一種治療痛經的藥物組合物及製備方法和檢測方法

2023-12-05 20:29:51 6

專利名稱：一種治療痛經的藥物組合物及製備方法和檢測方法
一種治療痛經的藥物組合物及製備方法和檢測方法
技術領域：
本發明為分案申請，原案申請號為200710064062. 9，原案申請日為2007年2月沈日，原案名稱為一種治療痛經的藥物組合物及製備方法和質量控制方法。發明領域
本發明涉及一種藥物組合物及製備方法和質量控制方法，特別涉及一種治療痛經 的藥物組合物及製備方法和質量控制方法。
背景技術：
痛經是指婦女在經期及其前後，出現小腹或腰部疼痛，甚至痛及腰骶。每隨月經 周期而發，嚴重者可伴噁心嘔吐、冷汗淋漓、手足厥冷，甚至昏厥，給工作及生活帶來嚴重影 響。目前臨床常將其分為原發性和繼發性兩種，原發性痛經多指生殖器官無明顯病變者，故 又稱功能性痛經，多見於青春期少女、未婚及已婚未育者。原因多為精神緊張、感覺過敏；體 質較弱也易產生痛經，提高體質後能緩解症狀；由於子宮位置不良、盲目細小造成經血儲留 也是痛經的常見原因，此種痛經在正常分娩後疼痛多可緩解或消失。繼發性痛經則多因生 殖器官有器質性病變所致，其中子宮內膜異位症最為多見。本病屬婦科臨床的常見病，據有 關調查表明，痛經的發病率為33. 19%。
目前，目前治療痛經多採用止痛等西藥治療，長期每月服藥，不僅易使機體產生抗 藥性及成癮性，而且還會使肝、腎、胃等器官產生病變，副作用十分明顯。發明內容
本發明目的在於提供一種藥物組合物；本發明另一目的在於提供一種治療痛經的 藥物組合物；本發明的第三個目的在於提供該藥物組合物的製備方法；本發明的第四個目 的在於提供該藥物組合物的質量控制方法。
本發明的第四個目的在於提供該藥物組合物的質量控制方法。
本發明目的是通過如下技術方案實現
本發明藥物組合物的原料藥組成為丹參600-900重量份、赤芍400-600重量份、 香附(醋制)400-600重量份、玫瑰花400-600重量份、蒲黃200-400重量份、延胡索(醋 制)400-600重量份、五靈脂(制)200-400重量份、桂枝200-400重量份、桃仁200-400重 量份、木香400-800重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成還可以為丹參600-900重量份、赤芍400-600重 量份、香附(醋制)400-600重量份、玫瑰花400-600重量份、蒲黃200-400重量份、延胡索 (醋制)400-600重量份、五靈脂(制)200-400重量份、桂枝200-400重量份、紅花200-400 重量份、烏藥400-800重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為丹參601-730重量份、赤芍520-599重 量份、香附(醋制)401-480重量份、玫瑰花520-599重量份、蒲黃201-280重量份、延胡索 (醋制)520-599重量份、五靈脂(制)201-280重量份、桂枝320-399重量份、紅花20H80重量份、烏藥620-799重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為丹參670重量份、赤芍560重量份、香附 (醋制)440重量份、玫瑰花560重量份、蒲黃240重量份、延胡索(醋制)560重量份、五靈 脂(制)240重量份、桂枝360重量份、紅花240重量份、烏藥660重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為丹參720重量份、赤芍530重量份、香附 (醋制)470重量份、玫瑰花530重量份、蒲黃270重量份、延胡索(醋制)530重量份、五靈 脂(制)270重量份、桂枝330重量份、紅花270重量份、烏藥630重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為丹參780-899重量份、赤芍401-480重 量份、香附(醋制)520-599重量份、玫瑰花401-480重量份、蒲黃320-399重量份、延胡索 (醋制)401-480重量份、五靈脂(制)320-399重量份、桂枝201-280重量份、紅花320-399 重量份、烏藥401-580重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為丹參840重量份、赤芍440重量份、香附 (醋制)560重量份、玫瑰花440重量份、蒲黃360重量份、延胡索(醋制)460重量份、五靈 脂(制)360重量份、桂枝240重量份、紅花360重量份、烏藥490重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為丹參790重量份、赤芍470重量份、香附 (醋制)530重量份、玫瑰花470重量份、蒲黃330重量份、延胡索(醋制)470重量份、五靈 脂(制)330重量份、桂枝270重量份、紅花330重量份、烏藥570重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為丹參740-760重量份、赤芍490-510重 量份、香附(醋制)490-510重量份、玫瑰花490-510重量份、蒲黃290-310重量份、延胡索 (醋制)490-510重量份、五靈脂(制)290-310重量份、桂枝290-310重量份、紅花290-310 重量份、烏藥590-610重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選為丹參750重量份、赤芍500重量份、香附 (醋制)500重量份、玫瑰花500重量份、蒲黃300重量份、延胡索(醋制)500重量份、五靈 脂(制)300重量份、桂枝300重量份、紅花300重量份、烏藥600重量份。
取上述組合物原料藥，加入常規輔料，按照常規工藝，製成臨床接受的劑型，包括 但不限於濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體製劑或凍幹 粉針劑。
本發明藥物組合物製備方法為以上十味，加水煎煮1-3次，每次加4-10倍量水煎 煮1-3小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至80-85°C相對密度1. 05-1. 13，加入乙醇使含醇量 為40% -60%，攪勻，靜置，取上清液收乙醇，濃縮至80-85°C相對密度1. 15-1. 2的清膏；加 入常規輔料，經常規方法，製成臨床接受的製劑。
本發明藥物組合物製備方法優選為以上十味，加水煎煮2次，第一次加8倍量水 煎煮2小時，第二次加6倍量水煎煮1. 5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至80-85°C相對密 度1.08-1. 10，加入乙醇使含醇量為50%，攪勻，靜置，取上清液收乙醇，濃縮至80-85°C相 對密度1. 16-1. 18的清膏；加入適量蔗糖及糊精，經常規方法，製成臨床接受的口服固體制 劑。
本發明藥物組合物質量控制方法包括如下鑑別方法和/或含量測定中的一種或 幾種
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；10-20 75-95比例的乙腈一水為流動相；檢測波長為230nm，理論塔板數按芍藥苷峰計算 應不低於2600 ； 對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品Ι-lOmg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解 並稀釋至刻度，搖勻，用0. 45 μ m微孔濾膜濾過，即得，每Iml中含芍藥苷50ug ；供試品溶液的製備取本發明藥物組合物製劑裝量差異下顆粒適量，研細，精密 稱取約0. 3g，置具塞錐型瓶中，精密加入60 %甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率 40KHZ的超聲處理30分鐘，取出，放冷，密塞，再稱定重量，用60 %甲醇補足減失的重量，搖 勻，上清液用0. 45um微孔濾膜濾過，即得；測定方法分別精密吸取對照品液與供試品液各10 μ 1注入液相色譜儀，測定，即 得；相當於生藥含量0. 5-1. 5%的本發明藥物組合物製劑含赤芍以芍藥苷C23H28O11計， 不得少於8. Omg ；鑑別方法Α、取相當於生藥含量1-10%。的製劑內容物，加0. 醋酸的60-80%乙 醇溶液20ml，置水浴上加熱4-6分鐘，濾過，濾液揮散乙醇後，加稀鹽酸1ml，攪拌，加水6ml 使溶解，濾過，濾液滴加碘化鉍鉀試液，即發生紅棕色沉澱；B、取相當於生藥含量1-10%。的製劑內容物，加水10ml，加0. 5-2. 5倍量的乙醇，攪 拌，靜置，濾過，濾液置水浴上加熱揮盡乙醇，放冷，濾過，取濾液Iml加草酸試液2 3滴， 產生黃棕色沉澱；C、取相當於生藥含量1_10%。的製劑內容物，研細，加水40_60ml溶解，濾過， 濾液用水飽和的乙酸乙酯萃取兩次，每次10-20ml，合併萃取液，揮幹，殘渣加乙酸乙酯 0. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml含Img 的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2 μ 1、對照品溶液1 μ 1，分 別點於同一矽膠G薄層板上，以6-10 3-7 0.6-1.0比例的苯-乙酸乙酯-甲酸溶液為 展開劑，展開，取出，晾乾，噴以0.5-1.5 0.5-1.5比例的2%三氯化鐵-1%鐵氰化鉀溶 液，熱風吹至斑點清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的藍色 斑點；D、取相當於生藥含量5%。的製劑內容物，加乙醇10_30ml，回流提取20_40分鐘， 放冷，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇0. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲黃對照藥 材2g，同法製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2 μ 1、對照品藥材溶液 1 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以1-5 1-5 0.5-1.5比例的甲苯-甲酸乙酯-甲 酸溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，365nm紫外燈下觀察；供試 品色譜中，在與對照品藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點； E、取相當於生藥含量2 %的製劑內容物，加70-90 %乙醇40_60ml，回流提取20_40 分鐘，放冷，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加氨試液使成鹼性，加乙醚提取二次， 每次20ml，合併乙醚提取液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙 素對照品，加乙醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供 試品溶液5μ 1、對照品溶液2μ 1，分別點於同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板 上，以4-8 2-6 0. 1-0.3比例的正己燒一醋酸乙酯一濃氨溶液為展開劑，展開，取出，晾 幹，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，顯相同顏色的
F、取相當於生藥含量的製劑內容物，加乙醇30_50ml，浸泡0. 5-1. 5小時，時 時振搖，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇l_3ml使溶解，置於已處理好的200目，2g，內徑10 15mm的氧化鋁柱上，以甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供 試品溶液；另取芍藥苷對照品，加甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層 色譜法試驗，吸取上述二種溶液各4μ1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠 G薄層板上，以20-60 3-7 5-15 0. 1-0. 3比例的氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展 開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中， 在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
本發明藥物組合物質量控制方法優選如下鑑別方法和/或含量測定中的一種或 幾種
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑； 15 85比例的乙腈一水為流動相；檢測波長為230nm，理論塔板數按芍藥苷峰計算應不低 於 2600 ；
對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品5mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解並 稀釋至刻度，搖勻，用0. 45 μ m微孔濾膜濾過，即得，每Iml中含芍藥苷50ug ；
供試品溶液的製備取本發明藥物組合物製劑裝量差異下顆粒適量，研細，精密 稱取約0. 3g，置具塞錐型瓶中，精密加入60 %甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率 40KHZ的超聲處理30分鐘，取出，放冷，密塞，再稱定重量，用60 %甲醇補足減失的重量，搖 勻，上清液用0. 45um微孔濾膜濾過，即得；
測定方法分別精密吸取對照品液與供試品液各10 μ 1注入液相色譜儀，測定，即 得；
相當於生藥含量1 %的本發明藥物組合物製劑含赤芍以芍藥苷C23H28O11計，不得少 於 8. Omg ；
鑑別方法Α、取相當於生藥含量5%。的製劑內容物，加0. 醋酸的70%乙醇溶液 20ml，置水浴上加熱5分鐘，濾過，濾液揮散乙醇後，加稀鹽酸1ml，攪拌，加水6ml使溶解，濾 過，濾液滴加碘化鉍鉀試液，即發生紅棕色沉澱；
B、取相當於生藥含量5%。的製劑內容物，加水10ml，加1. 5倍量的乙醇，攪拌，靜 置，濾過，濾液置水浴上加熱揮盡乙醇，放冷，濾過，取濾液Iml加草酸試液2 3滴，產生黃 棕色沉澱；
C、取相當於生藥含量5%。的製劑內容物，研細，加水50ml溶解，濾過，濾液用水飽 和的乙酸乙酯萃取兩次，每次15ml，合併萃取液，揮幹，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為供 試品溶液；另取原兒茶醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液； 照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2 μ 1、對照品溶液1 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板 上，以8 5 0.8比例的苯-乙酸乙酯-甲酸溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以1 1 比例的2%三氯化鐵-1%鐵氰化鉀溶液，熱風吹至斑點清晰；供試品色譜中，在與對照品色 譜相應的位置上，顯相同顏色的藍色斑點；
D、取相當於生藥含量5%。的製劑內容物，加乙醇20ml，回流提取30分鐘，放冷，濾 過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇Iml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲黃對照藥材2g，同法製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2 μ 1、對照品藥材溶液1 μ 1，分別點於同 一矽膠G薄層板上，以3 3 1比例的甲苯-甲酸乙酯-甲酸溶液為展開劑，展開，取出， 晾乾，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，365nm紫外燈下觀察；供試品色譜中，在與對照品藥材色 譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；E、取相當於生藥含量2%的製劑內容物，加80%乙醇50ml，回流提取30分鐘， 放冷，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加氨試液使成鹼性，加乙醚提取二次，每次 20ml，合併乙醚提取液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對 照品，加乙醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品 溶液5 μ 1、對照品溶液2 μ 1，分別點於同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以 6:4: 0.2比例的正己燒一醋酸乙酯一濃氨溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫 外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；F、取相當於生藥含量的製劑內容物，加乙醇40ml，浸泡1小時，時時振搖，濾 過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，置於已處理好的200目，2g，內徑10 15mm的氧化 鋁柱上，以甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液 』另 取芍藥苷對照品，加甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸 取上述二種溶液各4μ 1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以 400 5 10 0.2比例的氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴 以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位 置上，顯相同顏色的斑點。本發明藥物組合物丹參活血化瘀止痛為君藥；赤芍清熱涼血、散瘀止痛，香附、玫 瑰花、元胡行氣散瘀止痛，五靈脂、桃仁活血散瘀止痛，共為臣藥；木香辛溫散寒，蒲黃、桂枝 溫經止血，共為佐藥。全方配伍活血化瘀，理氣止痛，治療痛經有著很好的功效，尤其適宜治 療氣滯血瘀所致痛經。本發明藥物組合物經實驗研究證實有顯著的抑制冰醋酸所引起的 扭體反應效果；顯著提高PGF2a類似物所至的子宮痙攣性收縮的拮抗和阻斷作用；使子宮平 滑肌收縮幅度下降，張力下降，頻率降低，其張力可逐漸恢復；對氯前列烯醇及縮宮素所致 子宮平滑肌有明顯抑制作用。本發明組合物相比現有製劑痛經寶顆粒具備很好的藥效，並且本發明所述的範圍 在可以實現本發明藥效的同時，經過篩選，意外的發現，在組合物的某些範圍內，具備更為 突出的藥效。本發明所提供的中藥組合物的質量控制方法，是通過大量具體創造性試驗篩選後 得到，鑑別方法中通過對樣品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得鑑別專屬性很好，而且 方法經濟適用、結果快速，並且對不同的薄層板都能應用。含量測定方法中通過對樣品、供 試品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得含量測定方法可以很有效的對產品進行質量控 制，並且用該方法測定的產品相比其他方法測定的產品在藥效上表現的更為穩定。下述實驗例和實施例用於進一步說明但不限於本發明。藥物組對正常子宮平滑肌收縮影響的藥效學試驗藥物組I (丹參670g、赤芍560g、香附(醋制)440g、玫瑰花560g、蒲黃240g、延胡 索(醋制)560g、五靈脂(制)240g、桂枝360g、紅花240g、烏藥660g)藥物組II (丹參720g、赤芍530g、香附(醋制)470g、玫瑰花530g、蒲黃270g、延胡索(醋制)530g、五靈脂(制)270g、桂枝330g、紅花270g、烏藥630g)
藥物組III (丹參750g、赤芍500g、香附(醋制)500g、玫瑰花500g、蒲黃300g、延胡 索(醋制)500g、五靈脂(制)300g、桂枝300g、桃仁300g、木香600g)
藥物組IV (丹參750g、赤芍500g、香附(醋制)500g、玫瑰花500g、蒲黃300g、延胡 索(醋制)500g、五靈脂(制)300g、桂枝300g、紅花300g、烏藥600g)，
對照組市售的痛經寶顆粒
選健康未孕雌性大鼠60隻，分成6組，實驗前0. aiig/100g皮下注射乙烯雌酚，每 天1次，注射3天後，用乙醚吸入麻醉迅速剖取子宮，剪取子宮2cm，將其置於盛有30ml， 洛氏液的小槽內，連於傳感器上，水浴保持(36士0. 5) 由通氣鉤向槽內通入氧氣，用 MS-302多媒體化生物信號記錄分析系統記錄正常收縮曲線，然後加入不同藥物組藥物，觀 察給藥前後子宮收縮的頻率、幅度和子宮活動力(頻率和幅度的乘積，進行對比，結果見表 1
表1各組藥物對正常子宮平滑肌收縮的影響( ± SD )
權利要求
1.一種治療痛經的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物的原料藥組成為丹參 600-900重量份、赤芍400-600重量份、香附(醋制)400-600重量份、玫瑰花400-600重量 份、蒲黃200-400重量份、延胡索(醋制)400-600重量份、五靈脂(制)200-400重量份、桂 枝200-400重量份、桃仁200-400重量份、木香400-800重量份。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物的原料藥組成為丹參750重量份、赤芍500重量份、香附(醋制)500重量份、玫瑰花500重量份、蒲黃300重量份、延胡索(醋制)500重量份、五靈脂(制)300重量份、桂枝300重量份、桃仁300 重量份、木香600重量份。
3.如權利要求1所述的藥物組合物的製備方法，其特徵在於該方法為以上十味，加 水煎煮1-3次，每次加4-10倍量水煎煮1-3小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至80-85°C相 對密度1.05-1. 13，加入乙醇使含醇量為40% -60%，攪勻，靜置，取上清液收乙醇，濃縮至 80-85°C相對密度1. 15-1. 2的清膏；加入常規輔料，經常規方法，製成臨床接受的製劑。
4.如權利要求3所述的方法，其特徵在於該方法為以上十味，加水煎煮2次，第一 次加8倍量水煎煮2小時，第二次加6倍量水煎煮1. 5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至 80-85°C相對密度1.08-1. 10，加入乙醇使含醇量為50%，攪勻，靜置，取上清液收乙醇，濃 縮至80-85°C相對密度1. 16-1. 18的清膏；加入適量蔗糖及糊精，經常規方法，製成臨床接 受的口服固體製劑。
5.如權利要求1或2所述的藥物組合物的檢測方法，其特徵在於該方法包括如下鑑別方法和/或含量測定中的一種或幾種含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑； 10-20 75-95比例的乙腈一水為流動相；檢測波長為230nm，理論塔板數按芍藥苷峰計算 應不低於2600 ；對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品Ι-lOmg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解並稀 釋至刻度，搖勻，用0. 45 μ m微孔濾膜濾過，即得，每Iml中含芍藥苷50ug ；供試品溶液的製備取本發明藥物組合物製劑裝量差異下顆粒適量，研細，精密稱取約 0. 3g，置具塞錐型瓶中，精密加入60%甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率40KHZ的 超聲處理30分鐘，取出，放冷，密塞，再稱定重量，用60 %甲醇補足減失的重量，搖勻，上清 液用0. 45um微孔濾膜濾過，即得；測定方法分別精密吸取對照品液與供試品液各10 μ 1注入液相色譜儀，測定，即得；相當於生藥含量0. 5-1. 5%的本發明藥物組合物製劑含赤芍以芍藥苷C23H28O1J+，不得 少於8. Omg ；鑑別方法Α、取相當於生藥含量1-10%。的製劑內容物，加0. 醋酸的60-80%乙醇溶 液20ml，置水浴上加熱4-6分鐘，濾過，濾液揮散乙醇後，加稀鹽酸1ml，攪拌，加水6ml使溶 解，濾過，濾液滴加碘化鉍鉀試液，即發生紅棕色沉澱；B、取相當於生藥含量1_10%。的製劑內容物，加水10ml，加0.5-2. 5倍量的乙醇，攪拌， 靜置，濾過，濾液置水浴上加熱揮盡乙醇，放冷，濾過，取濾液Iml加草酸試液2 3滴，產生 黃棕色沉澱；C、取相當於生藥含量1_10%。的製劑內容物，研細，加水40-60ml溶解，濾過，濾液用水 飽和的乙酸乙酯萃取兩次，每次10-20ml，合併萃取液，揮幹，殘渣加乙酸乙酯0. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml含Img的溶液，作為對 照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2 μ 1、對照品溶液1 μ 1，分別點於同一矽膠 G薄層板上，以6-10 3-7 0.6-1.0比例的苯-乙酸乙酯-甲酸溶液為展開劑，展開，取 出，晾乾，噴以0. 5-1. 5 0. 5-1. 5比例的2%三氯化鐵_1 %鐵氰化鉀溶液，熱風吹至斑點 清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的藍色斑點；D、取相當於生藥含量5%。的製劑內容物，加乙醇10-30ml，回流提取20-40分鐘，放冷， 濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇0. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲黃對照藥材2g，同 法製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2 μ 1、對照品藥材溶液1 μ 1，分 別點於同一矽膠G薄層板上，以1-5 1-5 0.5-1.5比例的甲苯-甲酸乙酯-甲酸溶液 為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，365nm紫外燈下觀察；供試品色譜 中，在與對照品藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；E、取相當於生藥含量2%的製劑內容物，加70-90%乙醇40-60ml，回流提取20-40分 鍾，放冷，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加氨試液使成鹼性，加乙醚提取二次，每 次20ml，合併乙醚提取液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素 對照品，加乙醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品 溶液5 μ 1、對照品溶液2 μ 1，分別點於同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以 4-8 2-6 0. 1-0.3比例的正己燒一醋酸乙酯一濃氨溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置 365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；F、取相當於生藥含量1%的製劑內容物，加乙醇30-50ml，浸泡0. 5-1. 5小時，時時振 搖，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇l_3ml使溶解，置於已處理好的200目，2g，內徑10 15mm 的氧化鋁柱上，以甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶 液；另取芍藥苷對照品，加甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法 試驗，吸取上述二種溶液各4 μ 1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層 板上，以20-60 3-7 5-15 0. 1-0. 3比例的氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展開齊IJ， 展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與 對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
6.如權利要求5所述的方法，其特徵在於該方法包括如下鑑別方法和/或含量測定中 的一種或幾種含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；15 85 比例的乙腈一水為流動相；檢測波長為230nm，理論塔板數按芍藥苷峰計算應不低於沈00 ；對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品5mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解並稀釋 至刻度，搖勻，用0. 45 μ m微孔濾膜濾過，即得，每Iml中含芍藥苷50ug ；供試品溶液的製備取本發明藥物組合物製劑裝量差異下顆粒適量，研細，精密稱取約 0. 3g，置具塞錐型瓶中，精密加入60%甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率40KHZ的 超聲處理30分鐘，取出，放冷，密塞，再稱定重量，用60 %甲醇補足減失的重量，搖勻，上清 液用0. 45um微孔濾膜濾過，即得；測定方法分別精密吸取對照品液與供試品液各10 μ 1注入液相色譜儀，測定，即得；相當於生藥含量的本發明藥物組合物製劑含赤芍以芍藥苷C23H28O11計，不得少於 8. Omg ；鑑別方法A、取相當於生藥含量5%。的製劑內容物，加0. 醋酸的70%乙醇溶液 20ml，置水浴上加熱5分鐘，濾過，濾液揮散乙醇後，加稀鹽酸Iml，攪拌，加水6ml使溶解，濾 過，濾液滴加碘化鉍鉀試液，即發生紅棕色沉澱；B、取相當於生藥含量5%。的製劑內容物，加水10ml，加1.5倍量的乙醇，攪拌，靜置，濾 過，濾液置水浴上加熱揮盡乙醇，放冷，濾過，取濾液Iml加草酸試液2 3滴，產生黃棕色 沉澱；C、取相當於生藥含量5%。的製劑內容物，研細，加水50ml溶解，濾過，濾液用水飽和的 乙酸乙酯萃取兩次，每次15ml，合併萃取液，揮幹，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品 溶液；另取原兒茶醛對照品，加乙酸乙酯製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄 層色譜法試驗，吸取供試品溶液2 μ 1、對照品溶液1 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以 8:5: 0.8比例的苯-乙酸乙酯-甲酸溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以1 1比例 的2%三氯化鐵-1%鐵氰化鉀溶液，熱風吹至斑點清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相 應的位置上，顯相同顏色的藍色斑點；D、取相當於生藥含量5%。的製劑內容物，加乙醇20ml，回流提取30分鐘，放冷，濾過， 濾液蒸乾，殘渣加乙醇Iml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲黃對照藥材2g，同法製成對照 藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2 μ 1、對照品藥材溶液1 μ 1，分別點於同一 矽膠G薄層板上，以3 3 1比例的甲苯-甲酸乙酯-甲酸溶液為展開劑，展開，取出，晾 幹，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，365nm紫外燈下觀察；供試品色譜中，在與對照品藥材色譜 相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；E、取相當於生藥含量2%的製劑內容物，加80%乙醇50ml，回流提取30分鐘，放冷， 濾過，濾液蒸乾，殘渣加水IOml使溶解，加氨試液使成鹼性，加乙醚提取二次，每次20ml， 合併乙醚提取液，蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對照 品，加乙醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶 液5μ1、對照品溶液2μ1，分別點於同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以 6:4: 0.2比例的正己燒一醋酸乙酯一濃氨溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫 外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；F、取相當於生藥含量1%的製劑內容物，加乙醇40ml，浸泡1小時，時時振搖，濾過，濾 液蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，置於已處理好的200目，2g，內徑10 15mm的氧化鋁柱 上，以甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取 芍藥苷對照品，加甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸 取上述二種溶液各4μ1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上，以 40 5 10 0.2比例的氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以 5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置 上，顯相同顏色的斑點。
7. 一種治療痛經的藥物組合物的檢測方法，其特徵在於該方法包括如下鑑別方法和含量測定所述藥物組合物的製備方法為丹參750g赤芍500g 香附(醋制)500g玫瑰花500g蒲黃300g 延胡索(醋制)500g五靈脂(制)300g 桂枝300g 紅花300g烏藥600g ；以上十味，加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮2小時，第二次加6倍量水 煎煮1.5小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.08-1. 10(80-85°C )，加入乙醇使含 醇量為50%，攪勻，靜置，取上清液收乙醇，濃縮至相對密度1. 16-1. 18 (80-850C )的清膏， 加入適量蔗糖及糊精，乾燥，制粒，製成lOOOg，即得；鑑別(1)取本品5g，加0.醋酸的70%乙醇溶液20ml，置水浴上加熱5分鐘，濾過，濾液揮 散乙醇後，加稀鹽酸1ml，攪拌，加水6ml使溶解，濾過，濾液滴加碘化鉍鉀試液，即發生紅棕 色沉澱。(2)取本品5g，加水IOml，加1.5倍量的乙醇，攪拌，靜置，濾過，濾液置水浴上加熱揮盡 乙醇，放冷，濾過，取濾液Iml加草酸試液2 3滴，產生黃棕色沉澱。(3)取本品5g，研細，加水50ml溶解，濾過，濾液用水飽和的乙酸乙酯萃取兩次，每次 15ml，合併萃取液，揮幹，殘渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照 品，加乙酸乙酯製成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000 年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液2 μ 1、對照品溶液1 μ 1，分別點於同一矽膠G薄 層板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸溶液(8 5 0.8)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2%三 氯化鐵-1%鐵氰化鉀(1 1)溶液，熱風吹至斑點清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相 應的位置上，顯相同顏色的藍色斑點。(4)取本品5g，加乙醇20ml，回流提取30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇Iml 使溶解，作為供試品溶液。另取蒲黃對照藥材2g，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法 (中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液2 μ 1、對照品藥材溶液1 μ 1，分 別點於同一矽膠G薄層板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸溶液(3 3 1)為展開劑，展開， 取出，晾乾，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，紫外燈下觀察(365nm)。供試品色譜中，在與對照 品藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。(5)取本品20g，加80%乙醇50ml，回流提取30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水 IOml使溶解，加氨試液使成鹼性，加乙醚提取二次，每次20ml，合併乙醚提取液，蒸乾，殘渣 加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索乙素對照品，加乙醇製成每Iml含Img的 溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取供 試品溶液5 μ 1、對照品溶液2 μ 1，分別點於同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板 上，以正己燒一醋酸乙酯一濃氨溶液(6 4 0.2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光 燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(6)取本品10g，加乙醇40ml，浸泡1小時，時時振搖，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇2ml 使溶解，置於已處理好的氧化鋁柱O00目，2g，內徑10 15mm)上，以甲醇30ml洗脫，收集 洗脫液，蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加甲醇製成每 Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B) 試驗，吸取上述二種溶液各4 μ 1，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層 板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸GO 5 10 0.2)為展開劑，展開，取出，晾乾， 噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的 位置上，顯相同顏色的斑點。含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版附錄VI D)測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；乙腈一水(15 85)為流動相；檢測波長為230nm，理 論塔板數按芍藥苷峰計算應不低於2600。對照品溶液的製備精密稱取芍藥苷對照品5mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解並稀釋 至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過，即得(每Iml中含芍藥苷50ug)。供試品溶液的製備取本品裝量差異下顆粒適量，研細，精密稱取約0. 3g，置具塞錐型 瓶中，精密加入60%甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40KHZ)30分 鍾，取出，放冷，密塞，再稱定重量，用60 %甲醇補足減失的重量，搖勻，上清液用微孔濾膜 (0. 45um)濾過，即得。測定方法分別精密吸取對照品液與供試品液各10 μ 1注入液相色譜儀，測定，即得。 本品每袋含赤芍以芍藥苷(C23H28O11)計，不得少於8.0mg。
全文摘要
本發明公開了一種治療痛經的藥物組合物及製備方法和檢測方法。原料藥組成為丹參、赤芍、香附、玫瑰花、蒲黃、延胡索(醋制)、五靈脂、桂枝、桃仁、木香，製備方法為取上述組合物原料藥，加入常規輔料，按照常規工藝，製成臨床接受的劑型，包括但不限於濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體製劑或凍乾粉針劑。本發明採用高效液相色譜法對芍藥苷進行含量測定。本發明藥物組合物用於治痛經具備很好的療效。
文檔編號G01N30/90GK102028841SQ20101057683
公開日2011年4月27日 申請日期2007年2月26日 優先權日2007年2月26日
發明者付建家, 付立家 申請人:北京亞東生物製藥有限公司