一種中藥組合物在製備治療急慢性胃腸炎的藥物中的應用的製作方法
2023-12-08 04:18:41 5
本發明涉及生物醫藥技術領域，尤其是一種中藥組合物的應用。
背景技術：
急慢性胃腸炎是消化系統常見病，由於炎症反應及胃腸道平滑肌痙攣等原因，其主要症狀是嘔吐、洩瀉、胃腸功能紊亂。
急性胃炎是指各種外在和內在因素引起的急性廣泛性或局限性的胃黏膜急性炎症；疾病誘因多樣，包括急性應激、藥物、缺血、膽汁反流和感染等，臨床症狀主要表現為上腹疼痛、腹脹不適、噁心、嘔吐，有時伴腹瀉，食慾下降等症狀。寒邪客胃證是因外感寒邪，脘腹受涼；或過食寒涼傷中，氣機凝滯，胃氣不和，收引作痛；主症為上腹疼痛、腹脹、噁心、嘔吐；次症為惡寒喜暖、得溫痛減。
西醫對急慢性胃腸炎的治療主要是運用抗生素進行消炎、止痛、抗感染治療，或是採用激素治療包括灌腸治療，很多藥物只是止痛、消炎、消腫等，還是以症狀的控制為主，雖然都可以暫時緩解其症狀，但是治標不治本，治療費用高，治療時間長，經常反覆，久治不愈，嚴重影響了患者的工作和生活，因此，提供一種高效無害的治療急慢性胃腸炎的藥物具有重要意義。
技術實現要素：
基於此，本發明的目的在於克服上述現有技術的不足之處而提供一種中藥組合物在製備治療急慢性胃腸炎的藥物中的應用。
為實現上述目的，本發明採用的技術方案為：一種中藥組合物在製備治療急慢性胃腸炎的藥物中的應用，其特徵在於，所述中藥組合物包含以下重量份的組分：樟腦20～40份、水楊酸甲酯200～300份、松節油80～110份、薄荷素油200～300份、丁香羅勒油10～20份、樟油100～200份、八角茴香油10～30份、肉桂油10～30份、冰片2～4份、薄荷腦20～35份、桉油30～50份、茶油提取物40～120份。
優選地，所述茶油提取物從茶油組合物中提取製得，所述茶油組合物包含以下重量份的組分：卷柏1.0份、鵝不食草1.0份、水芙蓉1.0份、辛夷1.0份、山白芷0.5份、徐長卿1.0份、山銀花0.5份、救必應0.5份、金不換1.0份、白半楓荷0.5份、蓽澄茄0.5份、麻黃0.5份、重樓0.25份、人字草0.25份、金線風0.25份、金耳環0.25份、一朵雲0.25份、吊黃0.25份。
更優選地，所述茶油組合物還包含以下重量份的組分：兩面針1.0份、九裡香1.0份、紅花1.0份、水芙蓉1.0份、千裡光1.0份、大頭陳1.0份、當歸1.0份、鵝不食草1.0份、三七1.0份、腫節風1.0份、雞骨香1.0份、砂仁0.55份、獨活0.55份、羌活0.55份、姜皮0.55份、陳皮0.55份、香附0.5份、野菊花0.5份、桂枝0.5份、小羅傘0.5份、蔓荊子0.5份、桔梗0.5份、紫珠葉0.5份、地膽草0.5份、細辛0.5份、五指柑0.5份、肉豆蔻0.5份、木防己0.5份、三叉苦0.5份、救必應0.5份、地稔0.5份、防風0.5份、半枝蓮0.5份、鐵包金0.5份、柴胡0.5份、飛天蠄蟧0.5份、雞骨草0.5份、荊芥0.5份、虎杖0.5份、鉤藤0.5份、一枝黃花0.45份、白花燈籠0.43份、白花蛇舌草0.43份、石仙桃0.25份、五月艾0.25份、皂角刺0.25份、木香0.25份、山芝麻0.25份、益母草0.25份、紫蘇葉0.25份、倒扣草0.25份、側柏葉0.25份、魚腥草0.25份。
優選地，所述中藥組合物的茶油提取物是由上述中藥組合物粉碎後用茶油浸漬提取，所述茶油的重量份為50～200份；更優選地，所述中藥組合物的茶油提取物是由上述中藥組合物粉碎後用二氧化碳超臨界法或水蒸氣蒸餾法提取，再用茶油定容得到的。
優選地，所述急慢性胃腸炎為急性胃炎。
中醫理論認為，「卒然而嘔吐，定是邪客胃府」(《古今醫築·嘔吐噦門》)；「洩瀉之本，無不由於脾胃(《景嶽全書·淮瀉》)，可見急慢性腸胃炎病位在脾胃，故中醫臨床治療以健運脾胃、止吐降逆為主。本發明所述中藥組合物包括兩面針、徐長卿、九裡香、辛夷花、紅花、水芙蓉、還魂草、金不換、千裡光、大頭陳、當歸、鵝不食草、三七、腫節風、雞骨香、砂仁、獨活、羌活、姜皮、陳皮、香附、野菊花、山白芷、桂枝、小羅傘、蔓荊子、桔梗、紫珠葉、地膽草、細辛、五指柑、肉豆蔻、木防己、三叉苦、金銀花、救必應、白半楓荷、山蒼子、麻黃、地稔、防風、半枝蓮、鐵包金、柴胡、飛天蠄蟧、雞骨草、荊芥、虎杖、鉤藤、一枝黃花、白花燈籠、白花蛇舌草、人字草、金線風、石仙桃、五月艾、皂角刺、木香、山芝麻、益母草、紫蘇葉、倒扣草、側柏葉、金耳環、一朵雲、七葉一枝花、魚腥草、吊黃、樟腦、水楊酸甲酯、松節油、薄荷油、丁香羅勒油、樟油、八角茴香油、肉桂油、冰片、薄荷腦、桉油等成分，輔料為茶油，具有祛風解毒、消腫止痛的功能，已製作成中藥外用搽劑，在臨床應用於治療感冒頭痛、蟲蚊咬傷、無名腫毒、舟車眩暈等多年，評價良好、療效確切、安全性好。根據所述中藥組合物組方特點、藥理藥效研究結果以及民間臨床用藥，對所述中藥組合物用於製備治療急慢性胃腸炎的藥物中的應用進行了研究，進行了以安慰劑平行對照，分層區組隨機、雙盲、多中心臨床試驗，發現所述中藥組合物對腹痛、腹脹、噁心、嘔吐等症狀均有很好的改善作用，通過所述組合物對治療急性胃炎(寒邪客胃證)臨床症狀的研究發現，由所述組合物製備的藥物，對治療急慢性胃腸炎，具有較好的臨床療效，且因為所述組合物為中藥配方，安全性好。
優選地，所述治療急慢性胃腸炎的藥物為外用製劑或口服製劑，
更優選地，所述外用製劑為外用搽劑，所述口服製劑為軟膠囊劑。
優選地，所述中藥外用搽劑的製備方法為：將所述中藥組合物中除樟腦、水楊酸甲酯、松節油、薄荷油、丁香羅勒油、樟油、八角茴香油、肉桂油、冰片、薄荷腦、桉油十一味成分外，其餘兩面針等六十八味成分加適量茶油，浸漬15天，過濾，濾液中加入樟腦、水楊酸甲酯、松節油、薄荷油、丁香羅勒油、樟油、八角茴香油、肉桂油、冰片、薄荷腦、桉油十一味成分及適量葉綠素，攪拌，靜置5天，取澄清液，加茶油製成1000ml，即得所述搽劑。
本發明還提供一種治療急慢性胃腸炎的藥物，所述藥物包含有效量的中藥組合物和藥學上可接受的輔料，所述中藥組合物包含以下重量份的組分：樟腦20～40份、水楊酸甲酯200～300份、松節油80～110份、薄荷素油200～300份、丁香羅勒油10～20份、樟油100～200份、八角茴香油10～30份、肉桂油10～30份、冰片2～4份、薄荷腦20～35份、桉油30～50份、茶油提取物40～120份。
優選地，所述茶油提取物從茶油組合物中提取製得，所述茶油組合物包含以下重量份的組分：卷柏1.0份、鵝不食草1.0份、水芙蓉1.0份、辛夷1.0份、山白芷0.5份、徐長卿1.0份、山銀花0.5份、救必應0.5份、金不換1.0份、白半楓荷0.5份、蓽澄茄0.5份、麻黃0.5份、重樓0.25份、人字草0.25份、金線風0.25份、金耳環0.25份、一朵雲0.25份、吊黃0.25份。
更優選地，所述茶油組合物還包含以下重量份的組分：兩面針1.0份、九裡香1.0份、紅花1.0份、水芙蓉1.0份、千裡光1.0份、大頭陳1.0份、當歸1.0份、鵝不食草1.0份、三七1.0份、腫節風1.0份、雞骨香1.0份、砂仁0.55份、獨活0.55份、羌活0.55份、姜皮0.55份、陳皮0.55份、香附0.5份、野菊花0.5份、桂枝0.5份、小羅傘0.5份、蔓荊子0.5份、桔梗0.5份、紫珠葉0.5份、地膽草0.5份、細辛0.5份、五指柑0.5份、肉豆蔻0.5份、木防己0.5份、三叉苦0.5份、救必應0.5份、地稔0.5份、防風0.5份、半枝蓮0.5份、鐵包金0.5份、柴胡0.5份、飛天蠄蟧0.5份、雞骨草0.5份、荊芥0.5份、虎杖0.5份、鉤藤0.5份、一枝黃花0.45份、白花燈籠0.43份、白花蛇舌草0.43份、石仙桃0.25份、五月艾0.25份、皂角刺0.25份、木香0.25份、山芝麻0.25份、益母草0.25份、紫蘇葉0.25份、倒扣草0.25份、側柏葉0.25份、魚腥草0.25份。
優選地，所述中藥組合物的茶油提取物是由上述中藥組合物粉碎後用茶油浸漬提取。更優選地，所述中藥組合物的茶油提取物是由上述中藥組合物粉碎後用二氧化碳超臨界法或水蒸氣蒸餾法提取，再用茶油定容得到的。
優選地，所述藥物為外用製劑或口服製劑。
優選地，所述口服製劑為軟膠囊劑。
優選地，所述治療急慢性胃腸炎的藥物為一種中藥外用搽劑。
相對於現有技術，本發明的有益效果為：
本發明將所述中藥組合物應用於製備治療急慢性胃腸炎的藥物，從病發本質機理出發，成分為中藥配方，無毒無副作用，臨床研究發現所述藥物對腹痛、腹脹、噁心、嘔吐等症狀均有很好的改善作用，對治療急慢性胃腸炎，尤其是急性胃炎(寒邪客胃證)具有很好的臨床療效。
附圖說明
圖1為本發明所製備治療急慢性腸胃炎藥物對ACH的對抗作用圖；
圖2為風油精對ACH的對抗作用圖；
圖3為正常家兔小腸平滑肌加入ACH後的影響圖。
具體實施方式
為更好的說明本發明的目的、技術方案和優點，下面將結合具體實施例對本發明作進一步說明。
實施例1
本發明所述治療急慢性胃腸炎的藥物，本實施例所述藥物包含以下重量份的成分：
中藥組合物A：樟腦20份、水楊酸甲酯300份、松節油80份、薄荷素油300份、丁香羅勒油10份、樟油200份、八角茴香油10份、肉桂油30份、冰片2份、薄荷腦35份、桉油50份、茶油提取物40份；
其中，所述茶油提取物是由十八種中藥組合物粉碎後，再用50份茶油(由廣東羅浮山藥業有限公司提供)浸漬提取所得，所述茶油提取物包括以下重量份的十八種中藥組合物：卷柏1.0份、鵝不食草1.0份、水芙蓉1.0份、辛夷1.0份、山白芷0.5份、徐長卿1.0份、山銀花0.5份、救必應0.5份、金不換1.0份、白半楓荷0.5份、蓽澄茄0.5份、麻黃0.5份、重樓0.25份、人字草0.25份、金線風0.25份、金耳環0.25份、一朵雲0.25份、吊黃0.25份；
製備方法
將所有中藥材粉碎成細粉，用茶油浸漬15天，濾過，與中藥組合物中除茶油提取物外的十一種精油混合，攪拌，靜置5天，取澄清液，加茶油稀釋，製成軟膠囊內容物。囊材配比：明膠、甘油和水的比例為1：0.3：0.9。用壓製法製成軟膠囊。
實施例2
本發明所述治療急慢性胃腸炎的藥物，本實施例所述藥物為一種中藥外用搽劑，包含以下重量份的成分：
中藥組合物A：樟腦40份、水楊酸甲酯200份、松節油110份、薄荷素油200份、丁香羅勒油20份、樟油100份、八角茴香油30份、肉桂油10份、冰片4份、薄荷腦20份、桉油30份、茶油提取物120份；
其中，所述茶油提取物包括以下重量份的中藥組合物B：卷柏1.0份、鵝不食草1.0份、水芙蓉1.0份、辛夷1.0份、山白芷0.5份、徐長卿1.0份、山銀花0.5份、救必應0.5份、金不換1.0份、白半楓荷0.5份、蓽澄茄0.5份、麻黃0.5份、重樓0.25份、人字草0.25份、金線風0.25份、金耳環0.25份、一朵雲0.25份、吊黃0.25份、兩面針1.0份、九裡香1.0份、紅花1.0份、水芙蓉1.0份、千裡光1.0份、大頭陳1.0份、當歸1.0份、鵝不食草1.0份、三七1.0份、腫節風1.0份、雞骨香1.0份、砂仁0.55份、獨活0.55份、羌活0.55份、姜皮0.55份、陳皮0.55份、香附0.5份、野菊花0.5份、桂枝0.5份、小羅傘0.5份、蔓荊子0.5份、桔梗0.5份、紫珠葉0.5份、地膽草0.5份、細辛0.5份、五指柑0.5份、肉豆蔻0.5份、木防己0.5份、三叉苦0.5份、救必應0.5份、地稔0.5份、防風0.5份、半枝蓮0.5份、鐵包金0.5份、柴胡0.5份、飛天蠄蟧0.5份、雞骨草0.5份、荊芥0.5份、虎杖0.5份、鉤藤0.5份、一枝黃花0.45份、白花燈籠0.43份、白花蛇舌草0.43份、石仙桃0.25份、五月艾0.25份、皂角刺0.25份、木香0.25份、山芝麻0.25份、益母草0.25份、紫蘇葉0.25份、倒扣草0.25份、側柏葉0.25份、魚腥草0.25份；
將組合物B中各成分混合粉碎成粗粉，混勻，加適量茶油，50℃浸漬15天，趁熱用300目篩濾過，濾液放置至室溫，再用400目篩濾過，濾液中加入組合物A中除茶油提取物以外的其他十一味成分及0.02g葉綠素，攪拌，靜置24小時，濾過，濾液加茶油製成1000ml，即得所述外用搽劑。
以下實施例中所用「本發明中所述的中藥組合物」包含以下重量份的組分：樟腦20～40份、水楊酸甲酯200～300份、松節油80～110份、薄荷素油200～300份、丁香羅勒油10～20份、樟油100～200份、八角茴香油10～30份、肉桂油10～30份、冰片2～4份、薄荷腦20～35份、桉油30～50份、茶油提取物40～120份。其中，所述茶油提取物從茶油組合物中提取製得，所述茶油組合物包含以下重量份的組分：卷柏1.0份、鵝不食草1.0份、水芙蓉1.0份、辛夷1.0份、山白芷0.5份、徐長卿1.0份、山銀花0.5份、救必應0.5份、金不換1.0份、白半楓荷0.5份、蓽澄茄0.5份、麻黃0.5份、重樓0.25份、人字草0.25份、金線風0.25份、金耳環0.25份、一朵雲0.25份、吊黃0.25份。更佳地，所述茶油組合物還包括以下重量份的組分：兩面針1.0份、九裡香1.0份、紅花1.0份、水芙蓉1.0份、千裡光1.0份、大頭陳1.0份、當歸1.0份、鵝不食草1.0份、三七1.0份、腫節風1.0份、雞骨香1.0份、砂仁0.55份、獨活0.55份、羌活0.55份、姜皮0.55份、陳皮0.55份、香附0.5份、野菊花0.5份、桂枝0.5份、小羅傘0.5份、蔓荊子0.5份、桔梗0.5份、紫珠葉0.5份、地膽草0.5份、細辛0.5份、五指柑0.5份、肉豆蔻0.5份、木防己0.5份、三叉苦0.5份、救必應0.5份、地稔0.5份、防風0.5份、半枝蓮0.5份、鐵包金0.5份、柴胡0.5份、飛天蠄蟧0.5份、雞骨草0.5份、荊芥0.5份、虎杖0.5份、鉤藤0.5份、一枝黃花0.45份、白花燈籠0.43份、白花蛇舌草0.43份、石仙桃0.25份、五月艾0.25份、皂角刺0.25份、木香0.25份、山芝麻0.25份、益母草0.25份、紫蘇葉0.25份、倒扣草0.25份、側柏葉0.25份、魚腥草0.25份。
實施例3
對本發明所製備得到治療急慢性腸胃炎藥物進行抗炎實驗研究。
實驗試劑:吲哚美辛搽劑(進口藥品註冊證號H20050406，批號：CBD7E，興和株式會社)；茶油，廣東羅浮山藥業有限公司提供；水合氯醛，天津市科密歐化學試劑有限公司，批號：20080118。
藥物劑量：小鼠高劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.2ml；中劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.2ml；低劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.05ml、用茶油配至0.2ml；吲哚美辛組0.1ml；空白組使用茶油0.2ml。大鼠高劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.4ml；中劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.2ml、用茶油配至0.4ml；低劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.4ml；吲哚美辛組0.2ml、空白組使用茶油0.4ml。
試驗動物：KM小鼠，雌雄兼用，體重18～22g，購自廣州中醫藥大學實驗動物中心(合格證號：SCXK(粵)2008-0020，粵監證字2008A003)；SD大鼠，購自廣州中醫藥大學實驗動物中心(合格證號：SCXK(粵)2008-0020，粵監證字2008A002)。。
統計方法結果以表示，採用SPSS 11統計軟體進行組間t檢驗。
實驗設計：
①對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響
取KM小鼠60隻，體重18～22g，雌雄兼用，隨機分為空白組，本發明所製備治療急慢性腸胃炎藥物高、中、低劑量組和吲哚美辛組，每組12隻。將小鼠腹部部分剃毛做給藥部位，給藥劑量如表1，給藥方式為塗抹，給藥3d，末次給藥30min後用100％二甲苯0.1ml使用小鼠右耳的兩側致炎，左耳不塗做對照，塗藥後20min將小鼠處死，剪下兩耳，用直徑為0.8mm的打孔器切下兩耳圓形耳片，立即稱重，計算耳腫脹率，結果見表1所示。
表1本發明所製備治療急慢性腸胃炎藥物對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響(n＝12；)
註：與空白組比較*P<0.05**P<0.01
結果表明，本發明中所述的中藥組合物各劑量組和吲哚美辛組與空白組比較腫脹率均有減輕，其中本發明中所述的中藥組合物高、中劑量的作用最強(P<0.01)，說明對本發明中所述的中藥組合物二甲苯所致小鼠耳腫脹有明顯的抑制作用。
②對大鼠棉球肉芽腫的影響
選SD大鼠50隻，體重180～220g，雌雄兼用，用3.5％水合氯醛麻醉後，於無菌條件下，在其背部切開小口，用眼科鑷將重量為10mg的滅菌棉球從小切口植入皮下，隨即縫合皮膚，用碘液、青黴素和氯黴素消毒後常規飼養備用。手術次日取造模成功大鼠50隻，隨機分為模型組，本發明中所述的中藥組合物高、中、低劑量組和吲哚美辛組，每組10隻。將大鼠腹部部分剃毛做給藥部位，在手術次日開始給藥，給藥劑量如表2，給藥方式為塗抹，連續15d。15d後處死大鼠，打開原切口，將棉球連同周圍結締組織一起取出，剔除脂肪組織，放烘箱中60℃烘乾12h至恆重，稱乾重，減去棉球原重量即得肉芽腫的重量。結果見表2所示。
表2本發明中所述的中藥組合物對大鼠棉球肉芽腫引起的慢性炎症的影響(n＝10；)
註：與模型組比較*P<0.05**P<0.01
結果表明，與模型組比較，本發明中所述的中藥組合物各劑量組和吲哚美辛組均可降低棉球肉芽腫的乾重。其中本發明中所述的中藥組合物高、中劑量的作用最強(P<0.01)，說明本發明中所述的中藥組合物有明顯抑制肉芽組織增生的作用。
實驗例4
對本發明中所述的中藥組合物進行抑菌試驗研究。
①體外抑菌
試驗藥物：本發明中所述的中藥組合物。
試驗菌種：選用4種有代表性的引起皮膚感染的常見病原菌和條件致病菌：金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸桿菌和綠膿桿菌，菌種均來自北京衛生部生物製品研究所。
試驗方法：(1)菌液製備：將不同菌株新鮮培養物(菌落)製成菌液.濃度相當於0.5麥氏比濁管。(2)藥液製備：將本發明中所述的中藥組合物，每1ml藥液加0.4吐溫80助溶，再用營養肉湯配置成0.2g/ml使用。(3)含藥試管制備取滅菌試管10隻，第1管無菌操作加入2ml l M—H培養液作空白對照管，第2～9管無菌操作加入1ml菌液.第2管再加入1ml藥液，混勻後取1ml加入第3管，第4～9管依次倍比稀釋，第10管加入2ml菌液作陽性對照管，35℃培養24～48h，觀察本發明中所述的中藥組合物對4種致病菌的抑菌作用，結果見表3。
表3本發明中所述的中藥組合物體外抑菌試驗結果
結果表明，本發明中所述的中藥組合物對金黃色葡萄球菌最低抑菌濃度為0.00625g/ml、對乙型溶血性鏈球菌最低抑菌濃度為0.00151g/ml、對大腸桿菌最低抑菌濃度為0.00625g/ml、對綠膿桿菌最低抑菌濃度為0.2g/ml。說明本發明中所述的中藥組合物對金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌等4種菌有一定的抑制作用。
②體內抑菌
試驗藥物：本發明中所述的中藥組合物。
試驗菌種：大腸桿菌，菌種來自北京衛生部生物製品研究所。
藥物劑量：小鼠高劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.2ml；中劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.2ml；低劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.05ml、用茶油配至0.2ml；雲南白藥酊組0.1ml；模型組使用茶油0.2ml。
試驗動物：KM小鼠，雌雄各半，體重18～22g，購自廣州中醫藥大學實驗動物中心(合格證號：SCXK(粵)2008-0020，粵監證字2008A003)。
實驗設計：取KM小鼠300隻，體重18～22g，雌雄兼用，隨機分為5組，空白對照組、雲南白藥酊組，本發明中所述的中藥組合物高、中、低劑量組，每組20隻。每鼠腹腔注射大腸桿菌菌懸液0.5ml。將小鼠腹部部分剃毛做給藥部位。於接種菌液前3d和感染後4d，按表4中所示劑量分別給藥，給藥方式為塗抹，共給藥7d。各組小鼠正常飼養，記錄各組動物死亡情況，以動物的死亡率來評價藥物的療效，結果見表4。
表4本發明中所述的中藥組合物對大腸桿菌感染小鼠的治療作用
註：與空白組比較*P<0.05**P<0.01
結果表明，本發明中所述的中藥組合物高、中劑量組對大腸桿菌感染小鼠具有較好的抗感染作用，且呈現一定的量效關係。
實驗例5
對本發明中所述的中藥組合物進行鎮痛試驗研究。
藥物與試劑：本發明中所述的中藥組合物；雲南白藥酊(國藥準字Z53021238，批號：20080108，雲南白藥集團股份有限公司)；茶油，廣東羅浮山藥業有限公司。
藥物劑量：小鼠高劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.2ml；中劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.2ml；低劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.05ml、用茶油配至0.2ml；雲南白藥酊組0.1ml；空白組使用茶油0.2ml。
試驗動物：KM小鼠，60隻，雌雄各半，75隻雌性，體重18～22g，均購自廣州中醫藥大學實驗動物中心(合格證號：SCXK(粵)2008-0020，粵監證字2008A003)。
統計方法結果以表示，採用SPSS 11統計軟體進行組間t檢驗。
實驗設計：扭體法：取KM小鼠60隻，體重18～22g，雌雄兼用，隨機分為空白組，本發明中所述的中藥組合物高、中、低劑量組和雲南白藥酊組，每組12隻，分別對本發明所製得藥物進行相同實驗。將小鼠腹部部分剃毛做給藥部位。給藥7d，給藥劑量如表5。於末次給藥60min後腹腔注射0.8％醋酸溶液0.2ml/只，觀察10min內每隻小鼠第一次因疼痛引起扭體的時間(扭體潛伏期)和扭體次數。結果見表5。
表5本發明中所述的中藥組合物對醋酸致小鼠疼痛扭體的影響(n＝12；)
註：與空白組比較*P<0.05**P<0.01
結果表明，本發明中所述的中藥組合物各劑量組和雲南白藥組小鼠扭體數與空白組相比均減少，扭體潛伏期延長，其中本發明中所述的中藥組合物高劑量的作用最強(P<0.01)，說明對醋酸致小鼠疼痛扭體有明顯的鎮痛作用。
實驗例6
實驗動物：KM小鼠，雌雄各半，體重18～22g，購自廣州中醫藥大學實驗動物中心(合格證號：SCXK(粵)2008-0020，粵監證字2008A003)
實驗藥物:高劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.2ml；中劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.2ml；低劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.05ml、用茶油配至0.2ml；阿託品組每日皮下注射0.1ml；空白組使用茶油0.2ml。所使用的硫酸阿託品注射液(國藥準字H31021172，批號：080301，上海禾豐製藥有限公司)；茶油，廣東羅浮山藥業有限公司。
統計方法結果以表示，採用SPSS 11統計軟體進行組間t檢驗。
實驗設計：
取KM小鼠75隻，體重18～22g，雌雄兼用，隨機分為空白組，本發明中所述的中藥組合物高、中、低劑量組和阿託品組，每組15隻。將小鼠腹部部分剃毛做給藥部位，高劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.2ml；中劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.2ml；低劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.05ml、用茶油配至0.2ml；阿託品組每日皮下注射0.1ml；空白組使用茶油0.2ml。連續給藥3d，給藥方式塗抹，給藥劑量如下，於末次給藥後，將已禁食不禁水18h的小鼠分別灌胃給予半固體營養糊4％CMC-Na，每隻0.8ml。20min後脫頸椎處死，打開腹腔，結紮胃賁門和幽門，取胃，用濾紙拭於後稱全胃重，然後沿胃大彎剪開胃體，洗去胃內容物，拭乾稱淨重。以胃全重和胃淨重的差值為胃內殘留物重，計算胃內殘留物佔所灌半固體糊的重量百分比為胃內殘留率。結果見表6。
表6本發明中所述的中藥組合物對小鼠胃排空的影響(n＝15，)
註：與空白組比較*P<0.05**P<0.01
結果表明，高劑量的本發明中所述的中藥組合物和阿託品能增加小鼠胃殘留率，對正常小鼠的胃排空有明顯的抑制作用。
實驗例7
對本發明中所述的中藥組合物進行家鴿止嘔試驗研究。
實驗動物：家鴿，雌雄兼用，體重200～250g。購自廣州中醫藥大學實驗動物中心。
實驗藥物：高劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.4ml；中劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.2ml、用茶油配至0.4ml；低劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.4ml；風油精組0.2ml；空白組使用茶油0.4ml。
實驗設計：
取體重300～400g健康家鴿50隻，雌雄兼用，隨機分為空白組、本發明中所述的中藥組合物高、中、低劑量組、風油精組5組。禁食12h後，腹部拔毛做給藥部位，本發明中所述的中藥組合物高劑量組使用0.4ml、本發明中所述的中藥組合物中劑量組0.2ml，用茶油配至0.4ml、本發明中所述的中藥組合物低劑量組0.1ml，用茶油配至0.4ml、風油精組0.2ml、空白組使用茶油0.4ml。給藥方式塗抹，給藥後1h，每鴿灌服硫酸銅水溶液200mg/kg。記錄各鴿出現第一次嘔吐的時間(嘔吐潛伏期)和給硫酸銅1h內嘔吐的次數(嘔吐頻率)。結果見表7。
表7本發明所述中藥組合物對家鴿灌服硫酸銅所致嘔吐的影響(n＝10；)
註：與空白組比較*P<0.05**P<0.01
結果表明，本發明中所述的中藥組合物能明顯延長形成嘔吐所需的時間，並有減少家鴿嘔吐頻率的趨勢。
實驗例8
對本發明中所述的中藥組合物進行大鼠胃液分析研究。
實驗動物：SD大鼠，雌雄兼用，體重180～220g，購自廣州中醫藥大學實驗動物中心(合格證號：SCXK(粵)2008-0020，粵監證字2008A002)。
實驗藥物：大鼠高劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.4ml；中劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.2ml、用茶油配至0.4ml；低劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.4ml；嗎丁啉組灌胃給予1.54mg/kg，劑量1ml/100g。
實驗設計：取SD大鼠50隻，體重180～220g，雌雄兼用，隨機分成空白組、嗎丁啉組、本發明中所述的中藥組合物高、中、低劑量5組，每組l0隻。將大鼠腹部部分剃毛做給藥部位，高劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.4ml；中劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.2ml、用茶油配至0.4ml；低劑量組使用本發明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.4ml；嗎丁啉組灌胃給予1.54mg/kg，劑量1ml/100g；空白組使用茶油0.4ml。給藥方式塗抹，連續給藥3d，於末次給藥後禁食但不禁水24h。在乙醚麻醉下固定大鼠，沿腹中線剪開一小口，找出胃並結紮幽門。縫合切口，4h後拆線打開腹腔，結紮賁門，摘取全胃，用濾紙擦淨血跡，沿胃大彎剪開，傾出胃內容物置離心管中，2000r/rain離心10min。記錄胃液量，並用精密pH試紙測定胃內容物pH值。胃液總酸度的測定：取上清胃液1.0mL，加酚酞指示劑2滴，用0.02mol/L的NaOH滴定液滴定至終點，記錄所用去的Na0H溶液量，計算胃液總酸度。總酸度(mind/L)＝所用的NaOH毫升數×20。胃蛋白酶活性測定：取上清胃液0.8mL放入10mL的具塞試管，加0.05mol/L鹽酸液5mL，放進8cm長的蛋白管2支，塞好管塞，在37℃水浴中孵育24h，取出蛋白管，測量每支蛋白管兩端透明部分的長度，求平均值。結果見表8。
表8本發明中所述的中藥組合物對大鼠胃液分泌的影響(n＝10；)
註：與空白組比較*P<0.05**P<0.01
結果表明，本發明中所述的中藥組合物中、高劑量組能抑制大鼠胃液酸度，高劑量組能提高胃蛋白酶活性，各組有抑制胃液分泌的傾向，但與空白對照組比較，差異無顯著性意義。
實驗例9
對本發明中所述的中藥組合物進行解痙試驗研究。
實驗藥物：本發明中所述的中藥組合物(國藥準字Z44022355，批號：L08F041，廣東羅浮山藥業有限公司)；風油精(國藥準字Z44021847，批號：P1082，白雲山製藥廠)。
實驗動物：紐西蘭大耳兔，雌雄兼用，體重2.5～3.0kg，購自廣州中醫藥大學實驗動物中心，合格證號：SCXK(粵)2008-0020，粵監證字2008A006。SD大鼠，雌雄兼用，體重180～220g，廣州中醫藥大學實驗動物中心(合格證號：SCXK(粵)2008-0020，粵監證字2008A002)。
結果以表示，採用SPSS 11統計軟體進行組間t檢驗。
實驗設計
①對離體家兔小腸平滑肌的作用：取飢餓24h的家兔，擊斃後，打開腹腔，剪取十二直腸2～3cm，立刻放入裝有37℃的克氏液的浴槽中並通以95％O2和5％CO2，穩定約30min後，採用PowerLab多導生理記錄儀記錄正常值後，先加入1μmol/LAch 0.1ml，待穩定後分別加入不同劑量的本發明中所述的中藥組合物、風油精，並記錄5min。記錄兔腸道平滑肌在加人藥物後收縮活動的改變和對Ach的對抗作用。實驗結果見表9。
表9本發明所述中藥組合物對家兔離體小腸平滑肌收縮活動的影響(n＝6；)
註：與自身前後比較*P<0.05**P<0.01
表9結果表明，ACH可引起家兔離體小腸痙攣性收縮，本發明中所述的中藥組合物高、中劑量和風油精均可顯著減少離體家兔小腸平滑肌的收縮振幅，說明對ACH有明顯的對抗作用，能起到鎮痛解痙的療效。
②對大鼠離體胃條試驗：取禁食48h的SD大鼠，擊斃後，打開腹腔，剪取胃立刻放入Krebs液中。沿胃小彎剪開胃腔，去除胃黏膜，並在胃底部橫向剪下胃肌條，將胃肌條放入裝有37℃的克氏液的浴槽中並通以95％O2和5％CO2，穩定約30min，用PowerLab多導生理記錄儀記錄正常值後，先加入1μmol/LAch，待穩定後分別加入不同劑量的本發明中所述的中藥組合物、風油精，並記錄5min。記錄腸道平滑肌在加人藥物後收縮活動的改變和對Ach的對抗作用，用基線(張力)下降的mv差值數來表示。結果見表10。
表10本發明所述中藥組合物對大鼠離體胃平滑肌收縮活動的影響(n＝10；)
註：與自身前後比較*P<0.05**P<0.01
表10、圖1～3結果表明，ACH可引起胃條痙攣性收縮，本發明中所述的中藥組合物各劑量組和風油精均可顯著減少大鼠離體胃平滑肌的收縮振幅，說明對ACH有明顯的對抗作用。
通過以上藥理藥效學的研究可知，本發明中所述的中藥組合物，具有抗炎、鎮痛、抗菌功能等藥理作用。在胃腸功能試驗中，能明顯對抗由ACH引起的離體胃條、小腸痙攣性收縮，起到鎮痛解痙的作用；對正常小鼠的胃排空有明顯的抑制作用；能明顯延長硫酸銅致家鴿嘔吐反應時間，並有減少家鴿嘔吐頻率的趨勢；能抑制大鼠胃液分泌，並能提高胃蛋白酶活性，有抑制胃液酸度的傾向。對治療急、慢性胃腸炎引起的腹脹腹痛、噁心嘔吐有一定的療效。
實驗例10
試驗設計：分層區組隨機、雙盲、安慰劑平行對照、多中心試驗
受試人群：符合急性胃炎西醫診斷標準及寒邪客胃證辨證標準；年齡在18-65歲；病程在12小時之內；籤署知情同意書的患者。
治療方案：試驗組：本發明中所述的中藥組合物0.5ml/次，中上腹部塗搽，每次塗搽1分鐘；15分鐘1次，共3次。安慰劑組：本發明中所述的中藥組合物模擬藥0.5ml/次，中上腹部塗搽，每次塗搽1分鐘；15分鐘1次，共3次。
療效指標：主要指標：腹痛、腹脹、噁心、嘔吐消失率。次要指標：腹痛、腹脹、噁心、嘔吐消失時間。中醫證候療效。
安全性指標：用藥局部皮膚觀察，有無皮膚過敏。不良事件及不良反應。體檢和理化檢查。
受試者入組情況：本試驗共有240例受試者進入研究，全部進行隨機分配。經核查，有1例合併使用方案規定的禁用藥品、2例病程超過12小時而被剔除。共有合格受試者237例。所有合格受試者均完成觀察。所有進行隨機分配的受試者，除按規定剔除者外，至少用一次藥品的全部病例均納入全分析集(FAS)。ITT分析採用該數據集。本次試驗中試驗組有1例病程超過方案規定的12小時，對照組有1例因合併使用方案規定的禁用藥品，1例病程超過方案規定的12小時，故在盲態審核時予以剔除。本集包含試驗組119例、對照組118例，分別佔入組病例的99.2％和98.3％。所有遵循研究方案要求、依從性好、完成全部療程治療的受試者納入方案集(PS)。該集用於PPA分析。本次試驗中試驗組和對照組分別有10例和5例未按方案規定的用藥間隔使用試驗藥物，不納入PPS分析。故本集包含試驗組109例、對照組113例，分別佔入組病例的90.8％和94.2％。所有經隨機化分組，至少使用一次試驗藥物的全部病例納入安全性分析集(SS)。該集用於安全性評價分析。本集包含試驗組120例、對照組120例。治療前兩組性別、年齡、婚姻、民族、體重、身高、生命體徵及一般體檢、就診時治療史及合併疾病情況、病程及臨床症狀體徵等均具可比性(P＞0.05)。
主要療效指標：各症狀消失率比較，結果見表11-18。
PPS分析：上腹痛、腹脹、噁心、嘔吐、惡寒喜暖、得溫痛減用藥後1小時內消失率，採用卡方檢驗，試驗組均優於對照組，有統計學差異(均為P＜0.01)。
表11上腹痛(PPS)
表12腹脹(PPS)
表13噁心(PPS)
表14嘔吐(PPS)
表15惡寒喜暖(PPS)
表16得溫痛減(PPS)
次要症狀指標：主要臨床症狀消失時間，結果見表17。
表17主要臨床症狀消失時間(分鐘)(PPS)
中醫證候療效比較，結果見表18。
PPS分析：試驗組例數109例，有效率71.6％，對照組例數113例，有效率38.1％，有效率差33.5％，秩和檢驗：Z＝5.29，試驗組有效率優於對照組(P＜0.01)。
表18兩組證候療效比較(PPS)
秩和檢驗：Z＝5.29，P＜0.01
結果表明，本發明中所述的中藥組合物治療急性胃炎(寒邪客胃證)臨床試驗結果表明，用藥1小時後上腹痛、腹脹、噁心、嘔吐、惡寒喜暖、得溫痛減消失率試驗組明顯高於對照組(P＜0.01)，平均消失時間試驗組短於對照組，但無統計學差異(P＞0.05)。中醫證候療效試驗組明顯優於對照組(P值P＜0.01)。對痊癒或有效病例隨訪結果表明，試驗組腹脹、噁心和嘔吐症狀復發率低於對照組(P值＜0.05)，試驗組上腹痛症狀復發低於對照組，但無統計學差異(P＞0.05)。綜合上述結果，說明本發明中所述的中藥組合物對改善急性胃炎(寒邪客胃證)臨床症狀具有較好的臨床療效。
最後所應當說明的是，以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非對本發明保護範圍的限制，儘管參照較佳實施例對本發明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和範圍。