一種水飛薊賓和苦參素或苦參鹼的復鹽及其應用的製作方法

2023-12-05 16:21:06

專利名稱：：一種水飛薊賓和苦參素或苦參鹼的復鹽及其應用的製作方法
技術領域：
：本發明涉及藥物領域，具體涉及一種水飛薊賓和苦參素和/或苦參鹼形成的復鹽，以及該復鹽用於治療肝臟疾病的用途，特別是用於治療肝炎、肝損傷和肝癌等疾病的用途。
背景技術：
：肝臟疾病在我國是一種多發病和常見病。其病因和發病機理極為複雜，目前尚沒有對其有著確切有效的防治藥物。臨床多採用中醫辨證論治，並加用一些輔助藥物以提高療效，但許多病人的預後很差，給社會和家庭帶來不良影響。苦參鹼(Matrine，Mat.)是從豆科植物苦參(SophoraflavescensAit.)，苦豆子(S,alopecuroidesL)，廣豆根(S.subprostrataChunetT.Chen)等中分離出來的生物鹼，是白金雀兒鹼(lupanine)的異構體，屬於四環的喹諾裡西啶類(quinolizidine)。多年來對其大量的藥理和臨床研究發現，其具有抗肝纖維化、抗心律失常、免疫抑制、抗炎、抗高血壓血管重構、抗腫瘤等多種藥理作用。苦參素又名氧化苦參鹼，其藥理療效與苦參鹼相當，有一定的抗肝炎病毒和保肝作用，臨床上已用於治療慢性肝炎。但氧化苦參鹼或苦參鹼的臨床療效不確切，並且有報導苦參素治療後症狀及肝功能損害加重，出現黃疸，停藥後肝功能逐步恢復，認為與苦參素和苦參鹼有關；還有頭暈、便秘、噁心、過敏等不良反應報導。肝病發病率高,尤其是病毒性肝炎及肝硬變，迄今為止尚無一種十分理想的藥物。水飛薊賓具有保肝作用，臨床已用於治療慢性肝炎，口服水飛薊賓生物利用度較低，療程長，但由於水飛薊賓水溶性差，製備注射製劑時得加入助溶劑或將其製備成水溶性鹽，如CN1762344中將其製備成葡甲胺鹽或胺基酸鹽以增加水飛薊賓的水溶性；也可以直接通過調PH值以增加溶解度，但副作用較大；其靜脈注射給藥並沒有國內產品上市。對於水飛薊賓的複方用藥也有報導，如CN1969924A公開了一種水飛薊賓和板藍根的複方藥物，其具有協同作用；CN1875963公開了水飛薊賓與聯苯雙酯聯用治療肝臟疾病；CN1981833A公開了水飛薊賓和梔子、茵陳聯用以治療肝臟疾病；CN1907383A公開了水飛薊賓與數十味中藥材的聯合用藥技術。
發明內容本發明的目的在於克服現有單一化合物的水飛薊賓和苦參素、苦參鹼在臨床療效及治療範圍的不足，提供一種肝病治療療效優於水飛薊賓、苦參素、苦參鹼中任意單一化合物的水飛薊賓和苦參素/苦參鹼的復鹽。本發明的水飛薊賓和苦參素/苦參鹼的復鹽具有以下結構式P其中p^5;m或『05且m和n不同時等於O。p、m、n表示摩爾數，即表示復鹽中各分子的摩爾比。優選p二l;m=l~4;n=0。還優選p二l;m=0;n=l~4。本發明中水飛薊賓可以單獨與苦參素形成復鹽，或單獨與苦參鹼形成復鹽。水飛薊賓也可以同時和苦參素和苦參鹼形成復鹽，即m、n都大於O。本發明的復鹽可以用下列方法製備將水飛薊賓、苦參素和/或苦參鹼溶於有機溶劑中，加熱攪拌溶解，水浴回流，減壓濃縮，冰箱靜置，逐漸有白色固體結晶析出，過濾，洗滌，真空乾燥即得。發明人在研究中發現，水飛薊賓和苦參素/苦參鹼的復鹽在水中的溶解度和生物利用度大於水飛薊賓在水中的溶解度和生物利用度，這一發現極大有利於將水不溶的水飛薊賓製備成注射製劑，更為驚喜的是水飛薊賓和苦參素或苦參鹼形成的復鹽使藥效顯著增強，發明人對比該復鹽與水飛薊賓和苦參素或苦參鹼的藥效試驗學顯示，該復鹽作用均優於單獨使用水飛薊賓和苦參素或苦參鹼，這種增強作用在多個動物模型上均得到證實，在此基礎上形成了本發明。本發明的另一目的在於提供一種藥物組合物，含有有效劑量的作為有效成分的本發明所述的水飛薊賓和苦參素或苦參鹼複合鹽，以及藥學上可接受的載體。換言之，本發明提供一種含有作為活性組分的上述結構的水飛薊賓和苦參素和/或苦參鹼複合鹽，以及藥學上可接受的載體，包括賦形劑、稀釋劑等藥物輔助劑。所述藥物組合物是通過上述水飛薊賓和苦參素或苦參鹼複合鹽和藥學上可接受的藥物輔助劑混合後，按照本領域技術人員公知的製劑的常規製備方法製備得到的各種劑型。上述藥劑學上常用的各種劑型可以是片劑、膠囊、顆粒劑、栓劑等，或口服液或無菌胃腸外溶液或懸液等液體製劑形式。本發明復鹽也可以是大或小容量注射劑、凍乾粉針、無菌粉分裝等製劑形式。另外，還可按照常規方法將藥物組合物中的單味活性製劑或藥物組合物製成緩控釋製劑，如緩釋片、微丸或控釋片、微丸。根據不同的給藥方法及藥物劑型，製劑中可以含有0.1%~99%重量的活性物質，優選10~65%重量的活性物質。藥理藥效學試驗證明，本發明的水飛薊賓和苦參素或苦參鹼復鹽具有治療肝臟疾病的功用，所述的肝臟疾病優選肝炎、肝損傷、B型肝炎、肝癌等疾病。下面是本發明的水飛薊賓和苦參素或苦參鹼復鹽的部分藥效學試驗及結果-試驗一刀豆蛋白A(Con-A)所致的免疫性小鼠肝損傷模型雄性昆明小鼠U822克)隨機分為正常對照組、模型對照組及受試藥物組，每組12隻。除正常對照組外，模型對照組及受試藥物組分別於首日下午、次日上午、次日下午各腹腔注射(0)相應的生理鹽水或受試藥一次，於末次給藥後一小時，靜脈注射相應濃度為20mg/kg的Con-A20ml/kg。受試藥物組分為單一成分給藥組，以及復鹽(按實施例1製得)給藥組，其結果情況可見於表l。動物禁食過夜16小時後，斷頭處死動物，取血分離血清，按試劑盒說明測定血清中谷丙轉氨酶(ALT)、谷丙轉氨酶(AST)活性。通過與ConA模型組比較，可見，水飛薊賓與苦參素的復鹽(腹腔注射4次)對ConA引起的小鼠肝損傷的保護作用明顯優於單用水飛薊賓或苦參素任一化合物。表1水飛薊賓苦參素復鹽對ConA引起的小鼠肝損傷的保護作用組別劑量(mg/kg)ALT(UL土SD)正常(對照組)025.5±4.9ConA(模型組)28291.7±82.6*復鹽70mg117.9±66.2苦70124.8±89.1**水70168.7±65.2**備註*表示？<0.05，**表示？<0.01。"水"表示水飛薊賓，"苦"表示苦參素。試驗二、撲熱息痛(PHAA)引起的小鼠肝損傷模型雄性昆明小鼠(18~22克)隨機分為正常對照組、模型對照組及受試藥物組，每組12隻。除正常對照組外，模型對照組及受試藥物組分別於首日下午、次日上午、次日下午各腹腔注射(^)相應的生理鹽水或受試藥一次，於末次給藥後一小時，腹腔注射相應濃度為185mg/kg的撲熱息痛20mg/kg。動物禁食過夜，16小時後斷頭處死動物，取血分離血清，按試劑盒說明測定血清中谷丙轉氨酶(ALT)、谷丙轉氨酶(AST)活性。通過與撲熱息痛模型組比較，由表2可見，水飛薊賓苦參鹼復鹽組(按實施例2製得)對撲熱息痛(PHAA)引起的小鼠肝損傷的保護作用顯著優於單一使用組。表2水飛薊賓苦參鹼復鹽對PHAA引起的小鼠肝損傷的保護作用tableseeoriginaldocumentpage6備註*表示？<0.05，w表示pO.Ol。"水"表示水飛薊賓，"苦"表示苦參鹼。試驗三、水飛薊賓苦參素復鹽對小鼠急性毒性作用的比較昆明小鼠隨機分為正常對照組及受試藥物組，每組10隻，雌雄各半。除正常對照組外，受試藥物組分別腹腔注射大劑量水飛薊賓、苦參素及復鹽組l(按實施例1製得)、復鹽組2(按實施例5製得)一次，連續觀察7天，記錄動物的死亡時間和死亡數。結果顯示，苦參素或苦參鹼的劑量為800mg/kg時具有較大的毒性，10隻小鼠中有6-7隻死亡，水飛薊賓的劑量為800mg/kg組中10隻小鼠中有3隻死亡，而水飛薊賓:苦參素/苦參鹼復鹽劑量800mg/kg時無動物死亡或死亡較少，顯示其毒性小於水飛薊賓和苦參素或苦參鹼給藥組。可見，水飛薊賓苦參素/苦參鹼複合鹽既有明顯的保肝效果，且其毒性很低，該復鹽製劑對肝炎或其相關疾病具有較好的治療優勢。表3水飛薊賓、苦參素復鹽(ipl次)對小鼠的急性毒性作用比較tableseeoriginaldocumentpage6備註"水"表示水飛薊賓。試驗四、水飛薊賓苦參素復鹽對D-半乳糖胺+脂多糖(LPs)引起小鼠肝損傷的保護作用每組實驗小鼠12隻。與模型對照組比較，水飛薊賓苦參鹼為復鹽(按實施例2製得，i.p3次/2天)對D-半乳糖胺+脂多糖引起的小鼠肝損傷具有明顯的保護作用，且組合物在其合用劑量為10mg/kg、25mg/kg時能明顯降低ALT和AST的活性，而同比劑量的水飛薊賓或苦參鹼基本上無效。可見，複合鹽對肝損傷的保護作用明顯優於單一活性劑的保肝作用。表4水飛薊賓、苦參鹼復鹽對D-半乳糖胺+脂多糖(LPs)引起小鼠肝損傷的保護作用tableseeoriginaldocumentpage7備註承表示pO.05,"表示pO.01。試驗五水飛薊賓苦參素復鹽抗自由基活性用化學發光法測定苦參素、水飛薊賓和復鹽(按實施例1製得)體外抗超氧陰離子02—、羥基自由基、烷氧基自由基的作用。苦參素和水飛薊賓能抑制H2-02-luminol產生的化學發光。來判定組合物對烷氧基自由基的作用。這個結果表明水飛薊賓苦參素復鹽對烷氧基自由基有非常強的清除作用。表5水飛薊賓苦參素組合物的抗自由基活性tableseeoriginaldocumentpage7備註承表示p〈0.05,^表示p〈0.01。具體實施方式實施例1水飛薊賓和苦參素復鹽製備方法在100ml反應瓶中，加入甲醇40ml，加入苦參素和水飛薊賓3克(摩爾比1:1)，加熱攪拌溶解，水浴回流3小時，並用水衝泵減壓(20mraHg)濃縮至體積20ml，0'C靜置24小時，逐漸有白色固體結晶析出，過濾，洗滌，5CTC真空乾燥，得白色結晶2.75g，收率為91.7X。實施例2水飛薊賓和苦參鹼復鹽製備方法在100ml反應瓶中，加入丙酮50ml，加入苦參素和水飛薊賓3克(摩爾比1:2)，加熱攪拌溶解，水浴回流3小時，並用水衝泵減壓(20mmHg)濃縮至體積30ml，室溫靜置24小時，逐漸有白色固體結晶析出，過濾，洗滌，5(TC真空千燥，得白色結晶2.4g，收率為80.0X。實施例3水飛薊賓和苦參鹼復鹽製備方法在100ml反應瓶中，加入甲醇50ml，加入苦參素和水飛薊賓3克(摩爾比1:5)，加熱攪拌溶解，水浴回流3小時，並用水衝泵減壓(20mrnHg)濃縮，逐漸有白色固體結晶析出，至幹，5(TC真空乾燥，即得。實施例4水飛薊賓和苦參素復鹽製備方法在100ml反應瓶中，加入甲醇40ml，加入苦參素和水飛薊賓3克(摩爾比5:1)，加熱攪拌溶解，水浴回流3小時，並用水衝泵減壓(20mmHg)濃縮至體積20ml，(TC靜置24小時，逐漸有白色固體結晶析出，過濾，洗滌，5(TC真空乾燥，得白色結晶2.lg，收率為70.0X。實施例5水飛薊賓和苦參素、苦參鹼復鹽製備方法在100ml反應瓶中，加入甲醇40ml，加入苦參素、苦參鹼和水飛薊賓3克(摩爾比1:1:2)，加熱攪拌溶解，水浴回流3小時，並用水衝泵減壓(20mmHg)濃縮至體積20ml，室溫靜置24小時，逐漸有白色固體結晶析出，過濾，洗滌，5(TC真空乾燥，得白色結晶2.28g，收率為76.0%。實施例6苦參素水飛薊賓復鹽(按實施例l)微晶纖維素乳糖硬脂酸鎂100mg6.0mg適量適量每片130.6mg按上述原料、輔料混合均勻後，按照常規溼法制粒，千燥，壓片。實施例7苦參鹼水飛薊賓復鹽(按實施例2)50mgNaCl0.9g注射用水每支100ml取氯化鈉，用注射用水攪拌溶解，然後分別加入復鹽，繼續攪拌使完全溶解，添加注射用水至總量，濾過至澄明，灌封，滅菌，即得。實施例8復鹽(按實施例3)微晶纖維素澱粉100mg5.0mg滑石粉適量每片140mg按上述原料、輔料混合均勻後，按照常規溼法制粒，乾燥，整粒，灌膠囊。實施例9復鹽(按實施例4)50mg吐溫-80O.lg醋酸納緩衝液適量注射用水適量每支10ml用注射用水加吐溫-80，後加復鹽攪拌溶解，繼續攪拌使完全溶解，用醋酸-醋酸納緩衝液跳PH為6.5-7.0，添加注射用水至總量，濾過至澄明，灌封，滅菌，即得。權利要求1、一種如下式由水飛薊賓與苦參素和/或苦參鹼形成的復鹽其中p＝1～5；m或n＝0～5，並且m和n不同時＝0。2、權利要求l的復鹽，其中p-l，m=l~4，n=0。3、權利要求l的復鹽，其中p-l，m=0，n=l~4。4、一種治療肝臟疾病的藥物組合物，其中含有權利要求1的復鹽及藥學上可接受的載體。5、權利要求1的復鹽用於製備治療肝臟疾病的藥物的用途。6、權利要求5的用途，其中肝臟疾病是肝炎或肝損傷。7、權利要求5的用途，其中肝炎是B肝或酒精肝。全文摘要本發明涉及藥物領域，具體涉及一種水飛薊賓和苦參素和/或苦參鹼形成的復鹽(I)，以及該復鹽用於治療肝臟疾病的用途，特別是用於治療肝炎、肝損傷和肝癌等疾病的用途。文檔編號C07D407/00GK101157689SQ200710135219公開日2008年4月9日申請日期2007年11月14日優先權日2007年11月14日發明者崔秋菊申請人:南京克溫生物科技有限公司