一種美容霜添加劑、使用其製備的美容霜和應用的製作方法

2024-01-28 11:29:15 2

本發明涉及化妝品領域。具體而言，涉及一種促進膠原蛋白生成的美容霜添加劑、使用其製備的美容霜和應用。
背景技術：
：人的衰老不可逆轉，面部皮膚皺紋特別是眼角魚尾紋的出現往往是衰老的第一外在標記；許多環境因素比如太陽光紫外線會顯著惡化皮膚皺紋的密度和深度。現代美容手段致力於降低衰老的種種表現尺度，特別是減少面部皮膚皺紋，其最終目標是通過調控皮膚真皮層的成纖維細胞產生新的膠原蛋白。膠原蛋白是皮膚內最主要的結構蛋白，佔真皮層乾重的75％以上。現代分子皮膚學研究證明皮膚的皺紋，彈性，質地，光澤等在很大程度上決定於膠原蛋白水平的高低；隨著年齡的增長或者皮膚的老化，人們皮膚內膠原蛋白的含量逐漸減少。因此，促進膠原蛋白生成的多寡成為衡量眾多美容手段的有效性的最重要的指標。當前這些美容手段大體可歸類為生物激活和物理治療兩種。其中，將含有生物活性的霜劑直接敷於皮膚表面的化學方法佔據了主流大眾市場，這些生物活性物質主要包括維生素a，c，e以及它們的衍生物，軟骨多糖，a-和b-羥酸和其它抗氧化劑；而物理手段則常用於專業美容院或診所裡，主要包括機械磨皮，矽膠去皮以及日益普及的雷射手術除皺。另外，直接往皺紋密集的皮膚內注射純化的膠原蛋白或者肉毒素(botox)則是兩個極端的除皺手段，然而這些注射法經常會伴隨頭痛，暈眩，眼沉以及可能的心血管後遺症。雷射作為具有獨特的相干性和單色性的高能光源，其用於皮膚除皺的原理是：雷射發出高能量的光子，造成皮膚深層細胞的熱損傷或者直接在表皮層引進創傷，從而激活皮膚內在的傷口修復功能，導致產生包括膠原蛋白在內的許多傷口修復所必需的結構和調控蛋白。雖然產生的膠原蛋白能夠改善皮膚的皺紋狀況，但是高能雷射同時也會破壞許多正常細胞組織，並釋放相當的有害皮膚健康的副產物。近來,一種以長波(>550nm)為主的高強度脈衝光(intensepulselight，ipl)被用來替代雷射治療面部皺紋。儘管高強度脈衝光對皮膚的傷害遠不及雷射嚴重，但它的工作能量太低，難以激活成纖維細胞生成修復皺紋的膠原蛋白。所以，高強度脈衝光作為替代雷射的光學療法並不成功，它在皮膚除皺領域仍有很大爭議(dermatologicalsurgery20:p835-843，2000；lasersinsurgeryandmedicine26:p196-200，2000；lasersinsurgeryandmedicine30:82-85，2002；lasersinsurgeryandmedicine30:298-325，2002)。雷射用於除皺的局限性是顯而易見的：雷射裝置極其昂貴，運作需要大量能量，而且必須由專業醫務人員來操作；雷射束一次能照射的皮膚非常有限，給大規模皮膚均勻除皺帶來困難；治療會對皮膚組織造成傷害，病人會感到嚴重不適或疼痛，並需要很長時間恢復；創傷性的雷射手術還可能引發傷口感染，愈後留下疤痕，不僅達不到美容的預期目的，相反還可能在皮膚上遺留下永久破壞。除皺的效果優劣很大程度上取決於接受治療者的個體差異，所以對於每個人來講，接受雷射治療皺紋需要承擔相當的風險。如同雷射，發光二極體發出的也是狹窄波長範圍內的單色光。儘管發光二極體早已被廣泛應用於各種電子元件的發光裝置以及日用和商用燈具上，它們在醫療領域的用途直到最近幾年才開始逐漸被人們認識。這些用途主要包括促進傷口癒合，減輕疼痛，以及和光激活化學藥物同步使用來治療癌症。美國nasa的航天項目研究小組發現用發光二極體發出的近紅外的單色光(主要波長包括680nm,730nm,880nm)直接照射局部缺血性傷口，能夠大大縮短傷口癒合所需的時間(journalofclinicallasermedicine&surgery19:p305-314，2001)。他們將幾十個單色的發光二極體排成平面序列，持續照射傷口，使得每平方釐米皮膚在0。5-1小時內接受4-8焦耳的能量。這些發光二極體與高壓氧氣同步使用效果尤佳。幾家美國公司正在積極開發紅光和紅外光二極體在止痛上的應用，它們已經獲得美國食品和藥品管理局的首肯，很快將有用來治療手，腕，和其它肌肉疼痛的發光二極體裝置推向市場。在所謂的光動力療法中(photodynamictherapy)，發光二極體甚至可以成為定點消除腫瘤細胞的工具。比如由羅氏(roche)公司開發的porphyrin可以被發光二極體發出的680nm紅光激活，然後將獲得的能量傳遞給血液裡的氧氣分子，從而生成有害的單氧基團和游離基。這些單氧基團和游離基會破壞周圍細胞內的蛋白質，脂類，核酸等重要組分。用發光二極體激活聚集在腫瘤部位的porphyrin，就可以非常特異性的殺死腫瘤細胞，達到治療的目的。這種porphyrin光動力療法在許多國家已被用來治療膀胱癌,食道癌和肺癌，在美國正在臨床iii期試驗中。發光二極體之所以能夠成功地用於人體治療，主要因為科學研究發現二極體發出的非相干性的單色光可以有效地穿透皮膚表皮到達真皮層和更深層的體內組織。一項報導宣稱630-800nm範圍內的光子可以進入人體皮膚內部達23釐米(p.552spacetechnologyandapplicationsinternationalforum200，editedbym.s.el-genk，2001)。進入體內的二極體的光能夠刺激細胞內部的能量工廠線粒體，產生大量能量，從而加速各種修復機制，提高細胞活性和代謝，加快血液循環，其結果是體內的有害物質和代謝副產物從受傷或衰老的組織內被清除掉，同時促進生成的活性物質使組織得到更新。細胞內接受光能的具體分子並不清楚，但科學家發現一些發色基團(chromophores)和細胞色素系統(cytochromesystems)對紅光和紅外光有反應。在二極體的單色光穿透皮膚的過程中，光能逐漸被各種細胞組織吸收和損耗。大部份的被有效吸收的光子作用於真皮層的成纖維細胞。成纖維細胞是皮膚的動力機器，生產各種皮膚調節成份和主要結構蛋白比如膠原蛋白。從原理角度講，發光二極體的單色光不僅僅可以促進成纖維細胞產生大量能量物質atp，而且更重要的是能夠起動膠原蛋白的生物合成。因此，用發光二極體的單色光替代雷射來促進皮膚生成膠原蛋白而修補皺紋是一個創新又極富挑戰性的工作。和雷射手術除皺相比，發光二極體除皺的優越性很多：它工作能量低，通過激發成纖維細胞的潛能達到美容目的，對皮膚內外均無傷害；它使用方便安全，光源壽命遠長於雷射，並且價錢合理，易於家庭普及；更重要的是，通過選擇恰當波長，具有生物調節功效的輸出強度和頻率，發光二極體能夠達到傳統雷射美容除皺的效果。波長，強度和頻率的選擇和正確組合是決定發光二極體除皺裝置有效性的關鍵。首先，只有特定波長的發光二極體光波能夠穿透表皮層而最大限度地被成纖維細胞吸收，並轉化成能量，刺激細胞生成膠原蛋白，而其它波長的光波即使能到達這些細胞也不會有效激活細胞內的光敏蛋白。其次，只有狹窄範圍內的輸出強度具有生物調節的功效：強度低於生物激活閾值的光波不能提供足夠的能量啟動成纖維細胞的修復機制；而過高強度的光波則會在皮膚內主要轉化成熱能，並激發成纖維細胞的保護機制，最終導致膠原蛋白合成的抑制。最後，發光二極體的電磁光波在皮膚內的頻率只有與成纖維細胞的內在生物頻率發生共振時，才能特異性地將光能傳送到成纖維細胞，並且最大限度地降低其它細胞組織的激活所生成的無用甚至有害的副產品。膠原蛋白被稱為「骨中之骨，膚中之膚，肉中之肉」，可以說是真皮層強有力的後盾，其對皮膚的作用不言而喻。皮膚成分中有70％是由膠原蛋白組成，皮膚有如一個大套子緊緊包住身體各處，表面積相當大，人體四肢活動時，皮膚中膠原蛋白發揮功能，使皮膚具有保護功能，又有適當彈性及堅硬度。膠原蛋白的含量處於較高的水平能夠使得皮膚更加具有彈性，皺紋更少，這是每個女性所追尋的目標。但隨著年齡的增長，體內尤其是皮膚中的膠原蛋白極具降低。經過研究發現，包括紫外線、空氣汙染、飲食、輻射等在內的諸多外來因素可影響膠原蛋白的含量，這些因素可能通過激活膠原酶來破壞膠原蛋白致使膠原蛋白的含量有所降低，進而增加皺紋的數量。為了維持膠原蛋白在較高的水平，達到美容除皺的目的，必須抑制外來因素對膠原酶的激活作用。通過使用膠原蛋白酶的特異性抑制劑，可以特異性抑制皮膚中的膠原酶的活性，維持體內尤其是皮膚中的膠原蛋白的高水平，從而實現美容除皺。cn1618480a中已經公開了一種結合光物理和生物化學的皮膚美容方法。該方法利用特定波長的低能量光波，按照特定的程序釋放時，能穿透面部皮膚表皮層，激活真皮層的纖維細胞產生膠原蛋白，並促進代謝殘餘物質的清除。同時，被破壞的代謝平衡誘發皮膚內的自然修復機制，使光活化的結果不能保持。為此，cn1618480a還包含一類以脂溶性的膠原酶抑制物為核心的外敷用品，它與上述光學儀器同步使用，可使皮膚內的膠原蛋白維持在高水平，從而達到面部皮膚去皺紋，增強彈性和消除眼袋和黑眼圈的長期效果。具體而言，所述膠原酶抑制劑是具有以下結構的ol－1肽：benzoyl-pro-d-leu-d-ala-nhoh。現有技術cn102076706a也公開了一種類似的肽：x.sup.1-x.sup.2-x.sup.3-nhoh；其中x.sup.1是選自以下l型或d型胺基酸組成的組的胺基酸的殘基：脯氨酸、羥基脯氨酸、硫代脯氨酸和丙氨酸；x.sup.2是選自以下l型或d型胺基酸組成的組的胺基酸的殘基：穀氨醯胺、穀氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和苯丙氨酸；和x.sup.3是選自以下l型或d型胺基酸組成的組的胺基酸的殘基：甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和肌氨酸；其中α-胺基酸x.sup.1的羧基與α-胺基酸x.sup.2的氨基形成肽鍵，α-胺基酸x.sup.2的羧基與α-胺基酸x.sup.3的氨基形成肽鍵，且α-胺基酸x.sup.3的羧基與-nhoh形成醯胺基；所述α-胺基酸x.sup.1的氨基的氫原子可被選自以下基團組成的組的取代基取代：乙醯基、苯甲醯基、苄氧基、t-丁氧基羰基、苄氧基羰基、p-氨基苯甲醯基、p-氨基-苄基和p-羥基苯甲醯基；或其藥學可接受的鹽。並進一步公開了一種具體的肽：苯甲醯基-脯氨酸-d-亮氨酸-d-丙氨酸-nhoh。cn105213230a公開了一種基於不可見光和酶抑制物來促進膠原蛋白再生的方法，包括如下步驟：s1、用溫水清洗眼睛周圍的皮膚，擦乾後均勻塗抹一層抗皺精華液，該抗皺精華液由以下重量份的原料製備而成：泛醇3～9份、熊果苷5～11份、甘油聚丙烯酸酯3～6份、乙醯基六肽～36～14份、肉豆蔻醚丙酸3～5份、苯氧乙醇1～6份、羥苯甲酯2～8份、牛血清白蛋白3～5份、羥苯異丁酯1～4份、小麥胚芽甘油酯3～5份、自由活化星狀細胞、活化星狀細胞分解物、mmp14、經mmp14處理的膠原和活化星狀細胞分泌物構成的組分5～10份、蒸餾水50～65份、脂溶性的膠原酶抑制劑5-10份；s2、調整眼罩內部的護眼膜，然後帶上眼罩，開啟眼罩並選擇護理時間；該眼罩內由252個660納米波長的發光二極體組成，以特定的程序和特定的強度發出總能量輸出低於每平方釐米10毫瓦的不可見光；s3、按下5分鐘、10分鐘、20分鐘的任一鍵後，對應的藍燈亮起進入倒計時工作狀態；s4、計時完畢，關閉眼罩，停止工作。上述現有技術均使用光與膠原酶抑制劑的組合，儘管所述光對人皮膚總體無害，但在實際使用過程中，發現長期使用光照射仍然會產生一定的副作用，如皮膚發乾、略顯緊繃等，並且使用頻率也不宜太高，會加劇上述副作用。因此，發明人在另一項研究中發現了一種肽，其無須使用光照即可達到消除皺紋和黑眼圈的作用。所述肽的結構如下：x.sup.1-x.sup.2-x.sup.3-x.sup.4-x.sup.5-nhoh。x.sup.4為極性胺基酸的殘基、x.sup.5為非極性胺基酸的殘基，能夠獲得最佳的美容效果。但皮膚本身的膠原蛋白較低，為了進一步提高包含所述肽的美容霜的效果，需要一種美容霜添加劑，其能夠使得皮膚內的膠原蛋白保持在更高的水平，獲得更好的美容效果。牛油果，又名油梨、鱷梨、酪梨、奶油果、樟梨，屬於被子植物門的樟科、鱷梨屬常綠喬木。牛油果果實是一種著名的熱帶水果，以營養豐富、健康著稱。現代研究表明，牛油果果實富含多種維生素、豐富的脂肪酸和高含量的鈉、鉀、鎂、鈣等元素。牛油果果實的美容價值很高，能夠深度保溼、去除角質、滋養頭髮、美白抗衰老。截至目前，已經公開了在化妝品中使用的多種牛油果果實提取物。例如，cn1949985a公開了將鱷梨的果實與水溶液和酶加熱結合，以提供經消化的植物混合物。cn103347528a公開了富含多酚的鱷梨果肉和/或果皮提取物及含有它的美容用、皮膚病用和營養品組合物。另外已知的是，牛油果果實包含d-甘露庚酮糖，它是一種己糖激酶的抑制劑，可通過競爭性地與己糖激酶結合來阻斷葡萄糖的磷酸化，結果是葡萄糖的降解被抑制。此外，d-甘露庚酮糖還能夠促進表皮膠原蛋白(internationaljournalofcosmeticscience，2007：29，220)。也公開了多種包含d-甘露庚酮糖的提取物及其提取方法和d-甘露庚酮糖的應用(cn1968708a，cn1968707a，cn101711158a，cn105209046a，cn105439814a，cn105246351a等)。但現有技術並未公開採用特定方法提取牛油果果實能夠最佳地使得皮膚內的膠原蛋白保持在更高的水平，獲得更好的美容效果。技術實現要素：為了使得皮膚內的膠原蛋白保持在更高的水平，獲得更好的美容效果，發明人發現採用特定提取方法獲得的牛油果果實提取物可以最佳地解決該問題。申請人經過對牛油果果實的提取溶劑進行多項篩選發現本申請的牛油果果實提取物能夠獲得預料不到的上述美容效果，由此獲得本發明。本申請的牛油果果實提取物及其用途與現有技術公開的牛油果果實提取物及其用途存在以下不同：第一，本申請採用了混合溶劑提取牛油果果實，而現有技術並未公開本申請使用的混合溶劑。眾所周知，中藥成分在溶劑中的溶解度與溶劑性質直接相關，採用不同的溶劑提取獲得的中藥成分不同，採用溶劑提取法的關鍵即在於選擇適當的溶劑，溶劑選擇適當就可以較為順利地將所需成分提取出來。在實踐中，往往會根據所要提取的成分的極性，比如屬於水溶性成分還是脂溶性成分，來選擇親水性溶劑或是親脂性溶劑。第二，儘管對於牛油果果實而言，其含有的d-甘露庚酮糖能夠促進表皮膠原蛋白是已知的，但經過申請人的試驗證實，本申請的牛油果果實提取物並非僅通過d-甘露庚酮糖起作用，而是通過多個成分複合起作用的。所述牛油果果實提取物的製備方法如下：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到丙酮-乙醇-正丁烷的複合溶劑中，加熱提取，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得最終的提取物。進一步地，牛油果果實與複合溶劑的質量體積比為1:5-100，優選1:10-50，更優選1:30。進一步地，丙酮、乙醇、正丁烷三者的體積比為1-10:1-10:1-10，優選1-5:1-5:1-5，更優選4:3:1。進一步地，每次提取的時間為1-2小時，優選1.5小時。進一步地，在加熱提取前增加浸泡步驟。進一步地，浸泡的時間為1-8小時，優選2-6小時，更優選4小時。進一步地，大孔樹脂選自d392、d301和d382，優選d392。具體實施方式通過以下實施例來具體地說明本發明，其不被解釋為將本申請的範圍或精神限制於本文所述的具體方法。應當理解，提供了這些實施例以說明某些實施方案，並非意圖限制本申請的範圍。一、驗證採用不同溶劑獲得的提取物的美容效果的差異實施例1：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到丙酮-乙醇-正丁烷的複合溶劑中，其中丙酮、乙醇、正丁烷三者的體積比為4:3:1。加熱提取1.5小時，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂d392進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得實施例1。對比例1：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到丙酮-乙醇-正丁烷的複合溶劑中，其中丙酮、乙醇、正丁烷三者的體積比為1:1:1。加熱提取1.5小時，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂d392進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得對比例1。對比例2：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到丙酮-乙醇-正丁烷的複合溶劑中，其中丙酮、乙醇、正丁烷三者的體積比為1:2:3。加熱提取1.5小時，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂d392進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得對比例2。對比例3：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到丙酮中。加熱提取1.5小時，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂d392進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得對比例3。對比例4：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到乙醇中。加熱提取1.5小時，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂d392進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得對比例4。對比例5：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到正丁烷中。加熱提取1.5小時，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂d392進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得對比例5。對比例6：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到80％乙醇溶液中。加熱提取1.5小時，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂d392進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得對比例6。對比例7：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到正己烷中。加熱提取1.5小時，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂d392進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得對比例7。對比例8：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到乙酸乙酯中。加熱提取1.5小時，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂d392進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得對比例8。對比例9：將牛油果果實烘乾，粉碎，加入到石油醚中。加熱提取1.5小時，過濾，重複上述提取和過濾步驟兩次，收集濾液，真空濃縮得到浸膏，以水作為洗脫劑，用大孔樹脂d392進行吸附分離，獲得洗脫液，減壓濃縮，獲得對比例9。對比例10：d-甘露庚酮糖，其作為促進膠原蛋白生成的活性成分。每組選擇5名受試者，每組受試者在連續使用包含作為膠原酶抑制劑的上文提及的肽和實施例1/對比例1-10以及相同的常規化妝品添加劑製備的美容霜12周後，由專業人員對美容效果進行測評，評估結果如下：表1用不同溶劑獲得的提取物的美容效果的差異實施例/對比例效果打分a實施例110對比例18.5對比例28對比例37.5對比例46.5對比例56.5對比例64.5對比例75.5對比例84對比例94對比例10b8a總分為10分，分數越高，表明美容效果越好。b將對比例10的美容霜中d-甘露庚酮糖的含量配製成與實施例1的美容霜中d-甘露庚酮糖的含量相同。從表1可以看出，儘管某些單一溶劑能夠取得較為優異的美容效果，但複合溶劑作為提取溶劑的美容效果明顯優於其它溶劑，同時複合溶劑作為提取溶劑的美容效果也總體上優於d-甘露庚酮糖，表明本申請的提取物除了包含d-甘露庚酮糖作為促進膠原蛋白生成的活性成分外，還含有能夠促進膠原蛋白生成的其它活性成分，並且這些活性成分可以通過複合溶劑作為提取溶劑最佳地提取出來。另外，受試者使用實施例1的美容霜後皮膚更具彈性、更加細膩，皮膚質地和毛孔得到最大改善，皺紋明顯較其它組少且淺，黑眼圈明顯變少。二、驗證單獨使用本申請的提取物的效果招募5位20-55歲眼角有皺紋或眼部皮膚狀況需要改進(包括眼袋、黑眼圈等)的女士，使用由實施例1的提取物和常規化妝品添加劑製備的美容霜1個月後，發現相比於使用前，5位女士的皮膚更具彈性、更加細膩，皮膚質地和毛孔得到改善，皺紋和黑眼圈數量減少。可見，單獨使用本申請的牛油果果實提取物也可以取得優異的美容效果。三、驗證使用本申請的提取物的長期效果及是否產生副作用上述實施例1的受試者繼續使用該提取物12周，經專業人員確定，未產生副作用。可見，本申請的牛油果果實提取物能夠長期使用，安全無副作用。上述實施例意圖僅僅是示例性的，並且本領域技術人員將認識到或將能夠使用不超過常規實驗來確定多種等同物。所有這些等同物被認為在所要求保護的主題的範圍內，並且被所附權利要求所涵蓋。因為修改對於本領域技術人員將是顯而易見的，所以意圖要求保護的主題僅由所附權利要求的範圍限制。當前第1頁12