一種用於藍莓組培苗培養的生根培養基及其培養方法與流程
2024-03-26 13:17:05
本發明涉及植物組織培養技術領域，具體來說是一種用於藍莓組培苗培養的生根培養基及其培養方法。
背景技術：
藍莓(blueberry)學名越橘，屬於杜鵑花科(Ericaceae)越橘屬(Vaccinium SPP.)多年生灌木。果實為藍紫色小漿果，並披一層白色果粉，甜酸香爽，風味獨特，既可鮮食，也可深加工，富含A、Vpp、Vp、VB1、VB2、VB5、D、E、K等多種維生素、有機鍺、有機硒等十幾種人體所需的微量元素以及熊果苷、花青苷、SOD、鞣花酸、和黃酮類等抗氧化成分，高纖維、低熱量，其營養價值遠高於普通水果，尤其是藍漿果的花青素含量居各種果蔬之首。醫學研究證明，花青素具有明目強心、預防腦神經老化、增強人體免疫力、抗癌等獨特的保健功效。因此藍莓被譽為「黃金漿果」，是聯合國糧農組織(FAO)重點推薦的人類五大健康食品之一。藍漿果加工性能極佳，其果實柔軟多汁、香味獨特、色澤鮮豔且色素穩定，適宜加工成果汁、果醬、果酒及天然色素、保健食品等高檔產品，也是天然食品抗氧化劑和天然藥物的重要原料。
當前因發展迅速，藍莓生產用苗供應極度緊張已成為吉林省乃至全國發展藍莓產業的技術瓶頸。而採用植物組織培養方法可以在短期內快速繁殖多種植物，不僅繁殖率高，且因為其是無性繁殖，可以保持原繁殖母株的優良性狀，近年來在生產上應用越來越廣。藍莓不同品種之間儘管存在一定的特性差異，但都具有相同的生物學特徵：耐酸性土壤環境、耐低溫、耐瘠薄、較強的抗旱能力和抗病蟲害能力；不耐化肥(嫌鈣、嫌氯、嫌鈉)、除草劑。這些生物學特徵使藍莓具備優先發展的獨有優勢。同時，隨著生活和消費水平的提高，人們對食品的安全和品質要求越來越高，藍莓特有保健作用使其備受關注。但是，目前國內藍莓種苗繁育還處於起步階段，存在許多問題，還未見大規模工廠化生產報導。
組織培養繁殖植物的技術是一種特殊的營養繁殖方式，現在一般稱為快速繁殖技術或微繁殖技術。它是在無菌條件下，利用植物體的一部分，包括細菌、組織和器官，在人工控制的營養和環境條件下繁殖植物的方法。該技術面臨的一個難題是繼代培養容易出現苗弱現象。因此，採用復壯培養基替代繼代培養基既能防止品種退化，保證種苗質量，又能提供大量優質壯苗，提高快繁質量。現有技術一般用傳統繼代培養基，導致繼代叢生芽弱；而且誘導時間較長，生根難度大，成活率低，不能適應更加快速的市場需求。
技術實現要素：
本發明的目的是針對上述技術存在的問題，提供一種用於藍莓組培苗培養的生根培養基及其培養方法。
為實現上述目的，本發明採用的技術方案是：一種用於藍莓組培苗培養的生根培養基，所述培養基配方為：NH4NO3 1.67mmol/L、Ca(NO3)2 1.39mmol/L、KNO3 0.63mmol/L、MgSO4·7H2O 0.50mmol/L、KH2PO4 0.42mmol/L、MnSO4·H2O 0.04mmol/L、ZnSO4·7H2O 0.01mmol/L、H3BO3 0.03mmol/L、CuSO4·5H2O 0.001mmol/L、Na2EDTA 0.03mmol/L、FeSO4·7H2O 0.03mmol/L、肌醇0.17mmol/L、甘氨酸0.01mmol/L、維生素B1 0.001mmol/L、維生素B60.001mmol/L、維生素B5 0.001mmol/L、IBA 4mg/L、活性炭300mg/L、蔗糖30g/L、瓊脂5.5g/L。
進一步的，所述培養基pH為5.2。
本發明的另一目的是提供一種培養基用於培養藍莓組培苗的方法，將藍莓的外植體置於初代培養基上進行誘導分化培養，得到初代組培苗；再將初代組培苗置於生根培養基中進行繼代培養，得到繼代苗；
進一步的，誘導分化培養的培養條件為：溫度為25℃、光照強度為2000-3000lx、光周期為12h光照/12h黑暗，培養40天。
進一步的，所述繼代培養的培養條件為：光照強度為3000Lx，光照時間為14-16小時/天；光照培養時溫度為20-24℃，黑暗培養時溫度為18-22℃，溼度為60％-75％。
本發明的有益技術效果是：本發明的方法具有高效省時的特點，生產組培苗的成本低廉，平均每株種苗成本1.2元/株，得到的藍莓組培苗，遺傳性狀一致，克服了常規繁殖係數低的缺點。
具體實施方式
下面將結合本發明實施例，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基於本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有作出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬於本發明保護的範圍。
實施例1
配製培養基：培養基配方如下：NH4NO3 1.67mmol/L、Ca(NO3)2 1.39mmol/L、KNO30.63mmol/L、MgSO4·7H2O 0.50mmol/L、KH2PO4 0.42mmol/L、MnSO4·H2O 0.04mmol/L、ZnSO4·7H2O 0.01mmol/L、H3BO3 0.03mmol/L、CuSO4·5H2O 0.001mmol/L、Na2EDTA 0.03mmol/L、FeSO4·7H2O 0.03mmol/L、肌醇0.17mmol/L、甘氨酸0.01mmol/L、維生素B10.001mmol/L、維生素B6 0.001mmol/L、維生素B5 0.001mmol/L、IBA 4mg/L、活性炭300mg/L、蔗糖30g/L、瓊脂5.5g/L。培養基PH值5.2；培養基在121℃、131kPa的條件下滅菌20min。
一種生根培養基用於培養藍莓組培苗的方法，將藍莓的外植體置於初代培養基上進行誘導分化培養，得到初代組培苗；再將初代組培苗置於繼代培養基中進行繼代培養，得到繼代苗；
其中，誘導分化培養的培養條件為：溫度為25℃、光照強度為2000lx、光周期為12h光照/12h黑暗，培養40天。
其中，繼代培養的培養條件為：光照強度為3000Lx，光照時間為14小時/天；光照培養時溫度為20℃，黑暗培養時溫度為18℃，溼度為60％。
實施例2
培養基製備同實施例1。
一種生根培養基用於培養藍莓組培苗的方法，將藍莓的外植體置於初代培養基上進行誘導分化培養，得到初代組培苗；再將初代組培苗置於繼代培養基中進行繼代培養，得到繼代苗；
其中，誘導分化培養的培養條件為：溫度為25℃、光照強度為2500lx、光周期為12h光照/12h黑暗，培養40天。
其中，繼代培養的培養條件為：光照強度為3000Lx，光照時間為15小時/天；光照培養時溫度為22℃，黑暗培養時溫度為20℃，溼度為67％。
實施例3
培養基製備同實施例1。
一種生根培養基用於培養藍莓組培苗的方法，將藍莓的外植體置於初代培養基上進行誘導分化培養，得到初代組培苗；再將初代組培苗置於繼代培養基中進行繼代培養，得到繼代苗；
其中，誘導分化培養的培養條件為：溫度為25℃、光照強度為3000lx、光周期為12h光照/12h黑暗，培養40天。
其中，繼代培養的培養條件為：光照強度為3000Lx，光照時間為16小時/天；光照培養時溫度為24℃，黑暗培養時溫度為22℃，溼度為75％。
本技術領域技術人員可以理解，除非另外定義，這裡使用的所有術語(包括技術術語和科學術語)具有與本發明所屬領域中的普通技術人員的一般理解相同的意義。還應該理解的是，諸如通用字典中定義的那些術語應該被理解為具有與現有技術的上下文中的意義一致的意義，並且除非像這裡一樣定義，不會用理想化或過於正式的含義來解釋。
最後所應說明的是：以上實施例僅用以說明而非限制本發明的技術方案，儘管參照上述實施例對本發明進行了詳細說明，本領域的普通技術人員應該理解：依然可以對本發明進行修改或者等同替換，而不脫離本發明的精神和範圍的任何修改或局部替換，其均應涵蓋在本發明的權利要求範圍當中。