一種枯草芽孢桿菌bc-198、及其富硒菌劑與應用的製作方法

2024-03-01 20:36:15 2

專利名稱：一種枯草芽孢桿菌bc-198、及其富硒菌劑與應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及微生物技術領域，特別涉及一種枯草芽孢桿菌BC-198及其其富硒菌劑與應用。
背景技術：
硒是人類和動物必須的微量元素，有防癌和抗癌作用，長期缺硒，可引起多種疾病，是引起克山病的病因之一。現在人們認識到補硒必要性，通過食品補硒被認為最安全，最方便的手段。同世界大多數國家一樣，我國也是缺硒地區。我國缺硒省市達20多個，土壤中硒含量約O. 03-0. lmg/kg,向土壤補硒是獲得富硒農產品(食品)的一種有效辦法。多年來，人們以富硒礦石、富硒煤矸石等原料，經粉碎、鹼處理得到少部分(20%)可溶性無機硒，與 氮、磷、鉀、銅、鋅、鐵、鎂、硼等無機鹽或有機質復混成富硒肥料，或把硒製備成硒酸鈉、亞硒酸鈉，並以其溶液再與無機或有機肥料混配成富硒肥料，噴施到作物葉片或直接施到土壤中，這些富硒肥料雖然可以生產富硒農產品和富硒食品，但對肥料中無機硒作物利用率僅10%-15%，仍很低，施用有機硒可能是提高作物對硒利用率的途徑。農用微生物菌劑是一類有別於無機複合肥料、有機肥料的功能性微生物肥料。利用有益微生物轉化硒，把無機硒轉化成有機硒，以提高農作物對硒利用率，提高農產品含硒量。目前富硒微生物包括富硒酵母、富硒食用菌、光合細菌等。專利CN200710010871發明的一種富硒聯合固氮菌劑，在製備菌劑中加入可溶性硒，利用固氮菌對無機硒進行轉化，但其製劑中只採用固氮菌，僅具有單一固氮生理功能的富硒微生物肥料。專利CN102618469A，發明名稱一種莢膜紅細菌及其應用，公開了一種莢膜紅細菌AYGHJ-16，屬光合細菌，利用光能對物質進行代謝，促進無機硒的轉化和吸收，並有固氮和固碳作用。專利100512666C，發明名稱一種含硒微生物飼料添加劑及其製備方法，公開了利用微生物活菌為紅假單孢菌、納豆菌芽孢桿菌和酵母菌進行液體發酵、固體發酵，實現無機硒的微生物轉化。與本發明相比，目前的菌劑對硒的轉化或採用單一菌株或者同類菌株，對硒的轉化以及植物對硒的利用仍比較低。而且推廣使用的功能性微生物肥料如固氮、解鉀、解磷、催腐、促生長、抗病等肥料大多是功能單一的普通微生物菌劑。

發明內容
本發明目的是提供一株枯草芽孢桿菌BC-198及其應用。本發明另一目的是提供含有上述枯草芽孢桿菌BC-198的菌劑。本發明再一目的是提供一種有效成分為枯草芽孢桿菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212的複合菌劑。本發明又一目的是提供所述複合菌劑的製備方法。本發明提供的枯草芽孢桿菌Bacillus Subitilis BC-198,已於2012年8月30日保藏於中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC ;地址中國武漢，武漢大學；郵編430072)，保藏編號 CCTCCNo. M2012321。本發明還提供含有所述枯草芽孢桿菌BC-198的菌劑。本發明進一步提供一種複合菌劑，其有效成分為枯草芽孢桿菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212。所述枯草芽孢桿菌BC-198的活菌數為10-25億/ml，所述褐球固氮菌ASl. 212的活菌數為10-25億/ml。優選地，所述枯草芽孢桿菌BC-198的活菌數為15-19億/ml，所述褐球固氮菌ASl. 212的活菌數為15-19億/ml。本發明所述複合菌劑還含有防腐劑、保護劑；其中，所述防腐劑為苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鈉鹽、丙酸及其鈉鹽中的一種或幾種；所述保護劑為多羥基聚合物，其中所述多羥基聚合物為海藻酸及其鈉鹽、聚穀氨酸及 其鈉鹽、羧甲基纖維素及其鈉鹽中的一種或幾種。本發明還提供所述複合菌劑的製備方法，包括以下步驟I)製備枯草芽孢桿菌BC-198種子液和褐球固氮菌ASl. 212種子液；2)枯草芽孢桿菌BC-198種子液和褐球固氮菌ASl. 212種子液發酵培養，製備發酵液。其中，所述種子培養條件為種子培養基在500暈升三角瓶裝100-130暈升培養基，28-35°C恆溫振蕩培養12-16小時得種子液。培養枯草芽孢桿菌BC-198的種子培養基組成含硒溶液100毫升中加入葡萄糖O. 5%、澱粉O. 3%、蛋白腖O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化鈉O. 4%、磷酸氫二鉀O. 1%、PH7. 2 ；褐球固氮菌ASl. 212的種子培養基組成含硒溶液100毫升中加入O. 3%葡萄糖、O. 8%蔗糖、O. 2%蛋白腖、O. 6%酵母膏、O. 4%氯化鈉，硝酸鉀O. 2%、PH7. 4。其中，所述發酵培養條件為裝料體積為發酵罐容積的65-70%。枯草芽孢桿菌和褐球固氮菌的種子接入量分別與培養液體積比為I. 0-2. 0%和I. 5-2. 5%，罐內溫度28-35°C、罐壓O. 04-0. 06MPa、攪拌速度190220轉/分鐘，培養液體積與通入空氣體積比I :O. 2-0. 4 (v/v)，混合發酵14-19小時得發酵液。發酵培養基組成為在含硒溶液中加入O. 3-0. 5%葡萄糖、O. 3-0. 7%蔗糖、O. 4-0. 6% 蛋白腖、O. 3-0. 5% 酵母膏、O. 2-0. 5% 氯化鈉、PH7. 4。所述發酵液中進一步加入防腐劑、保護劑。所述防腐劑按發酵液體積加入質量體積比為O. 10%-0. 50%。所述保護劑按發酵液體積加入質量體積比為O. 15%-1. 0%。所述枯草芽孢桿菌BC-198或所述菌劑或所述複合菌劑可應用於生產富硒菌劑，用於提高植物對硒的吸收和利用。本發明優點是本發明提供的菌株可用於富硒菌劑的製備.製備方法可利用現成的通用發酵設備，操作簡單，製作成本低，製得的產品對作物有固氮、促生長、防治真菌病害等多種功能，可溶性硒經微生物進一步活化和轉化更有利於作物對硒吸收和利用，作物施用後可增加產量，改善農產品品質，生產農產品含硒量提高20倍，達到富硒產品質量標準。


圖I為Bc-198細胞電鏡圖，放大倍數IOk ；圖2為黃瓜使用枯草芽孢桿菌BC-198的長勢效果圖3為黃瓜未使用枯草芽孢桿菌BC-198的長勢效果圖。
具體實施例方式以下實施例用於說明本發明，但不用來限制本發明的範圍。在不背離本發明精神和實質的情況下，對本發明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬於本發明的範圍。若為特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段。本發明中涉及到的百分號「％」，若未特別說明，食指質量百分比；但溶液的百分t匕，除另有規定外，是指溶液IOOml中含有溶質若干克；液體之間的百分比，是指20°C時容量的比例。實施例I富硒多功能菌株分離和鑑定 從湖北恩施市白楊坪的富硒菸草廢棄物中，通過在O. 15%NaSe03、0. 6%葡萄糖、O. 5%蔗糖、O. 8%蛋白腖、O. 3%酵母膏、O. 4%氯化鈉、水100毫升配製的培養基中富集分離純化。拮抗試驗和促生長試驗，篩選得一株菌株BC-198，該菌株發酵液對大豆種子發芽率、根長、比對照提高30-40% ;對鐮刀菌、青黴抑制圈均大於I. 5釐米。還具有蛋白酶、纖維素酶活力；該菌株形態或生理生化特徵是；革蘭氏染色陽性、細胞杆狀、直徑< lum、如圖I所示，形成芽孢，不膨大，無伴胞晶體；接觸酶、氧化酶陽性，好氧生長，VP試驗陽性，VP PH7試驗陰性，甲基紅試驗陰性，利用葡萄糖、木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇產酸；利用葡萄糖不產氣；利用檸檬酸鹽，還原硝酸鹽，水解澱粉、液化明膠、分解酪素。在PH5.7、7%NaCl、50°C均生長；該菌株16SrRNA基因序列測定結果如SEQ ID NO. I所示。根據細胞形態、生化試驗結果，和基因序列測定結果，菌株BC-198鑑定為枯草芽孢桿菌Bacillus Subitilis0該菌株已於2012年8月30日保藏於中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC ;地址中國武漢，武漢大學；郵編430072)，保藏編號CCTCCNo. M2012321。實施例2枯草芽孢桿菌BC-198與褐球固氮菌配伍試驗(I)試驗培養基組成1) O. 6%葡萄糖、O. 5%蔗糖、O. 8%蛋白腖、O. 3%酵母膏、O. 4%氯化鈉水100毫升、PH7. 4 ；(2)固體培養基中加入I. 8%瓊脂(2)枯草芽孢桿菌BC-198與褐球固氮菌培養250毫升三角瓶裝上述培養液50毫升、O. IMPa滅菌25分鐘，分別接入枯草芽孢桿菌和褐球固氮菌，放置搖瓶機上，28-30°C振蕩培養14-20小時備用。(3)拮抗試驗按上述配方配製100毫升固體培養基，O. IMPa滅菌25分鐘，冷卻到45°C時加入I毫升預先培養14小時的褐球固氮菌培養液，混勻後，吸取15毫升移入直徑9釐米的培養皿，放置水平的桌面上製得瓊脂培養皿，冷卻40分鐘後，再放置牛津杯，向牛津杯中滴加O. 3毫升預先培養20小時的枯草芽孢培養液的離心上清液，置28-30°C恆溫箱培養24-36，牛津杯外緣未出現抑制圈。判定枯草芽孢桿菌BC-198對褐球固氮菌的生長無抑制作用。相似試驗方法判定褐球固氮菌對枯草芽孢桿菌生長也無抑制。實施例3富硒菌劑的製備(I)富硒農用微生物菌劑採用菌種枯草芽孢桿菌BC-198 ；培養枯草芽孢桿菌BC-198的種子培養基組成含硒溶液(O. 249mg/ml) 100毫升中加入葡萄糖O. 5%、澱粉O. 3%、蛋白腖O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化鈉O. 4%、磷酸氫二鉀O. 1%、PH7. 2 ；按上述配方配製種子培養基，在500毫升三角瓶中裝量100毫升，O. IlMPa壓力下滅菌25分鐘，冷卻到室溫後，用接種竹鏟挑取枯草芽孢BC-198菌種子母種，接入三角瓶培養基中，在轉速190轉/分鐘的搖瓶機上，28°C ±1°C恆溫振蕩培養14小時，製得枯草芽孢桿菌種子液；(2)富硒農用微生物菌劑的罐上發酵培養富硒農用微生物菌劑在5升不鏽鋼自控發酵罐上進行。在3升含硒溶液(O. 3mg/ml)中加入O. 5%葡萄糖、O. 6%蔗糖、O. 6%蛋白腖、O. 5%酵母膏、O. 4%氯化鈉、PH7. 4。培養基O. 12MPa滅菌25分鐘，培養基溫度下降到35°C，接入I. 8%枯草芽孢桿菌種子 液，設定罐壓O. 04-0. 06MPa，罐溫30 ±2°C，通氣流量I :0. 2(v/v)，攪拌速度190轉/分鐘，發酵18小時得發酵培養液2. 86升。(3)加入O. 19%的苯甲酸鈉，O. 9%的海藻酸鈉，O. 09%的聚穀氨酸攪拌均勻，得含硒O. 284mg/ml，細菌活菌數34. 8億/ml的富硒微生物菌劑。實施例4富硒複合菌劑的製備(I)富硒微生物菌劑的種子培養I)製備富硒農用微生物菌劑採用菌種枯草芽孢桿菌BC-198，和褐球固氮菌ASl. 212。2)富硒農用微生物菌劑種子培養基組成a.含硒水溶液製備硒礦粉碎，過100-200目，按硒礦粉質量體積比I :2_3的比例加入3%-4%氨水和1%-3%氫氧化鈉混合溶液，攪拌24-36小時，用H3PO4調PH8. 5-9. O過濾得上清液，測定並調整硒濃度為O. 25-1. Omg/ml，或直接用NaSeO3配製。b.培養基組成培養枯草芽孢桿菌BC-198的種子培養基組成含硒溶液(O. 25mg/ml) 100毫升中加入葡萄糖O. 5%、澱粉O. 3%、蛋白腖O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化鈉O. 4%、磷酸氫二鉀O. 1%、PH7. 2。褐球固氮菌ASl. 212的種子培養基組成含硒溶液(O. 25mg/ml) 100毫升中加入
O.3%葡萄糖、O. 8%蔗糖、O. 2%蛋白腖、O. 6%酵母膏、O. 4%氯化鈉，硝酸鉀O. 2%、PH7. 4。c.種子培養條件配製好種子培養基在500毫升三角瓶內裝量100毫升，O. IMPa滅菌25分鐘，分別接入枯草芽孢桿菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212，放置200轉/分旋轉搖瓶機上，30_32°C恆溫振蕩培養12-16小時得富硒微生物菌劑的種子液。(2)發酵培養農用微生物菌劑製備在IOL發酵罐內進行，其培養基組成在6. 5L含硒溶液(O. 25mg/ml)中加入O. 5%葡萄糖、O. 6%蔗糖、O. 6%蛋白腖、O. 5%酵母膏、O. 4%氯化鈉、PH7. 4。培養基裝料體積為發酵罐容積的65%、0. 12MPa滅菌25分鐘，培養基溫度下降到32°C，同時接入I. 4%的枯草芽孢桿菌BC-198種子液和I. 5%的褐球固氮菌ASl. 212種子液，控制罐內溫度30°C，罐內壓力O. 06MPa,攪拌速度190轉/分鐘，培養基與通入空氣體積比I :0. 4，接入種子液起，每隔2小時取樣測定發酵的PH值和細菌細胞濃度，發現發酵18小時和19小時，細菌細胞濃度沒有明顯增長，發酵18-19小時得發酵培養液。(3)放出罐內培養液5. 8升，加入O. 27%的苯甲酸鈉，O. 34%的聚穀氨酸，攪拌均勻得含硒量O. 24mg/ml的富硒微生物菌劑。枯草芽孢桿菌BC-198活菌數18. 3億/ml，褐球固氮菌ASl. 212活菌數16. 7億/ml。實施例5富硒複合菌劑的製備(I)富硒微生物菌劑的種子培養I)製備富硒農用微生物菌劑採用菌種枯草芽孢桿菌BC-198，和褐球固氮菌ASl. 2122)富硒農用微生物菌劑種子培養基組成a.含硒水溶液製備配製培養基的含硒浸出水製備硒礦經球磨機粉碎，過100目，加入硒礦粉質量的2倍體積的3%氨水、2%氫氧化鈉混合溶液，攪拌30小時，用H3PO4調 PH8. 7離心過濾得富硒水溶液，調節溶液含硒量為O. 3mg/ml。b.培養基組成培養枯草芽孢桿菌BC-198的種子培養基組成含硒溶液100毫升中加入葡萄糖
O.5%、澱粉O. 3%、蛋白腖O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化鈉O. 4%、磷酸氫二鉀O. 1%、PH7. 2。褐球固氮菌ASl. 212的種子培養基組成含硒溶液100毫升中加入O. 3%葡萄糖、
O.8%蔗糖、O. 2%蛋白腖、O. 6%酵母膏、O. 4%氯化鈉，硝酸鉀O. 2%、PH7. 4。c.菌種培養按上述培養基組成配製的種子培養基，在500毫升三角瓶中裝量120毫升培養基，
O.12MPa滅菌25分鐘，用接種鏟挑取枯草芽孢桿菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212母種分別移到三角瓶培養液中，放置200轉/分鐘旋轉搖瓶機上，30-32°C恆溫培養15小時。(2)發酵培養富硒農用微生物菌劑的發酵在50升不鏽鋼自控發酵罐內進行。在35升含硒溶液中加入O. 5%葡萄糖、O. 6%蔗糖、O. 6%蛋白腖、O. 5%酵母膏、O. 4%氯化鈉、PH7. 4。培養基裝料體積為發酵罐容積的70%、0. 12MPa滅菌25分鐘，培養基溫度下降到30-35°C，接入I. 14%的枯草芽孢桿菌種子液和2. 43%的褐球固氮菌種子液，設定發酵攪拌速度195轉/分鐘，罐內溫度28°C，罐內壓力O. 05MPa，罐內空氣流量I :0. 3 (v/v)。接入種子後，每隔3小時取樣測定發酵液PH和細菌細胞濃度發現，發酵18小時時細菌細胞濃度與15小時相近，細胞濃度沒有明顯增加。(3)放出罐內發酵菌液33升，加入O. 2%的苯甲酸鈉和O. 8%的聚穀氨酸，攪拌均勻，得含硒量O. 304mg/ml富硒農用多功能微生物的富硒菌劑。枯草芽孢桿菌BC-198活菌數15. 3億/ml，褐球固氮菌ASl. 212活菌數18. 7億/ml。實施例6富硒複合菌劑的製備( I)富硒微生物菌劑的種子培養I)製備富硒農用微生物菌劑採用菌種枯草芽孢桿菌BC-198，和褐球固氮菌ASl. 2122)富硒農用微生物菌劑種子培養基組成a.含硒水溶液製備b.培養基組成培養枯草芽孢桿菌BC-198的種子培養基組成含硒溶液(O. 249mg/ml) 100毫升中加入葡萄糖O. 5%、澱粉O. 3%、蛋白腖O. 6%、酵母膏O. 25%、氯化鈉O. 4%、磷酸氫二鉀O. 1%、PH7. 2。
褐球固氮菌ASl. 212的種子培養基組成含硒溶液(O. 249mg/ml) 100毫升中加入
0.3%葡萄糖、O. 8%蔗糖、O. 2%蛋白腖、O. 6%酵母膏、O. 4%氯化鈉，硝酸鉀O. 2%、PH7. 4c.種子培養按上述配方配製種子培養基，在500毫升三角瓶中裝量100毫升，O. IlMPa壓力下滅菌25分鐘，冷卻到室溫後，用接種竹鏟分別挑取枯草芽孢BC-198和褐球固氮菌ASl. 212菌種子母種，分別接入三角瓶培養基中，在轉速190轉/分鐘的搖瓶機上，28°C ± I°C恆溫振蕩培養14小時，製得枯草芽孢桿菌種子液和褐球固氮菌種子液。(2)富硒農用微生物菌劑的罐上發酵培養富硒農用微生物菌劑在200升不鏽鋼自控發酵罐上進行。在140升含硒溶液(O. 3mg/ml)中加入O. 5%葡萄糖、O. 6%蔗糖、O. 6%蛋白腖、O. 5%酵母膏、O. 4%氯化鈉、PH7. 4。 培養基裝料體積為發酵罐容積的70%、0. 12MPa滅菌25分鐘，培養基溫度下降到35°C，接入
1.2%的升枯草芽孢桿菌種子液，I. 8%的褐球固氮菌種子液，設定罐壓O. 04-0. 06MPa,罐溫30±2°C，通氣流量I :0. 2 (v/v)，攪拌速度190轉/分鐘，發酵18小時得發酵培養液132升。(3)加入O. 3%的苯甲酸鈉，O. 5%的海藻酸鈉，O. 15%的聚穀氨酸攪拌均勻，得含硒O. 284mg/ml的富硒微生物菌劑。枯草芽孢桿菌BC-198活菌數15. I億/ml，褐球固氮菌ASL 212 活菌數 14. 9 億/ml。實施例7菌劑的效果試驗2008年冬在馬鈴薯上使用實施例5製備的富硒微生物菌劑每株使用含硒
O.304mg/ml富硒農用微生物菌劑O. 065kg,結果表明使用富硒微生物菌劑肥料組馬鈴薯平均產量3. 51kg/株，大薯比例70. 98%，馬鈴薯平均含硒2. I lmg/kg,未使用平均含硒
O.102mg/kg ;未使用本肥料的馬鈴薯平均產量2. 86kg/株，大薯比例60. 39%，；使用本肥料的馬鈴薯晚疫病病株率4. 51% ;未使用本肥料的馬鈴薯晚疫病病株率79. 12% ;使用本肥料後的農產品含硒量提高了 20. 68倍，達到富硒標準。2010年-2012年連續三年在黃瓜上使用實施例6製備的富硒微生物菌劑每株使用含硒O. 284mg/ml富硒農用微生物菌劑O. 062kg。鮮黃瓜平均含硒2. 226mg/kg,未使用的鮮黃瓜平均含硒O. llmg/kg，提高硒含量20. 23倍；使用本肥料的黃瓜平均產量3. 36kg/株，未使用本肥料的黃瓜平均產量I. 94kg/株，增產極顯著。使用本肥料的黃瓜產品所含重金屬達到有機綠色產品標準，且有極顯著的增產效果。使用本肥料的黃瓜無病害，未使用的黃瓜白粉病病株率30. 4%。使用枯草芽孢桿菌BC-198的黃瓜長勢效果如圖2所示，植株高大，枝葉繁茂，葉子大，所接黃瓜大並且多；未使用枯草芽孢桿菌BC-198的黃瓜長勢效果如圖3所示，植株小，枝葉不繁茂，葉子小，所接黃瓜小並且不多。2010年-2012年連續三年在馬鈴薯上使用實施例6製備的富硒微生物菌劑，每株使用含硒O. 284mg/ml富硒農用微生物菌劑O. 0625kg,馬鈴薯平均含硒I. 935mg/kg,未使用平均含硒O. 0941mg/kg，提高硒含量20. 56倍；使用本肥料的馬鈴薯平均產量3. 56kg/株，大薯比例70. 82% ;未使用本肥料的馬鈴薯平均產量2. 86kg/株，大薯比例60. 68% ;使用本肥料的馬鈴薯晚疫病病株率3. 94% ;未使用本肥料的馬鈴薯晚疫病病株率82. 3%。結論作物施用本發明菌劑後可增加產量，降低患病率，改善農產品品質，生產農產品含硒量提高20倍以上，達到富硒產品質量標準。
雖然，上文中已經用一般性說明及具體實施方案對本發明作了詳盡的描述，但在本發明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬於本發明要求保護的範圍。·
權利要求
1.枯草芽孢桿菌(BacillusSubitilis) BC-198，其保藏號為 CCTCCNo. M2012321。
2.含有權利要求I所述枯草芽孢桿菌BC-198的菌劑。
3.一種複合菌劑，其有效成分為枯草芽孢桿菌BC-198和褐球固氮菌ASl. 212。
4.根據權利要求3所述的複合菌劑，其特徵在於，所述枯草芽孢桿菌BC-198的活菌數為10-25億/ml，所述褐球固氮菌ASl. 212的活菌數為10-25億/ml。
5.根據權利要求4所述的複合菌劑，其特徵在於，所述枯草芽孢桿菌BC-198的活菌數為15-19億/ml，所述褐球固氮菌ASl. 212的活菌數為15-19億/ml。
6.根據權利要求3-5任一項所述的複合菌劑，其特徵在於，還含有防腐劑、保護劑； 其中，所述防腐劑為苯甲酸及其鈉鹽、山梨酸及其鈉鹽、丙酸及其鈉鹽中的一種或幾種； 所述保護劑為多羥基聚合物，其中所述多羥基聚合物為海藻酸及其鈉鹽、聚穀氨酸及其鈉鹽、羧甲基纖維素及其鈉鹽中的一種或幾種。
7.根據權利要求3-6任一項所述的複合菌劑，其特徵在於，按照如下方法製備 1)製備枯草芽孢桿菌BC-198種子液和褐球固氮菌ASl.212種子液；2)枯草芽孢桿菌BC-198種子液和褐球固氮菌ASl.212種子液複合發酵培養，製備發酵液。
8.根據權利要求7所述的複合菌劑，其特徵在於，所述複合發酵培養是將枯草芽孢桿菌BC-198種子液、褐球固氮菌ASl. 212種子液的接入量分別為1_2%和I. 5-2. 5%。
9.根據權利要求7或8所述的複合菌劑，其特徵在於，進一步加入防腐劑、保護劑。
10.權利要求I所述枯草芽孢桿菌BC-198或權利要求2所述菌劑或權利要求3所述複合菌劑在提高植物對硒的吸收和利用中的應用。
全文摘要
本發明涉及一種枯草芽孢桿菌BC-198、及其富硒菌劑與應用。所述枯草芽孢桿菌(Bacillus Subitilis)BC-198，其保藏號為CCTCCNo.M2012321。本發明還提供了一種複合菌劑，其有效成分為枯草芽孢桿菌BC-198和褐球固氮菌AS1.212。本發明提供的富硒菌劑的製備方法可利用現成的通用發酵設備，操作簡單，製作成本低，製得的產品對作物有固氮、促生長、防治真菌病害等多種功能，作物施用後可增加產量，改善農產品品質，生產農產品含硒量提高20倍以上，達到富硒產品質量標準。
文檔編號A01P3/00GK102888376SQ20121038896
公開日2013年1月23日 申請日期2012年10月12日 優先權日2012年10月12日
發明者陳家任, 劉金龍 申請人:恩施和諾生物工程有限責任公司, 陳家任, 劉金龍