藥劑的製作方法

2023-12-03 07:02:31 3

專利名稱：藥劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌(阿託瓦醌，atovaquone)和氯胍的具有抗寄生蟲活性的增效組合物。更具體地說，本發明涉及含有上述組合物的藥用組合物，它們在治療原生動物寄生蟲感染(例如瘧疾和弓形體病)中的應用和在治療由卡氏肺囊蟲引起的感染中的應用。
先前已經公開了化合物2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌(阿託瓦醌)，例如在歐洲專利123，238中提到了式(Ⅰ)的2-取代的-3-羥基-1，4-萘醌及其生理上可接受的鹽
其中R1是氫，R2選自C1-6烷氧基、芳基烷氧基、C1-6烷基-C1-6烷氧基、用選自滷素和C1-6烷基的一或二個基團取代的苯基、滷素和全滷-C1-6烷基，或者R1和R2都是C1-6烷基或苯基，n是0或1。據說這些化合物具有抗原生動物活性。特別是，其中的n為0的式(Ⅰ)化合物據稱有防治人類瘧原蟲(plasmodium falciparum)的活性。而且還具有防治球蟲病病原體艾美球蟲屬(例如禽艾美球蟲和堆形艾美球蟲)的活性，其中的n為1的式(Ⅰ)化合物則具有防治泰氏梨漿蟲屬，特別是環狀泰氏梨漿蟲和小泰氏梨漿蟲等原生動物的活性。在這些化合物中特別提到並舉例說明的是其中的n為0，R為氫和R2為4-氯苯基的式(Ⅰ)化合物，即阿託瓦醌(atovaquone)。
氯胍是著名的預防瘧疾的藥物，但不能用於治療。它是最安全的防瘧藥，可以用於兒童和孕婦。但是，惡性瘧原蟲對氯胍已出現抗性，特別是在東南亞，而且日益嚴重。
為了克服抗藥性，同時或先後服用一種以上的防瘧藥已成為常規作法。但是，這種組合中很多是對抗性的，造成療效降低，而且服藥方式常常很複雜，增加了患者不能完成治療的可能性。因此，本發明的目的是提供一種沒有對抗作用的防瘧藥的組合，而且它不需要複雜的服藥方式。
現已出乎意料地發現，將在本說明書中用式(Ⅱ)表示的阿託瓦醌和氯胍一起或先後結合服用，其抗寄生蟲活性、特別是抗瘧活性，呈現增效作用。另外，式(Ⅱ)化合物和氯胍的增效組合可以簡單地在單一種藥物製劑中表現出來。
在本發明的第一方面，提供了一種治療和/或預防哺乳動物(包括人)中原生動物寄生蟲感染(例如瘧疾或弓形體病)或卡氏肺囊蟲造成的感染的方法，此法包括服用有效數量的阿託瓦醌或其生理上可接受的鹽，並且同時或隨後服用有效數量的氯胍。
在第二方面，本發明提供了用於製造藥劑的阿託瓦醌，以便與氯胍同時服用或先後服用，治療和/或預防在哺乳動物(包括人)中的原生動物寄生蟲感染(例如瘧疾或弓形體病)或卡氏肺囊蟲造成的感染。
式(Ⅱ)化合物和氯胍優選同時服用。最好是式(Ⅱ)化合物和氯胍以增效比例服用。
因此，根據本發明的又一方面，提供了阿託瓦醌或其生理上可接受的鹽與氯胍的組合物，其中阿託瓦醌或其鹽與氯胍以增效比例存在。
這裡使用的「增效比例」一詞表示，阿託瓦醌和氯胍的比例使組合物的抗寄生蟲活性大於阿託瓦醌或氯胍單獨存在時的活性或者根據各個組分的活性對組合物所預期的加和活性。因此，各組分若是按增效比例相組合，則協同地起增效作用。
可以成功地用來治療瘧疾、包括抗羥萘醌的瘧疾品系的增效比例是在氯胍∶阿託瓦醌為1∶0.1～1∶100的範圍內。增效比例以1∶0.2～1∶10為宜。
特別優選的增效比例是1∶1～1∶3。
本發明另一方面還提供了治療和/或預防哺乳動物(包括人)中的瘧疾的方法，該方法包括服用阿託瓦醌或其生理上可接受的鹽與氯胍的有效數量的組合物。
阿託瓦醌的羥基可以與適當的鹼形成鹽，阿託瓦醌的生理上可接受的鹽包括無機鹼鹽，例如鹼金屬(如鈉和鉀)鹽和鹼土金屬(如鈣)鹽;有機鹼鹽，例如苯乙基苄基胺、二苄基乙二胺、乙醇胺和二乙醇胺鹽;以及胺基酸鹽，例如賴氨酸和精氨酸鹽。
式(Ⅱ)化合物可以以順式或反式異構體的形式存在，也就是說，其中的環己基環可以被萘醌核和氯苯基順式或反式取代。順式和反式異構體以及它們的任何比例的混合物均可根據本發明使用。一般來說，當化合物是異構體的混合物時，反式異構體的含量應約為50%或者是主要的異構體，但是使用順式異構體佔主要地位的混合物也包括在本發明的範圍之內。異構體的具體比例可以隨需要而變;典型的混合物包括其中的順/反異構體之比約為1∶1，40∶60和5∶95的那些混合物。對於根據本發明的使用，優選式(Ⅱ)化合物的反式異構體，或是其中至少含95%(例如99%)反式異構體的順、反異構體的混合物。
式(Ⅱ)化合物也可以以互變異構體的形式存在，其中羥基將其質子給予一個氧代基，這種互變異構形式的使用也包括在本發明的範圍之內。但是，據信式(Ⅱ)所示的形式是穩定的形式。
阿託瓦醌和氯胍的組合物作為有效的抗寄生蟲劑所需的數量當然是可變的，最終要由醫師或獸醫決定。要考慮的因素包括服藥的途徑和製劑的本質，哺乳動物的體重、年齡和一般狀況，以及要治療的疾病的性質和嚴重程度。一般來說，對於治療人類瘧疾，要服用的合適有效劑量是每千克體重每天2.0毫克至30毫克氯胍和0.5毫克至30毫克阿託瓦醌，例如3到20毫克/千克/天的氯胍和1到20毫克/千克/天的阿託瓦醌，特別是5到15毫克/千克/天的氯胍和3到15毫克/千克/天的阿託瓦醌。
用於預防人類瘧疾時，合適的有效劑量是氯胍和阿託瓦醌均為每千克體重每周3至20毫克，例如氯胍和阿託瓦醌均為6毫克/千克/周至10毫克/千克/周。
應該清楚，上面提到的劑量均按藥物本身計算。
對於根據本發明的應用，阿託瓦醌和氯胍的組合物最好以藥物製劑的形式存在。
藥物製劑包括活性成分(即，阿託瓦醌和氯胍的組合物)和其一種或多種藥學上可接受的載體以及任選地其它用於治療和/或預防的成分。載體在與藥劑的其它成分相容和不損害服藥者方面必須是可接受的。
因此，本發明提供了一種藥物製劑，其中含有阿託瓦醌和氯胍的組合物以及一種或多種藥學上可接受的載體。
本發明還提供了製備藥物製劑的方法，該方法包括使阿託瓦醌和氯胍的組合物與一種或多種藥學上可接受的載體相組合。
阿託瓦醌和氯胍的組合物可以方便地製備成單位劑量形式的藥物製劑。一種方便的單位劑量的製劑含有數量各為10毫克至3克(例如50毫克至3克)的活性成分。典型的單位劑量可以含有例如500毫克的阿託瓦醌和200毫克的氯胍，或是500毫克的阿託瓦醌和500毫克的氯胍。
藥物製劑包括適合口服、局部施用(包括經皮、頰含和舌下服用)、肛門用藥和非腸道用藥(包括皮下、真皮內和靜脈內用藥)以及用鼻飼管用藥的藥劑。這些藥劑在適當的情況下可以方便地製成分離的劑量單位，並且可以用製藥工藝中熟知的任何方法製備。所有這些方法都包括使活性組分與液體載體或磨得很細的固體載體或與兩種載體一起混合的步驟，隨後更有必要，將產品成型，得到所要的製劑。
其中的載體是固體的適合口服的藥物製劑最好是製成單位劑量的製劑，例如大丸劑、膠囊劑或片劑，每單位劑量中含有預定數量的活性成分。片劑可以用壓制或模塑的方法製得，可以任選地加有一種或多種輔助成分。壓製藥片可以通過在合適的機械內將處於自由流動形式(例如粉末或顆粒)的活性化合物任選地與粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑或分散劑混合壓製得到。模塑藥片可以用模塑惰性液體稀釋劑的方法製得。片劑可以任選包糖衣，如果不包糖衣，則可以任選地列印符號。膠囊可以通過將活性成分單獨地或與一種或多種輔助成分以混合物形式裝入膠囊殼中然後用常規方法封口來製備。扁囊劑與膠囊類似，其中的活性成分與任何輔助成分一起密封在米紙封皮中。式(Ⅱ)化合物與氯胍的組合物也可以配製成可分散的顆粒，在服用前這些顆粒可以懸浮在水中或者撒在食物上。顆粒也可以封裝在例如小袋中。其中的載體是液體的適合口服的製劑可以製成在水基液體或非水液體中的溶液或懸浮液的形式，或者是水包油的乳狀液。
口服製劑中包括可控釋放的服用形式，例如片劑，其中的活性成分配製在合適的控制釋放的基質中，或是包覆著合適的控制釋放的薄膜。這類製劑可能特別適合用於預防。
活性成分也可以配製成適合經過鼻飼管用藥的溶液或懸浮液。
其中的載體為固體的適合肛門用藥的藥物製劑最好製成單位劑量的栓劑。合適的載體包括可可脂和工藝中常用的其它材料。栓劑可以方便地通過活性組合物和軟化或熔化的載體混合然後冷卻並在模具中成型來製備。
適合非腸道用藥的藥物製劑包括活性組合物在水基或油質溶劑中的滅菌溶液或懸浮液。可注射的製劑可以適合於快速濃注或連續注入。這些製劑適合於在單位劑量或多劑量的容器中保存，在裝入製劑後將容器密封直到需要用時開封。或者是，活性成分可以是粉末形式，在使用前將其與合適的溶劑，例如與滅菌的無熱原的水一起構成製劑。
阿託瓦醌和氯胍的組合物也可以配製成長效的儲存製劑，這種製劑可以肌內注射或以植入法用藥，例如皮下植入或肌肉內植入。儲存製劑可以包含合適的聚合物或疏水物質，或者離子交換樹脂。這類長效的藥劑特別適合用於預防。
應該清楚，除了上述的載體成分之外，用於上述各種服藥途徑的藥物製劑在合適時還可以包括一種或多種的輔助載體成分，例如稀釋劑、緩衝劑、香味劑、粘合劑、表面活性劑、增稠劑、潤滑劑、防腐劑(包括防氧化劑)等，以及用來使製劑與服用對象的血液等滲透壓的物質。
適合獸用的組合物包括適合口服、非腸道服用和瘤胃內用藥的那些組合物。
製備阿託瓦醌的方法在歐洲專利123，238中有說明，實施例1示例說明了一種特定的方法。
實施例12-[反-4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌a).4-(4-氯苯基)環己烷-1-羧酸將乙醯氯(30克)和氯化鋁細粉(60克)在二硫化碳(120毫升)中一起攪拌，然後在CO2/苯基溶纖劑浴中冷卻到-50℃。在10分鐘內逐滴加入預先冷到-50℃的環己烯(30克)，同時保持反應混合物的溫度低於-20℃。混合物在-50℃下再攪拌60分鐘，然後倒掉溶劑，留下膠狀的橙色複合物。當把此物質溫熱到室溫時加入少量氯苯，然後加入其餘的氯苯(總計300毫升)，將這樣得到的溶液在40℃下攪拌加熱3小時，倒在冰和濃鹽酸的混合物上，分離出有機層，用2M的鹽酸、2M氫氧化鈉和水洗，用無水硫酸鈉去水，蒸發乾燥。將產物真空蒸餾，收集沸點在140-154℃(0.1mmHg)的餾分，用等體積的石油醚(40-60)稀釋，冷卻到-6℃，鼓入連續的氮氣流，回收分離出的無色固體。
在0℃下向氫氧化鈉(6.2克)在水(42毫升)中的溶液加入溴(2.8毫升)。將上面得到的取代的六羥基乙醯苯(3.1克)溶在15毫升二噁烷中，然後加入冷的次溴酸鹽溶液，保持反應混合物低於20℃。將反應混合物在室溫下攪拌6小時，然後放置過夜。加入焦亞硫酸鈉以破壞多餘的次溴酸鹽，將混合物冷卻，然後酸化，得到無色的固體。濾出固體，用水洗，乾燥，自乙醇中重結晶，得到4-(4-氯苯基)環己烷-1-羧酸，熔點254-256℃。
b).2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-氯-1，4-萘醌將2-氯-1，4-萘醌(3.95克，0.02摩爾)、4-(4-氯苯基)環己烷-1-羧酸(4.9克，0.02摩爾)和粉狀硝酸銀(1.05克，0.0062摩爾)的混合物在40毫升乙腈中於激烈攪拌下加熱回流。在1小時內逐滴加入過硫酸銨(12.0克，0.0525摩爾)在50毫升水中的溶液。將該混合物回流3小時，然後在冰中冷卻30分鐘，隨後過濾，該殘留的粘性固體用沸騰的氯仿萃取兩次以去掉無機物。蒸發除掉該氯仿，留下黃褐色的固體(約2.7克)。將它溶解在沸騰的乙腈中，過濾除掉少量不溶的物質。冷卻時該標題化合物以黃色晶體的形式分離出來(550毫克)，熔點.172-175℃。
NMR，dH(δ6-二甲基亞碸)8.05(2H，mult.，β-萘醌)，7.85(2H，mult.，α-萘醌)，7.30(4H，s.，PhH)，3.30(1H，br.t.，CH)，2，67(1H，br.t.，CH)。1.2-2.4(8H，mult.，4xCH2).
c).2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌將步驟(b)的產物懸浮在10毫升沸騰的甲醇中，在15分鐘內逐滴加入在5.5毫升水中的0.55克氫氧化鉀。將該混合物回流，直到形成深紅化的溶液(約6小時後)，此時小心地逐滴加入2毫升濃鹽酸。將該混合物冷卻過濾，用水將該固體殘餘物充分清洗。水洗液重新酸化並過濾。將合併的固體殘餘物(500毫克，熔點.200-209℃)自乙腈中重結晶，得到反式異構體的該標題產物(300毫克)，熔點.216-219℃。
實施例2以下實施例示例說明了可以根據本發明使用的常規的藥物製劑。
A.薄膜包衣藥片核心實施例1的化合物500毫克氯胍鹽酸鹽200毫克微晶纖維素(AvicelpH101)130毫克羥丙基纖維素，Lo-sub，(LHPC，LH11)99毫克羥基乙酸澱粉鈉(Explotab)30毫克聚乙烯吡咯烷酮K3036毫克硬脂酸鈉5毫克壓片重量1000毫克包衣聚合物分散體(羥丙基甲基纖維素和二氧化鈦、聚乙二醇400及著色劑)20毫克拋光劑聚乙二醇80002毫克總重1022毫克B.可分散的薄膜包衣藥片核心實施例1的化合物500毫克氯胍鹽酸鹽200毫克微晶纖維素(AvicelpH101)100毫克羥丙基纖維素，Lo-sub(LHPC，LH11)83毫克羥基乙酸澱粉鈉(Explotab)40毫克聚乙烯吡咯烷酮K3020毫克硬脂酸鎂5毫克二辛基磺化琥珀酸鈉1毫克矽酸鋁鎂(VeegumF)50毫克糖精鈉1毫克壓片重量1000毫克包衣
聚合物分散體(羥丙基甲基纖維素和二氧化鈦、聚乙二醇400及著色劑)10毫克拋光劑聚乙二醇80002毫克總重1012毫克生物試驗結果實施例3實施例1化合物與其它抗瘧藥的組合物中藥物相互作用的比較用Desjardins的半自動化技術進行體外藥物靈敏度研究(Desjardins等，AntimalarialAgentsandChemotherapy.1979，16(6)，710-718)。在該體系中通過濃度遞變的藥物對放射性標記的次黃嘌呤在寄生蟲中結合的抑制作用來評定抗瘧活性。
將試驗的抗瘧藥物溶在水、95%乙醇或二甲基亞碸中;溶在水中的藥物用95%的乙醇按1∶1稀釋，溶在乙醇中的藥物用水按1∶1稀釋。然後用含10%人血清的培養介質將藥物溶液稀釋到起始濃度為估計的IC50的20-50倍。所試驗的藥物及其溶劑列出如下藥物初始溶劑介質實施例1化合物二甲基亞碸1640奎寧乙醇-水1640氯喹水-乙醇1640甲氟喹乙醇-水1640伯氨喹乙醇-水1640青蒿酯鈉乙醇-水1640
PM443二甲基亞碸1640四環素二甲基亞碸1640諾氟沙星二甲基亞碸1640環丙沙星二甲基亞碸1640氯胍乙醇-水低濃度葉酸鹽環氯胍乙醇-水低濃度葉酸鹽乙胺嘧啶二甲基亞碸低濃度葉酸鹽甲氧苄氨嘧啶二甲基亞碸低濃度葉酸鹽磺胺甲基異惡唑二甲基亞碸低濃度葉酸鹽氨苯碸二甲基亞碸低濃度葉酸鹽二氯二甲吡啶酚二甲基亞碸低濃度葉酸鹽別嘌呤醇乙醇-水低濃度葉酸鹽PS-15二甲基亞碸低濃度葉酸鹽WR99210二甲基亞碸低濃度葉酸鹽為研究藥物組合物，將起始濃度的藥物溶液按不同的比例(1∶5，1∶2，2∶1和5∶1)組合。然後將藥物溶液和組合物加到96孔的微量滴定板中，形成二排實施例1化合物、要組合的藥物和兩種藥物的四個組合物。用介質按1∶3連續稀釋藥物，使用12通道的移液器加到96孔的微量滴定板中。為了評價分類為二氫葉酸還原酶(DHFR)抑制劑的藥物，使用只含生理濃度的葉酸和對氨基苯甲酸的改性的培養介質。
其餘的生物步驟按Desjardins方法進行，不同之處在於，使用三種品系的惡性瘧原蟲(抗多種藥物的W-2無性繁殖系，對藥物敏感但是抗甲氟喹的D-6無性繁殖系和抗實施例1化合物的C2B分離物)，而且培育時間延長到72小時。
用Micromath Scientific Software公司的「MINSQ」程序計算各個IC50值。將各組成對的數據對Desjardins使用的雙曲線切線函數進行擬合。
將IC50值歸一化，作法是指定實施例1化合物和所組合的其它藥物的IC50為1，對於所研究的各個比例的兩種藥物則得出成比例的歸一化數值。使數據符合以下公式以構成等和圖(Isobologram)Yi＝1-[Xi/(Xi+eI＊(1-Xi))]其中Yi＝實施例1的化合物與另一種藥物組合時的IC50Xi＝另一種藥物在與實施例1化合物組合時的IC50I＝代表反向度的相互作用參數對於每種組合，計算I的值。正的I值表示增效組合，負值表示對抗，而I＝0代表加和相互作用。
結果示於表1中。
表1與實施例1I組合的藥物W-2D-6C2B奎寧-1.36氯喹-1.84-1.40甲氟喹-1.19四環素1.271.110.02,-0.08伯氨喹-0.79青蒿酸-0.18PM443-1.28諾福沙星1.02環丙沙星-1.22乙胺嘧啶0.36-0.48甲氧苄氨嘧啶1.270.58氯胍2.43,2.882.562.56環氯胍2.211.660.13,-0.73別嘌呤醇1.140.43PS-151.77,0.65,1.97-0.74WR992100.02磺胺甲基異惡唑2.75氨苯碸-0.39二氯二甲吡啶酚2.38,2.650.73
結果表明，2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌和氯胍組合，與所試驗的其它藥物組合物相比，顯示出最穩定的增效作用，特別是對於抗羥基萘醌的C2B品系。
通過測定氯胍的IC50與式(Ⅱ)化合物的IC50的比值，對於三種品系的瘧疾寄生蟲估計與氯胍的組合物的最佳比例。結果列在下面的表2中。
表2W-2D-6C2B氯胍:式(I)化合物920:14038:10.2:12473:1實施例4實施例1化合物、氯胍及其組合物在體內抗弓形體活性的比較這些化合物及其組合物的活性在鼠弓形體的小鼠樣品動物中檢驗，延長時間至死，以存活的小鼠百分數作為藥物活性的量度。
用管飼法使10隻一組的20克CBA/CA小鼠口服感染6囊胞的C56品系鼠弓形體，3天後開始藥物治療，繼續10天。所有的藥物均管飼口服。檢驗以下各組對照組阿託瓦醌，10毫克/千克阿託瓦醌，25毫克/千克氯胍，25毫克/千克阿託瓦醌，10毫克/千克+氯胍，25毫克/千克阿託瓦醌，25毫克/千克+氯胍，25毫克/千克所有的動物均每天檢查二次，檢驗30天，記下死亡總數。
結果列在表3和表4中。
表3致死的平均時間(天)阿託瓦醌010毫克/千克25毫克/千克氯胍014020.124.1(毫克/千克)259.018.429.3表4存活%阿託瓦醌010毫克/千克25毫克/千克氯胍010.010.110.0(毫克/千克)250.00.080.0對照鼠的平均死亡時間是14天，只有一隻動物存活[10%](此動物可能未被所用的低濃度接種物感染)。只用阿託瓦醌，在10毫克/千克時此時間增加到20.1天，在25毫克/千克時增加到24.1天，兩種情形下都只有一隻存活[10%]。氯胍雖然對人極其安全，但對小鼠有毒。在25毫克/千克時氯胍顯示出毒性，將死亡時間減小到9天，無一隻存活。將10毫克/千克的阿託瓦醌與25毫克/千克的氯胍組合，平均死亡時間為18.4天。將25毫克/千克阿託瓦醌和25毫克/千克氯醌組合，雖然氯胍有毒，但小鼠的死亡時間增加，而且與只用阿託瓦醌時10%的微小存活率相比，小鼠的存活率達到80%。
實施例5實施例1化合物、氯胍及其組合物在體外抗弓形體活性的比較使用根據對瘧疾採用的半自動化技術(Desjardins等，Antimicrobial Agents and Chemotherapy，1979，16(6)710-718)在體外研究藥物靈敏性，但是採用選擇性結合了3[H]-尿嘧啶的鼠弓形體。此體系中的抗弓形體活性通過濃度遞變的藥物對放射性標記的尿嘧啶吸收到寄生蟲內的抑制作用進行評定。
將藥物溶解在二甲基亞碸中，用含3%胎牛血清的培養介質配製稀釋液。為了研究藥物組合物，將起始濃度的藥物溶液以1∶1、1∶3和3∶1等不同比例組合。配製這些藥物溶液及組合物按1∶2連續稀釋的稀釋液，加在事先用海拉細胞和RH品系鼠弓形體接種的96孔板的雙排孔中。在寄生蟲和板在37℃下培育24小時後加入3[H]-尿嘧啶，2小時後加入藥物，繼續培養8小時。去掉上層流體，在十二烷基硫酸鈉中破壞含鼠弓形體的細胞，用三氯乙酸將標記的蛋白質沉澱在濾墊上。用β射線平板型閃爍計數器測定標記物的結合情況。對各化合物和其組合物計算對尿嘧啶結合的抑制百分數，用GS1程序計算IC50。使IC50值歸一化，其作法是指定實施例1化合物和氯胍的IC50為1，對於所研究的各個比例的兩種化合物則指定其歸一化的數值。將這些歸一化的IC50值彼此對照作圖，構成等和圖(Isobologram)。在此等和圖的直線以下的數值表示增效作用，在線上表示加合作用，線以上的數值表示對抗作用。
使用三套試驗板，所有數值均畫在圖上。結果示於表5中。
表5歸一化的IC50阿託瓦醌氯胍增效作用0.5592780.583893無0.1966890.614094有0.7293810.253691有0.3452380.527273有0.1309520.6有0.2333330.118182有0.4049590.451538有0.2292010.768462有0.2449040.091538有結果表明，阿託瓦醌與氯胍的組合顯示出體外對抗鼠弓形體的活性。
實施例6實施例1的化合物、氯胍及其組合物在體內抗肺囊蟲活性的比較在患間質性漿細胞性肺炎的試驗用Scid小鼠上檢驗各化合物和組合物的活性。
每組中的小鼠的感染程度用標準的肺印模塗片和免疫螢光試驗法測定。對每隻鼠打分，其中0＝無感染，+4＝嚴重感染。結果示於表6中。
表6處置情況SCOEE感染數/平均分數為對照0+1+3+4+4檢驗數±SE試驗的%未處置的對照動物0003710/103.70±0.14100阿託瓦醌,每天500055010/102.50±0.1668毫克/千克,口服阿託瓦醌,每天250017210/103.10±0.1784毫克/千克,口服氯胍,每天25毫克/0002810/103.8±0.1385千克,口服阿託瓦醌和氯胍,541005/100.50±0.2114每日50+25毫克/千克,口服阿託瓦醌和氯胍,104408/92.22±0.3160每日25+25毫克/千克,口服在單獨服用時，阿託瓦醌使感染分數減小。單獨服用25毫克/千克/天的氯胍在預防Scid小鼠的間質性漿細胞性肺炎方面無效。氯胍與阿託瓦醌組合顯示出增效作用。
權利要求
1.一種治療和/或預防哺乳動物中的原生動物寄生蟲感染或由卡氏肺囊蟲引起的感染的方法，該方法包括服用2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌和氯胍。
2.根據權利要求1的方法，其中2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌和氯胍同時服用。
3.根據權利要求1或2的一種方法，其中2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌和氯胍以增效比例服用。
4.根據權利要求1至3中任何一項的方法，其中原生動物寄生蟲感染是瘧疾。
5.根據權利要求1至3中任何一項的方法，其中原生動物寄生蟲感染是弓形體病。
6.根據權利要求1至3中任何一項的方法，用於治療和/或預防由卡氏肺囊蟲引起的感染。
7.根據權利要求1至6中任何一項的方法，其中2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌是反式異構體的形式，或者是以反式異構體為主的順式和反式異構體的混合物。
8.使用2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌製造藥劑，用來與氯胍同時服用或先後服用，以治療和/或預防哺乳動物中的原生動物寄生蟲感染或由卡氏肺囊蟲引起的感染。
9.根據權利要求8的應用，其中原用動物寄生蟲感染是瘧疾。
10.根據權利要求8的應用，其中原生動物寄生蟲感染是弓形體病。
11.根據權利要求8用於治療和/或預防卡氏肺囊蟲引起的感染。
12.2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌和氯胍的組合物。
13.根據權利要求12的一種組合物，其中2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌和氯胍以增效比例存在。
14.根據權利要求13的一種組合物，其中氯胍與2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌之比是在1∶1到1∶3的範圍內。
15.根據權利要求12至14中任何一項的一種組合物，其中2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌是反式異構體或是以反式異構體為主的順式和反式異構體的混合物。
16.根據權利要求12至15中任何一項的組合物，用於治療和/或預防哺乳動物中的原生動物寄生蟲感染或卡氏肺囊蟲引起的感染。
17.根據權利要求12至15中任何一項的組合物，用於製造藥劑，該藥劑用來治療和/或預防哺乳動物中的原生動物寄生蟲感染或由卡氏肺囊蟲引起的感染。
18.一種治療和/或預防哺乳動物中的原生動物寄生蟲感染或卡氏肺囊蟲引起的感染的方法，該方法包括服用有效數量的權利要求12至15中任何一項的組合物。
19.一種藥物製劑，其中含有權利要求12至15中任何一項的組合物及一種或多種藥學上可接受的載體。
20.一種單位劑量的藥劑，其中含有各為50毫克至3克的2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌和氯胍。
21.根據權利要求17的一種單位劑量的藥劑，其中含有500毫克2-[4-(4-氯苯基)環己基]-3-羥基-1，4-萘醌和200毫克氯胍。
全文摘要
本發明涉及阿託瓦醌(atovaquone)與氯胍的組合物，它們在治療和預防寄生蟲感染(例如原生動物寄生蟲感染，如瘧疾和弓形體病)和卡氏肺囊蟲引起的感染方面的應用，以及它們在製造用於治療和/或預防這類感染的藥物中的應用。這些組合物可以以單個藥物製劑的形式服用。最好是以增效比例服用阿託瓦醌和氯胍以使它們起增效作用。
文檔編號A61K31/12GK1091632SQ9311472
公開日1994年9月7日 申請日期1993年11月25日 優先權日1992年11月26日
發明者W·E·古特裡治, D·B·A·哈欽森, V·S·拉特, M·普尼 申請人:惠爾康基金會集團公司