一種櫻花皂甙的提純方法
2023-12-10 04:16:31 1
專利名稱：一種櫻花皂甙的提純方法
技術領域：
本發明涉及一種櫻花皂甙的提純方法，特別是涉及一種櫻花皂甙的高效、快速提純方法。
背景技術：
樓花阜式(Sakurasosaponin)為三職阜苷類物質，分子式C6tlH98O27,分子量1250. 82，CAS號59527-84-9。櫻花皂甙主要來源於紫金牛科(Myrsinaceae)黑皮密花樹Rapanea melanophloeos (L. JMez.的葉,具有抗真菌作用，I μ g時抗甜瓜分支孢子菌。同時櫻花皂甙在10 μ M濃度時，對豚鼠離體心房和乳頭肌呈增強收縮力和變時性作用，改善鈣通道作用。高速逆流色譜技術是一種不用任何同態載體的液、液色譜技術，其原理是基於組 分在旋轉螺旋管內的相對移動而互不混溶的兩相溶劑間分布不同而分離，其分離效率和速度可以與HPLC相媲美。HSCCC分離效率高，產品純度高，不存在載體對樣品的吸附和汙染，製備量大和溶劑消耗少，操作簡單，能從極複雜的混合物中分離出特定的組分。被廣泛應用天然產物分離製備中。目前，國內尚未見櫻花皂甙提取方法相關專利的報導。
發明內容
本發明的目的是克服現有技術的缺陷和不足，提供一種櫻花皂甙的提純方法，方法操作簡單，效率高。本發明的目的是通過以下技術方案來實現的
一種櫻花皂甙的提純方法，其特徵在於包括以下步驟
a.取乾燥黑皮密花樹葉粉碎至60-80目，加入超臨界萃取釜中，在萃取壓力28-35MPa、溫度40-60 °C的條件下，通入液態CO2和夾帶劑超臨界萃取2-3h，在壓力6-9MPa，溫度35-42 °C 解析；
b.所得萃取液濃縮至醇濃度為35-40%，加乙酸乙酯攪拌，分層後棄去乙酸乙酯層，力口酸調節pH3. 5-4. 5，再加入氯仿攪拌，分層後棄去氯仿層，母液濃縮得到浸膏；
c.浸膏採用高速逆流色譜純化，蒸發光散射檢測器在線監測，根據圖譜收集目標成分，回收試劑，減壓乾燥即得。步驟a中所述夾帶劑為65-90%的甲醇溶液，用量為原料的I. 5-3倍量。步驟b中所述酸為5%鹽酸溶液。步驟c中所述的高速逆流色譜分離的溶劑系統可選乙酸乙酯-丁醇-甲醇-水溶劑系統，混合比例6-10:2-3:1-2:7-11,取上相做固定相,下相做流動相。本發明的技術優勢有
1.方法採用了超臨界CO2萃取，提取效率高，溶劑容量少，可減少對環境汙染；
2.方法是在醇水溶液中用不同溶劑萃取，形成了液液分配色譜，不同的物質溶於不同的溶劑系統，有效地去除了雜質；
3.方法採用了高速逆流色譜法純化，方法簡便易操作，溶劑用量小，樣品無損失，製備量大，可連續製備，而且無汙染。
具體實施例方式 下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明。實施例I :
取乾燥黑皮密花樹葉1kg，粉碎至60目，加入超臨界萃取釜中，通入液態CO2，設置在萃取壓力28MPa、溫度55°C，達到上述參數後，調整液態CO2流速為20kg/h，同時通入2kg80%甲醇，動態萃取3h，在壓力7. 5MPa，溫度38°C條件下解析，所得萃取液濃縮至醇濃度為35%， 加乙酸乙酯攪拌，分層後棄去乙酸乙酯層，加5%鹽酸溶液調節pH4，再加入氯仿攪拌，分層後棄去氯仿層，母液濃縮得到浸膏；以乙酸乙酯-丁醇-甲醇-水為溶劑系統，混合比例為7:2:2:8，取上相做固定相，下相做流動相，採用高速逆流色譜純化，蒸發光散射檢測器在線監測，根據圖譜收集目標成分，回收試劑，連續製備，回收試劑，減壓乾燥得白色粉末櫻花皂甙I. 9g，經HPLC檢測，含量96. 9%。實施例2:
取乾燥黑皮密花樹葉1kg，粉碎至80目，加入超臨界萃取釜中，通入液態CO2，設置在萃取壓力32MPa、溫度40°C，達到上述參數後，調整液態CO2流速為22kg/h，同時通入2kg65%甲醇，動態萃取2h，在壓力7. 5MPa，溫度38°C條件下解析，所得萃取液濃縮至醇濃度為40%，加乙酸乙酯攪拌，分層後棄去乙酸乙酯層，加5%鹽酸溶液調節pH4，再加入氯仿攪拌，分層後棄去氯仿層，母液濃縮得到浸膏；以乙酸乙酯-丁醇-甲醇-水為溶劑系統，混合比例為8:3:2:10，取上相做固定相，下相做流動相，採用高速逆流色譜純化，蒸發光散射檢測器在線監測，根據圖譜收集目標成分，回收試劑，連續製備，回收試劑，減壓乾燥得白色粉末櫻花皂甙2. Ig,經HPLC檢測，含量96. 4%。實施例3
取乾燥黑皮密花樹葉1kg，粉碎至60目，加入超臨界萃取釜中，通入液態CO2，設置在萃取壓力35MPa、溫度60°C，達到上述參數後，調整液態CO2流速為20kg/h，同時通入I· 5kg90%甲醇，動態萃取3h，在壓力6MPa，溫度35°C條件下解析，所得萃取液濃縮至醇濃度為40%，加乙酸乙酯攪拌，分層後棄去乙酸乙酯層，加5%鹽酸溶液調節pH3. 5，再加入氯仿攪拌，分層後棄去氯仿層，母液濃縮得到浸膏；以乙酸乙酯-丁醇-甲醇-水為溶劑系統，混合比例為10:3:2:11，取上相做固定相，下相做流動相，採用高速逆流色譜純化，蒸發光散射檢測器在線監測，根據圖譜收集目標成分，回收試劑，連續製備，回收試劑，減壓乾燥得白色粉末櫻花皂甙2. Ig,經HPLC檢測，含量96. 8%。實施例4:
取乾燥黑皮密花樹葉1kg，粉碎至80目，加入超臨界萃取釜中，通入液態CO2，設置在萃取壓力35MPa、溫度60°C，達到上述參數後，調整液態CO2流速為18kg/h，同時通入3kg90%甲醇，動態萃取3h，在壓力9MPa，溫度42°C條件下解析，所得萃取液濃縮至醇濃度為35%，加乙酸乙酯攪拌，分層後棄去乙酸乙酯層，加5%鹽酸溶液調節pH4. 5，再加入氯仿攪拌，分層後棄去氯仿層，母液濃縮得到浸膏；以乙酸乙酯-丁醇-甲醇-水為溶劑系統，混合比例為6:2:1:7,取上相做固定相，下相做流動相，採用高速逆流色譜純化，蒸發光散射檢測器在線監測，根據圖譜收集目標成分，回收試劑，連續制 備，回收試劑，減壓乾燥得白色粉末櫻花皂甙2. 4 g，經HPLC檢測，含量97. 4%。
權利要求
1.一種櫻花皂甙的提純方法，其特徵在於包括以下步驟 a.取乾燥黑皮密花樹葉粉碎至60-80目，加入超臨界萃取釜中，在萃取壓力28-35MPa、溫度40-60 °C的條件下，通入液態CO2和夾帶劑超臨界萃取2-3h，在壓力6-9MPa，溫度35-42 °C 解析； b.所得萃取液濃縮至醇濃度為35-40%，加乙酸乙酯攪拌，分層後棄去乙酸乙酯層，力口酸調節pH3. 5-4. 5，再加入氯仿攪拌，分層後棄去氯仿層，母液濃縮得到浸膏； c.浸膏採用高速逆流色譜純化，蒸發光散射檢測器在線監測，根據圖譜收集目標成分，回收試劑，減壓乾燥即得。
2.根據權利要求I所述的櫻花皂甙的提純方法，其特徵在於步驟a中所述夾帶劑為65-90%的甲醇溶液，用量為原料的I. 5-3倍量。
3.根據權利要求I所述的櫻花皂甙的提純方法，其特徵在於步驟b中所述酸為5%鹽酸溶液。
4.根據權利要求I所述的櫻花皂甙的提純方法，其特徵在於步驟c中所述的高速逆流色譜分離的溶劑系統可選乙酸乙酯-丁醇-甲醇-水溶劑系統，混合比例6-10:2-3:1-2:7-11,取上相做固定相，下相做流動相。
全文摘要
本發明公開了一種櫻花皂甙的提純方法。其方法如下a.取乾燥黑皮密花樹葉粉碎至60-80目，加入超臨界萃取釜中，在萃取壓力28-35MPa、溫度40-60℃的條件下，通入液態CO2和夾帶劑超臨界萃取2-3h，在壓力6-9MPa，溫度35-42℃解析；b.所得萃取液加乙酸乙酯攪拌，分層後棄去乙酸乙酯層，調節pH，再加入氯仿攪拌，分層後棄去氯仿層；c.採用高速逆流色譜純化，蒸發光散射檢測器在線監測，根據圖譜收集目標成分，回收試劑，減壓乾燥即得櫻花皂甙。本方法高效、快速，適合高純度櫻花皂甙的生產。
文檔編號C07J71/00GK102827243SQ20121035032
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月20日 優先權日2012年9月20日
發明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農業發展有限公司