油脂中磷脂的測定方法
2023-12-05 20:21:06
專利名稱：油脂中磷脂的測定方法
技術領域：
本發明涉及一種油脂中磷脂的測定方法。
背景技術：
油脂精煉過程中，毛油中的磷脂會引起油品起泡、回色和氧化穩定性，影響油脂風味，而富含磷脂的毛油油腳又是生產磷脂保健品的主要原料。生物柴油生產過程中高磷脂原料油會導致脂肪酶嚴重失活。脂質體中的磷脂含量則是衡量其穩定性的重要指標。所以油脂產品生產中，磷含量是一項很重要的檢測指標。目前，磷脂的檢測方法有比色法，濁度法，重量法，TLC，HPLC，IR, NMR等。濁度法和重量法囿於較低的檢測精度而應用有限；TLC法受人為操作影響較大，重複性不好，而使用面積掃描儀其儀器又比較昂貴；HPLC、IR、NMR的檢測成本均較高，而且需要紮實的專業知識，非一般的檢測人員所能做到。GB5537-2008採用鉬藍比色法檢測磷脂，具體方法如下油脂樣品加氧化鋅炭化、 灰化，試樣中的有機磷轉化為難溶的磷酸鋅，加鹽酸溶解而得磷酸根，通過酸鹼調節控制體系呈酸性，再加入鉬酸鹽生成磷鉬酸鹽，磷鉬酸鹽被還原而產生鉬藍，其顏色深淺與油脂中磷脂含量成正相關，由此可進行比色定量。該法具有準確、靈敏度高等優點，但存在如下缺點(1)電爐加熱炭化耗時長(精製油需6-8小時，脫膠油需4-5小時)，且炭化過程不易控制；(2)所加ZnO轉成難溶的磷酸鋅，後續操作繁瑣，且灰化溫度受限制。因此尋找一種準確、快速測定油相體系中的磷脂含量的方法有重要的現實意義。陳勇(中國油脂， 2009，34(5) :69-70)在對GB5537-2008進行改進時用風扇使樣品不著火，這樣可以使炭化時間縮短2-3小時，但此法依然費時，且沒有解決灰化生成的磷酸鋅難溶於水需加酸煮沸溶解的問題。
發明內容
本發明的目的是提供一種既快速、安全、準確，又簡易、重現性好的油脂中磷脂的檢測方法。本發明依據的原理是利用濃硫酸能夠將有機物炭化的性質，迅速完成油脂炭化， 但單純使用濃硫酸有時不能將油脂炭化完全，還需電爐加熱完成炭化；利用鹼金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽可與灰分中的磷酸根生成可溶性磷酸鹽，不但可以提高炭化質量， 而且可以減少後續操作步驟；酸性條件下磷酸鹽與鉬酸鈉可通過還原劑在沸水溫度下生成藍色絡合物，藍色程度與磷酸根含量成正比，然後就可由標準曲線計算磷含量。本發明實現過程如下
一種油脂中磷脂的測定方法，包括油脂的炭化、灰化、溶解及磷的鉬藍比色法測定等步驟，其中油脂炭化先加入濃硫酸，濃硫酸加入量至少是油脂質量的10% ；再加入過量的鹼金屬的氫氧化物或碳酸鹽或碳酸氫鹽以確保與濃硫酸反應完全。所述油脂為植物油或動物油，如大豆油、桐油、菜籽油、棕櫚油、橄欖油、豬油、牛油寸。所述的濃硫酸為硫酸質量百分含量為95% 98%的濃硫酸。所述的鹼金屬的氫氧化物為Li0H、Na0H、K0H，最好為Κ0Η。使用氫氧化鉀灰化後得到的灰分蓬鬆，更易溶解於水。鹼金屬磷酸鹽的熱分解溫度高，可顯著提高灰化溫度，縮短灰化時間；鹼金屬磷酸鹽可直接用水溶解，勿需用酸溶解及後續的反覆PH調節。本發明灰化溫度550°C 1000°C，最佳灰化溫度650°C 800°C，一般灰化時間約 1. 5小時，通常灰化溫度越高，灰化時間越短。灰化所得灰分直接用水溶解。具體的說，油脂中磷脂的測定方法包括如下步驟
(1)磷酸鹽標準儲備液的製備稱取乾燥24h的磷酸二氫鉀0.4387 g，用水溶解並稀釋定容到IOOOmL ；
C )硫酸聯氨溶液的製備將0.15 g硫酸聯氨溶解在IL水中，得到0.015%的硫酸聯氨溶液；
G )鉬酸鈉稀硫酸溶液的製備量取140mL濃硫酸注入300mL水中，冷卻到室溫，加入 12.5 g鉬酸鈉，溶解後用水定容至500mL，充分搖勻，靜置24h備用；
(4)鹽酸溶液的製備將37%的濃鹽酸溶解於等體積的水中；
(5)標準曲線的繪製向6支比色管中分別加入磷酸鹽標準溶液0、1、2、4、6、8mL，加水補齊至IOmL ；再加入硫酸聯氨溶液8mL，鉬酸鈉溶液2mL ；比色管加塞，搖勻，去塞後沸水浴lOmin，冷卻至室溫後，加水稀釋至50ml，搖勻後靜置IOmin ；650nm測定吸光度，繪製標準曲線；
(6)試液的製備取3 IOg油脂於坩堝中，加入0.5 5mL 95% 98%的濃硫酸，再加入1. 5 9. Og固體氫氧化鉀；電爐上加熱炭化5 15min，炭化完成時油脂呈固態 』放入 700°C馬弗爐中灰化1. 5h ；取出冷卻至室溫，用30 60mL熱水溶解灰分，濾液轉移至100 mL容量瓶中，滴加1:1的鹽酸，調節pH值至3左右，定容至IOOmL;
(7)比色移取10mL上述試液至50 mL比色管中，加入硫酸聯氨溶液8mL，鉬酸鈉溶液2mL ；加塞，搖勻，去塞後沸水浴IOmin ；冷卻至室溫後，加水稀釋至50ml，搖勻後靜置 IOmin ；650nm測定吸光度；將樣品吸光度代入標準曲線，求出被測油脂中的磷含量；
(8)試樣中磷脂含量按下式計算
權利要求
1.油脂中磷脂的測定方法，包括油脂的炭化、灰化、溶解及磷的鉬藍比色法測定等步驟，其特徵在於油脂的炭化採取加入濃硫酸，以及鹼金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽。
2.根據權利要求1所述的油脂中磷脂的測定方法，其特徵在於濃硫酸加入量至少是油脂質量的10%。
3.根據權利要求2所述的油脂中磷脂的測定方法，其特徵在於加入過量的鹼金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽以確保與濃硫酸反應完全。
4.根據權利要求3所述的油脂中磷脂的測定方法，其特徵在於油脂的炭化加入的鹼金屬氫氧化物為LiOH、NaOH或Κ0Η。
5.根據權利要求4所述的油脂中磷脂的測定方法，其特徵在於油脂的炭化加入的鹼金屬氫氧化物為氫氧化鉀。
6.根據權利要求1所述的油脂中磷脂的測定方法，其特徵在於所述的濃硫酸為硫酸質量百分含量為95% 98%的濃硫酸。
7.根據權利要求1至6任意之一所述的油脂中磷脂的測定方法，其特徵在於灰化溫度為 550°C 1000"C。
8.根據權利要求7所述的油脂中磷脂的測定方法，其特徵在於灰化溫度為650°C 800 "C。
9.根據權利要求8所述的油脂中磷脂的測定方法，其特徵在於灰化所得灰分直接用水溶解。
10.根據權利要求1所述的油脂中磷脂的測定方法，其特徵在於包括如下步驟(I)磷酸鹽標準儲備液的製備稱取乾燥Mh的磷酸二氫鉀0. 4387 g，用水溶解並稀釋定容到IOOOmL ；Cl)硫酸聯氨溶液的製備將0.15 g硫酸聯氨溶解在IL水中，得到0.015%的硫酸聯氨茗液；C )鉬酸鈉稀硫酸溶液的製備量取140mL濃硫酸注入300mL水中，冷卻到室溫，加入 12.5 g鉬酸鈉，溶解後用水定容至500mL，充分搖勻，靜置24h備用；(4)鹽酸溶液的製備將37%的濃鹽酸溶解於等體積的水中；(5)標準曲線的繪製向6支比色管中分別加入磷酸鹽標準溶液0、1、2、4、6、8mL，加水補齊至IOmL ；再加入硫酸聯氨溶液8mL，鉬酸鈉溶液2mL ；比色管加塞，搖勻，去塞後沸水浴lOmin，冷卻至室溫後，加水稀釋至50ml，搖勻後靜置IOmin ；650nm測定吸光度，繪製標準曲線；(6)試液的製備取3 IOg油脂於坩堝中，加入0.5 5mL 95% 98%的濃硫酸，再加入1. 5 9. Og固體氫氧化鉀；電爐上加熱炭化5 15min，炭化完成時油脂呈固態 』放入 700°C馬弗爐中灰化1 池；取出冷卻至室溫，用30 60mL熱水溶解灰分，濾液轉移至100 mL容量瓶中，滴加1 1的鹽酸，調節pH值至3左右，定容至IOOmL ；(7)比色移取10mL上述試液至50 mL比色管中，加入硫酸聯氨溶液8mL，鉬酸鈉溶液2mL ；加塞，搖勻，去塞後沸水浴IOmin ；冷卻至室溫後，加水稀釋至50ml，搖勻後靜置 IOmin ；650nm測定吸光度；將樣品吸光度代入標準曲線，求出被測油脂中的磷含量；(8)試樣中磷脂含量按下式計算式中X—磷脂含量，單位為mg/gP—標準曲線查得的被測液的含磷量，單位為mgm—試樣質量，單位為gV1—樣品灰化後稀釋的體積，單位為mLV2—比色時所取的被測液的體積，單位為mL31一每毫克磷相當於磷脂的毫克。
全文摘要
本發明公開了一種油脂中磷脂的測定方法，包括油脂的炭化、灰化、溶解及磷的鉬藍比色法測定等步驟，其中油脂的炭化採取加入濃硫酸，以及鹼金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽。本發明用濃硫酸預炭化，然後加鹼反應，可在15分鐘內完成不同量的各類油脂的炭化，防止直接電爐加熱炭化過程中產生的飛濺、燃燒，縮短炭化時間；用鹼金屬的氫氧化物或碳酸鹽或碳酸氫鹽代替ZnO，生成熱分解溫度更高的可溶性磷酸鹽，縮短灰化時間，灰化產物可直接溶解過濾，使後續操作更為簡易安全。
文檔編號G01N21/78GK102175672SQ20111000131
公開日2011年9月7日 申請日期2011年1月6日 優先權日2011年1月6日
發明者李蓉, 趙萬裡, 陳斌, 馬曉迅 申請人:西北大學