一種白茅根提取物的用途及製備方法
2023-10-06 05:04:29 1
專利名稱：：一種白茅根提取物的用途及製備方法
技術領域：
：本發明涉及了一種具有抗腫瘤(抗癌)作用的中藥，從白茅根提取的化合物中製備具有抗腫瘤(抗癌)作用的提取物的方法。
背景技術：
：白茅根為禾本禾鬥植物白茅(ImperatacylindricalBcauv.Var.major(Nees)C.E.Hubb.)的乾燥根莖，又名蘭根，地筋，白花茅根，茅草根，甜草根等，其根色白，呈竹節狀，春秋兩季採挖，洗淨，晾乾，除去鬚根及膜質葉鞘，捆成小把，廣泛分布於全國各地，資源豐富。白茅根始載於《神農本草經》，自古以來即被我國人民視為具有止血、消炎、利尿作用而加以利用，國內外部分地區早已開始了對白茅根資源的開發利用。白茅根是一味重要的中醫傳統常用中藥，已經被載入1995年、2000年和2005年版；《中華人民共和國藥典》。白茅根味甘，性寒，歸肺、胃、膀胱經，具有涼血止血、清熱利尿之功效。用於治療熱病煩渴，吐血、尿血、熱淋澀痛、小便不利、水腫和黃疸等症。有人分析白茅根的主要化學成分是以糖類和三萜類化合物為主，到目前為止已確定白茅根中含有大量的單糖、低聚糖和多糖，並且確定了9個五環三萜類化合物.以蘆竹素和白茅素等羊齒烷，包括羊齒烯醇型及喬木萜烷型三萜類化合物為主，異喬木萜醇，喬木萜醇，西米杜鵑醇，喬木萜醇甲醚，喬木萜酮，木栓酮.有文獻報導白茅根還含有內酯、甘露醇、葡萄糖、果糖、蔗糖、木糖，草酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸，大量的鉀鹽，2谷甾醇、油菜甾醇、豆甾醇以及木犀草啶.近年來，人們對白茅根進行了多方面的研究，發現白茅根煎劑中有一些抗菌活性成分，對弗氏，宋內氏痢疾桿菌有明顯的抑菌作用。在傳統中醫中藥學研究中，均採用白茅根治療血熱吐血、衄血、尿血及急性腎炎等症。在臨床應用上，白茅根則主要用於治療急性傳染性肝炎，主要症狀大多在10天內消失，未見副作用.另據報導，白茅根對提高B型肝炎表面抗原陽性的轉陰率有顯著效果。近年來公開文獻報導了一些白茅根化學成分及藥理作用的研究內容，例如王明雷，王素賢，孫啟時在《瀋陽藥科大學學報》發表了"白茅根化學及藥理研究進展"的文章，本文對白茅根的化學和藥理研究進展進行了綜述，包括自該中藥中分得一些重要的化學成分如三萜類化合物、內酯、甾醇及有機酸等，以及有關其止血、利尿、抗菌和抗肝炎等活性研允。呂世靜，黃槐蓮，袁漢堯等在《中國新藥雜誌》發表了"白茅根多糖對人T淋巴細胞免疫調節效應的研究"的文章，研究白茅根多糖對經植物血凝素誘導的人外周血T淋巴細胞增殖與細胞周期的影響，以MTT比色法及流式細胞術檢測。結果證明白茅根多糖對植物血凝素誘導的正常人外周血T淋巴細胞增殖有顯著的促進作用(P<0.05)，並能促進細胞從Gl期進入S期。結論白茅根多糖具有調節人外周血T淋巴細胞免疫功能的效應。泰山醫學院藥學院的孫立彥、山東師範大學生命科學院的高允生、趙遵田等在《中國醫院藥學雜誌》研究了白茅根多糖對小鼠耐缺氧作用的影響。方法超聲提取RIP。60隻小鼠隨機分為6組，分別灌胃給予生理鹽水、普萘洛爾和不同劑量的白茅根多糖，觀察小鼠缺氧存活時間和耗氧量。結果灌胃給予白茅根多糖50，100，200，400mg'kg—工和普萘洛爾20mgkg—、使小鼠05min的耗氧量分別降低2.48%，23.14%，10.74%，5.79%和28.93%，510min的耗氧量分別降低21.13%，16.90%，38.73%和9.86%。灌胃給予氯化鈉注射液、普萘洛爾20mg.kg—1和白茅根多糖50，100，200，400mg*kg—、小鼠缺氧30min存活率分別為0，0，20%，10%，50%，20%。普萘洛爾組、白茅根多糖200mgkg—1和400mgkg—1組，小鼠的缺氧存活時間分別延長33.16%，37.31%和35.23%。結論白茅根多糖能明顯增強實驗小鼠的耐缺氧作用。
發明內容本發明的目的是確定傳統中藥白茅根的新藥理作用——抗腫瘤(抗癌)作用，從白茅根中提取出具有抗腫瘤作用提取物的提取方法，並用這些提取物作為製備抗腫瘤(抗癌)作用藥物的原料，從而更好的利用我國中草藥資源，豐富中草藥治療疾病的領域。本發明通過對白茅根藥材的提取物進行研究，發現白茅根提取物具有抗腫瘤(抗癌)作用，在體外的抗癌試驗研究表明其提取物有良好的抗腫瘤作用。本發明的技術方案如下1、白茅根抗癌(腫瘤)提取物的製備具有抗癌作用的水提物的提取方法。本發明所述的提取方法採用通常的製藥工藝和方法，均已提取物中含有抗腫瘤(抗癌)作用的成分為原則。2、體外實驗，採用MTT法測定白茅根水提物對人肝癌細胞株H印G2、人大腸腺癌細胞株SW-480的生長抑制情況，為白茅根水提取物抗腫瘤(抗癌)作用的下一步研究奠定g石出。以下是實施方式—、白茅根有效物質組的提取提取前的處理先將白茅根原料粉碎，製成粗粉。提取方法將白茅根粗粉加水進行熱提，合併水提液，過濾，濾液在不超過一定溫度下減壓濃縮，再冷凍乾燥，即得到白茅根水提有效物質組。二、白茅根有效物質組的藥理研究本發明通過對白茅根提取物的藥理實驗研究結果表明，在體外的抗癌試驗中，其有良好的抗肝癌、腺癌的效果。體外抗癌作用實驗——MTT法1、實驗材料1.1白茅根提取物自製，臨用前用二甲基亞碸助溶後除菌過濾備用1.2腫瘤細胞株肝癌細胞株H印G2、人大腸腺癌細胞株SW-480均購自於上海細胞生物研究所細胞庫。1.3實驗試劑溴化四氮唑藍(MTT)，Sigma公司；胎牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司；DMEM培養基、胰酶為美國GIBCO公司；匿SO為天津市博迪化工有限公司。1.4實驗儀器C02培養箱，長沙華曦電子科技有限公司；低溫冰箱(-8(TC，InnovaU570)，武漢理想科學儀器有限公司；超淨工作檯，蘇州佳寶淨化工程設備有限公司；低速4離心機，北京時代北利離心機有限公司；倒置顯微鏡，上海萬衡精密儀器有限公司；酶標儀(Sunrise)，北京東勝創新生物科技有限公司。2、實驗方法2.1MTT法將細胞經胰酶消化後計數，製成6X104個/ml的細胞懸液，以100yL/孔接種於96孔板中，培養24h後，每孔加藥物溶液100L，每孔總液量為200yL，每個藥物濃度設5個重複孔，並設空白對照(DMEM培養液)。培養48h後，棄去原培養液，在96孔板中每孔加入100iiLDMEM培養液，再加入5mg.mL—^TT20yL，繼續培養4h，棄上清液，每孔加入DMSO150iiL，振蕩5min後，在酶標儀測0D49。nm值。細胞生長抑制率=(對照組OD值-試驗組OD值)/對照組ODX100%。2.2統計學處理以SPSS15.0統計軟體分析，兩組間的均數比較採用t檢驗。3、實驗結果MTT法測定不同提取方法得到的各白茅根提取物對腫瘤細胞生長的抑制作用。結果見表表一、白茅根提取物對肝癌細胞株H印G2的生長抑制作用tableseeoriginaldocumentpage5表二、白茅根提取物對人大腸腺癌細胞株SW-480的生長抑制作用tableseeoriginaldocumentpage64、結論在體外實驗中，白茅根提取物對腫瘤細胞的生長有明顯的抑制作用。權利要求一種白茅根提取物的用途，其特徵在於用白茅根提取物製備抗腫瘤和抗癌作用的藥物。2.如權利要求1所述的具有抗癌作用的白茅根提取物，其特徵在於包含對白茅根進行水提取得到的提取物。3.根據權利要求2所述的具有抗癌作用的提取物的應用方法，其特徵在於將從白茅根中提取的有效化學物質組做成以下製劑或劑型口服給藥製劑口服液、片劑、膠囊、含片、丸劑；注射給藥製劑注射劑；噴霧給藥製劑。4.如權利要求1所述的有效化學物質組，其特徵是在治療肝癌、大腸腺癌方面具有抗癌、抗腫瘤作用。全文摘要一種白茅根提取物的用途及製備方法，本發明公開了一種白茅根抗癌中藥並從其中提取具有抗腫瘤(抗癌)作用的提取物，確定了其製備方法。白茅根提取物是以水為提取溶劑，採用熱提法。用從白茅根中得到的提取物製成不同的中藥製劑，具有較好的抗肝癌、大腸腺癌的作用。文檔編號A61K36/88GK101732605SQ201010010030公開日2010年6月16日申請日期2010年1月6日優先權日2010年1月6日發明者盧秉久,孟憲生,康廷國,王東,王瑩,郭小瑞申請人:遼寧中醫藥大學