緩慢加入SH001保護劑25mL，輕 輕搖勻置2 8°C 4 8h保存待用。(5)、生化成分穩定經保護處理的血清(血漿)，再緩慢加入SH060穩定劑25mL，充 分混勻後密封置2°C 8°C 4 8h保存。(6)、取樣檢測取ImL —支在TC6060全自動生化分析儀檢測，觀察臨床生化30項 指標是否符合生化中值質控品水平要求。(7)、分裝和凍幹保存採用棕色玻璃瓶將多項臨床生化質控品按2. Oml定量分 裝、快速冷凍，置醫用冷凍乾燥機內24h凍幹、封口保存。(8)、定值質控品賦值選擇具有實溯源性的校準品(如Roche)校準TC6060生化分 析儀及配套的生化試劑，然後按儀器使用說明書進行測定20支復溶的質控品，統計分析計 算質控品參考值範圍。(9)、保存與臨床使用多項臨床生化質控品密封后置2°C 8°C或_20°C保存，供 臨床生化分析使用。
權利要求
1.一種臨床生化質控品，其特徵在於包括保護劑(SH001)和穩定劑(SH060);兩者按 適當比例與人或動物血清或血漿組合而成；(1)、保護劑(SH001)組成和濃度範圍氯化鈉4.0 6. Og/L、枸櫞酸0. 1 0. 5g/L、枸 櫞酸鈉1. 0 2. 5g/L、磷酸二氫鈉0. 5 1. 5g/L、腺嘌呤0. 1 0. 8g/L、複合蛋白保護劑 HPD 0. 5 2. Og/L、二硫蘇糖醇(DTT) 1. 0 5. Og/L、生物抑菌劑適量；(2)、穩定劑(SH060)組成和濃度範圍甘露醇6. 0 16. Og/L、海藻糖5. 0 10g/L、丙三醇2. 0 5. 0g/L、複合酶保護劑HP1. 0 5. 0g/L、複合酶穩定劑 AES 2. 5 6. 0g/L、BSA 1. 0 2. 5g/L 迭氮鈉 0. 2 0. 6g/g°
2.一種臨床生化質控品的製備工藝，其特徵在於按以下步驟配製，(1)、血細胞分離取人類或動物源性新鮮全血200 400mL，置水平離心機3000轉離 心30min使血細胞成分與血清或血漿分離，緩慢吸取上清液，計其體積為100 250mL，待 用；(2)、生化成分保護在200mL血清或血漿基質中緩慢加入SH001保護劑50 60mL, 輕輕搖勻置2 8°C，保存4 他待用；(3)、生化成分穩定經上述保護處理的血清或血漿，再緩慢加入SH060穩定劑30 40mL,充分混勻後密封置2 8°C，4 8h保存；(4)、取樣檢測取1 2mL兩支同時在TC6060全自動生化分析儀檢測，觀察ALT、AST、 TBIL、DBIL、TBA、ALP、y _GT、CHO, TP、ALB、BUN、CR、UA、GLU, TG、HDL-C, LDL-C, Apo-AU Apo-B, LDH、CK、CK-MB, AMY、ADA、Ca、IP、K、Na、CL、Mg 共 30 項臨床生化指標添加相應的生 化成分可配製成質控品；(5)、分裝和凍幹保存採用棕色玻璃瓶將多項臨床生化質控品按一定規格定量分裝、 快速冷凍，置醫用冷凍乾燥機內M 30h凍幹、封口保存。
全文摘要
本發明臨床生化質控品及其製備工藝，利用海藻糖以及多種複合酶穩定劑和複合蛋白保護劑、複合酶保護劑的組合效應，製備成多項臨床生化質控品，粘稠度低，容易復溶與混勻，基質效應較小。本發明分別對ALT、AST、TBIL、DBIL、TBA、ALP、γ-GT、CHO、TP、ALB、BUN、CR、UA、GLU、TG、HDL-C、LDL-C、Apo-A1、Apo-B、LDH、CK、CK-MB、AMY、ADA等酶或蛋白質、脂類及其代謝產物進行保護，有良好的穩定性，密封后置-20℃以下保存有效期為12各月，2～8℃保存有限期至少為6個月，效期穩定性較長，足以滿足臨床生化檢驗質控控制要求。
文檔編號G01N33/50GK102128917SQ20101057677
公開日2011年7月20日 申請日期2010年12月7日 優先權日2010年12月7日
發明者揭克敏, 顏簫 申請人:江西特康科技有限公司