Ppar受體和egf受體特異性化合物及其鹽以及它們在醫藥領域中的用途的製作方法

2023-12-08 07:39:16 2

專利名稱：Ppar受體和egf受體特異性化合物及其鹽以及它們在醫藥領域中的用途的製作方法
PPAR受體和EGF受體特異性 化合物及其鹽以及它們在醫藥領域中的用途發明領域本發明涉及PPAR受體和EGF受體特異性化合物及其鹽以及它 們在醫藥領域中的用途。發明目的特別地，根據本發明的化合物及其鹽可有利地用於預防和治療表 達PPARy受體(過氧化物酶體增生物激活受體)和EGF受體(表皮生長 因子受體)的腫瘤，如食道腫瘤、胃腫瘤、胰腺腫瘤、結腸胂瘤、前列 腺腫瘤、乳腺腫瘤、子宮及附件腫瘤、腎腫瘤和肺腫瘤。此外，根據 本發明的化合物及其鹽可用於治療慢性炎性疾病，尤其是慢性腸疾病， 如克羅恩病和潰瘍性直腸結腸炎。發明背景PPARy受體是核受體(約50個轉錄因子的組)，其控制多種基因 的表達，這些基因對於調節脂類代謝、胰島素合成以及致癌作用和炎 症過考呈是重要的。(Bull AW， Arch Pathol Lab Med 2003; 127: 1121-1123) (Koeffler HP, Clin Cancer Res 2003; 9: 1-9) (Youssef J等 人，J Biomed Biotec 2004; 3: 156-166)。有各種與PPARy受體結合併改變其構象，產生激活作用的天然 和合成激動劑。天然和合成的配體描述於The Lancet 2002; 360:1410-1418。最近的研究已顯示肺瘤細胞用PPARy受體的配體處理誘發細胞增生、細胞分化和編程性細胞死亡的降低，表明這類化合物作為預防致癌作用的潛在應用(Osawa E等人，Gastroenterology 2003; 124:361-367)。其它研究已顯示在IBD動物模型中PPARy受體的配體(例如曲格 列酮)具有抗炎作用並抑制黏膜炎性反應(Tanaka T等人，Cancer Res 2001; 61: 2424-2428)。此外，最近已公開的證據表明，5-ASA(即IBD治療中的金標準) 的腸內抗炎活性依賴於PPARy受體的結合及隨後激活(Rousseaux C 等人，J Exp Med 2005; 201: 1205-1215)。在各種類型的腫瘤中具有酪氨酸激酶EGF活性的跨膜受體以被 活化的形式極高程度地表達(Mendelsohn J， Endocr Relat Cancer 2001; 8: 3-9) (Harari PM， Endocr Rdat Cancer 2004; 11: 689-708)。受體的過表達還與癌細胞潛在的轉移能力相關。關於這一點，已 證明了 EGF在與細胞外基質相互作用的水平上促進與病變相關的各 種細胞類型的遷移和侵襲力(Brunton等，Oncogene 1997; 14: 283-293)。在實驗室動物和人類中進行的許多研究已確立了 EGF受體的抑 製劑在控制增殖和腫瘤擴散中的功效(Mendelsohn J, Endocr Relat Cancer 2OOI5 8: 3-9) (Harari PM, Endocr Relat Cancer 2004; 11: 689-708)。毫無疑問，通過EGF受體激活激發的細胞內信號促進腫瘤細胞 的生長和存活，有助於病理狀況的發展，並且這類信號在確定腫瘤細 胞擴散和移生至遠端器官的能力中是必要的。(Mendelsohn J， Endocr Relat Cancer 200" 8: 3-9) (Kari C等人，Cancer Res 2003^ 63.. 1-5)。根據前述內容並且此外考慮到根據生物學觀點，慢性炎性過程參 與致癌作用，很清楚存在對新化學實體的創新研究的實際需要，所述 新化學實體通過其對PPARy受體和EGF受體的互補作用能發揮化學預防、抗增殖和抗轉移類型的抗炎和抗腫瘤作用。本發明提供了通過調節特異性受體如PPARy受體和EGF受體而 適合於預防和治療癌症和慢性炎症的新的一類化合物。發明概述本發明涉及一 系列化合物的新穎的和創造性的醫藥和治療用途。 就這些化合物中的任何一個都是未知的來說，本發明還涉及這些化合 物。本發明涉及包含通式(I)的化合物Ri和R2，可以相同或不同，選自-H、或者含有l-6個碳原子的直 鏈或支鏈烷基基團，或者一起形成含有5或6個原子的芳香族或脂肪 族環；Y和Z,可以相同或不同，選自-H、 -OH、 -COOH、 -OR3、 -CH(OR3)COOH,其中R3選自H、苯基、苄基、-CF3或畫CF;jCF3、乙 烯基、烯丙基和含有l-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基基團。本發明還涉及通式(Ia)的化合物亞群Ri和R;j，可以相同或不同，選自-H或者含有1-6個碳原子的直 鏈或支鏈烷基基團；Y和Z，可以相同或不同，選自-H、 -OH、 -COOH、 -OR3、 -CH(OR3)COOH，其中R3選自-H和含有1-6個碳原子的直鏈或支鏈 烷基基團。在本發明的一些實施方案中，Z和Y是不同的。在本發明的一些 實施方案中，Y或Z中至少一個以-COOH結尾。因此，在本發明的 一些實施方案中，Y或Z(以及在一些實施方案中Y或Z中至少一個， 和在一些實施方案中，Y或Z中僅有一個)是-COOH。在本發明的一其中其中些實施方案中，Y或Z (以及在一些實施方案中Y或Z中至少一個， 和在一些實施方案中，Y或Z中僅有一個)是-CH(OR3)COOH。本發明還涉及根據式(I)和(Ia)的化合物，除其中Y和Z,可以相 同或不同，選自誦H、 -COOH、 -OR3、 -CH(OR3)COOH以外。因此， 在本發明的一些實施方案中，Z或Y可以不是-OH。在本發明的這類 實施方案中，排除化合物10和11。在本發明的一些實施方案中，當Y是-H且Z是-CH(OH)COOH 時，基團NRiR2連接於3'位。因此，在本發明的一些實施方案中，排 除化合物21。本發明的其它實施方案中，當Z是-OCH3且Y是-COOH時，基 團NI^R2連接於4'位。因此，在本發明的一些實施方案中，排除化合 物22。在本發明的一些實施方案中，當Y是-H且Z是-CH(OCH3)COOH 時，基團NI^R2連接於4'位。因此，在本發明的一些實施方案中，排 除化合物35。特別地，上述含有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基基團可選自 -CH3、 -CH2CH3、 CH(CH3)2、 -CH2CH2CH3、 -CnH2nl。 式(I)和式(Ia)化合物可選自 3-(3'-氨基苯基)2-羥基丙酸(化合物20) 2-(4-氨基苯基)2-曱氧基乙酸(化合物23) 2-(3-氨基苯基)2-乙氧基乙酸(化合物32)2- (4-氨基苯基)2-乙氧基乙酸(化合物33)3- (4'-氨基苯基)2-甲氧基丙酸(化合物34) 3-(4'-氨基苯基)2-乙氧基丙酸(化合物39) 3-(3'-氨基苯基)2-乙氧基丙酸(化合物40)。上述化合物名稱也可寫成如下的標準化學名稱(該名稱將在整篇 文章中使用)(±)-2-羥基-3-(3'-氨基苯基)丙酸(化合物20) (±)-2-甲氧基-2_(4'-氨基苯基)乙酸(化合物23)(±)-2-乙氧基-2-(3'-氨基苯基)乙酸(化合物32)(±)-2-乙氧基-2_(4'-氨基苯基)乙酸(化合物(±)-2-甲氧基-3-(4，-氨基苯基)丙酸(化合物34)(±)-2-乙氧基-3-(4，-氨基苯基)丙酸(化合物3"(±)_2_乙氧基-3-(3，-氨基苯基)丙酸(化合物40)。根據本發明的化合物可以有利地用於醫藥領域。因此，本發明涉 及包含一種或多種如上文所定義的作為有效成分的化合物與一種或多 種可藥用賦形劑或助劑組合的藥物組合物。此外，本發明涉及如上文所定義的化合物用於製備用於預防和治 療表達PPARy受體和egf受體的腫瘤的藥物產品的用途，所述肺瘤 例如食道胂瘤、胃腫瘤、胰腺腫瘤、結腸腫瘤、前列腺腫瘤、乳腺腫 瘤、子宮及其附件肺瘤、腎腫瘤和肺腫瘤。此外，本發明涉及根據本發明的化合物用於製備用於治療慢性炎 性疾病的藥物產品的用途，所述炎性疾病例如克羅恩病和潰瘍性直腸 結腸炎。特別地，可用於上述應用中的根據本發明的化合物，除已經描述 的以外，可以是如下化合物(R，s)-:2-羥基-;2-P-氨基苯基)乙酸(化合物10)(R，s)-2-羥基-2-(4-氨基苯基)乙酸(化合物11)(R，s)-2-羥基-3-(4'-氨基苯基)丙酸(化合物21)(R，s)-2-甲氧基-3-(3，-氨基苯基)丙酸(化合物35)(R,s)-2-曱氧基-3-(3-氨基苯基)丙酸(化合物34)。上述化合物名稱也可寫成如下的標準化學名稱(該名稱將在整篇 文章中使用)(±)-2-羥基-2-(3'-氨基苯基)乙酸(化合物10)(±)-2_羥基-2-(4'-氨基苯基)乙酸(化合物11)(±)-2-羥基-3-(4'-氨基苯基)丙酸(化合物21)(±)-2-甲氧基-3_(3，-氨基苯基)丙酸(化合物35)(±)-2-曱氧基-3-(4'-氨基苯基)丙酸(化合物34)。根據一個實施方案，根據下式(II),式(I)化合物的R3可以是Hformula see original document page 13而Rp R2、 X和Y如上文所定義。根據另一個實施方案，根據下式(III)，式(I)化合物的R3可以是formula see original document page 13而Rp R2、 X和Y如上文所定義。根據另一個實施方案，根據下式(IV)，式(I)化合物的R3可以是 CH2CHhformula see original document page 13而Rn R2、 X和Y如上文所定義。根據另一個實施方案，根據下式(V)，式(I)化合物的R3可以是 CH2CKhformula see original document page 13而R!、 R2、 X和Y如上文所定義。根據另一個實施方案，根據下式(VI)，式(I)化合物的R3可以是formula see original document page 14(VI)而Rp R2、 X和Y如上文所定義。根據另一個實施方案，根據下式(VI),式(I)化合物的R3可以是formula see original document page 14 (VI)而Rp R2、 X和Y如上文所定義。根據另一個實施方案，根據下式(VII)，式(I)化合物的R3可以是 CH2CH3formula see original document page 14 (VII)而R,、 R2、 X和Y如上文所定義。根據另一個實施方案，根據下式(VIII)，式(I)化合物的113可以是 CH2CH3NH2 (VIII)而Ri、 R2、 X和Y如上文所定義。根據另一個實施方案，根據下式(IX)，式(I)化合物的R3可以是-CH3而Ri、 R2、 X和Y如上文所定義。優選地，式(I)化合物可以選自(±)-2-羥基-3-(3，-氨基苯基)丙酸(化合物20)(±)-2-甲氧基-2-(4'-氨基苯基)乙酸(化合物23)(士)-2-乙氧基-2-(3'-氨基苯基)乙酸(化合物32)(±)-2-乙氧基-2-(4'-氨基苯基)乙酸(化合物33)(±)-2-甲氧基-3_(4，-氨基苯基)丙酸(化合物34)(±)-2-乙氧基-3-(4'-氨基苯基)丙酸(化合物3"(±)-2-乙氧基-3-(3'-氨基苯基)丙酸(化合物40)。根據本發明的化合物可有利地用於醫藥領域。因此，本發明涉及 包含一種或多種如上文所定義的作為有效成分的化合物與一種或多種 可藥用賦形劑或助劑組合的藥物組合物。此外，本發明涉及如上文所定義的化合物用於製備用於預防和治 療表達PPARy受體和EGF受體的肺瘤的藥物產品的用途，所述腫瘤 例如食道腫瘤、胃腫瘤、胰腺肺瘤、結腸肺瘤、前列腺肺瘤、乳腺腫 瘤、子宮及其附件肺瘤、腎腫瘤和肺腫瘤。此外，本發明涉及根據本發明的化合物用於製備用於治療慢性炎性疾病的藥物產品的用途，所述炎性疾病例如克羅恩病和潰瘍性直腸 結腸炎。本發明還涉及治療人類和/或哺乳動物(包括嚙齒類動物、家 畜、家養寵物、小鼠、大鼠、倉鼠、兔、犬、貓、豬、羊、奶牛、馬) 的方法。特別地，可用於上述應用中的根據本發明的化合物，除已經描述的以外，可以是如下化合物(±)-2-羥基-2-(3-氨基苯基)乙酸(化合物10)(士)-2-羥基-2-(4-氨基苯基)乙酸(化合物11)(±)-2-羥基-3-(4'-氨基苯基)丙酸(化合物21)(±)-2-甲氧基-3-(3'-氨基苯基)丙酸(化合物")(±)-2-甲氧基-3-(4，-氨基苯基)丙酸(化合物34)。所述化合物的使用不限於其以外消旋形式的使用。本發明延及任 何所述化合物以對映體純的R或S形式的使用，或以其中一種對映體 超過另一種，以任何比例的任何混合物使用。實際上，完成的對接研究表明S對映體較R對映體更有活性，盡 管純R對映體確實顯示出活性。本發明的分子得自使用美沙拉秦作為基礎的分子建模工作，並且 評價了所有化學上可行的變化，以便在計算機對接實驗中得到最好的 分數(受體的親和力和激活)。結果，認為顯示與美沙拉秦功能和/或活 性相當的本發明化合物通過相似的生物學途徑發揮作用。有人認為本 發明的分子中固有的與美沙拉秦相似的特性賦予了該分子與EGF途 徑相關的相似活性。本文所提供的實施例是用於預測所述化合物在各種已經討論的醫 藥領域中的用途的有用模型。因此，不管其作用機理，該模型提供了 有價值和有意義的結果。除上文提及的化合物以外，本發明還提供了以下化合物的用途2—10 2—11(R，S) 2-羥基-2-(3-氨基苯基) (R，S) 2-羥基-2-(4-氨基苯基)formula see original document page 172—21 2_22(R，S) 2-羥基-3-(4'-氨基苯基) (R，S) 2-甲氧基-2-(3-氨基苯 丙酸 基)乙酸根據其優選的實施方案，特別參照附圖中的圖表，為了舉例說明 的目的，現在將描述本發明，但不限於此。附圖和表格簡述表1:由指定化合物的分級劑量(0.5-10mM)抑制DLD-1細胞的百 分數。細胞在化合物存在或缺乏下培養，然後在48小時培養後通過比 色(BrdU)測定法評價細胞生長。

圖1 顯示了化合物20、 23、 32、 33、 34、 35、 39和40的結構。圖2:經用化合物處理的PPARy的活性。圖3-4:指定物質對人結腸癌細胞系(即HT29、 HT115和DLD1) 增殖的作用。細胞用增加性濃度的物質(0.5-10mM)處理48小時，使用 用於測量BrdU結合的比色測定法確定增殖。使用ELISA讀出器在 450nm處測定光密度(OD)。數據表明3次單獨實驗的平均值士 SD。圖5: (R)化合物34和PPARy受體的對接(顯示了胺基酸殘基標 記和氫鍵合)。圖6: (s)化合物34和PPARy受體的對接(顯示了胺基酸殘基標記 和氫鍵合)。圖7: (R)化合物35和PPARy受體的對接(顯示了胺基酸殘基標 記和氫鍵合)。圖8: (s)化合物35和PPARy受體的對接(顯示了胺基酸殘基標記 和氫鍵合)。圖9: (R)化合物39和PPARy受體的對接(顯示了胺基酸殘基標 記和氫鍵合)。圖10: (s)化合物39和PPARy受體的對接(顯示了胺基酸殘基標 記和氫鍵合)。圖11:美沙拉秦和PPARy受體的對接(顯示了胺基酸殘基標記和 氫鍵合)。圖12:化合物39的合成圖示和隨後的拆分。 實施例1製備(±)-2-羥基-3-(3，氨基苯基)-丙酸(化合物20)的方法步驟1將3-硝基苯曱醛(45.3g, 0.3mol)、 n-乙醯甘氨酸(42.1g， (U6mo1) 和乙酸鈉(32g, 0.39mol)與乙酸酐(142ml， 1.5mol)混合，並將得到的混合物在攪拌下加熱至120。C保持6小時，得到深色溶液。然後，將混合物冷卻至室溫過夜，致形成沉澱的固體。將反應混合物傾入到冰水(130g)中，經過濾收集得到的懸浮固體。粗製固體產物(72g)用丙酮(80ml)洗滌，然後從熱丙酮(320ml)重結晶，得到晶狀固體，該晶狀固體用50%乙醇水溶液洗滌，然後於40°C/40mmHg乾燥，得到淡黃色針狀的2-曱基-4-(3-硝基亞爺基)噁唑-5(411)-酮(49.(^, 78%)。 1H ,R (5, 250MHz, GDCI3) = 2,47 (3H, s), 7,15 (1H, s), 7乃3 (1H' dd, 8.2 & 7.6Hz〉, 8.27 (1H, d, 8.2Hz), 8.34 "H, d, 7.6Hz), 9.02 (1H, s》，步驟2將2-甲基-4-(3-硝基亞節基)噁唑-5(4H)-酮(52.0g， 0.224mol)與3M 鹽酸(1.3L)混合，並將混懸液於100。C攪拌6小時。得到的混懸液於室 溫攪拌過夜，然後經過濾收集懸浮固體，用水(2x40ml)洗滌，然後在 真空中乾燥，得到2-羥基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸(29.3g)。合併的濾液 和洗滌物用乙酸乙酯(4x0.5L)萃取，然後將合併的有機提取物經硫酸 鈉乾燥，並濃縮至乾燥，得到另一批量的2-羥基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸(12.0g)。 2-羥基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸的總收率為41.3g(88%)。，H NMR (5, 250MHz, DMSO陽似- 6.56 (1H, 3), 7力4 (1H， t, 8Hz), 8.0~8.1 (2H, m)' 8,78 (1H, s), 9鄰(1H, brs), 12.80 (1H, brs). 步驟3將乙醇鈉(l，8g， 26.4mmol)於0。C分批加入到攪拌的2-羥基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸(5.25g， 25.0mmol)在甲醇(131 ml)中的溶液中，形成澄 清的淡黃色溶液。然後，將硼氫化鈉(lg， 26.4mmol)分成兩份小心加入， 該混合物於5-10。C攪拌30分鐘。然後加入少量水以袢滅反應並破壞 任何過量的NaBH4。真空中除去曱醇，得到固體殘餘物，其和乙酸乙 酯和庚烷的5:2混合物(21ml)磨細，然後用3%甲醇水溶液進一步磨細。 經過濾收集得到的固體，並在真空中乾燥，得到2-羥基-3-(3-硝基苯基) 丙酸(3.0g， 57%)。1H剛R (6, 2羅Hz, DMSOda) = 2,97 (1H, dd, 14 & 8.2Hz), 3.15 (1H, dd, 14 &4 2Hz), 4.23 (1H, dd, 8.2 & 4,2Hz》，7.58 (1H' t,闊，7.70 (1H, d, 8Hz), 8.0-8.15 (2H,nri).步驟4將2-羥基-3-(3-硝基苯基)丙酸(3.0g， 14.2mmol)、甲醇(129ml)和 5。/。活性炭上鈀(600mg， 2 mol。/。)的混合物在10psi H2氣氛中氫化1小 時。然後將該混合物經硅藻土過濾，濾餅用甲醇洗滌，於40'C在高真 空下濃縮濾液，得到泡沫狀固體產物。將其溶解於水中，冷凍乾燥該溶液，得到白色固體(士)-2-羥基-3-(3'-氨基苯基)-丙酸(2.6g， 100%)。NMR (5, 250MHz, DMSCKy = 2.6， (1H, dd, 13,6 & 8,3Hz), 2,81 (1h^ dd, 13.6 & 4.,, 4.09 (1H' dd, 8.25 & 4,6HJ, 6.35-6,43 (2H' m), 6.45 (1H, d, 1Hz), 6,90 (1H, t, 7.6Hz),實施例2製備(±)-2-甲氧基-2-(4'-氨基苯基)-乙酸(化合物23)的方法步驟l以保持溫度低於-5。C的速率將氫氧化鉀(6.72g， 0.12mol)在甲醇 (25ml)中的溶液加入到冷卻的(-7。C) 4-乙醯氨基苯甲醛(24.5g， 0.15mol) 和氯仿(40.1g， 0.33moL)在DMF (100ml)中的溶液中。將混合物溫熱至 2°C ，歷經5.5小時，然後將其加入1M HC1水溶液(200ml)和甲苯(200ml) 的混合物中，並攪拌過夜。經過濾收集得到的2-(4-乙醯氨基苯基)-三 氯曱醇(29g),並抽吸乾燥。 步驟2將2-(4-乙醯氨基苯基)-三氯甲醇(14.0g， 49.5mmol)在甲醇(330ml) 中的溶液和氫氧化鉀(13.8g， 250mmol)在曱醇(150ml)中的溶液合併， 並將該混合物加熱至70-80。C保持3小時。冷卻後，經過濾除去KC1 副產物，然後在真空中濃縮濾液，得到白色固體2-(4-乙醯氨基苯基)-2-曱氧基乙酸(14g)。步驟3將2-(4-乙醯氨基苯基)-2-曱氧基乙酸(7.1g， 31.8mmol)和肼一水合物(40ml)加熱16小時，冷卻並在真空中濃縮。得到的殘餘油狀物經矽 膠柱色語法(洗脫劑，在CH2C12中的20-40%曱醇)純化，得到2.6g (45%) 的(±)-2-甲氧基-2-(4'-氨基苯基)-乙酸。1H NMR (5, 250隨i CD3OD): 3.27 (3H, s)' 4.43 (1H' s), 6.66 (2H, d, 8,5Hz), 7.18 (2H, 實施例3製備(±)-2-乙氧基-2-(3'-氨基苯基)-乙酸(化合物32)的方法步驟l將3-硝基苯甲醛(25g， 165mmol)和氯仿(30ml， 375mmol)溶解於 DMF(100ml)中，並將溶液冷卻至-5。C到-10。C之間。緩慢加入氬氧化 鉀(7.5g， 134mmol)在甲醇(22.5ml)中的新鮮溶液以便維持內部溫度 8,5 (s' ，H). 步驟2將2-(3-硝基苯基)-三氯甲醇(20g， 74mmol)溶解於無水乙醇(74ml) 中，並緩慢加入氫氧化鉀(20.7g， 369mmol)在無水乙醇(150ml)中的溶 液。將溶液回流加熱4小時，冷卻，然後在真空中濃縮。殘餘物用稀 鹽酸酸化，並將產物在乙酸乙酯中萃取(x 3)。將合併的有機層乾燥 (MgS04)，過濾並在真空中濃縮，得到棕色固體2-乙氧基-2-(3-硝基苯基)乙酸(6,4g， 28.4mmol， 38%)。1H NMR (5, 250MHz, C03OD〉 1.03H, 7,0Hz》，3.6 (m' 1H), 3.7 (m, 1H), 5.1 (s. 1H>， 7.7《t, 1K 7.8H2), 7.9 , 3.5 (m, 1 H), 3,6 <m， 1 H), 4.6 (s, 1 M), 6,7 (cf' 1 H' J = 7,S Hz), 6,9 (m, 2 H》,7.0 (t, 1 HJ - 7.6 Hz).實施例4製備(±)-2-乙氧基-2-(4，-氨基苯基)-乙酸(化合物33)的方法formula see original document page 22見"化合物23步驟l" 步驟2將2-(4-乙醯氨基苯基)-三氯甲醇(14.0g， 49.5mmol)在乙醇(400ml) 中的溶液和氫氧化軒(13.8g， 250mmol)在乙醇(150ml)中的溶液合併， 並將混合物於70-8(TC加熱2.5小時。將混合物冷卻，過濾，以除去 KC1副產物，並在真空中濃縮，得到黃色固體2-(4-乙醯氨基苯基)-2-乙氧基乙酸(l4g)。步驟3將2-(4-乙醯氨基苯基)-2-乙氧基乙酸(7.54g, 31.8mmol)和肼一水合物(40ml)加熱16小時，冷卻混合物，然後在真空中濃縮。然後將殘餘油狀物經矽石柱色語法(在CH2Ch中的20-40%甲醇洗脫劑)純化，得到白色泡沫狀的(士)-2-乙氧基-2-(4'-氨基苯基)-乙酸(2.3g， 37%)。1H NMR (5, 250MH之,CD3OD): 1,18 (3H, t' 7,0Hz), 4-42 (1H, qd, 7.3, 2.4Hz), 4.56 (2H,s), 5,50 (1H, qd, 7,0' 2,1Hz)' 6.66 (2H, d' 8,7Hz〉， 7,20 (2H, d' 8.5Hz)實施例5製備(±)-2-甲氧基-3-(4'-氨基苯基)-丙酸(化合物34)的方法步驟l將4-硝基苯甲醛(53.7g， 0.356mol)、 N-乙醯甘氨酸(49.9g， 0.427mol) 和乙酸鈉(37.9g, 0.463mol)與乙酸酐(168g， 1.78mol)混合，並將得到的 混合物在攪拌下加熱至120。C保持6小時，得到深色混懸液。然後將 混合物冷卻至室溫過夜，使得形成沉澱固體。將反應混合物傾入到冰 水(150g)中，經過濾收集得到的懸浮固體。粗製固體產物用丙酮(100ml) 洗滌，然後從熱丙酮(650ml)重結晶，得到晶狀固體，該晶狀固體用50% 乙醇水溶液洗滌，然後在真空中乾燥，得到淡黃色針狀的2-甲基-4-(4-硝基亞千基)嚙唑-5(4H)-酮(55.0g， 66%)。將結晶母液和洗滌物合併， 蒸發，得到固體殘餘物，其從丙酮重結晶，得到第二批量的2-甲基-4-(4-硝基亞節基)噁唑-5(4H)-酮(8g， 10%)。 2-甲基-4-(4-硝基亞千基)嚙唑 -5(4H)-酮的合併收率為63g (76%)。'H ,R (。， 250MHz, COCiy = 2.47 (3H' S>, 7,14 (1H, s), 8,28 (4H' m), 步驟2將2-甲基-4-(4-硝基亞千基)嚙唑-5(4H)-酮(63.0g, 0.272mol)和3M 鹽酸(1.2L)混合，並將混懸液於100。C攪拌6小時。得到的混懸液在室 溫下攪拌過夜，然後經過濾收集懸浮固體，用水(2x50ml)洗滌，然後 在真空中乾燥，得到2-羥基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸(46.6^81%)。將合 並的濾液和洗滌物用乙酸乙酯(4x0.5L)萃取，然後經硫酸鈉乾燥合併 的有機提取物，濃縮至乾燥，得到另一批量的2-羥基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸(0.化，1 %)。 2-羥基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸的總收率為47.4g (82%)。1H NMR〖5, 250MHz> 0MS0-d6> = 6.52《1H, s), 8,0, (2H' d， 8,5Hn)， 8.22 (2H, d, 8.5Hz).步驟3將2-羥基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸(15g， 71.7mmo1)、碳酸銫(56g， 172.1 mmol)和硫酸二曱酯(14.2ml， 150.6mmol)在DMF (270ml)中的混 合物於室溫下攪拌18小時。加入水(220ml)和乙酸乙酯(150ml)，並分 離各層。水層進一步用乙酸乙酯(4 x 100ml)萃取，然後將合併的有機 相用水(6 x 100ml)、鹽水(2 x 120ml)洗滌，並濃縮至一半體積。加入 庚烷(70ml),混合物濃縮至200ml體積。經過濾收集得到的沉澱固體， 用庚烷(2 x 100ml)洗滌，在濾器上抽吸乾燥，得到含有痕量庚烷的黃 褐色固體2-甲氧基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸甲酯(9.2g，收率54%)。 !H NMR (3， 250MHz, DMSO-d6): 3.82 (s， 3-H, OMe)， 3.84 (s， 3國H, OMe)， 7.02 (s， 1國H, CH=)， 8.04 (d， 2-H, CH芳香族)，8.26 (d， 2-H， CH 芳香族)。步驟4將2-曱氧基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸甲酯(7.8g， 32.8mmol)溶解於 IMS (156ml)中。加入NaOH (1.44g, 36.1mmol)在水(78ml)中的溶液， 並將該混合物在室溫(18。C)下攪拌18小時。反應混合物用1M HC1 (120ml)酸化，並將得到的沉澱固體經過濾收集，用水(2xl00ml)洗滌， 在濾器上部分抽吸乾燥30分鐘，隨後經真空乾燥箱於18t:乾燥18小 時。由此得到2-甲氧基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸為含有一些結晶水的黃 褐色固體(6.7g, 91%)。NMR (6， 250MHz， DMSO-d6): 3.83 (s， 3-H, OMe), 6.97 (s， 1國H， CH=), 8.02 (d， 2-H， CH芳香族)，8.25 (d， 2-H， CH芳香族)。步驟5將2-甲氧基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸(6.7g， 30mmol)置於曱醇(700ml) 中，並加入THF (300ml)和10。/。鈀碳(溼基)(0.67g)。將混合物於45psi 氫化43分鐘，隨後每隔1小時重複再填充至45-48psi，持續3小時，最後在48ps持續18小時。將得到的混懸液經GF/F濾紙過濾，濾渣 用MeOH (200ml)洗滌。將濾液濃縮至灰白色固體。於20'C將固體在 IMS(75ml)中漿化1.5小時，過濾，並用IMS/庚烷(1:2) (20ml)洗滌， 在濾器上乾燥1小時，得到灰白色固體(±)-2-甲氧基-3-(4，-氨基苯基)-丙酸(5.1g，收率88%)。畫R (3， 250MHz， DMSO-d6): 2.74 (m， 2-H)， 3.23 (s， 3-H， CH3)， 3.80 (dd， 1畫H， CH)， 6.47 (d， 2-H，芳香族)，6.87 (d， 2畫H,芳香族)。 實施例6製備(±)-2-甲氧基-3-(3'-氨基苯基)-丙酸(化合物35)的方法步驟1和2 按照化合物20 步驟3將疏酸二曱酯(13.23g， 105mmol)加入到攪拌的2-幾基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸(10.5g， 50.0mmol)和碳酸銫(39.1g， 120mmol)在DMF(105ml)中混合物中，形成澄清的淡黃色混合物，將其在室溫下攪拌過夜。將得到的深紅色混懸液在真空中濃縮，並將殘餘物分配於水(100ml)和二氯甲烷(150ml)之間。分離有機層，進一步用水(2 x 100ml)洗滌，經硫酸鈉乾燥並經矽膠過濾。將得到的黃色溶液在真空中蒸發至乾燥，得到黃色固體2-甲氧基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸曱酯(8.1g, 67%)。1H NMR (5, 250MHz, DMSOde) 3,81 (3H, s》，3.83 (3H, S》，7.08 (1H, s)T 7'71 (1H, dd，7<9 & 8,2Hz;), 8.10-8,22 (2H, m), 8.66 (1H, s), 步驟4將氫氧化鉀(2.0g， 35.9mol)在水(25ml)中的溶液加入到攪拌的2-甲氧基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸曱酯(8.lg， 3丄:Zmmol)在甲醇(150ml)中 的溶液中，得到的混合物於室溫下攪拌過夜。加入更多量的在水(10ml) 中的KOH (0.5g， 8.9mmol)，並將該混合物加熱至SO。C保持1小時。 然後將甲醇在真空中蒸發，殘餘物用水(200ml)稀釋。溶液用二氯曱烷 (2 x 100ml)洗滌，經珪藻土墊過濾，然後通過加入3MHCl酸化至pH 3。將混合物冷藏18小時，然後經過濾收集沉澱的固體，用水洗滌(3x 30ml)，並在真空中於4(TC乾燥，得到黃色固體2-甲氧基-3-(3-硝基苯 基)丙烯酸(6.4g， 84%)。1H MMR (。， 2S0MHz, DMSO-de〉 ^ 3,82 (3Ht s>, 7,02 (1H, 3》，7.70 (1H, t, 7,93Hz>, 8,10-8.22飄m), 8.65 (1H, s). 步驟5將2-甲氧基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸(3.4g, 15.25mmo1)、甲醇(340ml) 和5。/。活性炭上鈀(1.36g， 4 mol。/。)的混合物於12-36psi 112氣氛下氫化 1.5小時。然後，經硅藻土過濾混合物，濾餅用甲醇洗滌，濾液於40。C 在真空下濃縮，得到泡沫狀固體產物。將其溶解於水(100ml)中，並將 溶液冷凍乾燥，得到灰白色固體(±)-2-曱氧基-3-(3'-氨基苯基)-丙酸 (2.6g， 100%)。,R (5, 230,2, DMSO-de) = 2.68 (1H, dd, 13.9 & 8H2)r 2.80 (1H, dd, 13.9 & 4.6他》，3,21 (3H, s), 3,84 (1H, dd, 8,25 & 4,6Hz), 6.36~6.44 (3H,時，g.91 (1H, dd, 7-6H4'實施例7製備(±)-2-乙氧基-3-(4'-氨基苯基)-丙酸(化合物39)的方法。對映 體的拆分(圖12)。N02 NH2按照化合物34步驟1和2。 步驟3將2-羥基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸(20g， 95.6mmol)懸浮於DMF (200ml)中。加入Cs2C03 (74.9g， 229.9mmol)和硫酸二乙酯(26.3ml， 201mmo1)，並觀察到溶解。於18。C攪拌18小時後，加入水(350ml) 和乙酸乙酯(250ml)，並分離各層。水層進一步用乙酸乙酯(5 x 200ml) 萃取，然後將合併的有機相用水(2 x 200ml)、鹽水(2 x 200ml)洗滌， 經硫酸鎂乾燥。將有機層濃縮至千燥，得到含有3.6%質量的DMF的 橙色固體2-乙氧基-3-(4-硝基苯基)-丙烯酸乙酯(27.6g潮溼的，收率 >100%)。^匪R (S， 250MHz， DMSO-d6): 1.32 (t, 6國H, 2 x CH2CH3)， 4.13 (q， 2-H， CH2CH3)， 4.30 (q， 2-H, CH2CH3)， 6.99 (s, l-H， CH-)， 8.06 (d， 2畫H， CH芳香族)，8,26 (d， 2-H， CH芳香族)。 步驟4含有3.6wt% DMF的2-乙氧基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸乙酯(校正 26.07g， 98.3mmol)溶解於IMS (500ml)中，並加入NaOH (1.44g， 36.1 mmol)在水(260ml)中的溶液。得到的混合物在室溫下攪拌18小時，然 後用lMHCl(120ml)酸化，經過濾收集得到的固體，用水(2xl00ml) 洗滌，並在濾器上抽吸乾燥30分鐘，隨後經真空乾燥箱於18。C乾燥 18小時。由此得到2-乙氧基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸為含有結晶水的橙 色固體(18.4g， 79%)。^醒R (8， 250MHz， DMSO-d6): 1.31 (t， 3-H， Me), 4.11 (q， 2-H， CH2)， 6.98 (s， l-H， CH=)， 8.05 (d， 2-H， CH芳香族)，8.25 (d， 2誦H， CH芳香族)。步驟5將2-乙氧基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸(18.4g潮溼的，約77.5mmol) 溶解於MeOH (I.IL)中，並加入10%鈀碳(溼基)(1.84g)。將混合物於 12psi氫化10分鐘，隨後每隔10-20分鐘重複再填充至20-28psi，持續5小時，然後至46psi持續18小時。將混合物通過GF/F紙過濾， 並將殘餘物在IMS (100ml)中漿化，過濾，用庚烷(100ml)洗滌，並在 濾器上抽吸乾燥。由此得到灰白色固體(±)-2-乙氧基-3-(4，-氨基苯基)-丙酸(11.2g， 69%)。1H MMR (6, 250MHg, DMSOds》1.03 (t, 3-K CH3>, 2.73 (m, 2-H,)' 3,29 (m, 1H》，3>4S (m, 1H), 3.80 (ck), 、H》，6,50 (d, 2-H), 6—87 (d' 2-H〉. 實施例8製備(±)-2-乙氧基-3-(3，-氨基苯基)-丙酸(化合物40)的方法步驟1和2按照化合物20步驟1和2。 步驟3將硫酸二乙酯(12g, 78.2mmol)加入到攪拌的2-羥基-3-(3-硝基苯基) 丙烯酸(6.1g, 30.0mmol)和碳酸銫(29.3g，卯mmol)在DMF (61ml)中的 混合物中，形成澄清的淡黃色混合物，將其於室溫下攪拌過夜。將得 到的深紅色混懸液加熱至50。C保持4小時，然後在真空中濃縮，並將 殘餘物分配於水(100ml)和二氯曱烷(150ml)之間。分離有機層，再用水 (2 x 100ml)洗滌，經硫酸鈉乾燥，並通過矽膠墊過濾。在真空中將得 到的黃色溶液蒸發至乾燥，得到黃色固體2-乙氧基-3-(3-硝基苯基)丙 烯酸乙酯(5.6g， 72%)。 步驟4將氫氧化鉀(1.3g， 22.2mol)在水(20ml)中的溶液加入攪拌的2-乙 氧基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸乙酯(5.6g， 21，1 mmol)在甲醇(100ml)中的 溶液中，並將得到的混合物加熱至回流過夜。然後，在真空中蒸發甲醇，殘餘物用水(150ml)稀釋。溶液用二氯甲烷(2 x 80ml)洗滌，經矽 藻土墊過濾，然後通過加入3M HC1酸化至pH 3。將混合物冷藏18 小時，然後經過濾收集沉澱的固體，用水(3x30ml)洗滌，並於40。C在 真空中千燥。得到的固體從乙酸乙酯和庚烷重結晶，得到黃色固體的2-乙氧基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸(3.0&， 61 %)。，H薩R 〔5, 2,Hz, DMSO"de) - 1.34 (3HI, t, 7Hz), 4,10 (2H, q, 7Hz), 7.CW (1H. s),7,69 (1H, t, 7;3Hz》，8,07-8.22 (2H, m), 8,80 (，H, m)t 13.25 (1H, brs>, 步驟5將2-乙氧基-3-(3-硝基苯基)丙烯酸(3.06g, 12.9mmo1)、甲醇(150ml) 和5。/。活性炭上把(0.60g， 2mol。/。)的混合物於12-30psi H2氣氛下氬化2 小時。然後，經硅藻土過濾混合物，濾餅用甲醇洗塗，並於40。C在真 空下濃縮濾液，得到泡沫狀固體產物。將其溶解於水(100ml)中，並將 該溶液冷凍乾燥，得到灰白色固體(±)-2-乙氧基-3-(3'-氨基苯基)-丙酸 (2.7g， 100%)。1H NMR (5, 250MHz, DMSO"d6) - 1,07《3H, t, 7Hz), 2.6-2.85 (2H, m〉， 3,20-3,38 (1H, m)， 3.40 3,60 (1H' m), 3.92 (1H, dd, 5 & 7,7Hz),沃3>6*45 (3H國m), 7,01 (1H, t, 7^Hz),實施例9分子建模使用SYBYL軟體6.9.1版(Tripos Associates Inc， St Louis， MO) 在Silicon Graphics工作站上運行，進行分子建模研究。由標準碎片 庫建立了 5-ASA的兩性離子形式的三維^f莫型，隨後使用Tripos力場(3) 優化其幾何形狀。由於化合物的pKa仍是未知的，所以SPARC在線 計算器用於測定在生理 pH (7.4)時發生的種類 (http:〃ibmlc2.chem.uga.edu/spare/index.cfm)。離子4匕4匕合物的三維才莫 型由標準碎片庫建立，隨後使用Tripos力場(3)，包括由Gasteiger和 Hiickel原子電荷計算的靜電項，優化其幾何形狀。Maximin2程序中 可用的Powell方法用於使能量最小化，直至梯度值小於0.001 kcal/mol丄人PPARy配體結合域的結構得自其與在RCSB蛋白資料庫(1171) 中可用的泰沙格列賽(tesaglitazar (AZ 242))絡合的X-射線晶體結構(4,5)。化合物進入受體活性位點的柔性對接使用GOLD軟體進行(6)。 最穩定的對接模型根據由GoldScore (6)和X-Score評分機能(7)所預測 的評分最高的構象選擇。使用Maximin2程序中可用的Powell法和 Tripos力場以及4.0的介電常數，使絡合物能量降至最低，直至梯度 值達到0.01 kcal/mol.A。圍繞配體定義熱域(10A)和興趣區域(15A), 使用退火機能。 結果分子建模受體對接研究表明， 一般而言，S對映體較R對映體更 有活性，即使R對映體也確實顯示活性。 一個對映體更有生物活性這 一現象是眾所周知的。結果，本發明提供了一種將化合物拆分為對映體的方法。化合物 32的拆分方法以圖解方式顯示於圖11。儘管不希望被理論所束綽，但是認為化合物的S-對映體將提供較 高的活性。對接研究的結果顯示於圖5-10。實施例7製備(±)-2-乙氧基-3-(4'-氨基苯基)-丙酸(化合物39)的方法。對映 體的拆分(圖12)。formula see original document page 30
步驟1和2按照化合物34步驟1和2。 步驟3將2-羥基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸(20g， 95.6mmol)懸浮於DMF(200ml)中。加入Cs2C03 (74.9g， 229.9mmol)和硫酸二乙酯(26.3ml， 201mmol)，並觀察到溶解。於18。C攪拌18小時後，加入水(350ml) 和乙酸乙酯(250ml)，並分離各層。水層進一步用乙酸乙酯(5 x200ml) 萃取，然後將合併的有機相用水(2 x 200ml)、鹽水(2 x 200ml)洗滌， 經硫酸鎂乾燥。將有機層濃縮至乾燥，得到含有3.6。/。質量的DMF的 橙色固體2-乙氧基-3-(4-硝基苯基)-丙烯酸乙酯(27.6g潮溼的，收率 >100%)。
'H匪R (S， 250MHz， DMSO-d6): 1.32 (t， 6-H， 2 x CH2CH3)， 4.13 (q， 2國H， CH2CH3)， 4.30 (q, 2畫H， CH2CH3), 6.99 (s， l-H， CH=)， 8.06 (d， 2-H， CH芳香族)，8.26 (d， 2-H, CH芳香族)。 步驟4
含有3.6wt% DMF的2-乙氧基-3-(4-硝基苯基)丙烯酸乙酯(校正 26.07g， 98.3mmol)溶解於IMS (500ml)中，並加入NaOH (1.44g， 36.1 mmol)在水(260ml)中的溶液。得到的混合物在室溫下攪拌18小時，然 後用lMHCl(120ml)酸化，經過濾收集得到的固體，用水(2xl00ml) 洗滌，並在濾器上抽吸乾燥30分鐘，隨後
結果
激活PPARy導致一連串使與特異性DNA序列元件(稱為過氧化 物酶體增殖物反應元件(ppRE))結合的反應(7-9)。
我們通過用海鰓螢光素酶和PPRE質粒瞬時轉染上皮細胞，研究 了 PPARy轉錄活性。為了評價所述新分子是否具有比5-ASA更高的 刺激PPARy激活的功效，我們以lmM的濃度檢測了這些分子。將 lmM濃度的新分子的作用與5-ASA和羅格列酮比較，後二者分別以 30mM和1(T5M的最佳濃度用作陽性對照。在24小時期間用不同的分 子刺激細胞。
在轉染的HT-29細胞中PPARy活性的分析顯示，lmM的新分子 34、 39、 35和40分別增加了報導基因活性4.8±0.71、 2.73±0.31、 2.64±0.46、 3.4±0.97倍，由此顯示出相似於或優於30mM的5-ASA (2.8±0.7 )和1(T5M的羅格列酮(3.17士0.29)的活性。圖2表示在一式三份進行的2或3個實驗中所有得到的每一個分 子的所有結果。不同實驗之間的重現性良好，並與文獻中所述的數據 相似。
本研究使我們鑑別了 4個對激活PPARy具有較5-ASA大30-50 倍功效的新分子。 實施例11 結腸癌細胞生長
檢測了以下物質(即20、 34、 35、 39和40)它們調節結腸癌細胞生 長的能力。為此，使用三個人結腸癌細胞系(即HT-29、 HT-115和 DLD-1)。在環氧合酶-2(COX-2)表達的基礎上選擇這些細胞類型。事 實上，HT-115細胞表達生物學活性的COX-2, HT-29細胞表達無功 能的COX-2同工型，DLD-1是COX-2-缺陷細胞。現認為這些分子 對不表達COX-的細胞也是有活性的，因此本發明的分子可用於不表 達COX-2的細胞以便治療腫瘤和本文所述的其它應用。
HT-29和DLD-1細胞分別在McCoy和RPMI1640培養基中培養， 所述培養基中補充了 10y。胎牛血清(FBS)、 1。/。青黴素/鏈黴素(P/S)和 50mg/ml慶大黴素。HT-115在補充了 15% FBS和1% P/S的DMEM 培養基中培養。將細胞於37。C在5%(:02存在下維持在增溼的培養箱 中。
為了細胞生長測定，將單個細胞懸浮液以2 x 103細胞/孔(HT115 為4 x 103細胞/孔)接種於含有0.5% FBS的培養基的96-孔培養皿中， 並使其粘附。然後除去非粘附細胞，將含有0.5% FBS的新鮮培養基 加入到每一個孔中。細胞在指定物質存在或缺乏下培養。將各物質溶 解於含有0.5% FBS的培養介質中，作為25mM儲備溶液，需要時用 NaOH將各儲備溶液的pH調節至7.4。以0.5至10mM範圍內的終濃 度使用物質。
4吏用市售的細胞增殖試劑盒(Roche Diagnostics, Monza，意大 利)，通過測定摻入到DNA中的5-溴-2，-脫氧尿苷(BrdU)測定細胞增 殖。在溫育的最後6小時期間將BrdU加入到細胞培養物中，在培養48小時後通過聯免疫吸附測定法(ELISA)來評價BrdU-陽性細胞的水 平。使用ELISA讀出器在450nm處測定光密度(OD)。 一式三份進行 實驗，並以平均值士標準偏差(SD)報告結果。 結果所述化合物在其抑制結腸癌細胞生長的能力方面存在差異。結果概 括於表l中，其中顯示了指定化合物抑制DLD-1細胞生長的百分數。 物質20，以劑量依賴性方式在受試的三個細胞系中的每一個中都顯示 出明顯的抗增殖作用(圖3和4)。當化合物以終濃度lOmM使用時， 可見細胞生長抑制超過90%。當以終濃度5或10mM使用時，可見化 合物20明顯抑制細胞生長的能力。當以高劑量(10mM)使用時，化合物34和39輕微降低細胞生長(圖 4)，但是組間差異無統計學意義。類似地，在加入了物質35和40的 培養基中未見細胞生長的抑制(見表1)。 結論本發明的第一組實施例(實施例10)表明了四個優化的分子34、39、 35和40以lmM濃度增加轉染的HT-29細胞中PPARy活性的能力， 顯示出相似於或優於30mM的5-ASA和1(T5M的羅格列酮的活性。本發明的第二組實施例(實施例1 l)顯示化合物不同程度地影響結 腸癌細胞系，HT-29、 HT-115和DLD1的生長抑制作用。所述化合物 在其抑制結腸癌細胞系生長的能力方面存在差異。物質20對受試細胞 系顯示了明顯的抗增殖效應。本發明的這些分子對於不表達COX-2的細胞也是有活性的，因 此本發明的分子可用於不表達COX-2的細胞以便治療腫瘤和本文所 述的其它應用。總的結論由建模研究表明的合成的最高等級化合物，均顯示了相似/優於美 沙拉秦的活性。參考文獻1. Dubuq呵，L, EA Ja眼orr, S, Deeb, S. Rakot咖，M:. Karou"丄F. Co，ombel, 丄Auwerx, S. Petter卿n, and P, Desreumaux, 2003. Impaired: expression of peroxisome proltferato「~adivated receptor g柳ma in ulcerative colitis. GssfroeWera/ogy 124:1265-1276,2. Rous滅aux C, Lefebvre B, Dubuq:呵L, Lefebvre P, Romano O, Au條rx J， Metz:ger D, WaWi W, Desvergne B, Naccari GC, Chavatte P, Fsrc暨A, Bulois P, Cortot A, Cofomb'el JF, Desreumaux P.. ftit曰:stinai arrti-irrflammatory effect of 5-amino sslicyfic acid fs d鄰加derH on PPARy. J fp W^c 20O5; 207: 1205>15.3. Clark, M,C.R.D丄V.O,, N, 1989, Validation of tfie General Purpose Tripos 5,2 Fteld. J- C帥p"fC^em. 10:982-1012,4. Gampe, RT., Jr., V.G. Montana, M,H. Lambert, A,B. IVWIer, RK. Kedsoe, M.V, Miiburn, S.A,. Klie鵬r, T.SVI. Wilteon， and H,E.. Xu, 2O00, Asymmetry inthe PPAR^RXRalpha crystal staictur reveals the motecutar basis of heterodi怖riz幼'o:n among nuotear rec鄰tws, Mo/ Ce,/ 5:545-555,5.. Jones, G., P,誦ett, R,C- Gten, A,R. Lsach, and R, Taytor. 1斷，Oevdopment snd validation of a genetic algorithm for flexfcte dodking, "' SZoZ 267:727-748.6. Wang, R., L Lai, and S* Wang.. 2:002. Further dev由pment曰nd validation of empirical scoring functions for strudure-based binding a活ntty preciiction. J Compuf細Des 16:11-26.7, Ws幼n, S.' R. Kurokawa, RT. Node, G,B. Wisely, E,M Mclnerney, D,W, Rose' M-V. Miilbufn, M,G, Rose咖d, and C..K. Glass. 1998. l:nteracUons e贈ol卄ng the assembly of mscfear-receptor heterodimers and co-artivators, Wafwre 395:199-202,8. Mangefsdort, DJ。 C. Thummel, M, Beato, P, Herrlich, G, SchutzT K, Uin的ono, B, Blu她,，P, Kastrw, M,胸rt(, P< Chambon, and et al- 1卿，The nuc!的r receptor superfamily: the second decade, Ce//83:836^839.9, 睛s『a, P,, E,D, Owuor， W. U & Yu, C. Qit K. Meyer, Y,丄2hu, MS' Rao,線 Kong, and丄K. Reddy, 2002, Ptiosphorylatbn of transoipticmal coactivator peroxisome proliferator-activated reeepto'r (PPAR)-bind:ing prc^ein《PBP》. Sti麵'Iation of transcriptJona[ regulation by mitogen-activated protein kinase. J 8/0/ Cfrsm 277:4874548754. Epub 42002 Sep 48727,
權利要求
1.通式(I)的化合物其中R1和R2，可以相同或不同，選自-H、或者含有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基基團，或者一起形成含有5或6個原子的芳香族或脂肪族環；Y和Z，可以相同或不同，選自-H、-OH、-COOH、-OR3、-CH(OR3)COOH，其中R3選自H、苯基、苄基、-CF3或-CF2CF3、乙烯基、烯丙基和含有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基基團。
2.通式(Ia)的化合物Rj和R2，可以相同或不同，選自-H或者含有1-6個碳原子的直 鏈或支鏈烷基基團；Y和Z,可以相同或不同，選自-H、 -OH、 -COOH、 -OR3、 -CH(OR3)COOH，其中R3選自-H和含有1-6個碳原子的直鏈或支鏈 烷基基團。
3.權利要求1或權利要求2所述的化合物，其中所述含有1-6個 碳原子的直鏈或支鏈烷基基團選自-CH3、 -CH2CH3、 -CH(CH3)2、formula see original document page 2
4. 任意一項前述權利要求所述的化合物，其中Y是H。
5. 權利要求1-4中任意一項所述的化合物，其中Z是 CH3(OR3)COOH。
6. 任意一項前述權利要求所述的化合物，其中R3是-CH3。
7. 任意一項前述權利要求所述的根據下式(VI)的化合物formula see original document page 0(化合物34)。
8.權利要求1-6中任意一項所述的根據下式(VI)的化合物formula see original document page 0(化合物35)。
9. 任意一項前述權利要求所述的化合物，其中R3是-H。
10. 權利要求1-5中任意一項所述的根據下式(II)的化合物formula see original document page 0(化合物20)。
11.權利要求1-5中任意一項所述的化合物，其中R3是-CH2CH3,
12.權利要求1-5和權利要求11中任意一項所述的根據下式(VII) 的化合物(化合物39),
13.權利要求l-5和權利要求11中任意一項所述的根據下式(VIH) 的化合物formula see original document page 4(化合物40),
14. 權利要求1-3中任意一項所述的化合物，其中Y是-COOH。
15. 權利要求1-3和權利要求14中任意一項所述的化合物，其中 R3是-CH3。
16.權利要求1-3和權利要求14或15中任意一項所述的根據下 式(III)的化合物formula see original document page 5，(化合物23),
17.權利要求1-3和權利要求14中任意一項所述的化合物，其中 R3是-CH2CH3。
18.權利要求1-3和權利要求14和17中任意一項所述的根據下 式(IV)的化合物formula see original document page 5(化合物32),
19.權利要求1-3和權利要求14和17中任意一項所述的根據下 式(V)的化合物formula see original document page 5(化合物33)。
20.根據任意一項前述權利要求的化合物，其中所述化合物選自 (±)-2-羥基-3_(3'-氨基苯基)丙酸(化合物20) (±)-2-甲氧基-2-(4，-氨基苯基)乙酸(化合物23) (±)-2-乙氧基-2-(3'-氨基苯基)乙酸(化合物32)(±)-2-乙氧基-2-(4'-氨基苯基)乙酸(化合物33) (±)-2-甲氧基-3_(4'-氨基苯基)丙酸(化合物34) (±)-2-乙氧基-3-(4'-氨基苯基)丙酸(化合物39) (±)-2-乙氧基-3-(3'-氨基苯基)丙酸(化合物40)。
21. 根據任意一項前述權利要求的化合物，其為對映體純的R或 s形式。
22. 藥物組合物，它包含與一種或多種可藥用賦形劑或助劑組合 的一種或多種如權利要求1-22任意一項中所定義的作為活性成分的 化合物。
23. 根據權利要求1-21任意一項的化合物或根據權利要求22的 藥物組合物用於醫藥領域的用途。
24. 根據權利要求1-21任意一項的化合物或根據權利要求22的 藥物組合物用於製備藥物產品的用途，所述藥物產品用於預防和治療 表達PPARy受體和egf受體的腫瘤。
25. 根據權利要求24的用途，其特徵在於所述腫瘤選自食道腫 瘤、胃腫瘤、胰腺腫瘤、結腸腫瘤、前列腺腫瘤、乳腺腫瘤、子宮及 附件腫瘤、腎腫瘤和肺腫瘤。
26. 根據權利要求1-21任意一項的化合物或根據權利要求22的 藥物組合物在製備用於治療慢性炎性疾病的藥物產品中的用途。
27. 根據權利要求24的用途，其特徵在於所述慢性炎性疾病選 自克羅恩病和潰瘍性直腸結腸炎。
28. 根據權利要求1-21任意一項的化合物或根據權利要求22的 藥物組合物在製備用於治療慢性炎性疾病的藥物產品中的用途。
29. 根據權利要求1-21任意一項的化合物或根據權利要求22的 藥物組合物的用途，其特徵在於所述化合物選自(±)-2-羥基-2-(3，-氨基苯基)乙酸 (±)-2-羥基-2-(4'-氨基苯基)乙酸 (±)-2-羥基-3-(4'-氨基苯基)丙酸 (±)-2-甲氧基-3_(3'-氨基苯基)丙酸 (±)-2-甲氧基-3-(4，-氨基苯基)丙酸。
30. 根據權利要求23-29任意一項的用途，其特徵在於所述化合 物選自化合物IO、化合物ll、化合物20、化合物21、化合物22、化 合物23、化合物32、化合物33、化合物34、化合物35、化合物39 和4匕合物40。
31. 根據權利要求23-30任意一項的用途，其中所述化合物的應 用是以混合物使用，該混合物中一種對映體以任何比例過量於另一種 對映體。
32. 治療人或動物的方法，其包括用 一種或多種根據權利要求1-21 任意一項的化合物、權利要求22中所述的藥物組合物或根據權利要求 23-31任意一項的用途治療所述的人或動物。
33. 參照附圖和附表基本上如本文所述的化合物。
34. 參照附圖和附表基本上如本文所述的用途。
35. 參照附圖和附表基本上如本文所述的藥物組合物。
全文摘要
本發明涉及包含通式(I)的化合物，其中，R1和R2，可以相同或不同，選自-H、或者含有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基基團，或者一起形成含有5或6個原子的芳香族或脂肪族環；Y和Z，可以相同或不同，選自-H、-OH、-COOH、-OR3、-CH(OR3)COOH，其中R3選自H、苯基、苄基、-CF3或-CF2CF3、乙烯基、烯丙基和含有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基基團。
文檔編號C07C229/42GK101243039SQ200680030077
公開日2008年8月13日 申請日期2006年7月24日 優先權日2005年7月22日
發明者G·納卡裡, S·巴羅尼 申請人:朱利亞尼國際有限公司