一種培養基及其在製備銀耳菌種中的應用的製作方法
2024-04-09 03:35:05
本發明涉及食用菌栽培
技術領域：
，尤其涉及一種培養基及其在製備銀耳菌種中的應用。
背景技術：
：銀耳(Tremellafuciformis)在分類上隸屬於真菌門(Eumycota)，擔子菌綱(Basidiomycetes)，銀耳目(Tremellales)，銀耳科(Termelaceae)，銀耳屬(Tremell)，屬中溫、好氣性真菌，主要分布於亞熱帶，也分布於熱帶、溫帶和寒帶。銀耳與大多數生產栽培的食用菌種類不同，它是伴生真菌協同完成其生活史的典型代表，其生活史的完成離不開香灰菌的協同作用。我國是銀耳生產大國，近年來，響應市場需求，銀耳的種植面積大幅提高，為了提高生產效率，銀耳栽培種的質量受到了越來越多的關注。菌種生產從母種開始，經過原種擴培和觀察出耳形態後，選擇生長優良的轉接擴培成為栽培種，經過一段時間培養後，選擇性狀優良的成為成品栽培種。母種的篩選需要專業的儀器設備，原種和栽培種的製備對技術的要求較高，一般種植戶從市場上購買的菌種即為栽培種。對於栽培種的制種方法，目前銀耳栽培種的制種與其他食用菌相比並無特殊方法。制種時將培養基壓實並在中心預留轉接原種需要的孔洞。培養基經過滅菌後無菌條件下接入原種，經過20天左右的培養即可獲得栽培種。上述栽培種的制種方法方便易行，在食用菌栽培種的製備中廣泛使用。但這樣的方法對於需與伴生菌協同完成生活史的銀耳而言，卻存在著一定的缺陷。現有銀耳菌種的製備通常以菌袋或蘑菇瓶為容器，銀耳菌絲的生長延伸範圍只能至接中點向外延伸2cm左右，其伴生菌(香灰菌)的菌絲生長範圍可以遍布整個菌袋，而通常菌袋撐開後直徑為不低於8cm；這就導致了菌袋中遠離中心的一側僅生長了伴生菌的菌絲，卻沒有生長銀耳菌絲。以菌袋或蘑菇瓶的體積尚無法使銀耳菌絲布滿，遑論進一步擴大製備體系，這嚴重的限制了銀耳菌種製備的效率。且擴大培養體系後，不僅菌絲生長不均勻，且生長不良。如果能夠研發一次性大規模發酵銀耳菌絲的培養基質和培養方法，則能夠提高銀耳菌種的製備效率。技術實現要素：有鑑於此，本發明要解決的技術問題在於提供一種培養基及其在製備銀耳菌種中的應用。本發明提供的培養基組分合理，適宜銀耳生長，以其製備銀耳菌種能夠提高菌絲生長的速率，縮短菌種製備時間，且能夠實現菌種的大規模製備。本發明提供的培養基質包括木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂。本發明提供的培養基質中，木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂的質量比為78：(5～10)：(5～10)：(5～10)：(1～5)：1:1:0.1:0.05。本發明提供的培養基質中，麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉的質量之和不超過培養基質總質量的30％。一些實施例中，木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂的質量比為78∶9∶5∶5∶1∶1:1:0.1:0.05。一些實施例中，木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂的質量比為78∶5∶10：10∶5∶1:1:0.1:0.05。一些實施例中，木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂的質量比為78∶10∶7∶7∶3：1:1:0.1:0.05。麥麩為小麥最外層的表皮，主要營養成分包括纖維素、蛋白、維生素等；玉米粉也稱玉米面，是由玉米磨製而成，主要營養成分包括碳水化合物、蛋白質、脂肪、胡蘿蔔素；米糠也稱洗米糠，主要包括稻穀的果皮、種皮、外胚乳、糊粉層和胚，營養成分包括：蛋白質、粗纖維和脂肪。石膏的主要化學成分為硫酸鈣(CaSO4)的水合物，本發明用石膏將培養基質的pH值調整為5.2～5.8。本發明以木屑為基質，以麥麩、玉米粉、米糠和蛋白粉為營養物質，並添加蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀、硫酸鎂。本發明提供的培養基能夠提高菌種中菌絲的生長速率，從而縮短菌種製備時間，且該培養基質能夠適應大規模的菌種培養。實驗表明，以本發明培養基製備菌種，能夠實現一次性發酵10000升的菌種，且能夠在10～15天內完成菌種的製備，縮短了菌種的製備時間。其中，木屑為青岡木屑，粒徑為2mm～3mm。蛋白粉為銀耳的生長提供更豐富的營養，蛋白粉可以為乳清蛋白粉，酵母粉，大豆蛋白粉或昆蟲蛋白粉；本發明實施例中，蛋白粉為昆蟲蛋白粉。為了更好的製備銀耳菌種，本發明提供的培養基質的含水量為50％～55％。本發明提供的培養基質在製備銀耳菌種中的應用本發明還提供了一種銀耳菌種，在本發明提供的培養基質中接種原種後，培養10～15天，經分裝製得；或在本發明提供的培養基質中接種原種後，培養3～5天，經分裝後，進行後培養製得。本發明提供的銀耳菌種有本發明提供的培養基製得，所得菌種中菌絲潔白、健壯、濃密，菌絲數量大。本發明提供的銀耳菌種的具體製備方法為：將本發明提供的培養基滅菌、冷卻後，與原種混合均勻，培育至菌絲充分擴散後，進行分裝。或者將本發明提供的培養基滅菌、冷卻後，與原種混合均勻，培育3～5天後，進行分裝然後進行後培養。製備菌種的培養的溫度為22℃～25℃。所述後培養的溫度為20℃～23℃，時間為10天～15天。本發明實施例中，分裝至每份900g。本發明提供的培養基能夠適應大規模的菌種製備，每次滅菌10000升培養基質。現有銀耳菌種的製備通常在菌袋或蘑菇瓶中進行，不論以哪種裝置作為載體，其體系都不超過2kg。而本發明提供的培養基能夠使菌絲在大規模培養的情況下健壯、快速的生長。每次培養的規模可達10000升，約合3500kg。本發明所述分裝優選分裝至透氣袋中。本發明所述的透氣袋的材質為聚丙烯。形式為內折袋。規格為19cm×45cm×5cm，撐開長度32±0.1cm。其具有4cm直徑透氣孔。一種實施方式中，透氣袋具有套環和蓋子；透氣袋直徑與內塞配套，套環與內塞配套。套環呈喇叭形，上口內徑3.8±0.1cm，高度3.2±0.1cm。另一種實施方式中，透氣袋不具有套環和蓋子，以熱合方式封口。透氣袋、套環、內塞皆要求乾淨、無破損，圓滑無毛刺。套環與內塞的材質為塑料，能夠耐130℃高溫、2.5kg高壓。本發明還提供了一種銀耳的栽培方法，接種本發明提供的銀耳菌種。本發明提供的銀耳的室內栽培方法包括：將本發明的銀耳菌種接種於熟料或培養基，培養50天；所述培養的條件為22℃，溼度為70％，每天通風3次，每次30分鐘。優選的，培養20天後用棉紗布保溼，每天噴水3～5次。所述熟料為經過石灰水浸泡的段高10cm、電鑽打孔的短段，高壓滅菌的熟料。本發明提供的銀耳的室外栽培方法包括：3月初～4月初將本發明的銀耳菌種接種於青岡樹段木，培養至5月底～6月初開始出耳，直到9月底結束。所述青岡樹段木的製備方法為：砍伐青岡樹，晾曬15天～25天後截成1米的段木，鑽孔2～3釐米深。所述砍伐的時間為春節後，所述晾曬至驚蟄。本發明提供的培養基質包括木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、磷酸二氫鉀和硫酸鎂。本發明提供的培養基能夠提高菌種中菌絲的生長速率，從而縮短菌種製備時間，且該培養基質能夠適應大規模的菌種培養。實驗表明，以本發明培養基製備菌種，能夠實現一次性發酵3500kg的菌種，且能夠在10～15天內完成菌種的製備，縮短了菌種的製備時間。具體實施方式本發明提供了一種培養基及其在製備銀耳菌種中的應用，本領域技術人員可以借鑑本文內容，適當改進工藝參數實現。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領域技術人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發明。本發明的方法及應用已經通過較佳實施例進行了描述，相關人員明顯能在不脫離本
發明內容、精神和範圍內對本文的方法和應用進行改動或適當變更與組合，來實現和應用本發明技術。本發明採用的試材、試劑、儀器皆為普通市售品，皆可於市場購得。下面結合實施例，進一步闡述本發明：實施例1～3以表1配方配製培養基質：表1培養基質配方木屑麥麩玉米粉米糠蛋白粉蔗糖石膏磷酸二氫鉀硫酸鎂實施例178kg9kg5kg5kg1kg1kg1kg0.1kg0.05kg實施例278kg5kg10kg10kg5kg1kg1kg0.1kg0.05kg實施例378kg10kg7kg7kg3kg1kg1kg0.1kg0.05kg青岡木屑粉碎至粒徑為2～3mm。按照配方將青岡木屑、麥麩、玉米粉、米糠、蛋白粉、蔗糖、石膏、昆蟲蛋白粉、磷酸二氫鉀和硫酸鎂混勻，123℃，滅菌150min，製得培養基質。對比例1～3以表2配方配製培養基質：表2培養基質配方青岡木屑粉碎，蛋白粉為昆蟲蛋白粉。按照配方將各組分混勻，123℃，滅菌150min，製得培養基質。實施例4將滅菌後的實施例1～3和對比例1～3的培養基，分別與原種混勻(培養基與原種的質量比為1:15)製備銀耳菌種，各組處理如表3，分別記為實驗組1～6：表3實驗組1～6菌種製備方法實施例5主要以將青岡段木截斷到更適宜大小，通過高壓滅菌，既保留了青岡段木的有效成分，模擬自然生長；又縮短了段木出耳的生長周期，對驗證新品種和新工藝的開發效果，具有快速有效的特點。以經過石灰水浸泡的段高10cm、電鑽打孔的短段，高壓滅菌的熟料，即短段熟料為銀耳出耳率測試載體。實驗組1～6製備的栽培種為實驗對象，接入短段熟料的接種孔中，以觀察記錄出耳率，和銀耳性狀的室內測試。以上每個處理3個重複(即3袋栽培種)，每袋點種20個短段熟料。溫室培養條件為恆溫22℃，溼度為70％，每天通風3次，每次30分鐘。培養20天後將熟料短段的塑膠袋口打開，用棉沙布蓋上袋口保溼，每天澆水3-5次。培養30天及30天起每5天觀察記錄出耳、汙染情況，和採摘鮮耳稱重至培養50天烘乾測產量，並通過對比分析不同處理銀耳的生長指標來評估其提高出耳率的能力和在短段熟料中的生長情況。出耳是指接種孔出耳；汙染是指整個短段的汙染；空穴是指接種孔正常生長，結果如表4：表4室內培養銀耳的出耳情況由表3可知，採用本發明提供的菌種，能夠顯著提高出耳率，(p<0.05)，進而提高產量，增加種植戶的收入。實施例6以通江段木銀耳主產區陳河鄉砍伐的段木為出耳率室外測試。以實施例1～3的栽培種和對比例1～3的栽培種為實驗對象，在陳河鄉按照當地農事安排，春節後砍伐青岡樹，晾曬20天左右，待驚蟄節氣時截成1米的均勻段木。運回生產產地後鑽孔2cm～3cm深，待接種後發菌40天～60天，根據當年氣候條件決定，5月底6月初進入事先準備好的出耳耳堂中進行出耳管理；根據銀耳生長狀況適時噴水防蟲。9月中下旬，統計出耳情況。以上每個處理3個重複(即3袋栽培種)，每袋點種100斤耳棒。結果如表5：表5室外培養銀耳的出耳情況表中產量合計是按3個重複×20個短段熟料得出的數據結果，以幹品計。由表4可知，採用本發明提供的菌種，能夠顯著提高出耳率，(p<0.05)，減少耳棒空穴的現象，提高耳棒的生物轉化率，增加種植戶的收入。以上僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對於本
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護範圍。當前第1頁1 2 3