從吐根中提取分離鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的一種製備方法

2023-12-05 11:26:51 2

專利名稱：從吐根中提取分離鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的一種製備方法
技術領域：
本發明涉及一種從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法。
背景技術：
吐根是多年生常綠矮小灌木，為茜草科，頭九節屬。根呈扭曲圓柱形，暗棕色，莖青綠，枝質軟，花白色。吐根主要產於巴西潮溼森林地帶，商品名為巴西吐根。吐根在印度東部的Bengal、緬甸、馬來亞聯邦、新加坡、印度尼西亞等地種植成功，我國廣東、雲南、臺灣也有引種栽培。
吐根中主要含有醚溶性總生物鹼，其中又以鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼為主。吐根為南美印第安人的藥品，於1672年傳入歐洲，被認為是痢疾的治療藥物，對阿米巴痢疾治療效果較好。現在吐根的應用更為廣泛，作為催吐藥療效確切，即使中等劑量也能刺激嘔吐直至胃內容物被清除；小劑量使用是強祛痰劑，常用於許多止咳藥中，用於支氣管炎、百日咳的治療。吐根具有一定的毒性，其毒性成分和治療成分都是以鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼為主的總生物鹼，該發明對今後製劑中鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的精確控制從而提高藥品安全性具有顯著意義。由於吐根屬於進口藥品，國內對其相關研究甚少，也缺乏相應的提取精製方法的文獻。有報導稱採用乙醇對吐根進行超聲提取，可以有效提取醚溶性生物總鹼許立穎、宋偉峰，吐根醚溶性生物鹼提取工藝研究，製劑與技術，2011年4月8卷第11期但是醚溶性生物鹼包括了許多的成分，且並未涉及到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的提取精製方法。

發明內容
本發明提供一種從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法，該方法包括如下步驟a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入酸性乙醇，超聲提取，得提取液A ；b、濃縮提取液A離心，取上清液，揮盡溶劑，調節PH值至鹼性，得濃縮液B ;C、萃取濃縮液B以乙醚萃取，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ;d、分離純化將殘渣C溶解，注入製備液相，採用製備色譜進行分離純化，採用ODS柱分離，流動相為乙腈三乙胺；根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ；e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別濃縮至有機溶劑除去後，調節PH值至酸性，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。該方法中所指的酸性乙醇，是指將所需濃度的乙醇，加入適量鹽酸，配置成所需酸度的乙醇。本發明從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法優選包括如下步驟
a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入10-40倍量I %-3%的酸性乙醇，乙醇濃度為50-90%，超聲提取0. 5-2小時，得提取液A ;b、濃縮提取液A離心，取上清液，40_60°C減壓揮盡乙醇，調節PH值到10_12，得濃縮液B ；
C、萃取濃縮液B以同體積乙醚萃取1-4次，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ;d、分離純化將殘渣C用乙腈溶解，定容至相當於生藥量Ig每ml，採用製備色譜進行分離純化，色譜條件色譜柱=ODS色譜柱；流動相為乙腈0. 05%三乙胺，室溫體積比為40-45 60-55 ;流速為I. Oml/min-5. Oml/min ;根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ；e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別減壓濃縮至有機溶劑除去後，調整pH值到3-5，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。本發明從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法更優選包括如下步驟a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入20倍量I %的酸性乙醇，乙醇濃度為70%，超聲提取I小時，得提取液A ；b、濃縮提取液A離心，取上清液，40°C減壓揮盡乙醇，調節PH值到10，得濃縮液B ；C、萃取濃縮液B以同樣體積的乙醚萃取4次，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ；d、分離純化將殘渣C用乙腈溶解，定容至相當於生藥量Ig每ml，採用製備色譜進行分離純化，色譜條件色譜柱=C18色譜柱；檢測波長283nm ;流動相為乙腈0. 05%三乙胺，室溫體積比為45 55;流速為5. Oml/min;根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ；e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別減壓濃縮至有機溶劑除去後，調整pH值到4，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。本發明從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法更優選還包括如下步驟a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入30倍量3%的酸性乙醇，乙醇濃度為90%，超聲提取2小時，得提取液A ；b、濃縮提取液A離心，取上清液，60°C減壓揮盡乙醇，調節PH值到12，得濃縮液B ；C、萃取濃縮液B以同樣體積的乙醚萃取I次，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ;d、分離純化將殘渣C用乙腈溶解，定容至相當於生藥量Ig每ml，採用製備色譜進行分離純化，色譜條件色譜柱=C18色譜柱；檢測波長283nm ;流動相為乙腈0. 05%三乙胺，室溫體積比為40 60;流速為I. Oml/min;根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ；e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別減壓濃縮至有機溶劑除去後，加入少量稀鹽酸，調整PH值到5，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。本發明從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法更優選還包括如下步驟
a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入10倍量2%的酸性乙醇，乙醇濃度為60%，超聲提取O. 5小時，得提取液A ;b、濃縮提取液A離心，取上清液，50°C減壓揮盡乙醇，調節PH值到11，得濃縮液B ；C、萃取濃縮液B以同樣體積的乙醚萃取3次，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ；d、分離純化將殘渣C用乙腈溶解，定容至相當於生藥量Ig每ml，採用製備色譜 進行分離純化，色譜條件色譜柱=C18色譜柱；檢測波長283nm ;流動相為乙腈0. 05 %三乙胺，室溫體積比為45 55;流速為3. Oml/min;根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ；e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別減壓濃縮至有機溶劑除去後，加入少量稀鹽酸，調整pH值到3，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。本發明從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法更優選還包括如下步驟a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入40倍量3%的酸性乙醇，乙醇濃度為50%，超聲提取I. 5小時，得提取液A ;b、濃縮提取液A離心，取上清液，60°C減壓揮盡乙醇，調節PH值到10，得濃縮液B ；C、萃取濃縮液B以同體積乙醚萃取2次，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ；d、分離純化將殘渣C用乙腈溶解，定容至相當於生藥量Ig每ml，採用製備色譜進行分離純化，色譜條件色譜柱=C18色譜柱；檢測波長283nm ;流動相為乙腈0. 05 %三乙胺，室溫體積比為45 55;流速為4. Oml/min;根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ；e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別減壓濃縮至有機溶劑除去後，調整pH值到5，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。本發明從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法中，調節酸性乙醇使用鹽酸，調節溶液鹼性使用氨試液。本發明還保護依據上述任一所述的從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法得到的精製鹽酸吐根鹼在製備治療阿米巴病藥物中的應用。本發明從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法中的原料藥材吐根由菌草科植物 Cephaelis acuminate Karsten 或 C. ipecacuanha (Brotero)A. Richard 的根莖和根組成。採用本發明從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法連續生產五批鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼，純度均超過98%，詳細結果見表I表I連續五批生產鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的純度
IEl鹽酸吐根鹼含量％~鹽酸吐根酚鹼含量％~
2012020199. 7898.0權利要求
1.一種從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法，該方法包括如下步驟 a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入酸性乙醇，超聲提取，得提取液A; b、濃縮提取液A離心，取上清液，揮盡溶劑，調節PH值至鹼性，得濃縮液B; C、萃取濃縮液B以乙醚萃取，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ; d、分離純化將殘渣C溶解，注入製備液相，採用製備色譜進行分離純化，採用ODS柱分離，流動相為乙腈三乙胺；根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ； e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別濃縮至有機溶劑除去後，調節PH值至酸性，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。
2.根據權利要求I所述的從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法，該方法包括如下步驟 a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入10-40倍量1%-3%的酸性乙醇，乙醇濃度為50-90 %，超聲提取0. 5-2小時，得提取液A ； b、濃縮提取液A離心，取上清液，40-60°C減壓揮盡乙醇，調節PH值到10-12，得濃縮液B ； C、萃取濃縮液B以同體積乙醚萃取1-4次，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ; d、分離純化將殘渣C用乙腈溶解，定容至相當於生藥量Ig每ml，採用製備色譜進行分離純化，色譜條件色譜柱=ODS色譜柱；流動相為乙腈0. 05%三乙胺，室溫體積比為40-45 : 60-55 ;流速為I. Oml/min-5. Oml/min ;根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酹鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ； e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別減壓濃縮至有機溶劑除去後，調整pH值到3-5，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。
3.根據權利要求I所述的從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法，該方法包括如下步驟 a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入20倍量I%的酸性乙醇，乙醇濃度為70%，超聲提取I小時，得提取液A ; b、濃縮提取液A離心，取上清液，40°C減壓揮盡乙醇，調節PH值到10，得濃縮液B; C、萃取濃縮液B以同樣體積的乙醚萃取4次，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ; d、分離純化將殘渣C用乙腈溶解，定容至相當於生藥量Ig每ml，採用製備色譜進行分離純化，色譜條件色譜柱=C18色譜柱；流動相為乙腈0. 05%三乙胺，室溫體積比為45 55;流速為5. Oml/min;根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ； e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別減壓濃縮至有機溶劑除去後，調整pH值到4，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。
4.根據權利要求I所述的從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法，其特徵在於，該方法包括如下步驟 a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入30倍量3%的酸性乙醇，乙醇濃度為90%，超聲提取2小時，得提取液A ; b、濃縮提取液A離心，取上清液，60°C減壓揮盡乙醇，調節PH值到12，得濃縮液B;C、萃取濃縮液B以同樣體積的乙醚萃取I次，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ; d、分離純化將殘渣C用乙腈溶解，定容至相當於生藥量Ig每ml，採用製備色譜進行分離純化，色譜條件色譜柱=C18色譜柱；流動相為乙腈0. 05%三乙胺，室溫體積比為.40 60 ;流速為I. Oml/min;根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ； e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別減壓濃縮至有機溶劑除去後，加入少量稀鹽酸，調整PH值到5，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。
5.根據權利要求I所述的從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法，其特徵在於，該方法包括如下步驟 a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入10倍量2%的酸性乙醇，乙醇濃度為60%，超聲提取0.5小時，得提取液A ; b、濃縮提取液A離心，取上清液，50°C減壓揮盡乙醇，調節PH值到11，得濃縮液B； C、萃取濃縮液B以同樣體積的乙醚萃取3次，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ; d、分離純化將殘渣C用乙腈溶解，定容至相當於生藥量Ig每ml，採用製備色譜進行分離純化，色譜條件色譜柱=C18色譜柱；流動相為乙腈0. 05%三乙胺，室溫體積比為.40 60 ;流速為3. Oml/min;根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ； e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別減壓濃縮至有機溶劑除去後，加入少量稀鹽酸，調整PH值到3，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。
6.根據權利要求I所述的從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法，其特徵在於，該方法包括如下步驟 a、超聲提取取吐根藥材，粉碎，加入40倍量3%的酸性乙醇，乙醇濃度為50%，超聲提取I. 5小時，得提取液A ; b、濃縮提取液A離心，取上清液，60°C減壓揮盡乙醇，調節PH值到10，得濃縮液B; C、萃取濃縮液B以同體積乙醚萃取2次，收集乙醚層，揮幹溶劑，得殘渣C ; d、分離純化將殘渣C用乙腈溶解，定容至相當於生藥量Ig每ml，採用製備色譜進行分離純化，色譜條件色譜柱=C18色譜柱；流動相為乙腈0. 05%三乙胺，室溫體積比為45 55;流速為4. Oml/min;根據檢測圖譜鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼對應的譜帶，分別餾分收集溶液D和溶液E ； e、冷凍乾燥將得到的溶液D和溶液E分別減壓濃縮至有機溶劑除去後，調整pH值到.5，進行冷凍乾燥，得到鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。
7.根據權利要求1-6任一所述的從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方 法，其特徵在於，調節酸性使用鹽酸，調節鹼性使用氨試液。
8.根據權利要求1-6任一所述的從吐根中提取精製鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法，其特徵在於，步驟d中，色譜條件中檢測波長為283nm。
全文摘要
本發明公開了一種從吐根中分離製備鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼的方法。茜草科植物吐根具有催吐、鎮咳祛痰劑的作用，目前已知其含有鹽酸吐根鹼、鹽酸吐根酚鹼等6種生物鹼。本發明提供一種製備方法，通過提取、純化、冷凍乾燥等步驟，可以從吐根中得到含量為98％以上的鹽酸吐根鹼和鹽酸吐根酚鹼。
文檔編號C07D455/00GK102633793SQ20121011315
公開日2012年8月15日 申請日期2012年4月18日 優先權日2012年4月18日
發明者宋劍, 王宗權, 裴彩雲, 賈永鑫, 韓桂茹 申請人:宋劍