脲取代的咪唑並喹啉醚的製作方法

2023-10-29 11:55:57 3

專利名稱：脲取代的咪唑並喹啉醚的製作方法
技術領域：
本發明領域本發明涉及在1-位上具有醚和脲官能基的咪唑並喹啉化合物，和涉及含有所述化合物的藥物組合物。本發明進一步涉及這些化合物作為免疫調節劑以誘導動物中細胞因子的生物合成和治療疾病包括病毒性疾病和腫瘤疾病的用途。
本發明背景關於1H-咪唑並[4，5-c]喹啉環系的首篇可靠的報導，是由Backman等在J.Org.Chem.15，1278-1284(1950)中描述可能能夠用作抗瘧疾劑的1-(6-甲氧基-8-喹啉基)-2-甲基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉的合成。隨後報導了多種取代的咪唑並[4，5-c]喹啉的合成。例如，由Jain等人，J.Med.Chem.11，pp87-92(1968)，合成了可以作為抗驚厥藥和心血管藥的1-[2-(4-哌啶基)乙基]-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉化合物。此外，Baranov等在CheM.Abs.85，94362(1976)中，公開了幾個2-氧代咪唑並[4，5-c]喹啉化合物，以及Berenyi等在J.Heterocyclic Chem.18，1537-1540(1981)中，也已經公開了某些2-氧代咪唑並[4，5-c]喹啉。
隨後發現某些1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺及其1-和2-取代的衍生物可用作抗病毒劑，支氣管擴張劑和免疫調節劑。這些還具體在美國專利US 4,689,338；4,698,348；4,929,624；5,037,986；5268,376；5,346,905；和5,389,640進行了描述，這些文獻均引入本文作為參考。
對咪唑並喹啉環系的興趣一直是存在的。
某些在1-位上含有醚取代基的1H-咪唑並[4，5-c]1，5-二氮雜萘-4-胺，1H-咪唑並[4，5-c]吡啶-4-胺和1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺，在美國專利US.5,268,376；5,389,640；5,494,916和WO 99/29693中已經公開。
儘管已有這些鑑別可用作免疫反應調節劑的化合物的嘗試，但對具有通過誘導細胞因子生物合成或其它機理來調節免疫反應能力的化合物的需求一直是存在的。
本發明概述我們已經發現一組新的可誘導動物中細胞因子生物合成的化合物。因此，本發明提供了在1-位上具有醚和脲官能基的咪唑並喹啉-4-胺和四氫咪唑並喹啉-4-胺化合物。這些化合物如式(I)和(II)所示，更具體的如下文所述。這些化合物共有下式結構 其中X，R1，R2，和R的定義分別如式(I)和式(II)所述。
式(I)和式(II)化合物可以用作免疫反應調節劑是因為當給動物施用時，這些化合物表現出誘導細胞因子生物合成和另外調節免疫反應的能力。這使得該化合物可用於治療對免疫反應的這些變化有響應的一系列疾病如病毒性疾病和腫瘤。
本發明進一步提供了含有式(I)或(II)免疫反應調節化合物的藥物組合物，提供了通過給動物施用式(I)和式(II)化合物來誘導動物中細胞因子生物合成，治療動物病毒感染，和/或治療腫瘤疾病的方法。
此外，本發明還提供了合成本發明化合物的方法和在合成這些化合物時所採用的新中間體。
本發明詳述如前所述，我們已經發現了某些可以誘導細胞因子生物合成和調節動物免疫反應的化合物。所述化合物為如下式(I)和(II)所示的化合物。
在1-位上具有醚和脲官能基的本發明咪唑並喹啉化合物是由下式(I)所示的化合物或其可藥用鹽 其中X表示-CHR5-，-CHR5-烷基-，或者-CHR5-烯基-；R1表示選自下述的基團-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜環基；-R4-NR8-CR3-NR5R7；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜芳基；和-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜環基；R2表示選自下述的基團
-氫；-烷基；-烯基；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-烷基-Y-烷基；-烷基-Y-烯基；-烷基-Y-芳基；和被一個或多個選自下述的取代基取代的-烷基或-烯基-OH；-滷素；-N(R5)2；-CO-N(R5)2；-CO-C1-10烷基；-CO-O-C1-10烷基；-N3；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-CO-芳基；和-CO-雜芳基；各個R3表示＝O或＝S；各個R4各自獨立地表示烷基或者烯基，它們可以被一個或多個-O-基所打斷；各個R5各自獨立地表示H或C1-10烷基；R6表示鍵，烷基，或者烯基，它們可以被一個或多個-O-基所打斷；R7表示H或C1-10烷基，可以被雜原子所打斷；或者R7和R5連接到一起形成環；
R8表示H，C1-10烷基，或芳烷基；或者R4和R8連接到一起形成環；R9表示C1-10烷基，它可以和R8連接到一起形成環；各個Y各自獨立地表示-O-或-S(O)0-2-；Z表示鍵，-CO-或-SO2-；n是0-4；和各個存在的R各自獨立地表示選自下述的基團C1-10烷基，C1-10烷氧基，羥基，滷素和三氟甲基。
本發明也包括在1-位上具有醚和脲官能基的四氫咪唑並喹啉化合物。這些化合物如下式(II)所示或為其可藥用鹽 其中X表示-CHR5-，-CHR5-烷基-，或者-CHR5-烯基-；R1表示選自下述的基團-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜環基；-R4-NR8-CR3-NR5R7；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜芳基；和
-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜環基；R2表示選自下述的基團-氫；-烷基；-烯基；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-烷基-Y-烷基；-烷基-Y-烯基；-烷基-Y-芳基；和被一個或多個選自下述的取代基取代的-烷基或-烯基-OH；-滷素；-N(R5)2；-CO-N(R5)2；-CO-C1-10烷基；-CO-O-C1-10烷基；-N3；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-CO-芳基；和-CO-雜芳基；各個R3表示＝O或＝S；各個R4各自獨立地表示烷基或者烯基，它們可以被一個或多個-O-基所打斷；各個R5各自獨立地表示H或C1-10烷基；R6表示鍵，烷基，或者烯基，它們可以被一個或多個-O-基所打斷；
R7表示H或C1-10烷基，可以被雜原子所打斷；或者R7和R5連接到一起形成環；R8表示H，C1-10烷基，或芳烷基；或者R4和R8連接到一起形成環；R9表示C1-10烷基，它可以和R8連接到一起形成環；各個Y各自獨立地表示-O-或-S(O)0-2-；Z表示鍵，-CO-或-SO2-；n是0-4；和各個存在的R各自獨立地表示選自下述的基團C1-10烷基，C1-10烷氧基，羥基，滷素和三氟甲基。
化合物的製備本發明化合物可以按照反應流程I製備，其中R，R2，R3，R4，R5，R8，X和n的定義如上所述，BOC是叔丁氧羰基和R11表示-Z-R6-烷基，-Z-R6-烯基，-Z-R6-芳基，-Z-R6-雜芳基，或-Z-R6-雜環基或R11表示R7，其中R6、R7和Z定義如上所述。
在反應流程I步驟(1)，式X氨基醇中的氨基通過叔丁氧基羰基進行保護。在鹼如氫氧化鈉的存在下，用一縮二碳酸二叔丁酯(di-tert-butyl dicarbonate)處理氨基醇的四氫呋喃溶液。式X氨基醇中許多可從市場獲得；另一些可採用已知的合成方法製備。
在反應流程I步驟(2)中，將被保護的式XI氨基醇轉化為式XII所示的碘化物。將碘加到三苯膦和咪唑的二氯甲烷溶液中，然後加入式XI被保護的氨基醇的二氯甲烷溶液，反應在室溫進行。
在反應流程I步驟(3)中，採用式XII碘化物將式XIII的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基醇烷基化，得到式XIV所示1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基醚。在合適的溶劑中如N，N-二甲基甲醯胺中，使得式XIII醇與氫化鈉反應得到醇鹽。在室溫下向醇鹽溶液中加入碘化物。添加完成後在升溫下(～100℃)反應。式XIII化合物中許多是已知的，參見例如Gerster等，US 4,689,338，另一些採用已知的合成方法容易製備，參見例如Gerster等，US 5,605,899和Gerster等US 5,175,296。
在反應流程I步驟(4)中，採用常規定可氧化生成N-氧化物的氧化劑，氧化式XIV所示1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基醚得到式XV所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-5N-氧化物。優選的，在室溫下用3-氯-過氧苯甲酸氧化XIV化合物的氯仿溶液。
在反應流程I步驟(5)中，氨化式XV所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-5N-氧化物得到式XVI所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺。步驟(5)包括(i)使得式XV化合物與醯化試劑反應；然後(ii)使得所得產物與氨化試劑反應。步驟(5)第(i)步包括使式XV所示的N-氧化物與醯化試劑反應，合適的醯化試劑包括烷基-和芳基-磺醯氯(例如苯磺醯氯，甲磺醯氯，對甲苯磺醯氯)。芳基磺醯氯是優選的，例如對甲苯磺醯氯是最優選的。步驟(5)第(ii)步包括使第(i)步產物與過量氨化試劑反應。合適的氨化試劑包括氨水(例如以氫氧化銨形式)和銨鹽(例如碳酸銨，碳酸氫銨，磷酸銨)。氫氧化銨是優選的。反應優選將式XV所示的N-氧化物溶於惰性溶劑如二氯甲烷或1，2-二氯乙烷中(如果必要可以加熱)，並向所得的溶液中加入氨化試劑，然後緩慢加入醯化試劑。反應任選在升溫下(85-100℃)在密封的壓力容器中進行。
在反應流程I步驟(6)中，在酸性條件下通過水解除去保護基得到式XVII所示1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺。優選的，在室溫下或溫和加熱條件下，用氫氯酸/乙醇處理式XVI化合物。
在反應流程I步驟(7)中，採用常規合成方法將式XVII所示1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺轉化為式XVIII所示脲或硫脲化合物。例如，式XVII化合物可以與異氰酸酯R12-N＝C＝O反應，其中R12表示-R6-烷基，-R6-烯基，-R6-芳基，-R6-雜芳基，或-R6-雜環基。該反應可以在室溫下，通過向式XVII化合物的溶液中加入異氰酸酯在合適溶劑如二氯甲烷或1-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液來進行。或者使式XVII化合物與式R12-N＝C＝S所示硫代異氰酸酯，式R12-C(O)-N＝C＝O所示的醯基異氰酸酯，式R12-S(O2)-N＝C＝O所示的磺醯基異氰酸酯和式R13-N-C(O)Cl氨甲醯氯化合物，R13為R12或R7。可以採用常規方法分離得到產物或其可藥用鹽。
反應流程I 本發明化合物可以根據反應流程II製備，其中R，R2，R3，R4，R5，R8，R11，X和n的定義如上所述，BOC是叔丁氧羰基。
在反應流程II步驟(1)，式XIX氨基醇中的氨基通過叔丁氧羰基進行保護。在鹼如氫氧化鈉的存在下，用一縮二碳酸二叔丁酯處理氨基醇的四氫呋喃溶液。式XIX氨基醇中許多可從市場獲得，另一些可採用已知的合成方法製備。
在反應流程II步驟(2)中，將被保護的式XX氨基醇轉化為式XXI所示的甲磺酸酯。在鹼如三乙胺存在下，用甲磺醯氯處理式XX化合物在合適溶劑如二氯甲烷中的溶液。該反應可在低溫下進行(0℃)。
在反應流程II步驟(3a)中，將式XXI甲磺酸酯轉化為式XXII疊氮化物。將疊氮化鈉加到化合物XXI在合適的溶劑如N，N-二甲基甲醯胺的溶液中。該反應可在升溫下(80-100℃)下進行。
在反應流程II步驟(3b)中，採用式Hal-R8所示滷化物將式XXII化合物烷基化，得到式XXIII化合物。當R8是氫時該步驟省略。化合物XXII在合適的溶劑如N，N-二甲基甲醯胺或四氫呋喃中與氫化鈉反應得到一陰離子，然後與滷化物混和。該反應可以在室溫下進行。
在反應流程II步驟(4)中，還原式XXII或式XXIII疊氮化物得到式XXIV所示的胺。優選的，該反應採用常規的多相氫化催化劑如鈀/炭。反應在帕爾反應器中在合適的溶劑如甲醇或異丙醇中容易進行。
在反應流程II步驟(5)中，使式XXV所示的4-氯-3-硝基喹啉與式XXIV所示的胺反應得到式XXVI的3-硝基喹啉。該反應在鹼如三乙胺存在下，將式XXIV胺加到式XXV化合物在合適溶劑如二氯甲烷中的溶液來進行。式XXV喹啉化合物中許多是已知的或可以採用已知的合成方法製備，參見例如Gerster，US 4,689,338，及其中引述的參考文獻。
在反應流程II步驟(6)中，還原式XXVI所示的3-硝基喹啉到式XXVII的3-氨基喹啉。優選的，該反應採用常規的多相氫化催化劑如鉑/炭。反應在帕爾反應器中在合適的溶劑如甲苯中容易進行。
在反應流程II步驟(7)中，使式XXVII化合物與羧酸或其等同物反應得到式XIV所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉。合適的羧酸的等同物包括原酸酯和鏈烷酸1，1-二烷氧基烷酯。要選擇羧酸或其等同物使得能夠在式XIV化合物中得到需要的R2取代基。例如，原甲酸三乙酯可以製得其中R2是氫的化合物，和原戊酸三乙酯可以製得其中R2是丁基的化合物。該反應可在沒有溶劑或在惰性溶劑如甲苯存在下進行。應充分加熱以除去反應中生成的任何副產物醇或水。可以任選加入催化量的吡啶鹽酸鹽。
或者，在反應流程II步驟(7)中，(i)使式XXVII化合物與式R2C(O)Cl醯滷反應，然後(ii)環化。在步驟(i)中，將醯滷加到式XXVII化合物在惰性溶劑中的溶液中，惰性溶劑如乙腈、或二氯甲烷。反應可在室溫進行或低溫下進行。在步驟(ii)中，在鹼存在下將步驟(i)產物在醇性溶劑中加熱。優選的在過量三乙胺存在下在乙醇中加熱回流(i)產物或將其與氨甲醇溶液一起加熱。
步驟(8)，(9)，(10)和(11)可以按照反應流程I步驟(4)，(5)，(6)和(7)所述的方式進行。
反應流程II

本發明化合物可以根據反應流程III製備，其中R，R2，R3，R4，R5，R8，R11，X和n的定義如上所述。
在反應流程III步驟(1)中，還原XVII所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺得到式XXVIII所示的6，7，8，9-四氫-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺。優選的，還原反應的進行是將式XVII化合物懸浮於或溶於三氟乙酸中，加入催化量的氧化鉑(IV)，然後氫化。反應在帕爾反應器中容易進行。
步驟(2)中，根據與反應流程I步驟(7)所述的同樣的方式進行步驟(2)的反應，得到式XXIX所示的6，7，8，9-四氫-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺。採用常規方法可以分離產物或其可藥用鹽。
反應流程III 本發明化合物可以根據反應流程IV製備，其中R，R1，R2，X和n的定義如上所述。
在反應流程IV步驟(1)中，式XXV所示的4-氯-3-硝基喹啉與式R1-O-X-NH2所示的胺反應得到式XXX所示的3-硝基喹啉-4-胺。該反應可通過將胺加到式XXV化合物在合適的溶劑如氯仿或二氯甲烷中的溶液而進行並任選加熱。許多式XXV喹啉化合物是已知的化合物，參見例如Gerster等，US 4,689,338，以及其中引述的文獻。
在反應流程IV步驟(2)中，採用反應流程II步驟(6)的方法，還原式XXX所示的3-硝基喹啉-4-胺得到式XXXI的喹啉-3，4-二胺。
在反應流程IV步驟(3)中，採用反應流程II步驟(7)的方法，環化式XXXI所示的喹啉-3，4-二胺，得到式XXXII所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉。
在反應流程IV步驟(4)中，採用反應流程I步驟(4)的方法，氧化式XXXII所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉，得到XXXIII所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-5N-氧化物。
在反應流程IV步驟(5)中，採用反應流程I步驟(5)的方法，氨化XXXIII所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-5N-氧化物，得到式I所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺。採用常規方法可以分離產物或其可藥用鹽。
反應流程IV
本發明化合物可以根據反應流程V製備，其中R，R2，R3，R4，R5，R8，R11，X和n的定義如上所述。
在反應流程V步驟(1)中，採用反應流程I步驟(6)的方法，除去式XIV化合物中的BOC基，得到式XXXIV所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉。
在反應流程V步驟(2)中，採用反應流程I步驟(7)的方法，將式XXXIV所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉轉化為式XXXV所示的脲或硫脲。
在反應流程V步驟(3)中，採用反應流程I步驟(4)的方法，氧化式XXXV所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉，得到XXXVI所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-5N-氧化物。
在反應流程V步驟(4)中，採用反應流程I步驟(5)的方法，氨化XXXVI所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-5N-氧化物，得到式XVIII所示的1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺。採用常規方法可以分離產物或其可藥用鹽。
反應流程V 本發明也提供了合成式(I)和式(II)化合物的可用的中間體。這些中間體化合物具有式(III)或(IV)結構，詳述如下。
式(III)所示一組中間體化合物或其可藥用鹽 其中
X表示-CHR5-，-CHR5-烷基-，或者-CHR5-烯基-；R1表示選自下述的基團-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜環基；-R4-NR8-CR3-NR5R7；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜芳基；和-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜環基；R2表示選自下述的基團-氫；-烷基；-烯基；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-烷基-Y-烷基；-烷基-Y-烯基；-烷基-Y-芳基；和被一個或多個選自下述的取代基取代的-烷基或-烯基-OH；-滷素；-N(R5)2；-CO-N(R5)2；-CO-C1-10烷基；-CO-O-C1-10烷基；
-N3；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-CO-芳基；和-CO-雜芳基；各個R3表示＝O或＝S；各個R4各自獨立地表示烷基或者烯基，它們可以被一個或多個-O-基所打斷；各個R5各自獨立地表示H或C1-10烷基；R6表示鍵，或者是烷基或者烯基，它們可以被一個或多個-O-基所打斷；R7表示H或C1-10烷基，可以被雜原子所打斷；或者R7和R5連接到一起形成環；R8表示H，C1-10烷基，或芳烷基；或者R4和R8連接到一起形成環；R9表示C1-10烷基，它可以和R8連接到一起形成環；各個Y各自獨立地表示-O-或-S(O)0-2-；Z表示鍵，-CO-或-SO2-；n是0-4；和各個存在的R各自獨立地表示選自下述的基團C1-10烷基，C1-10烷氧基，羥基，滷素和三氟甲基。
另一組式(IV)所示的一組中間體化合物或其可藥用鹽
其中X表示-CHR5-，-CHR5-亞烷基-，或者-CHR5-亞烯基-；R1表示選自下述的基團-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜環基；-R4-NR8-CR3-NR5R7；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜芳基；和-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜環基；各個Y各自獨立地表示-O-或-S(O)0-2-；Z表示鍵，-CO-或-SO2-；各個R4各自獨立地表示烷基或者烯基，它們可以被一個或多個-O-基所打斷；各個R5各自獨立地表示H或C1-10烷基；R6表示鍵，或者是烷基或者烯基，它們可以被一個或多個-O-基所打斷；R7表示H或C1-10烷基，可以被雜原子所打斷；或者R7和R5連接到一起形成環；R8表示H，C1-10烷基，或芳烷基；或者R4和R8連接到一起形成環；R9表示C1-10烷基，它可以和R8連接到一起形成環；n是0-4；和各個存在的R各自獨立地表示選自下述的基團C1-10烷基，C1-10烷氧基，滷素和三氟甲基。
這裡所用的術語「烷基」、「烯基」和前綴「烷」包括直鏈或支鏈基團也包括環狀基團，即環烷基和環烯基。除非另外說明，這些基團是指含有1-20個碳原子，而烯基是指含有2-20個碳原子的基團。優選的基團含有至多10個碳原子。環狀基團可以是單環或多環的和優選含3-10個環碳原子。環狀基團的實例包括環丙基、環丙基甲基、環戊基、環己基和金剛烷基。
此外-X-基團中的烷基和烯基部分可以是未取代的或被一個或多個選自下面的取代基取代，這些取代基選自烷基，烯基，芳基，雜芳基，雜環基，芳烷基，雜芳基烷基和雜環基烷基。
這裡的術語「滷烷基」是指被一個或多個滷素取代的基團，包括全氟烷基。該定義也適合於含前綴「滷」的基團。合適的滷烷基的實例包括氯甲基，三氟甲基等。
這裡的術語「芳基」包括碳芳環或環系。芳基的實例包括苯基、萘基、聯苯基、芴基或茚基。術語「雜芳基」是指包括含至少一個環雜原子(如O，S，N)的芳環或環系。合適的雜芳基包括呋喃基，噻吩基，吡啶基，喹啉基，異喹啉基，吲哚基，異吲哚基，三唑基，吡咯基，四唑基，咪唑基，吡唑基，噁唑基，噻唑基，苯並呋喃基，苯並噻吩基，咔唑基，苯並噁唑基，嘧啶基，苯並咪唑基，喹喔啉基，苯並噻唑基，1，5-二氮雜萘基，異噁唑基，異噻唑基，嘌呤基，喹唑啉基等。
「雜環基」是指包括含至少一個環雜原子(如O，S，N)的非芳香環或環系並且包括上述雜芳基的全飽和或部分飽和的衍生物。雜環基的實例包括吡咯烷基，四氫呋喃基，嗎啉基，硫代嗎啉基，哌啶基，哌嗪基，噻唑烷基，咪唑烷基和異噻唑烷基等。
這裡的芳基，雜芳基，和雜環基可以是未取代的或被一個或多個本發明化合物包括以任何的可藥用形式存在的化合物，包括其異構體(如非對映異構體和對映異構體)，鹽，溶劑化物，多晶型物，等等。特別的，如果某一化合物是光學活性的，那麼本發明還包括各個化合物的對映異構體以及對映異構體的外消旋混合物。
藥物組合物和生物活性本發明藥物組合物含有治療有效量的本發明化合物和可藥用載體。
術語「治療有效量」是指足以產生治療效果的本發明化合物的量，這裡的治療效果是指產生細胞因子誘導作用、抗腫瘤活性和/或抗病毒活性。雖然，在本發明藥物組合物中採用的活性化合物的具體量取決於本領域普通技術人員公知的一些因素如化合物的理化性質、載體的性質和所採用的治療方案而有所變化，但是本發明組合物應當含有足夠的活性成分使受者能夠得到劑量約為100ng/kg-約50mg/kg，優選約10μg/kg-約5mg/kg的化合物。可以採用任何常規劑型如片劑、錠劑、非腸道製劑、糖漿、霜劑、膏劑、噴霧劑、經皮貼劑、經黏膜貼劑等。
在施用時，本發明化合物可以在治療方案中作為單獨的治療劑使用，也可以與一種或多種其它活性劑聯合用藥，這些活性劑包括其它的免疫調節劑、抗病毒劑和抗菌劑等。
下面進行的試驗證明本發明化合物顯示可誘導某些細胞因子產生。這些結果表明本發明化合物可用作免疫反應調節劑以多種不同方式調節免疫反應，使得它們可以用於多種疾病的治療中。
可由施用本發明化合物誘導產生的細胞因子包括幹擾素(α)(IFN-α)和/或腫瘤壞死因子(α)(TNF-α)以及某些白介素(IL)。其生物合成可由本發明化合物誘導的細胞因子包括IFN-α，TNF-α，IL-1，IL-6，IL-10和IL-12以及其它多種細胞因子。在這些作本發明化合物包括以任何的可藥用鹽形式存在的化合物，包括其異構體(如非對映異構體和對映異構體)，鹽，溶劑化物，多晶型物，等等。特別的，如果某一化合物是光學活性的，那麼本發明還包括各個化合物的對映異構體以及對映異構體的外消旋混合物。
藥物組合物和生物活性本發明藥物組合物含有治療有效量的本發明化合物和可藥用載體。
術語「治療有效量」是指足以產生治療效果的本發明化合物的量，這裡的治療效果是指產生細胞因子誘導作用、抗腫瘤活性和/或抗病毒活性。雖然，在本發明藥物組合物中採用的活性化合物的具體量取決於本領域普通技術人員公知的一些因素如化合物的理化性質、載體的性質和所採用的治療方案而有所變化，但是本發明組合物應當含有足夠的活性成分使受者能夠得到劑量約為100ng/kg-約50mg/kg，優選約10μg/kg-約5mg/kg的化合物。可以採用任何常規劑型如片劑、錠劑、非腸道製劑、糖漿、霜劑、膏劑、噴霧劑、經皮貼劑、經黏膜貼劑等。
在施用時，本發明化合物可以在治療方案中作為單獨的治療劑使用，也可以與一種或多種其它活性劑聯合用藥，這些活性劑包括其它的免疫調節劑、抗病毒劑和抗菌劑等。
下面進行的試驗證明本發明化合物顯示可誘導某些細胞因子產生。這些結果表明本發明化合物可用作免疫反應調節劑以多種不同方式調節免疫反應，使得它們可以用於多種疾病的治療中。
可由施用本發明化合物誘導產生的細胞因子包括幹擾素(α)(IFN-α)和/或腫瘤壞死因子(α)(TNF-α)以及某些白介素(IL)。其生物合成可由本發明化合物誘導的細胞因子包括IFN-α，TNF-α，IL-1，IL-6，IL-10和IL-12以及其它多種細胞因子。在這些作用中，上述細胞因子和其它細胞因子可以抑制病毒產生和腫瘤細胞生長，使得這些化合物可用於治療病毒性疾病和腫瘤。因此，本發明提供了誘導動物中細胞因子生物合成的方法，包括向動物施用治療有效量本發明化合物或組合物。
已發現某些本發明化合物可以在不伴隨產生顯著水平的炎性細胞因子的情況下，優先誘導含有pDC2細胞(前體樹突細胞-2型)的造血細胞種群，例如PBMC(周圍血液單核細胞)中的IFN-α的表達。
除了誘導細胞因子產生的能力，本發明化合物也影響到先天免疫系統的其它方面，例如可以刺激天然殺傷細胞的活性，這種作用也可能是基於細胞因子的誘導作用。本發明化合物也可以激活巨噬細胞，從而刺激氧化氮的分泌和更多細胞因子的產生。進一步的，本發明化合物可以造成B-淋巴細胞的增殖和分化。
本發明化合物對獲得性免疫反應也有影響。例如，雖然不確信對T-細胞有任何直接的作用和對T-細胞細胞因子有直接的誘導作用，但當施用本發明化合物時，可以直接誘導1型輔助T細胞(Th1)細胞因子IFN-γ的產生和抑制2型輔助T細胞(Th2)細胞因子IL-4，IL-5和IL-13的產生。這裡活性是指化合物可用於治療如下疾病，在該疾病中需要促進Th1反應和/或抑制Th2反應。考慮到本發明化合物抑制Th2免疫反應的能力，本發明化合物可用於治療特應性疾病例如特應性皮炎、哮喘、過敏症、過敏性鼻炎；系統性紅斑狼瘡；也可用作對細胞調節免疫的疫苗佐劑；和可能會用於治療復發的真菌疾病和衣原體疾病。
本發明化合物的免疫反應調節作用使得它可以用於治療許多的疾病。因為它們有誘導細胞因子IFN-α和/或TNF-α產生的能力，本發明化合物可特別用於治療病毒性疾病和腫瘤。本發明化合物的免疫調節活性表明本發明化合物可以治療的疾病例如有不限於下面例舉的疾病病毒性疾病包括生殖器疣；普通疣；蹠疣；B型肝炎；C型肝炎；I和II單純皰疹病毒疾病；觸染性軟疣；天花，特別是重型天花；HIV；CMV；VZV；鼻病毒；腺病毒；流感；和副流感；上皮內瘤形成如頸上皮內瘤形成；人乳頭狀瘤病毒(HPV)和相關的瘤形成疾病；真菌疾病例如念珠菌屬感染疾病，麴黴屬感染疾病和隱球菌性腦膜炎；腫瘤病，例如，基底細胞癌，毛細胞白血病，卡波西肉瘤，腎細胞癌，鱗狀細胞癌，骨髓性白血病，多發性骨髓瘤，黑色素瘤，非何杰金氏淋巴瘤，皮膚的T-細胞淋巴瘤，以及其它的癌症；寄生蟲病例如卡氏肺孢子蟲病，隱孢子蟲病，莢膜組織胞漿菌病，弓形體病，錐蟲感染，和利什曼病；和細菌感染例如結核，和鳥分支桿菌感染。可以採用本發明化合物治療的其它疾病和症狀包括光化性角化病；溼疹；嗜酸性細胞增多症；特發性血小板增多；麻風；多發性硬化症；奧門症候群；盤狀狼瘡；鮑恩病；類鮑恩丘疹病；斑形脫髮；抑制手術後瘢痕疙瘩和其它術後疤痕的形成。此外，這些化合物可以促進或刺激傷口的癒合，傷口包括慢性傷口。這些化合物還可以用於治療在例如移植病人、腫瘤病人和HIV病人中，對細胞調節的免疫系統進行抑制後出現的機會性感染和腫瘤。
誘導細胞因子生物合成的化合物的有效量是指足以使一種或多種細胞，例如單核細胞、巨噬細胞、樹突細胞和B-細胞，產生一種或多種細胞因子如IFN-α、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10和IL-12，這些細胞因子的量在其背景水平上顯示增加。確切的用量取決於本領域公知的因素，但是應當期望是在約100ng/kg-約50mg/kg，優選約10μg/kg-約5mg/kg劑量範圍內。本發明也提供了治療動物病毒感染和腫瘤疾病的方法，包括向動物施用治療有效量的本發明化合物或組合物。化合物的治療或抑制病毒感染的有效量是指與未接受治療的對照組化合物相比減少一種或多種病毒感染的表現例如病毒損傷、病毒載荷、病毒產生率和死亡率的化合物的用量。確切的用量取決於本領域公知的因素，但是應當期望是在約100ng/kg-約50mg/kg，優選約10μg/kg-約5mg/kg劑量範圍內。化合物的治療腫瘤疾病有效量是指使腫瘤大小或腫瘤病灶數目減小的化合物的用量。同樣的，確切的用量取決於本領域公知的因素，但是應當期望是在約100ng/kg-約50mg/kg，優選約10μg/kg-約5mg/kg劑量範圍內。
本發明進一步提供了下述實施例，它們只是為了進行說明但不是以任何方式限制本發明。
在下面的實施例中一些化合物採用半製備性HPLC純化。採用了Waters Fraction Lynx自動純化系統。半製備性HPLC中級分用Micromass LC-TOFMS分析，並且合併適宜的級分和離心蒸發得到所需化合物的三氟乙酸鹽。結構用1H NMR確認。
柱Phenomenex Luna C18(2)，10×50mm，顆粒大小5微米，100孔，流速25mL/分鐘；梯度吸脫從5-65％B 4分鐘，然後65-95％B 0.1分鐘，然後在95％B保持0.4分鐘，其中A＝0.05％三氟乙酸/水和B＝0.05％三氟乙酸/乙腈；通過質量選擇控制收集級分。
實施例1N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N』-苯基脲 步驟A
氮氣氣氛中將2-(2-氨基乙氧基)乙醇(29.0g，0.276mol)在180mL四氫呋喃(THF)中的溶液冷卻到0℃，並用140mL的2N氫氧化鈉溶液處理。然後在1個小時內向快速攪拌下的溶液中滴加入一縮二碳酸二叔丁酯(60.2g，0.276mol)在180mL THF中的溶液。然後使反應混合物溫熱到室溫並繼續攪拌18小時。減壓除去四氫呋喃，並通過加入150mL1M硫酸溶液將所得的含水漿液調到pH為3。用乙酸乙酯(300mL，100mL)提取，並用水(2X)和鹽水洗滌合併的有機層。用硫酸鈉乾燥有機相，濃縮得到2-(2-羥基乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯，為無色油狀物(47.1g)。
步驟B在氮氣氣氛中將2-(2-羥基乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯(47.1g，0.230mol)在1L無水二氯甲烷中的溶液冷卻到0℃並用三乙胺(48.0mL，0.345mol)處理。在30分鐘內滴加入甲磺醯氯(19.6mL，0.253mol)。使反應混合物溫熱到室溫並繼續攪拌22小時。加入500mL飽和碳酸氫鈉溶液使反應淬滅並分離有機層。用水(3×500mL)和鹽水洗滌有機相。用硫酸鈉乾燥並濃縮有機相得到甲磺酸2-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙氧基}乙酯，為棕色油狀物(63.5g)。
步驟C用NaN3(16.1g，0.247mol)處理甲磺酸2-{2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙氧基}乙酯(63.5g，0.224mol)在400mL的N，N-二甲基甲醯胺(DMF)中的溶液，反應混合物在氮氣氣氛中加熱到90℃。5小時後溶液冷卻到室溫並用500mL冷水處理。然後用二乙醚(3×300mL)提取反應混合物，並用水(4×100mL)和鹽水(2×100mL)洗滌合併的有機層。有機相用硫酸鎂乾燥並濃縮得到52.0g 2-(2-疊氮基乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯，為淺棕色油狀物。
步驟D用4g的10％鈀/炭處理2-(疊氮基乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯(47.0g，0.204mol)的甲醇溶液並在氫氣氣氛中(3Kg/cm2)振蕩24小時。通過硅藻土墊過濾溶液並濃縮得到35.3g 2-(2-氨基乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯粗產物，為無色液體，它不需進一步純化可直接使用。
步驟E在氮氣氣氛中，用三乙胺(43mL，0.308mol)和2-(2-氨基乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯(0.151mol)處理攪拌中的4-氯-3-硝基喹啉(31.4g，0.151mol)在500mL無水二氯甲烷中的溶液。攪拌過夜，用水(2×300mL)和鹽水(300mL)洗滌反應混合物。有機相用硫酸鈉乾燥並濃縮得到淺黃色固體。用乙酸乙酯/己烷重結晶得到43.6g的2-{2-[(3-硝基喹啉-4-基)氨基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯，為嫩黃色晶體。
步驟F用1.5g的5％鉑/炭處理2-{2-[(3-硝基喹啉-4-基)氨基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯(7.52g，20.0mmol)的甲苯溶液並在氫氣氣氛中(3Kg/cm2)振蕩24小時。通過硅藻土墊過濾溶液並濃縮得到6.92g的2-{2-[(3-氨基喹啉-4-基)氨基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯粗產物，為黃色漿液。
步驟G將2-{2-[(3-氨基喹啉-4-基)氨基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯(10.2g，29.5mmol)在250mL無水二氯甲烷中的溶液冷卻到0℃並用三乙胺(4.18mL，30.0mmol)處理。在5分鐘內滴加入甲氧基丙醯氯(3.30mL，30.3mmol)。使反應混合物溫熱到室溫並繼續攪拌1小時。減壓濃縮反應混合物得到橙色固體。將其溶於250mL乙醇中並加入12.5mL的三乙胺。加熱回流反應混合物並在氮氣氣氛中攪拌過夜。然後將反應混合物濃縮到幹並用300mL的二乙醚處理。過濾混合物並減壓濃縮濾液得到棕色固體。將所得固體溶於200mL熱的甲醇中並用活性炭處理。過濾熱溶液並濃縮得到11.1g的2-{2-[2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯，為黃色漿液。
步驟H用3-氯過氧苯甲酸(MCPBA，77％，9.12g，40.8mmol)處理2-{2-[2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯(10.22g，24.7mmol)在250mL氯仿中的溶液。攪拌30分鐘後用1％碳酸鈉(2×75mL)溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉乾燥有機層並濃縮得到10.6g的2-{2-[2-(2-甲氧基乙基)-5-氧化-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯，為橙色泡沫狀物，不需進一步純化即可使用。
步驟I將2-{2-[2-(2-甲氧基乙基)-5-氧化-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯(10.6g，24.6mmol)在100mL的1，2-二氯乙烷中的溶液加熱到60℃並用10mL濃氫氧化銨溶液處理。10分鐘內，向快速攪拌下的溶液中加入對甲苯磺醯氯(7.05g，37.0mmol)。再用1mL濃氫氧化銨溶液處理反應混合物然後密封在加壓容器中，加熱持續2小時。然後冷卻反應混合物並用100mL氯仿處理。然後用水，1％碳酸鈉溶液(2X)和鹽水洗滌反應混合物。用硫酸鈉乾燥有機層並濃縮得到10.6g的2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯，為棕色泡沫狀物。
步驟J用75mL的2M HCl的乙醇溶液處理2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯(10.6g，24.6mL)並在攪拌下加熱回流混合物。1.5小時後冷卻反應混合物並過濾得到粘性固體。用乙醇和二乙醚洗滌所得固體並真空乾燥得到鹽酸鹽，為淺棕色固體。將該鹽酸鹽溶解到50mL水中並用10％氫氧化鈉溶液處理得到其游離鹼。然後，濃縮含水懸浮液至幹並用氯仿處理所得的殘留物。通過過濾除去所得的鹽並濃縮濾液得到3.82g 1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺，為棕褐色粉末。
MS 330(M+H)+；1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.10(d，J＝8.1Hz，1H)；7.66(α，J＝8.2Hz，1H)；7.40(m1，H；7.25(m，1H)；6.88(br s，2H)；4.78(t，J＝5.4Hz，2H)；3.89(t，J＝4.8Hz，2H)；3.84(t，J＝6.9Hz，2H)；3.54(t，J＝5.4Hz，2H)；3.31(s，3H)；3.23(t，J＝6.6Hz，2H)；2.88(t，J＝5.3Hz，2H).
步驟K在氮氣氣氛中將1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(750mg，2.28mmol)溶解到30mL的無水二氯甲烷中並冷卻到0℃。然後用異氰酸苯酯(247μL，2.28mmol)和三乙胺(0.64mL，4.56mmol)處理所得到的反應混合物，並使之緩慢溫熱到室溫。攪拌2小時後，減壓濃縮反應混合物得到黃色固體。將該黃色固體溶於最少量二氯甲烷中並加入乙酸乙酯直到溶液混濁。將混合物置於冷凍室中過夜直到白色晶體生成。過濾分離晶體並真空乾燥得到126mg的N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N』-苯基脲，熔點171.0-174.0℃。
MS 449(M+H)+；1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.50(s，1H)；8.05(d，J＝7.7Hz，1H)；7.62(d，J＝8.8Hz，1H)；7.44-7.18(m，3H)；7.27-7.18(m，3H)；6.88(t，J＝7.3Hz，1H)；6.54(s，2H)6.12(t，J＝5.5Hz，2H)；4.76(t，J＝4.8Hz，2H)；3.88(t，J＝5.3Hz，2H)；3.81(T，J＝6.7Hz，2H)；3.40(t，J＝6.0Hz，2H)；3.28(s，3H)；3.25-3.14(m，4H)；13C(75MHz，DMSO-d6)δ155.5，152.0，144.9，140.8，132.7，129.0，126.8，126.5，121.5，121.4，120.5，117.9，115.1，70.5，69.4，58.4，45.5，27.6；元素分析理論值C24H28N6O3·0.21 H2O％C，63.73，％H，6.33，％N，18.58.實測值％C，63.33，％H，6.28，％N，18.67.
實施例2N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-6，7，8，9-四氫-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N』-苯基脲
步驟A將1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(10.0g，27.3mmol)溶於50mL三氟乙酸中並用PtO2(1.0g)處理。在氫氣氣氛中(3KG/cm2)振蕩反應混合物，4天後再加入PtO20.5g並進行氫化3天。然後通過硅藻土墊過濾反應混合物，減壓濃縮得到棕色油狀物。將所得的油狀物溶於200mL水中，然後通過加入10％氫氧化鈉溶液調到鹼性(pH～11)。然後用氯仿(5×75mL)提取並用硫酸鈉乾燥合併的有機層，濃縮後得到5.17g 1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-2-(2-甲氧基乙基)-6，7，8，9-四氫-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺，為褐色固體。
MS 334(M+H)+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.19(s，2H)；4.49(t，J＝5.4Hz，2H)；3.84(t，J＝6.6Hz，2H)；3.71(t，J＝5.4Hz，2H)，3.36(t，J＝5.2Hz，2H)；3.51(s，3H)；3.15(t，J＝6.6Hz，2H)；2.95(m，2h)；2.82(m，2H)；2.76(t，J＝5.1Hz，2H)；1.84(m，4H)，1.47(br s，2H).
步驟B在氮氣氣氛中將1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-2-(2-甲氧基乙基)-6，7，8，9-四氫-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(919mg，2.76mmol)溶解到30mL的無水二氯甲烷中並冷卻到0℃。然後用異氰酸苯酯(300μL，2.76mmol)和三乙胺(0.77mL，5.51mmol)處理所得到的反應混合物，並使之緩慢溫熱到室溫。攪拌過夜後，通過加入飽和碳酸氫鈉溶液(30mL)使得反應淬滅。並分離有機層，用水和鹽水洗滌有機相，用硫酸鈉乾燥並減壓濃縮得到黃色固體。用二乙醚(30mL)研磨所得固體並加入數滴甲醇。過濾分離固體並真空乾燥得到460mg N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-6，7，8，9-四氫-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N』-苯基脲，為白色粉末。熔點，180-182℃。
MS 453(M+H)+；1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.51(s，1H)；7.37(d，J＝7.7Hz，2H)；7.19(t，J＝8.2Hz，2H)；6.86(t，J＝7.7Hz，1H)；6.11(t，J＝5.5Hz，2H)；5.70(s，2H)；4.43(t，J＝5.1Hz，2H)；3.78-3.69(m，4H)；3.39(t，J＝5.6Hz，2H)；3.25(s，3H)；3.19(m，2H)；3.10(t，J＝6.8Hz，2H)；2.91(m，2H)；2.64(m，2H)；1.72(m，4H)；13C(75MHz，DMSO-d6)δ155.5，151.3，149.3，146.3，140.8，138.5，129.0，125.0，121.4，118.0，105.6，70.6，70.5，70.4，58.4，44.6，39.2，32.7，27.6，23.8，23.1，23.0；元素分析理論值C24H32N6O3％C，63.70，％H，7.13，％N，18.57.實測值％C，63.33，％H，7.16，％N，18.66.
實施例3N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N-甲基-N』-苯基脲 步驟A在氮氣氣氛中將氫化鈉(60％油懸浮液，9.1g，228mmol)置於圓底燒瓶中並用己烷(3X)洗滌。用800mL無水THF處理乾燥氫化鈉。然後在40分鐘內將2-(2-疊氮基乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯在200mLTHF中的溶液加到攪拌下的氫化鈉溶液中。添加完成後，繼續攪拌反應20分鐘，接著加入碘化鉀(13.6mL，218mmol)。攪拌過夜，加入300mL飽和碳酸氫鈉溶液使反應淬滅。然後，用水200mL和1L二乙醚處理反應混合物。分離有機相併用水和鹽水洗滌有機相。用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮有機相得到41.9g的2-(2-疊氮基乙氧基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯，為黃色液體。
步驟B用2.5g的10％鈀/炭處理2-(2-疊氮基乙氧基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(41.9g，170mmol)在600mL甲醇中的溶液並在氫氣氣氛中(3KG/cm2)振蕩24小時。通過硅藻土墊過濾溶液並濃縮得到37.2g 2-(2-氨基乙氧基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯粗產物，為淺黃色液體。
步驟C用三乙胺(43.1mL，310mmol)和2-(2-氨基乙氧基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(37.2g，171mmol)處理在氮氣氣氛中攪拌下的4-氯-3-硝基喹啉(32.3g，155mmol)。攪拌過夜，用水(2×300mL)和鹽水(300mL)洗滌有機相。用硫酸鈉乾燥並濃縮有機相得到棕色油狀物。通過柱色譜(SiO2，33％乙酸乙酯/己烷-67％乙酸乙酯/己烷)進一步純化得到46.7g甲基(2-{2-[(3-硝基喹啉-4-基)氨基]乙氧基}乙基)氨基甲酸叔丁酯，為黃色固體。
步驟D用0.5g的5％鉑/炭處理甲基(2-{2-[(3-硝基喹啉-4-基)氨基]乙氧基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(6.56g，16.8mmol)在75mL甲苯中的溶液並在氫氣氣氛中(3Kg/cm2)振蕩24小時。通過硅藻土墊過濾溶液並濃縮得到6.8g的2-{2-[(3-氨基喹啉-4-基)氨基]乙氧基}乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯粗產物，為橙色漿液。它不須進一步純化即可使用。
步驟E將2-{2-[(3-氨基喹啉-4-基)氨基]乙氧基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(6.05g，16.8mmol)在200mL無水二氯甲烷中的溶液冷卻到0℃並用三乙胺(2.40mL，17.2mmol)處理。在5分鐘內滴加入甲氧基丙醯氯(1.72mL，17.2mmol)。使反應混合物溫熱到室溫並繼續攪拌3小時。減壓濃縮反應混合物得到橙色固體。將其溶於200mL乙醇中並加入7.2mL的三乙胺。加熱回流反應混合物並在氮氣氣氛中攪拌過夜。然後在減壓下將反應混合物濃縮到幹並用300mL的二乙醚處理。過濾反應混合物並減壓濃縮濾液得到棕色固體。將所得固體溶於300mL二氯甲烷中並用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機層，減壓濃縮得到棕色油狀物。將該油狀物溶於100mL熱的甲醇中並用活性炭處理。過濾熱溶液並濃縮得到7.20g的2-{2-[2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯，為黃色漿液。
步驟F用MCPBA(77％，4.32g，19.3mmol)處理2-{2-[2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(7.20g，16.8mmol)在200mL二氯甲烷中的溶液。攪拌6小時後用飽和碳酸氫鈉溶液處理並分離各層。用水和鹽水洗滌有機相。用硫酸鈉乾燥並濃縮有機相得到7.05g的2-{2-[2-(2-甲氧基乙基)-5-氧化-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯，為淺棕色固體。
步驟G將2-{2-[2-(2-甲氧基乙基)-5-氧化-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(7.05g，15.9mmol)的100mL的1，2-二氯乙烷溶液加熱到80℃並用5mL濃氫氧化銨溶液處理。10分鐘內，向快速攪拌下的溶液中加入固體對甲苯磺醯氯(3.33g，17.5mmol)。再用5mL濃氫氧化銨溶液處理反應混合物然後密封在加壓容器中，加熱持續4小時。然後冷卻反應混合物並用100mL二氯甲烷處理。然後用水，1％碳酸鈉溶液(3X)和鹽水洗滌反應混合物。用硫酸鈉乾燥有機層並濃縮得到6.50g的2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯，為棕色油狀物。
步驟H將2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(6.50g，14.7mmol)溶於100mL乙醇中並用20mL 2M HCl的乙醇溶液進行處理，和在攪拌下加熱回流反應混合物。6小時後冷卻反應混合物並過濾得到粘性固體。用乙醇和二乙醚洗滌所得固體並真空乾燥得到鹽酸鹽，為淺棕色粉末。將該鹽酸鹽溶解到50mL水中並用5mL濃氫氧化銨溶液處理得到其游離鹼。用二氯甲烷(5×50mL)提取水懸浮液。用硫酸鈉乾燥合併的有機層並濃縮，得到3.93g的2-(2-甲氧基乙基)-1-{2-[2-(甲基氨基)乙氧基]乙基}-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺，為褐色粉末。
MS 344(M+H)+。
1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.07(d，J＝7.7Hz，1H)；7.62(dd，J＝1.0，8.3Hz，1H)；7.42(ddd，J＝1.0，7.1，8.2Hz，1H)；7.22(ddd，J＝1.1，7.1，8.2Hz，1H)；6.49(s，2H)；4.75(t，J＝5.1Hz，2H)；3.83(t，J＝6.8Hz，4H)；3.35(t，J＝5.6Hz，2H)；3.30(s，3H)；3.21(t，J＝6.9Hz，2H)；2.45(t，J＝5.6Hz，2H)；2.12(s，3H).
步驟I將2-(2-甲氧基乙基)-1-{2-[2-(甲基氨基)乙氧基]乙基}-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(929mg，2.71mmol)溶解到30mL的無水二氯甲烷中，用異氰酸苯酯(300μL，2.76mmol)處理。在氮氣氣氛下攪拌過夜，減壓濃縮反應混合物。通過柱色譜(SiO2，3％甲醇/用氫氧化銨水溶液飽和的氯仿)純化得到白色固體。用水和甲醇重結晶得到610mg N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N-甲基-N』-苯基脲，為薄片狀白色晶體，熔點184.8-185.8℃。
MS463(M+H)+；1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.16(s，1H)；8.06(d，J＝7.7Hz，1H)；7.61(dd，J＝1.0，8.3Hz，1H)；7.43-7.38(m，3H)；7.25-7.17(m，3H)；6.91(t，J＝7.3Hz，1H)；6.47(s，2H)；4.76(t，J＝5.0Hz，2H)；3.88(t，J＝5.1Hz，2H)；3.78(t，J＝6.8Hz，2H)；3.48(t，J＝5.2Hz，2H)；3.39(t，J＝5.4Hz，2H)；3.27(s，3H)；3.20(t，J＝6.8Hz，2H)；2.82(s，3H)；13C NMR(75MHz，DMSO-d6)δ155.6，152.0，151.9，145.1，140.9，132.7，128.5，126.7，126.6，122.0，121.4，120.5，120.1，115.1，70.5，69.6，69.4，58.4，47.7，45.5，35.4，27.6.元素分析理論值C25H30N6O3·0.12 H2O％C，64.62；％H，6.56；％N，18.08.實測值％C，64.69；％H，6.65；％N，18.09.
實施例4N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-6，7，8，9-四氫-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N-甲基-N』-苯基脲 步驟A將2-(2-甲氧基乙基)-1-{2-[2-(甲基氨基)乙氧基]乙基}-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(4.22g，12.3mmol)溶於25mL三氟乙酸中並用PtO2(0.5g)處理。在氫氣氣氛中(3Kg/cm2)振蕩反應混合物，4天後再加入PtO20.5g並進行氫化3天。然後通過硅藻土墊過濾反應混合物，減壓濃縮得到黃色油狀物。將所得的油狀物溶於50mL水中並用50mL氯仿提取。移開有機層並除去，然後通過加入10％氫氧化鈉溶液將水相調到鹼性(pH～12)。然後用氯仿(6×50mL)提取並用硫酸鈉乾燥合併的有機層，濃縮後得到棕色油狀物。將所得油狀物溶於100mL熱的甲醇中並用1g活性炭處理。通過硅藻土過濾熱溶液並濃縮至幹。用乙醚濃縮所得的粘性固體數次得到3.19g的2-(2-甲氧基乙基)-1-{2-[2-(甲基氨基)乙氧基]乙基}-6，7，8，9-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺，為灰白色粉末。
MS 348(M+H)+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.84(s，2H)；4.48(t，J＝5.7Hz，2H)；3.84(t，J＝6.7Hz，2H)；3.70(t，J＝5.7Hz，2H)；3.46(t，J＝5.1Hz，2H)；3.36(s，3H)；3.14(t，J＝6.7Hz，2H)；2.96(m，2H)；2.83(m，2H)；2.65(t，J＝5.1Hz，2H)；2.36(s，3H)；1.85(m，4H).
步驟B將2-(2-甲氧基乙基)-1-{2-[2-(甲基氨基)乙氧基]乙基}-6，7，8，9-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(750mg，2.16mmol)溶解到30mL的無水二氯甲烷中，用異氰酸苯酯(239μL，2.20mmol)處理。在氮氣氣氛中攪拌過夜，減壓濃縮反應混合物。用乙酸乙酯和二氯甲烷結晶得到170mg N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-6，7，8，9-四氫-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N-甲基-N』-苯基脲，為蓬鬆的白色晶體。熔點167.7-170.0℃。
MS 467(M+H)+；1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.17(s，1H)；7.43(d，J＝7.6Hz，2H)；7.21(t，J＝7.9Hz，2H)；6.91(t，J＝7.3Hz，1H)；5.65(s，2H)；4.43(t，J＝5.0Hz，2H)；3.72(t，J＝7.0Hz，2H)；3.70(t，J＝5.2Hz，2H)；3.46-3.41(m，4H)；3.24(s，3H)；3.07(t，J＝6.9Hz，2H)；2.92(m，2H)；2.85(s，3H)；2.64(m，2H)；1.72(m，4H)；13C NMR(75MHz，DMSO-d6)δ155.6，151.2，149.3，146.3，140.9，138.4，128.5，124.9，122.0，120.1，105.5，70.7，70.5，69.5，58.4，48.0，44.6，35.5，32.8，27.6，23.8，23.1，23.0.元素分析理論值C25H34N6O3％C，64.36；％H，7.35；％N，18.01.實測值％C，64.04；％H，7.38；％N，18.02.
實施例5N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)嗎啉-4-甲醯胺 在氮氣氣氛中，在溫和加熱後劇烈攪拌下將1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(0.75g，2.3mmol)溶於二氯甲烷(30mL)和三乙胺(0.64mL，4.6mmol)。在冰水浴中冷卻所得溶液並滴加入4-嗎啉甲醯氯(0.27mL，2.3mmol)。移去冰浴並繼續攪拌4小時。通過加入飽和碳酸氫鈉溶液(25mL)使得反應淬滅。並分離各層，用水(3×25mL)和鹽水(25mL)洗滌有機相，乾燥(硫酸鈉)，過濾並濃縮得到黃色泡沫狀物。產物用二氯甲烷和乙酸乙酯重結晶。晶體用醚(2×5mL)研磨並除去殘餘的溶劑。真空乾燥最後的產物得到200mg N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)嗎啉-4-甲醯胺。為褐色晶體，熔點164-166℃。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.06(d，J＝8.1Hz，1H)，7.61(d，J＝7.3Hz，1H)，7.42(t，J＝7.2Hz，1H)，7.23(t，J＝7.8Hz，1H)，6.51(s，2H)，6.33(t，J＝5.0Hz，1H)，4.74(t，J＝4.3Hz，2H)，3.85-3.81(m，4H)，3.49(t，J＝4.3Hz，4H)，3.33(t，J＝5.9Hz，2H)，3.30(s，3H)，3.21(t，J＝6.8Hz，2H)，3.14(t，J＝4.5Hz，4H)，3.08(t，J＝6.0Hz，2H)；13C NMR(75MHz，DMSO-d6)δ157.8，151.9，145.0，132.7，126.7，126.6，121.4，120.5，115.1，70.4，70.2.，69.2，58.4，45.5，44.0，27.6；元素分析理論值C22H30N6O4％C，59.71，％H，6.83，％N，18.99.實測值％C，59.71，％H，6.80，％N，18.78；MS(CI)m/e 443(M+H)實施例6N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N-甲基嗎啉-4-甲醯胺 在氮氣氣氛中將2-(2-甲氧基乙基)-1-{2-[2-(甲基氨基)乙氧基]乙基}-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(802mg，2.34mmol)溶解到30mL的無水二氯甲烷中並冷卻到0℃。然後向攪拌下的溶液中加入三乙胺(0.65mL，4.68mmol)和嗎啉甲醯氯(273μL，2.34mmol)，並使之過夜溫熱到室溫。通過加入飽和碳酸氫鈉溶液(30mL)和二氯甲烷(30mL)使得反應混合物淬滅。並分離有機層，用水和鹽水洗滌有機相，用硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。通過柱色譜(SiO2，2-5％甲醇/用氫氧化銨水溶液飽和的氯仿)進一步純化得到產物，為無色泡沫狀物。用乙酸乙酯結晶得到640mg N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N-甲基嗎啉-4-甲醯胺，為白色晶體。熔點，121.8-122.3℃。
MS 457(m+H)+；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.06(dd，J＝0.9，8.3Hz，1H)；7.61(dd，J＝1.1，8.3Hz，1H)；7.41(ddd，J＝1.2，7.0，8.3Hz，1H)；7.22(ddd，J＝1.3，7.0，8.1Hz，1H)；6.44(s，2H)；4.74(t，J＝5.2Hz，2H)；3.84(t，J＝5.2Hz，2H)；3.82(t，J＝6.9Hz，2H)；3.50-3.43(m，6H)；3.30(s，3H)；3.20(t，J＝6.9Hz，2H)；3.16(t，J＝5.5Hz，2H)；2.88(t，J＝4.7Hz，4H)；2.59(s，3H)；13C NMR(75MHz，DMSO-d6)δ163.8，152.0，151.8，145.2，132.7，126.7，121.3，120.6，115.1，70.4，69.4，68.9，66.1，58.5，49.1，47.3，45.5，36.9，27.7.
元素分析理論值C23H32N6O4％C，60.51；％H，7.07；％N，8.41.實測值％C，60.56；％H，6.85；％N，18.19.
實施例7-21步驟A用原戊酸三乙酯(2.5mL，14.5mmol)處理2-{2-[(3-氨基喹啉-4-基)氨基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯(3.46g，10.0mmol)在50mL甲苯中的溶液並加熱回流反應混合物。然後加入25mg份的吡啶鎓鹽酸鹽並繼續回流4小時。將反應混合物減壓濃縮至幹。將殘留物溶於50mL二氯甲烷中並用飽和碳酸氫鈉，水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機層並濃縮得到綠色油狀物。將該油狀物溶50mL熱的甲醇中並用活性炭處理。過濾熱溶液並濃縮得到4.12g 2-[2-(2-丁基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯，為黃色油狀物。
步驟B用3-氯過氧苯甲酸(MCPBA，77％，2.5g，11.2mmol)處理2-[2-(2-丁基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯(4.12g，10.0mmol)在50mL二氯甲烷中的溶液。攪拌5小時後用飽和碳酸氫鈉溶液處理並分離各層。用水和鹽水洗滌有機相。用硫酸鈉乾燥並濃縮有機相得到3.68g的2-[2-(2-丁基-5-氧化-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯，為淺棕色泡沫狀物。
步驟C將2-[2-(2-丁基-5-氧化-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯(3.68g，8.60mmol)在100mL 1，2-二氯乙烷中的溶液加熱到80℃並用10mL濃氫氧化銨溶液處理。10分鐘內，向快速攪拌下的溶液中加入固體對甲苯磺醯氯(1.87g，9.81mmol)。然後將反應混合物密封在加壓容器中，加熱持續2小時。然後冷卻反應混合物並用100mL二氯甲烷處理。然後用水，1％碳酸鈉溶液(3X)和鹽水洗滌反應混合物。用硫酸鈉乾燥有機層並濃縮得到3.68g的2-[2-(4-氨基-2-丁基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯，為淺棕色泡沫狀物。
步驟D將2-[2-(4-氨基-2-丁基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯(3.68g，8.60mmol)懸浮於20mL 2M HCl的乙醇溶液中並在攪拌下加熱回流所得的混合物。3小時後濃縮反應混合物得到固體。固體用熱的乙醇(50mL)進行研磨並過濾得到2.90g產物，為鹽酸鹽。將該鹽酸鹽溶解到50mL水中並用5mL濃氫氧化銨溶液處理得到其游離鹼。用二氯甲烷(3×50mL)提取水懸浮液。用硫酸鈉乾燥合併的有機層，濃縮得到1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-2-丁基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺，為褐色粉末。
MS 328(M+H)+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.95(d，J＝8.3Hz，1H)；7.83(d，J＝8.4Hz，1H)；7.50(m，1H)；7.30(m，1H)；5.41(s，2H)；4.69(t，J＝5.6Hz，2H)；3.93(t，J＝5.6Hz，2H)；3.39(t，J＝5.1Hz，2H)；2.97(t，J＝7.9Hz，2H)；2.76(t，J＝5.1Hz，2H0；1.89(m，2H)；1.52(m，2H)；1.26(br s，2H)；1.01(t，J＝7.3Hz，3H).
步驟E採用下述的一般方法，根據前面反應流程(I)步驟(7)的合成方法，可以製備下表所列的化合物。
將異氰酸酯(84μmol)加到含有1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-2-丁基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(25mg，76μmol)的二氯甲烷(5mL)溶液的試管中。給試管加塞，然後在室溫下在振動器中放置20小時。通過真空離心除去溶劑。採用上述的方法通過半製備HPLC純化殘留物。下表中列出了游離鹼的結構和所觀測到的精確質量(M+H)。



實施例22-36步驟A採用實施例7-21步驟A的一般方法，使4-哌啶乙醇(10g，77.4mmol)與一縮二碳酸二叔丁酯(17.7g，81.3mmol)反應得到13.1g的4-(2-羥基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，為澄清油狀物。
步驟B將碘(7.97g)分成3份加到咪唑(3.89g，57.1mmol)和三苯膦(14.98g，57.1mmol)的二氯甲烷(350mL)溶液中。5分鐘後加入步驟A物質的二氯甲烷(70mL)溶液。在室溫下攪拌反應混合物過夜。加入更多的碘(7.97g)並在室溫攪拌反應1小時。用飽和硫代硫酸鈉溶液(2X)和鹽水洗滌反應混合物，用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮得到油狀殘留物。通過柱色譜(用20％乙酸乙酯/己烷洗脫矽膠)純化得到15.52g的4-(2-碘乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，為淺黃色油狀物。
步驟C在氮氣氣氛中，將2-(1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)丁-1-醇(6.5g，26.9mmol)分三份加到氫化鈉(1.4g，60％，35.0mmol)的無水N，N-二甲基甲醯胺懸浮液中。攪拌反應混合物45分鐘直到氣體不再產生。在15分鐘內滴加入4-(2-碘乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(10.05g，29.6mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2.5小時，然後加熱到100℃並攪拌過夜。HPLC分析表明反應完成約35％。加入飽和氯化銨溶液，攪拌所得混合物20分鐘，然後用乙酸乙酯(2X)提取。用水(2X)和鹽水洗滌乙酸乙酯提取物，用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮得到棕色油狀物。所得油狀物通過柱色譜純化(順序用30％乙酸乙酯/己烷，50％乙酸乙酯/己烷和乙酸乙酯洗脫矽膠)得到2.2g的4-{2-[2-(1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)丁氧基]乙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯。
步驟D採用實施例7-21步驟H的一般方法，氧化步驟C產物得到4-{2-[2-(5-氧化-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)丁氧基]乙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯，為油狀物。
步驟E將氫氧化銨溶液(20mL)加到步驟D產物的二氯甲烷(20mL)溶液中，在5分鐘內加入甲苯磺醯氯(0.99g，5.2mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液。攪拌所得的兩相的反應混合物過夜，用氯仿和飽和碳酸氫鈉溶液稀釋反應混合物。分離各層。有機層用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮得到棕色玻璃狀物。通過柱色譜(先用50％乙酸乙酯/己烷再用乙酸乙酯洗脫矽膠)純化該物質，得到1.0g的4-{2-[2-(4-氨基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)丁氧基]乙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯，為淺黃色玻璃樣泡沫狀物。
步驟F在氮氣氣氛中，混合4-{2-[2-(4-氨基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)丁氧基]乙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.00g，2.1mmol)和2N氫氯酸乙醇溶液(10mL，20mmol)並在室溫攪拌所得溶液14小時。真空除去溶劑，將得到的固體溶於水中。加入飽和碳酸鈉水溶液直到pH10。用二氯甲烷(3X)提取後，合併有機層，用水和鹽水洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾並真空除去絕大多數溶劑。加入己烷得到沉澱。真空過濾得到0.5g的1-{1-[(2-哌啶-4-基乙氧基)甲基]丙基}-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺，為褐色粉末。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.34(bs，1H)，8.19(d，J＝8.49Hz，1H)，7.61(dd，J＝8.31，1.13Hz，1H)，7.45-7.39(m，1H)，7.25-7.19(m，1H)，6.55(s，2H)，5.25-5.15(m，1H)，4.00-3.80(m，2H)，3.5-3.3(m，2H)，2.8-2.64(m，H)，2.22-2.11(m，2H)，2.09-1.99(m，2H)，1.8-1.63(bs，1H)，1.37-1.0(m，5H)，0.95-0.7(m，5H)；13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ152.8，145.8，140.6，133.0，127.8，127.0，126.9，121.3，121.0，115.5，71.8，68.1，58.4，46.1，36.3，33.1，32.7，24.5，9.9；MS(CI)m/e 368.2459(368.2450 C21H30N5O理論值).
步驟G採用下述的一般方法，根據前面反應流程(I)步驟(7)的合成方法，可以製備下表所列的化合物。
將異氰酸酯或硫代異氰酸酯(75μmol)加到含有1-{1-[(2-哌啶-4-基乙氧基)甲基]丙基}-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(25mg，68μmol)的二氯甲烷(5mL)溶液的試管中。給試管加塞，然後在室溫下在振動器中放置20小時。通過真空離心除去溶劑。採用上述的方法通過半製備HPLC純化殘留物。下表中列出了游離鹼的結構和所觀測到的精確質量(M+H)。



實施例37-44步驟A用原甲酸三乙酯(4.65mL，28.0mmol)處理2-{2-[(3-氨基喹啉-4-基)氨基]乙氧基}乙基氨基甲酸叔丁酯(6.92g，20.0mmol)在100mL甲苯中的溶液並加熱回流反應混合物。然後加入100mg份的吡啶鎓鹽酸鹽並繼續回流2小時。將反應混合物減壓濃縮至幹。將殘留物溶於200mL二氯甲烷中並用飽和碳酸氫鈉，水和鹽水洗滌。用硫酸鈉乾燥有機層並濃縮得到綠色油狀物。將該油狀物溶於200mL熱的甲醇中並用10g活性炭處理。過濾熱溶液並濃縮得到5.25g 2-[2-(1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯，為淺黃色漿液。
步驟B用3-氯過氧苯甲酸(MCPBA，77％，3.63g，16.3mmol)處理2-[2-(1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯(5.25g，14.7mmol)在200mL二氯甲烷中的溶液。攪拌過夜後用飽和碳酸氫鈉溶液處理並分離各層。用水和鹽水洗滌有機相。用硫酸鈉乾燥並濃縮有機相得到4.60g的2-[2-(5-氧化-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯，為淺棕色泡沫狀物。
步驟C將2-[2-(5-氧化-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯(4.60g，12.4mmol)在150mL 1，2-二氯乙烷中的溶液加熱到80℃並用10mL濃氫氧化銨溶液處理。10分鐘內，向快速攪拌下的溶液中加入固體對甲苯磺醯氯(2.71g，14.2mmol)。再用2mL濃氫氧化銨溶液處理反應混合物然後將反應混合物密封在加壓容器中，加熱持續3小時。然後冷卻反應混合物並用100mL二氯甲烷處理。然後用水，1％碳酸鈉溶液(3X)和鹽水洗滌反應混合物。用硫酸鈉乾燥有機層並濃縮得到4.56g的2-[2-(4-氨基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯，為淺棕色泡沫狀物。
步驟D將2-[2-(4-氨基-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基)乙氧基]乙基氨基甲酸叔丁酯(4.56g，12.3mmol)溶於100mL乙醇中並用30mL 2M HCl的乙醇溶液處理，並在攪拌下加熱回流所得的混合物。3小時後濃縮反應混合物得到固體。固體用熱的乙醇(100mL)進行研磨並過濾得到產物，為鹽酸鹽。將該鹽酸鹽溶解到50mL水中並用5mL濃氫氧化銨溶液處理得到其游離鹼。用二氯甲烷(5×50mL)提取水懸浮液。用硫酸鈉乾燥合併的有機層，濃縮得到1.35g 1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺，為褐色粉末。
MS 272(M+H)+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.98(d，J＝8.2Hz，1H)；7.88(s，1H)；7.84(d，J＝8.4Hz，1H)；7.54(m，1H)；7.32(m，1H)；5.43(s，2H)；4.74(t，J＝5.2Hz，2H)；3.97(t，J＝5.2Hz，2H)；3.42(t，J＝5.1Hz，2H)；2.78(t，J＝5.1Hz，2H)；1.10(br s，2H).
步驟E採用下述的一般方法，根據前面反應流程(I)步驟(7)的合成方法，可以製備下表所列的化合物。
在試管中混合1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-4-胺(20mg，74μmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(5mL)，然後加熱下超聲振動得到溶液。加入異氰酸酯(81μmol)，給試管加塞，然後在室溫下在振動器中放置20小時。通過真空離心除去溶劑。採用上述的方法通過半製備HPLC純化殘留物。下表中列出了游離鹼的結構和所觀測到的精確質量(M+H)。


在人細胞中的細胞因子誘導作用採用體外人血細胞體系來評估細胞因子誘導作用。如Testerman等在「Cytokine Induction by the Immunomodulators Imiquimod and S-27609」，Journal of Leukocyte Biology，58，365-372(1995年9月)中所述，活性是建立在對分泌到培養基中的幹擾素(α)和腫瘤壞死因子(α)(分別為IFN和TNF)進行測量的基礎上的。
培養用的血液細胞製備物將通過靜脈穿刺將從健康人捐獻者獲得的全血置於EDTAvacutainer管中採用Histopaque-1077通過密度梯度離心從全血中分離周圍血液單核細胞(PBMC)。用Hank氏平衡鹽溶液洗滌PBMC兩次，然後以3-4×106細胞/mL懸浮在RPMI完全培養基中。將PBMC懸浮液加到放置了等體積含試驗化合物的RPMI完全培養基的48孔平底無菌組織培養板中(Costar，Cambridge，MA或 Becton DickinsonLabware，Lincoln Park，NJ)。
化合物製備物將化合物溶解到二甲亞碸(DMSO)中。在向培養板孔中加樣時DMSO的濃度不得超過最終濃度的1％。
培養將試驗化合物的溶液加到含RPMI完全培養基的孔1中，然後在各孔中製備依次稀釋的稀釋液。隨後，向各孔中加入等體積的PBMC懸浮液，使得試驗化合物的濃度在所需的範圍。最終PBMC懸浮液的濃度在1.5-2×106細胞/mL。用無菌塑料蓋子蓋板，輕輕混勻，然後在37℃在5％二氧化碳氣氛中培養18-24小時。
分離培養後在4℃以1000rpm(～200×g)離心板5-10分鐘，用無菌聚丙烯吸量管移去無細胞存在的培養上清液並轉移到聚丙烯管中。在分析前樣品保持在-30℃到-70℃。通過ELISA對樣品進行幹擾素(α)和腫瘤壞死因子(α)分析。
通過ELISA對樣品進行幹擾素(α)和腫瘤壞死因子(α)分析採用Human Multi-Species試劑盒(PBL Biomedical Laboratories，New Brunswick，NJ)通過ELISA測定幹擾素(α)濃度。測定結果以pg/mL表示。
採用ELISA試劑盒(Genzyme，Cambridge，MA；RD Systems，Minneapolis，MN；或Pharmingen，San Diego，CA)測定腫瘤壞死因子(α)濃度。測定結果以pg/mL表示。
下表列出了各個化合物可誘導幹擾素和腫瘤壞死因子的最低濃度。A「*」表示在任何試驗化合物濃度下均未觀察到誘導作用；通常最高試驗濃度是10或30μM。
權利要求
1.式(I)化合物或其可藥用鹽 其中X表示-CHR5-，-CHR5-烷基-，或者-CHR5-烯基-；R1表示選自下述的基團-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜環基；-R4-NR8-CR3-NR5R7；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜芳基；和-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜環基；R2表示選自下述的基團-氫；-烷基；-烯基；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-烷基-Y-烷基；-烷基-Y-烯基；-烷基-Y-芳基；和被一個或多個選自下述的取代基取代的-烷基或-烯基-OH；-滷素；-N(R5)2；-CO-N(R5)2；-CO-C1-10烷基；-CO-O-C1-10烷基；-N3；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-CO-芳基；和-CO-雜芳基；各個R3表示＝O或＝S；各個R4各自獨立地表示烷基或者烯基，其可以被一個或多個-O-基所打斷；各個R5各自獨立地表示H或C1-10烷基；R6表示鍵，烷基，或者烯基，其可以被一個或多個-O-基所打斷；R7表示H或C1-10烷基，其可以被雜原子所打斷；或者R7和R5連接到一起形成環；R8表示H，C1-10烷基，或芳烷基；或者R4和R8連接到一起形成環；R9表示C1-10烷基，其可以和R8連接到一起形成環；各個Y各自獨立地表示-O-或-S(O)0-2-；Z表示鍵，-CO-或-SO2-；n是0-4；和各個存在的R各自獨立地選自下述的基團C1-10烷基，C1-10烷氧基，羥基，滷素和三氟甲基。
2.根據權利要求1的化合物或鹽，其中X表示-CH(烷基)(烷基)-，其中烷基可相同或不同。
3.根據權利要求1的化合物或鹽，其中X表示-CH2-CH2-。
4.根據權利要求1的化合物或鹽，其中X表示-CH(C2H5)(CH2)-。
5.根據權利要求1的化合物或鹽，其中R2是H。
6.根據權利要求1的化合物或鹽，其中R2是烷基。
7.根據權利要求1的化合物或鹽，其中R2是-烷基-O-烷基。
8.選自下述的化合物或其可藥用鹽N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N』-苯基脲；N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-6，7，8，9-四氫-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N』-苯基脲；N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)嗎啉-4-甲醯胺；N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N-甲基嗎啉-4-甲醯胺；N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N-甲基-N』-苯基脲；和N-(2-{2-[4-氨基-2-(2-甲氧基乙基)-6，7，8，9-四氫-1H-咪唑並[4，5-c]喹啉-1-基]乙氧基}乙基)-N-甲基-N』-苯基脲。
9.下式(II)所示化合物或其可藥用鹽 其中X表示-CHR5-，-CHR5-烷基-，或者-CHR5-烯基-；R1表示選自下述的基團-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜環基；-R4-NR8-C3-NR5R7；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜芳基；和-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜環基；R2表示選自下述的基團-氫；-烷基；-烯基；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-烷基-Y-烷基；-烷基-Y-烯基；-烷基-Y-芳基；和被一個或多個選自下述的取代基取代的-烷基或-烯基-OH；-滷素；-N(R5)2；-CO-N(R5)2；-CO-C1-10烷基；-CO-O-C1-10烷基；-N3；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-CO-芳基；和-CO-雜芳基；各個R3表示＝O或＝S；各個R4各自獨立地表示烷基或者烯基，其可以被一個或多個-O-基所打斷；各個R5各自獨立地表示H或C1-10烷基；R6表示鍵，烷基，或者烯基，其可以被一個或多個-O-基所打斷；R7表示H或C1-10烷基，其可以被雜原子所打斷；或者R7和R5連接到一起形成環；R8表示H，C1-10烷基，或芳烷基；或者R4和R8連接到一起形成環；R9表示C1-10烷基，其可以和R8連接到一起形成環；各個Y各自獨立地表示-O-或-S(O)0-2-；Z表示鍵，-CO-或-SO2-；n是0-4；和各個存在的R各自獨立地選自下述的基團C1-10烷基，C1-10烷氧基，羥基，滷素和三氟甲基。
10.根據權利要求9的化合物或鹽，其中R2是H或烷基。
11.根據權利要求9的化合物或鹽，其中R2是-烷基-O-烷基。
12.含有治療有效量的權利要求1化合物或鹽和可藥用載體的藥物組合物。
13.誘導動物中細胞因子生物合成的方法，包括向動物施用治療有效量的權利要求1化合物或鹽。
14.根據權利要求13的方法，其中細胞因子是IFN-α。
15.治療動物病毒性疾病的方法，包括向動物施用治療有效量的權利要求1化合物或鹽。
16.治療動物腫瘤疾病的方法，包括向動物施用治療有效量的權利要求1化合物或鹽。
17.式(III)所示化合物或其可藥用鹽 其中X表示-CHR5-，-CHR5-烷基-，或者-CHR5-烯基-；R1表示選自下述的基團-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜環基；-R4-NR8-CR3-NR5R7；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜芳基；和-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜環基；R2表示選自下述的基團-氫；-烷基；-烯基；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-烷基-Y-烷基；-烷基-Y-烯基；-烷基-Y-芳基；和被一個或多個選自下述的取代基取代的-烷基或-烯基-OH；-滷素；-N(R5)2；-CO-N(R5)2；-CO-C1-10烷基；-CO-O-C1-10烷基；-N3；-芳基；-雜芳基；-雜環基；-CO-芳基；和-CO-雜芳基；各個R3表示＝O或＝S；各個R4各自獨立地表示烷基或者烯基，其可以被一個或多個-O-基所打斷；各個R5各自獨立地表示H或C1-10烷基；R6表示鍵，烷基，或者烯基，其可以被一個或多個-O-基所打斷；R7表示H或C1-10烷基，其可以被雜原子所打斷；或者R7和R5連接到一起形成環；R8表示H，C1-10烷基，或芳烷基；或者R4和R8連接到一起形成環；R9表示C1-10烷基，其可以和R8連接到一起形成環；各個Y各自獨立地表示-O-或-S(O)0-2-；Z表示鍵，-CO-或-SO2-；n是0-4；和各個存在的R各自獨立地表示選自下述的基團C1-10烷基，C1-10烷氧基，羥基，滷素和三氟甲基。
18.式(IV)所示的化合物或其可藥用鹽 其中X表示-CHR5-，-CHR5-亞烷基-，或者-CHR5-亞烯基-；R1表示選自下述的基團-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜芳基；-R4-NR8-CR3-NR5-Z-R6-雜環基；-R4-NR8-CR3-NR5R7；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烷基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-烯基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-芳基；-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜芳基；和-R4-NR8-CR3-NR9-Z-R6-雜環基；各個Y各自獨立地表示-O-或-S(O)0-2-；Z表示鍵，-CO-或-SO2-；各個R4各自獨立地表示烷基或者烯基，其可以被一個或多個-O-基所打斷；各個R5各自獨立地表示H或C1-10烷基；R6表示鍵，烷基，或者烯基，其可以被一個或多個-O-基所打斷；R7表示H或C1-10烷基，其可以被雜原子所打斷；或者R7和R5連接到一起形成環；R8表示H，C1-10烷基，或芳烷基；或者R4和R8連接到一起形成環；R9表示C1-10烷基，其可以和R8連接到一起形成環；n是0-4；和各個存在的R各自獨立地表示選自下述的基團C1-10烷基，C1-10烷氧基，滷素和三氟甲基。
19.含有治療有效量的權利要求9化合物或鹽和可藥用載體的藥物組合物。
20.誘導動物中細胞因子生物合成的方法，包括向動物施用治療有效量的權利要求9化合物或鹽。
21.根據權利要求20的方法，其中細胞因子是IFN-α。
22.治療動物病毒性疾病的方法，包括向動物施用治療有效量的權利要求9化合物或鹽。
23.治療動物腫瘤疾病的方法，包括向動物施用治療有效量的權利要求9化合物或鹽。
全文摘要
在1－位含有醚和脲官能基的咪唑並喹啉和四氫咪唑並喹啉化合物可以用作免疫反應調節劑。本發明的上述化合物和組合物可以誘導多種細胞因子的生物合成並可用於治療多種疾病包括病毒性疾病和腫瘤疾病。
文檔編號C07D471/02GK1537111SQ01819907
公開日2004年10月13日 申請日期2001年12月6日 優先權日2000年12月8日
發明者史蒂芬·L·克魯克斯, 喬治·W·格裡斯格雷伯, 菲利普·D·黑普納, 布裡翁·A·梅裡爾, A 梅裡爾, D 黑普納, W 格裡斯格雷伯, 史蒂芬 L 克魯克斯 申請人:3M創新有限公司