一種蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用的製作方法

2024-04-02 17:00:05

專利名稱：一種蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用的製作方法
技術領域：
本發明屬於生物技術領域，涉及細菌及其應用，具體是指一種蛭弧菌在 消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用，特別適用於畜禽養殖環境、禽蛋 肉的保藏及其加工過程中常見致病菌的消除。
背景技術：
食品安全已經成為全世界共同關注的問題，世界衛生組織(WHO)將食品 安全看作是一個世界性的挑戰。近年來，全球食品安全惡性事件頻發，食源 性疾病已成為影響公共健康的重要問題。據WH0統計，發達國家每年約有三分 之一的人感染食源性疾病，而一些發展中國家，食源性疾病往往是致人非正 常死亡的主要原因。多方面的研究和調査結果顯示，除意外事故和人為因素 以外，食源性疾病主要是由微生物和化學藥物所引起的。根據中美兩國CDC 近10年的統計結果，在中美兩國由微生物引起的食源性疾病均佔總數的50% 左右，而化學物質引起的食源性疾病佔總數的比率在美國是1%左右，在中國 是27%左右。國內外的各種資料和統計數據表明微生物是引起食源性疾病的罪 魁禍首。近20年來，我國的畜牧業和水產養殖業得到了迅猛的發展，其產品 佔整個食品行業的比重越來越大，肉、乳、蛋和水產品是動物性食品中的主 要種類。根據全國飼料工作辦公室的統計結果，我國肉類產品2003年的產量 為6920萬噸、禽蛋量為2606.8萬噸，肉類和蛋類的年產量均為全世界第一。 但是，我國肉類的年出口量僅為60多萬噸，不到總量的1%，禽蛋類的出口 量更是微乎其微，其原因之一是微生物汙染等食品安全問題。引發食源性疾 病的微生物普遍存在，但並不是時時刻刻都會引起食源性疾病，這些致病微 生物與其周圍的非致病菌及環境存在著相互制約的關係，處於微生態的平衡 狀態，而當這種平衡被打破以後，致病的微生物大肆生長，從而導致食源性 疾病暴發。我國環境的惡化和生態的破壞使這一問題日益突出。
對於禽蛋及肉類攜帶的致病菌的控制，目前還沒有任何資料報導，現有 的資料只是從畜禽養殖過程中採取一些措施，例如使用抗生素，以消除或
者減少其活體攜帶的致病菌，雖然這種源頭措施或有一定的預防效果，但是 對畜禽有副作用，直接影響了禽蛋及肉的質量。例如抗生素的濫用，導致了
致病菌對抗生素產生抗藥性；疫苗的使用雖然是個途徑，但免疫效果不明顯， 特別是目前人們為了增強疫苗的免疫效果，選用的毒株越來越強，反而有潛 在的致病危險。然而，蛭弧菌作為一類具有裂解致病菌的特殊細菌，不僅可 應用到畜禽從養殖到食用前的全過程，而且不會導致細菌出現抗性，也無噬 菌體療法中宿主過於專一的缺點，因此蛭弧菌作為一類致病菌的生物消除劑 具有相當的優勢。
如能在畜禽從養殖、畜禽產品運輸、食用或加工前，先進行致病菌的生 物消除工作，則可以減少或消除食物中毒的機率，特別是可為禽蛋及肉產品 的加工提供優質原材料和加工上的便利。因此，利用蛭弧菌消除禽蛋及肉類 攜帶的致病菌以提高和改善禽蛋及肉的安全性，對人類健康和我國禽蛋及肉 類加工業的發展具有十分重要的意義。

發明內容
本發明的目的在於克服現有技術的弊端，通過研發找出適用於消除禽蛋 及肉類攜帶的常見致病菌的蛭弧菌，從而提供一種高效、無毒無副作用的蛭 弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用。
為了達到上述目的，本發明的主要技術方案如下
一種蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用，其特徵在於 應用方法包括以下具體步驟及其條件 步驟一蛭弧菌的分離純化
對採集的水體或底泥進行預處理，接種增殖蛭弧菌的嗜水氣單胞菌，倒 雙層平板，在含宿主菌的雙層平板上出現噬菌斑，挑取不斷擴大的單斑，再 按微生物學方法液體增殖培養、雙層平板檢驗，再次挑取不斷擴大的單斑， 並重複若干次，至單噬菌斑傳代形成形狀、大小、透明度均一致的噬菌斑， 即為一株蛭弧菌純菌株，按同一時間內單斑大小計，分離出2株蛭弧菌純菌株，
所述蛭弧菌於2008年1月13日在位於中國武漢市武漢大學內的中國典型培養 物保藏中心保藏，^/e77op^力rio5^ BDFOl，保藏編號為CCTCCNO: M 208008 和^/eWow77rio 5"p. BDF02，保藏編號為CCTCC NO: M 208009;
步驟二蛭弧菌液的製備
將2株蛭弧菌分別進行發酵培養，分別製成濃度為102 1012pfWml的蛭 弧菌液，待用；
步驟三蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用 採用上述2株蛭弧菌按任意比例混合的蛭弧菌混合液或單株蛭弧菌液， 以噴灑或者擦塗或者浸漬的方法處理攜帶有致病菌的禽蛋及肉類產品，其中 採用浸漬的方法蛭弧菌濃度至少達到102pfo/ml，其優選範圍為104 106pfu/ml;採用噴灑或者擦塗的方法使用濃度》l(^pfii/ml的蛭弧菌液時， 直接用於禽蛋及肉類產品，其使用量至少達到15ml/kg,優選使用量範圍為 35-55ml/kg;應用於環境，其使用量至少達到10ml/m2。
所述蛭弧菌混合液的最佳混合比例為BDF01:BDF02為1:1。 所述應用環境包括畜禽養殖場養殖環境、保藏環境和禽蛋及肉類產品運 輸工具、加工過程。
所述應用方法用於畜禽養殖場養殖環境致病菌的消除時，採用噴灑的方 法當使用濃度》l(^pfii/ml的蛭弧菌液時，優選使用量範圍為35 55ml/m2。 所述應用方法用於禽蛋及肉類保藏或運輸環境中致病菌的消除時，採用 噴灑的方法當使用濃度^l(^pfii/ml的蛭弧菌液時，優選使用量範圍為30 50ml/m2。
本發明與現有技術相比，具有如下突出的優點和顯著的效果 1、採用本法消除禽蛋及肉類攜帶的致病菌的效果顯著 本應用克服了抗生素濫用帶來的副作用，也克服了疫苗免疫效果不明顯 而噬菌體療法中宿主過於專一的缺點，為消除禽蛋及肉類所攜帶的食源性致
病菌提供了一種新方法，該方法可適用於從"養殖到餐桌"包括禽蛋肉類加 工在內的全過程。
(1) 用於畜禽養殖場養殖環境致病菌的消除時，可明顯的減少養殖環境 中的致病菌的數量，可以防止或減少畜禽動物的患病率，從而提高畜禽養殖 環境的質量以及改善畜禽動物產品的品質，同時也防止人患豬鏈球菌病的可 能。從根本上減少乃至杜絕致病菌所引發的食源性疾病，確保人的健康安全。
(2) 用於禽蛋及肉類保藏、運輸環境中致病菌的消除時，以新鮮的雞蛋、 鴨蛋、豬肉、豬肉為例，檢測結果如圖1和圖2所示，對沙門氏菌(5Wmo^/^
Sp)，豬鏈球菌(S&印toCOCCWS SM&)，梭狀芽胞桿菌(C70S^TiVj'i/i77Sp)及大腸
桿菌(五^/^r/c/z^ co/z')的清除率均可達99%以上。可有效地延長在常溫或者低 溫下的保藏時間，防止或延緩禽蛋及肉腐敗變質，同時避免使用化學防腐劑， 方便、安全且效果好，直接提高了產品品質。
(3)本應用方法特別適用於禽蛋及肉類加工過程中，為加工提供優質原 材料和加工上的便利，確保禽蛋類加工產品的優質，有效地解決了食品安全 問題。
2、 採用本發明消除禽蛋及肉類攜帶致病菌安全性好 蛭弧菌消除禽蛋肉類攜帶的沙門氏菌，豬鏈球菌，梭狀芽胞桿菌及大腸
桿菌的方法是生物的方法，蛭弧菌具有可侵染、裂解宿主細菌的特性，使之 適合作為抑止或清除生物體及其環境中致病菌的生物淨化因子，且其在裂解 完宿主細菌後，會因飢餓而自動消亡，因此對人和動物無毒副作用。有效地 減少或消除化學藥物如抗生素的殘留，確保禽畜產品的優質，從根本上避免 禽類產品食物中毒事件的發生。提高了消費者食用禽蛋及肉的安全係數，保 護了消費者的健康。
3、 本發明還可延伸推廣應用於其它動物性產品和水產品，特別有利於減 少或消除化學藥物如抗生素的使用和殘留，確保水產品和其它動物性產品的 優質，對提高食用安全性，保障人類健康具有十分重要的意義；同時為出口 貿易保駕護航。


圖1為蛭弧菌及其混合液在消除雞蛋表面攜帶四種致病菌的試驗效果比 較圖。
圖2為蛭弧菌及其混合液在消除豬肉加工過程中表面攜帶的四種致病菌 的試驗效果比較圖。
具體實施例方式
實施例1
蛭弧菌在消除禽蛋場新鮮雞蛋攜帶的常見致病菌的應用試驗
試驗包括以下具體步驟及其條件 步驟一蛭弧菌的分離純化
對採集的水體或底泥進行預處理，接種增殖蛭弧菌的嗜水氣單胞菌，倒 雙層平板，在含宿主菌的雙層平板上出現噬菌斑，挑取不斷擴大的單斑，再 按微生物學方法液體增殖培養、雙層平板檢驗，再次挑取不斷擴大的單斑， 並重複若干次，至單噬菌斑傳代形成形狀、大小、透明度均一致的噬菌斑，
即為一株蛭弧菌純菌株，按同一時間內單斑大小計，分離出2株蛭弧菌純菌 株，所述蛭弧菌於2008年1月13日在位於中國武漢市武漢大學內的中國典 型培養物保藏中心保藏，5fife〃ov/Z^0平BDF01,保藏編號為CCTCC NO: M 208008和5&〃ow'6Wo平BDF02,保藏編號為CCTCC NO: M 208009。 步驟二蛭弧菌液的製備
步驟一得到的菌株號分別為BDF01、 BDF02的蛭弧菌，與嗜水氣單胞 菌液混合後加入到含有DNB培養基的三角錐瓶中，恆溫搖床250 rpm、28 。C 培養24 h。培養物經過6000 rpm、4 。C離心20 min，取上清液，再16000 rpm、 4 'C條件下離心20 min，棄上清液，加入適量DNB液體培養基重新懸浮蛭 弧菌沉澱物，製成濃度為102 1012pfu/ml的蛭弧菌液，將上述2株菌以任 意比例混合均稱為蛭弧菌混合液。
步驟三消除沙門氏菌、豬鏈球菌、梭狀芽胞桿菌及大腸桿菌的應用實
驗
(1) 沙門氏菌，豬鏈球菌，梭狀芽胞桿菌及大腸桿菌的製備 用普通營養肉湯(NB)培養基搖床培養，160 rpm 28 。C培養12-16 h
分別增殖沙門氏菌，豬鏈球菌，梭狀芽胞桿菌及大腸桿菌，培養液經5000rpm、 4X:離心20min，棄上清液，沉澱菌體用無菌水重新懸浮，使其濃度為 109cfii/ml，最後製備上述四種菌的混合液，每種菌的終濃度為105cfu/ml。
(2) 分別施用BDF01或BDF02蛭弧菌液和分別按BDF01:BDF02為 1:1、 1:2、 2:1的比例混合的蛭弧菌混合液對沙門氏菌，豬鏈球菌，梭狀芽胞 桿菌及大腸桿菌的消除試驗
試驗所用材料為雞蛋，試驗均設對照和實驗組。對照設三個平行樣，每 個平行樣有雞蛋10個；實驗組中，把雞蛋浸漬於步驟三(1)的4種致病菌 混合液中，30秒後取出瀝乾。然後將每10個雞蛋分成一個小組，浸漬於濃 度為102pfu/ml、 104pfu/ml、 106pfu/ml、 108pfu/ml、 1010pfu/ml或1012pfu ml 的蛭弧菌液中。不同濃度的蛭弧菌液均設單株即BDF01或BDF02和蛭弧菌 混合液。雞蛋在不同蛭弧菌液浸漬後，30秒後取出瀝乾，在室溫下放置4小 時，之後分別檢測上述四種致病菌的含量。沙門氏菌、豬鏈球菌、梭狀芽胞 桿菌及大腸桿菌的具體檢測方法是取經無菌生理鹽水溼潤的滅菌拭子(棉花
籤)在蛋表面上均勻的塗抹4次後，置含無菌生理鹽水的無菌離心管中振蕩、 混勻，然後採用MPN (most probable number)方法對細菌進行計數(單位為 cfii/ml/雞蛋)。其中豬鏈球菌的檢測採用透明指示選擇性培養基，沙門氏菌 的檢測採用XLD(xylose-lysine-deoxycholate)選擇性培養基，梭狀芽胞桿菌檢 測採用卵黃瓊脂培養基，大腸桿菌的檢測採用TBX (Tryptone Bile X-glucuronide)選擇性瓊脂培養基。
以BDF01或BDF02最低濃度(102pfu/ ml)的蛭弧菌液和混合比1:1的 蛭弧菌混合液的試驗組的結果為例，對消除效果進行說明。檢測結果如圖1 所示。圖1表明，在使用蛭弧菌混合液的實驗組，在4小時的試驗結束時， 致病菌幾乎檢測不到，即完全消除；而施用同樣濃度的單株蛭弧菌(BDF01 或BDF02)的實驗組對四種致病菌的消除稍慢，此時仍可檢測到致病菌的數 量為2-3 cfii/ml雞蛋，消除效果比2株蛭弧菌混合液的效果略差。
比較四種致病菌的初始濃度與終濃度，可知單株或2株蛭弧菌混合液對 沙門氏菌，豬鏈球菌，梭狀芽胞桿菌及大腸桿菌消除率均可達到99%以上。 由於其它試驗小組的效果相同或更好，故在此不再贅述。
實施例2
蛭弧菌在消除畜肉類攜帶的常見致病菌的應用試驗 試驗包括以下具體步驟及其條件 步驟一、二及步驟三(1)均同實施例1
步驟三(2) 2株蛭弧菌蛭弧菌對消除豬肉加工過程中表面攜帶的沙門氏 菌，豬鏈球菌，梭狀芽胞桿菌及大腸桿菌試驗
分割出每塊重量相近的實驗樣品豬塊，每塊重約0.25kg，試驗設對照組 和實驗組，其中對照組三塊，為三個平行樣，剩下豬肉塊為實驗組，每小組 三塊，為三個平行樣。將它們浸漬於步驟三(1)的致病菌混合液中，致病菌 混合液是指沙門氏菌、豬鏈球菌、梭狀芽胞桿菌及大腸桿菌的終濃度分別達 到1x105cfu/ml， 30秒後取出瀝乾。然後對實驗組每個小組的豬肉再直接均 勻噴灑不同量的不同濃度的蛭弧菌液。每小組的蛭弧菌液的噴灑量為 15ml/kg、 35ml/kg、 55ml/kg、 75ml/kg或100ml/kg;蛭弧菌液的濃度為 102pfu/ml、 104pfu/ml、 106pfu/ml、 108pfu/ml、 1010pfu/ml或1012pfu ml。不同濃度的蛭弧菌液均按1:1、 3:2、 2:3進行混合，製備蛭弧菌混合液。
經上述蛭弧菌液噴灑後的豬肉塊置於室溫下，試驗時間為4小時，之後 分別檢測致病菌的含量，四種致病菌的濃度檢測方法採用MPN檢測法(單 位為cfU/kg)。檢測所用特異性培養基同實施例l。
以BDF01、 BDF02最低濃度(102pfu/ ml)的蛭弧菌液和混合比1:1、 噴灑量最小(15ml/kg)的蛭弧菌混合液的試驗組為例，對消除效果進行說明。 檢測結果如圖2所示。從圖2可以看出，在使用蛭弧菌混合液的實驗組，在 4小時的試驗結束時，致病菌檢測不到，即完全消除；而施用同樣濃度的單 株蛭弧菌(BDF01或BDF02)的實驗組對四種致病菌的消除略慢，此時仍 可檢測到致病菌的數量為10cfu/kg，消除效果比2株蛭弧菌混合液的效果稍 差。
比較四種致病菌的初始濃度與終濃度，可知2株蛭弧菌混合液對沙門氏 菌，豬鏈球菌，梭狀芽胞桿菌及大腸桿菌消除率可達到99%以上。由於其它 試驗小組的清除效果相同或更好，故在此不再贅述。
關於對肉品質的評價，除了上述從肉的衛生安全方面做出檢測外，還包 括從持水力、pH、嫩度、肉色以及硬度及溼度幾個方面來考査。
持水力按照目前通用的48小時滴水法，將肉製品懸掛在(TC-4'C懸掛貯 存48小時後計算失重率，使用蛭弧菌的實驗組的豬肉在懸掛48h持水率均 較高，失重率平均為2.2%,而對照組的失重率則為11%。由此明顯看出對 照組豬肉品質的下降。
從肉色來評價，使用蛭弧菌的豬肉呈現鮮紅色，稍有光澤，而未使用蛭 弧菌的豬肉肉色灰白，光澤暗淡，且不斷有水外滲。主觀評價可以看出感染 致病菌的豬肉(對照組)肉色明顯的劣於實驗組。
從pH值測定來看，感染致病菌的豬肉(對照組)的pH都接近5，這是 肌肉的持水力下降的標誌，此時的pH值對豬肉的風味產生較大影響，而使 用蛭弧菌的實驗組pH值維持在6.5左右，這說明肉的品質保持的比對照組 的要好。
嫩度主要是通過嫩度儀來評估的，評估的結果兩者之間沒有很明顯的區 別，實驗組嫩度略微的優於對照組。
主觀評價硬度主要是通過切面是否容易變形來確定的，而評價溼度主要
是通過切面液體滲出的多少來確定的，4h時對照組的豬肉切面很容易變形， 而且還有水滲出，可以鑑定等級為滲出。實驗組的豬肉切面不容易變形，也 沒有水滲出，可以鑑定等級為潮溼。
從以上肉品質的綜合鑑定來看，實驗組的豬肉品質明顯的優於對照組。 這說明蛭弧菌在消除禽蛋肉類攜帶的常見致病菌方面效果顯著，可以推廣應 用於禽蛋肉類的保藏和加工工業。
實施例3
蛭弧菌在消除養豬場環境中的常見致病菌的應用試驗
試驗包括以下具體步驟及其條件 步驟一及二均同實施例1 步驟三(1)致病菌的消除試驗
以某一養豬場為例，在未施用蛭弧菌前之一年，由於豬養殖衛生條件不
好，養殖環境中的豬鏈球菌、大腸桿菌等較多，經常達1(^cfu/cr^以上。因
此為控制它們的病害，養殖場常在飼料中添加抗生素，如此導致豬肉的品質 下降，出口貿易受到限制。同時，養殖衛生條件不好，肉豬易出現腸炎、豬 肺疫等病害。
為了探索健康、綠色的養豬方法，該養豬場試用本發明的應用方法，分 成多個不同試驗組，對豬的欄圈、用具、詞料、豬身上均勻噴灑濃度為l(^pfU/ml 的2株蛭弧菌任意混合液(本實施例採用1:1)，噴灑使用量則按試驗組的 不同分別為15ml/m2、 35ml/m2、 55 ml/m2、 75 ml/m2、或100ml/m2，每隔2 天噴灑一次。在隨後的環境病菌檢測中，僅在噴灑量為15ml/r^試驗組中檢 測到少量的大腸桿菌，其他噴灑量的試驗組致病菌幾乎檢測不到。如此使用， 一年下來，雖然抗生素停止了使用，但豬的病害基本沒有發生。作為肉豬售 出時的各項檢測均合格，達到了出口標準，其肉質比在飼料中加了抗生素的 要好。
本試用研究的結果表明蛭弧菌在消除畜禽養殖環境中致病菌、甚至防治 其病害方面的效果顯著，可改善豬的體質，防治豬的病害的發生，消除藥物 或者抗生素的使用，提升豬肉品質。由此可見，蛭弧菌菌劑可以廣泛地推廣 應用於畜禽養殖基地。
實施例4
蛭弧菌在消除禽蛋及肉類的保藏環境、運輸工具攜帶的常見致病菌的應 用試驗
試驗包括以下具體步驟及其條件 步驟一及二均同實施例1 步驟三(1)致病菌的消除試驗
採用本發明的應用方法，分成多個不同試驗組，對保藏禽蛋及肉類的冷
庫地面和牆體、運輸禽蛋及肉類貨櫃內表面，均勻噴灑濃度為102pfii/ml 的2株蛭弧菌按1:1混合的混合液，噴灑使用量則按試驗組的不同分別為 10ml/m2、 30ml/m2、 50 ml/m2、 70 ml/m2、或100 ml/m2，每天噴灑一次，連 續噴灑兩天，在隨後的環境病菌檢測中，僅在噴灑量為10ml/m2試驗組中檢 測到少量的豬鏈球菌，其他噴灑量的試驗組沒有檢測到沙門氏菌，豬鏈球菌， 梭狀芽胞桿菌及大腸桿菌等常見致病菌。本試用研究的結果表明蛭弧菌在消 除保藏、運輸過程中致病菌方面的效果顯著，可確保禽蛋及肉類產品品質。 由此可見，蛭弧菌可以廣泛地推廣應用於禽蛋及肉類產品的保藏與運輸。
權利要求
1、一種蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用，其特徵在於應用方法包括以下具體步驟及其條件步驟一蛭弧菌的分離純化對採集的水體或底泥進行預處理，接種增殖蛭弧菌的嗜水氣單胞菌，倒雙層平板，在含宿主菌的雙層平板上出現噬菌斑，挑取不斷擴大的單斑，再按微生物學方法液體增殖培養、雙層平板檢驗，再次挑取不斷擴大的單斑，並重複若干次，至單噬菌斑傳代形成形狀、大小、透明度均一致的噬菌斑，即為一株蛭弧菌純菌株，按同一時間內單斑大小計，分離出2株蛭弧菌純菌株，所述蛭弧菌是指在中國典型培養物保藏中心保藏，Bdellovibrio sp.BDF01，保藏編號為CCTCC NOM 208008和Bdellovibrio sp.BDF02，保藏編號為CCTCC NOM 208009；步驟二蛭弧菌液的製備將2株蛭弧菌分別進行發酵培養，分別製成濃度為102～1012pfu/ml的蛭弧菌液，待用；步驟三蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用採用上述2株蛭弧菌按任意比例混合的蛭弧菌混合液或單株蛭弧菌液，以噴灑或者擦塗或者浸漬的方法處理攜帶有致病菌的禽蛋及肉類產品，其中採用浸漬的方法蛭弧菌濃度至少達到102pfu/ml；採用噴灑或者擦塗的方法使用濃度≥102pfu/ml的蛭弧菌液時，直接應用於禽蛋及肉類產品，其使用量至少達到15ml/kg；應用於環境，其使用量至少達到10ml/m2。
2、 根據權利要求1所述的一種蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病 菌的應用，其特徵在於所述蛭弧菌混合液的混合比例為BDF01:BDF02 為1:1。
3、 根據權利要求1所述的一種蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用，其特徵在於所述應用環境包括畜禽養殖場養殖環境、保藏環境 和禽蛋及肉類產品運輸工具、加工過程。
4、 根據權利要求1或3所述的一種蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用，其特徵在於所述應用方法用於畜禽養殖場養殖環境致病菌的消除時，採用噴灑的方法當使用濃度≥10 2 pfu/ml的蛭弧菌液時，使用量範圍為35 55ml/m2。
5、 根據權利要求1或3所述的一種蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見 致病菌的應用，其特徵在於所述應用方法用於禽蛋及肉類保藏或運輸環境 中致病菌的消除時，採用噴灑的方法當使用濃度≥102 pfu/ml的蛭弧菌液時，使用量範圍為30 50ml/m2。
6、 根據權利要求1所述的一種蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用，其特徵在於所述應用方法用於消除禽蛋及肉類加工過程中所攜帶的致病菌時，採用浸漬的方法蛭弧菌濃度範圍為10 4 10 6pfu/ml，採用噴灑或者擦塗的方法使用濃度≥10 2pfu/ml的蛭弧菌液時，使用量範圍為 35—55ml/kg。
全文摘要
本發明公開了一種蛭弧菌在消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌的應用，用蛭弧菌液以噴灑或者擦塗或者浸漬的方法處理攜帶有致病菌的禽蛋及肉類，採用浸漬的方法時蛭弧菌濃度至少達到102puf/ml，採用噴灑或者擦塗的方法使用濃度≥102pfu/ml的蛭弧菌液時，使用量至少達到15ml/kg。公開的2株蛭弧菌可分別獨立使用，但混合使用效果更佳。採用本應用方便、安全且無副作用，消除禽蛋及肉類攜帶的常見致病菌效果顯著，致病菌清除率均在99％以上。可適用於從「養殖到餐桌」包括禽蛋肉類加工在內的全過程，直接提高了產品品質。對提高食用安全性，保障人類健康具有十分重要的意義。
文檔編號A23B5/00GK101341901SQ200810030158
公開日2009年1月14日 申請日期2008年8月13日 優先權日2008年8月13日
發明者蔡俊鵬, 馬小花 申請人:華南理工大學