一種茵陳蒿湯配方顆粒及其製備方法和檢測方法
2023-12-01 23:57:26
專利名稱：一種茵陳蒿湯配方顆粒及其製備方法和檢測方法
技術領域：
本發明屬於中藥領域。具體涉及一種中藥及其製備方法和檢測方法，尤其涉及一種茵陳蒿湯配方顆粒及其製備方法和檢測方法。
背景技術：
茵陳蒿湯源自《傷寒論》:「陽明病，發熱汗出者，此為熱越，不能發黃也；」 「傷寒七八日，身黃如橘子色，小便不利，腹微滿者，茵陳蒿湯主之。」茵陳蒿湯由茵陳蒿、桅子和大黃三味藥組成。茵陳蒿湯主治溼熱黃疽，一身面目俱黃，色鮮明如橘子，腹微滿，口中渴，小便不利，舌苔黃膩，脈沉實或滑數。方中茵陳清熱利溼，疏利肝膽為君；桅子清洩三焦溼熱，並可退黃為臣；大黃通利大便，導熱下行為佐，三藥相配，使溼熱之邪從二便排洩，溼去熱除，則發黃自退。現代研究表明，茵陳蒿湯具有利膽、保肝、護胰、解熱、抗炎、鎮痛、抗菌、抗病毒等藥理作用。傳統的茵陳蒿湯劑不僅服用攜帶不方便，而且穩定性不高，不易儲存。另外，茵陳蒿湯傳統的煎煮方法較為麻煩，病人對茵陳蒿湯加水量、浸泡時間、煎煮時間、先煎、後下等不甚了解，使處方的療效得不到全面發揮甚至沒有療效。同時尚無相關的質量控制標準，其有效成分得不到相應的保證，難以保證群眾的用藥安全有效。所以傳統中藥湯劑越來越難以適應現代化社會快節奏的生活方式和臨床應用的需要。現代有將傳統煎煮湯液進行改進，做成分煎顆粒劑或合煎顆粒等新形式用於臨床。而中醫臨床用藥歷來多用複方湯劑，實踐證明中藥複方的作用往往比單味藥所不具有的獨特療效。中藥配方顆粒是以中藥飲片為原料，經現代工業提取、濃縮、乾燥、制粒等工序精製而成的顆粒劑，供中醫臨床配方時應用。它既保留了中藥飲片的藥性藥效，又不需煎煮，易於調劑、使用方便、質量可控，符合現代消費與生活需求，易為國外消費者認可和接受，是一種安全、可控、高效、方便的現代中藥湯劑。為了回歸傳統醫藥治療疾病的精髓，本發明按照「遵古」的指導思想，用水提取藥物，結合現代的濃縮、制粒工藝，總結出了與茵陳蒿湯劑最為匹配的製劑工藝參數，最大限度地保留了傳統醫藥的經驗積累，而又能適應現代社會快節奏的需要，為傳統醫藥的創新提供了一種新的方法和思路。隨著中藥現代化發展及中藥走向國際市場的需要，為了保證中藥產品的質量可控，建立質量標準具有非常重要的意義。茵陳蒿湯配方顆粒目前尚無質量標準及檢測方法，本發明提供一種茵陳蒿湯配方顆粒的質量標準草案，以更好的指導生產，使生產工藝控制更加嚴格合理，在產品生產過程中，用該質量規定方法能有效的控制產品的質量，從而確保茵陳蒿湯配方顆粒的臨床療效和安全性。
發明內容
因此，本發明的目的是針對現有技術中存在的茵陳蒿湯配方顆粒不能夠安全使用，並且質量不能很好地控制的 不足，提供一種茵陳蒿湯配方顆粒及其製備方法和檢測方法，該茵陳蒿配方顆粒副作用小，其製備方法簡單，並且通過該檢測方法使其能夠更為安全地使用。除非特別指明，本文中的「本品」均指「茵陳蒿配方顆粒」。除非特別指明，本文中的「六六六」均指「六氯環己烷」。除非特別指明，本文中的「滴滴涕」均指「雙對氯苯基三氯乙烷」。針對上述目的，本發明提供的技術方案如下:一方面，本發明提供一種茵陳蒿湯配方顆粒，所述茵陳蒿湯配方顆粒由質量比為
3:1.5:1的茵陳蒿、桅子和大黃加水提取，過濾，濃縮噴霧乾燥而製得。還一方面，本發明提供一種茵陳蒿湯配方顆粒的製備方法，所述方法包括以下步驟: 以3:1.5:1的質量比稱取茵陳蒿、桅子和大黃，加水提取三次，每次提取15-30分鐘，過濾合併濾液，再將其濃縮成浸膏，乾燥制粒，即得。優選地，提取3次。優選地，第一次提取30分鐘，或第二、三次提取15分鐘。還優選地，加茵陳蒿、桅子和大黃總質量的6-8倍的水提取。優選地，第一次加8體積倍的水提取，或第二、三次加6倍體積的水提取。優選地，所述乾燥為噴霧乾燥、減壓乾燥或微波乾燥，還優選地，所述乾燥為微波乾燥。進一步優選地，於55°C，乾燥25分鐘。另一方面，本發明提供一種茵陳蒿湯配方顆粒的檢測方法，所述檢測方法包括以下步驟:步驟1:通過薄層色譜法鑑定所述茵陳蒿湯配方顆粒；步驟2:通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒的指紋圖譜；步驟3:通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中物質的含量；步驟4:通過熱浸法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒的浸出物含量；步驟5:通過熾灼殘渣檢查法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中的重金屬含量；步驟6:通過農藥殘留量測定法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中的有機氯農藥殘留含量。優選地，所述步驟I包括以下步驟:I)製備茵陳蒿樣品溶液組、桅子樣品溶液組和大黃樣品溶液組，所述茵陳蒿樣品溶液組包括茵陳蒿湯配方顆粒茵陳蒿供試品溶液、第一茵陳蒿對照藥材溶液、第一茵陳蒿陰性對照品溶液，所述桅子樣品溶液組包括茵陳蒿湯配方顆粒桅子供試品溶液、第一桅子對照藥材溶液、第一桅子苷對照品溶液和第一桅子陰性對照品溶液，所述大黃樣品溶液組包括茵陳蒿湯配方顆粒大黃供試品溶液、第一大黃對照藥材溶液和第一大黃陰性對照品溶液；2)將所述茵陳蒿樣品溶液組、桅子樣品溶液組和大黃樣品溶液組分別點於同一矽膠G薄層板上，加展開劑展開，取出晾乾，噴以顯色劑至斑點顯色，檢測，即得。優選地，所述茵陳蒿湯配方顆粒茵陳蒿供試品溶液通過包括以下步驟的方法製得:
取所述茵陳蒿湯配方顆粒，加水溶解，再加鹽酸加熱，濾過後用乙酸乙酯提取，合併乙酸乙酯液，蒸乾後，殘渣加乙醇溶解，即得；還優選地，加熱至80 □，或還優選地，加乙酸乙酯提取2次，每次加IOml乙酸乙酯，更優選地，取所述茵陳蒿湯配方顆粒1.0g,加水IOml溶解，再加稀鹽酸Iml ；或優選地，所述第一茵陳蒿對照藥材溶液通過包括以下步驟的方法製得:取所述茵陳蒿對照藥材，加水煎煮，濾過後，濾液加乙酸乙酯後，按照與製備所述陳蒿湯配方顆粒桅子供試品溶液加乙酸乙酯提取的方法提取，還優選地，取茵陳蒿對照藥材3g，加水50ml，煎煮5 10分鐘；
或優選地，所述第一茵陳蒿陰性對照品溶液通過包括以下步驟的方法製得:所述茵陳蒿陰性樣品為缺少茵陳蒿按茵陳蒿湯配方顆粒的工藝處方製備的樣品，取茵陳蒿湯茵陳蒿陰性配方顆粒樣品，加水溶解，再加鹽酸加熱，濾過後用乙酸乙酯提取，合併乙酸乙酯液，蒸乾後，殘渣加乙醇溶解，即得；還優選地，加熱至80 □，或還優選地，加乙酸乙酯提取2次，每次加IOml乙酸乙酯，更優選地，取所述茵陳蒿湯配方顆粒1.0g，加水IOml溶解，再加稀鹽酸Iml ；或優選地，所述茵陳蒿湯配方顆粒桅子供試品溶液通過包括以下步驟的方法製得:取所述茵陳蒿湯配方顆粒，加水溶解，再加入乙醇搖勻，靜置，濾過後，濃縮濾液，即得；還優選地，取所述茵陳蒿湯配方顆粒1.0g，W 25ml水溶解，再加入50ml乙醇搖勻，靜置，濾過後，濃縮濾液至20ml ；或優選地，所述第一桅子對照藥材溶液通過包括以下步驟的方法製得:取所述桅子對照藥材溶液，加水煎煮，再加入乙醇搖勻，靜置，濾過後，濃縮濾液，即得；還優選地，取所述桅子對照藥材3.0g，W 25ml水溶解，再加入50ml乙醇搖勻，靜置，濾過後，濃縮濾液至20ml ；或優選地，所述第一桅子苷對照品溶液通過包括以下步驟的方法製得:取所述桅子苷對照品，加乙醇製成桅子苷濃度為4mg/ml的溶液，即得；或優選地，所述第一桅子陰性對照溶液通過包括以下步驟的方法製得:所述桅子陰性樣品為缺少桅子按茵陳蒿湯配方顆粒的工藝處方製備的樣品，取茵陳蒿湯第一桅子陰性配方顆粒樣品，加水溶解，再加入乙醇搖勻，靜置，濾過後，濃縮濾液，即得；還優選地，取所述桅子對照藥材3.0g，W 25ml水溶解，再加入50ml乙醇搖勻，靜置，濾過後，濃縮濾液至20ml ；或優選地，所述茵陳蒿湯配方顆粒大黃供試品溶液通過包括以下步驟的方法製得:取所述茵陳蒿湯配方顆粒，加水溶解，再加鹽酸，用乙醚振蕩提取2次，即得；還優選地，所述茵陳蒿湯配方顆粒3.0g，加20ml水溶解，再加Iml鹽酸；或還優選地，每次加20ml乙醚；或優選地，所述第一大黃對照藥材溶液通過包括以下步驟的方法製得:取大黃對照藥材，加水煎煮，濾過後，濾液再加鹽酸，用乙醚振蕩提取2次，即得；還優選地，所述大黃對照藥材1.0g,加20ml水溶解，再加Iml鹽酸；或還優選地，每次加20ml乙醚；
還優選地，煎煮10分鐘，再優選地，取大黃對照藥材lg，加水20ml ；或優選地，所述第一大黃陰性對照品溶液通過包括以下步驟的方法製得:所述大黃陰性樣品為缺少大黃按茵陳蒿湯配方顆粒的工藝處方製備的樣品，取茵陳蒿湯第一大黃陰性配方顆粒樣品，加水溶解，再加鹽酸，用乙醚振蕩提取2次，即得；還優選地，所述茵陳蒿湯配方顆粒3.0g，加20ml水溶解，再加Iml鹽酸；或還優選地，每次加20ml乙醚；優選地，所述茵陳蒿樣品溶液組以石油醚-乙酸乙酯-丙酮為展開劑，還優選地，所述石油醚-乙酸乙酯-丙酮中石油醚、乙酸乙酯、丙酮的體積比為5:3:2 ;更優選地，所述顯色劑為5wt%的氫氧化鉀乙醇溶液；或優選地，所述桅子樣品溶液組以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水為展開劑，還優選地，所述乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水中乙酸乙酯、丙酮、甲酸和水的體積比為5:5:1:1，更優選地，所述顯色劑為10體積％的硫酸乙醇溶液；或優選地，所述大黃樣品溶液組以石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，還優選地，所述石 油醚-甲酸乙酯-甲酸中石油醚、甲酸乙酯和甲酸的體積比為15:5:1，更優選地，所述顯色劑為氨氣。優選地，所述步驟2或3通過包括以下步驟的方法進行:製備待測樣品溶液，通過高效液相色譜法測定；當通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒的指紋圖譜時，所述待測樣品溶液包括:第一供試品溶液、對照藥材溶液組和對照品溶液組，所述對照藥材溶液包括第二茵陳蒿對照藥材溶液、第二桅子對照藥材溶液和第二大黃對照藥材溶液，所述對照品溶液組包括綠原酸對照品溶液、第二桅子苷對照品溶液和黃酸對照品溶液；當通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中物質的含量時，所述待測樣品溶液包括:第二供試品溶液、第三桅子苷對照品溶液和第二桅子苷陰性對照品溶液；優選地，以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；或優選地，當通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒的指紋圖譜時，以甲醇為流動相A，0.05%磷酸為流動相B，按下述條件進行梯度洗脫:O至10分鐘:流動相A的濃度由10體積％勻速變為20體積％，流動相B濃度由90體積％勻速變為80體積％ ； 10至40分鐘:流動相A的濃度由20體積％勻速變為50體積％，流動相B濃度由80體積％勻速變為50體積％ ；40至60分鐘:流動相A的濃度由50體積％勻速變為80體積％，流動相B濃度由50體積％勻速變為20體積％ ；60至80分鐘:流動相A的濃度為80體積％，流動相B濃度為20體積％ ;還優選地，檢測波長為254nm，理論塔板數按桅子苷峰計算不低於3000 ;或當通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中物質的含量時，以體積比為20:80的甲醇-水為流動相，還優選地，檢測波長為240nm，理論塔板數按桅子苷峰計算不低於 6000。優選地，所述第一、第二供試品溶液通過包括以下步驟的方法製得:取所述茵陳蒿湯配方顆粒粉末，加甲醇溶液溶解，稱重，超聲處理後，再次稱重，並用甲醇溶液補足減失的重量，濾過，取濾液，即得；優選地，超聲處理30分鐘，還優選地，稱取所述茵陳蒿湯配方顆粒粉末0.lg，加甲醇溶液20ml ；或所述對照藥材溶液組通過包括以下步驟的方法製得:取茵陳蒿、桅子、大黃對照藥材，加甲醇溶液溶解，超聲處理後，，濾過，取濾液，即得；優選地，超聲處理30分鐘，還優選地，稱取所述茵陳蒿、桅子和大黃對照藥材和lg，加甲醇溶液20ml ；或所述對照品溶液組和第三桅子苷對照品溶液通過包括以下步驟的方法製得:取桅子苷對照品、綠原酸對照品或大黃酸對照品，加甲醇溶液製成含對照品濃度為0.lmg/ml的溶液； 優選地，所述甲醇溶液為體積比為50%的甲醇溶液。優選地，所述步驟4中浸出物的含量> 30wt%。優選地，在步驟5中，測得的重金屬含量< 25ppm ;或在步驟6中,所述有機氯農藥為六六六、滴滴涕和五氯硝基苯,所述六六六的含量(0.20ppm ;所述滴滴涕的含量< 0.20ppm,所述五氯硝基苯的含量;^ 0.lOppm。本發明所述的茵陳蒿湯按傳統方法合煎後製成配方顆粒，充分發揮中藥配伍的優勢，體現了中醫藥整體觀念，克服了目前單位配方顆粒服用時各藥味簡單相加帶來的不足；確立了茵陳蒿湯配方顆粒完善的質量標準，可以有效地控制該配方顆粒的質量；茵陳蒿湯配方顆粒便於患者攜帶使用和儲存，在使用上省去了煎煮的麻煩；對促進中醫藥現代化有較大意義。本發明的製備·方法:其方法簡單，成本低廉，適合工業化生產。它是將原藥材飲片加水提取，微波乾燥，收集幹膏，制粒，分裝而成的中藥顆粒，該顆粒能直接提供中藥處方中配伍使用。本方法生產的茵陳蒿湯配方顆粒保持了茵陳蒿湯的全部特徵，其有效成分、性味、歸經、主治、功效和傳統茵陳蒿湯劑一致，而單位質量的有效成分得到較好的控制；它既能保證中醫傳統的君、臣、佐、使和辨證施治、靈活加減的特點，同時又免去了病人傳統煎煮的麻煩，具有不需要煎煮、直接衝服、服用量少、作用迅速、成分完全、療效確切、安全衛生、攜帶保存方便等許多優點。本發明的茵陳蒿湯配方顆粒質量控制方法是一種具體可行的成分鑑定和含量測定方法，所採用的鑑別方法專屬性強，含量測定準確度高，重現性好，為生產單位、檢測機構提供了檢測指標、檢測手段和技術方法等，以能更好的指導生產，使生產工藝控制更加嚴格合理，在產品生產過程中，用該質量測定方法能有效的控制產品的質量，從而確保茵陳蒿湯配方顆粒物的臨床療效和安全性。
以下，結合附圖來詳細說明本發明的實施方案，其中:圖1為本發明所述的茵陳蒿湯配方顆粒的茵陳蒿樣品溶液組的薄層層析色譜圖，圖中，1-3為茵陳蒿湯配方顆粒茵陳蒿供試品溶液，4為茵陳蒿大黃陰性對照溶液，5第一茵陳蒿陰性對照品溶液；圖2為本發明所述的茵陳蒿湯配方顆粒的桅子樣品溶液組的薄層層析色譜圖；圖中，1-3為茵陳蒿湯配方顆粒的桅子樣品溶液，4第一桅子對照藥材溶液，5為第一桅子苷對照品溶液，6為第一桅子陰性對照品溶液；圖3為本發明所述的茵陳蒿湯配方顆粒的大黃樣品溶液組的薄層層析色譜圖；其中，圖3A為日光下鑑別的大黃樣品溶液組的薄層層析色譜圖，圖3B為365nm紫外光下鑑別的大黃樣品溶液組的薄層層析色譜圖，圖3C為氨氣燻後鑑別的大黃樣品溶液組的薄層層析色譜圖，圖中，1-3為茵陳蒿湯配方顆粒的大黃樣品溶液，4為第一大黃對照藥材溶液，5為第一大黃陰性對照品溶液；圖4為本發明所述的茵陳蒿湯配方顆粒的指紋圖譜；圖5為本發明所述的大黃對照藥材的指紋圖譜；圖6為本發明所述的茵陳蒿對照藥材的指紋圖譜；圖7為本發明所述的桅子對照藥材的指紋圖譜；圖8為本發明所述的大黃酸對照品的指紋圖譜；圖9為本發明所述的桅子苷對照品的指紋圖譜；圖10為本發明所述的綠原酸對照品的指紋圖譜；圖11為本發明所述的空白溶劑的圖譜；圖12為本發明所述的桅子苷濃度與峰面積的線性關係圖；圖13為本發明實施例5中大 黃樣品溶液組的專屬性試驗結果，其中，圖13a為第
二桅子苷陰性對照品溶液的高效液相色譜圖；圖13b為桅子苷對照品的高效液相色譜圖；圖13c為所述的茵陳蒿湯配方顆粒的高效液相色譜具體實施例方式除非特別指明，以下實施例中所用的茵陳蒿飲片、桅子飲片和大黃飲片購自康美藥業股份有限公司，茵陳蒿飲片批號:110608581 ;桅子飲片批號:110707961 ;大黃飲片批號:1107132021 ;茵陳、大黃和桅子對照藥材購自中國食品藥品檢定研究院，批號分別為120950-201007和120984-200301、120986-200303。除非特別指明，以下實施例中所用的桅子苷對照品購自中國固體製劑製造技術國家工程中心，批號:1204-040618。除非特別指明，以下實施例中所用的桅子苷、綠原酸和大黃酸對照品購自中國固體製劑製造技術國家工程中心，批號分別為:1204-040618,1100-040311 和 1040-040421。實施例1茵陳蒿湯配方顆粒的製備條件選擇1.藥材茵陳蒿、桅子和大黃飲片。2.儀器設備電子稱(型號:UWA-F-003，廈門聯貿電子有限公司)；電熱套(規格:10000ml，海寧新華醫療器械廠)；旋轉蒸發器(型號:RE-5205，上海亞榮生化儀器廠)；循環水式真空泵(型號=SHZ-D (III)，鞏義市英峪予華儀器廠)；滷素水份測定儀(型號:HB43 — S，梅特勒-託利多)；高效液相色譜儀:Waters2695_2489, Empower2Personal Single System SW 化學工作站；色譜柱:Waters symmenyi C18 (4.6mmX 250mm, 5 μ m);電子分析天:METTER TOLEDOXP6 ；HANGPING FA2104 ;超聲提取器:KQ_300VDB型雙頻數控超聲清洗儀。甲醇為色譜純，水為超純水；其他試劑均為分析純。3.製備方法
取茵陳蒿飲片18g、桅子飲片9g和大黃飲片6g加水提取三次，濾過，合併三次濾液，濃縮成清膏，噴霧乾燥，混勻，再將混勻的粉末幹法制粒，整粒，即得。具體條件如下表I所示:表I
權利要求
1.一種茵陳蒿湯配方顆粒，所述茵陳蒿湯配方顆粒由質量比為3:1.5:1的茵陳蒿、桅子和大黃加水提取，過濾，濃縮噴霧乾燥而製得。
2.根據權利要求1所述的茵陳蒿湯配方顆粒的製備方法，所述方法包括以下步驟: 以3:1.5:1的質量比稱取茵陳蒿、桅子和大黃，加水提取三次，每次提取15-30分鐘，過濾合併濾液，再將其濃縮成浸膏，乾燥制粒，即得。
3.根據權利要求2所述的茵陳蒿湯配方顆粒的製備方法，其特徵在於，提取3次，優選地，第一次提取30分鐘，或第二、三次提取15分鐘；還優選地，加茵陳蒿、桅子和大黃總質量的6-8倍的水提取。
4.根據權利要求1至3中任一項所述的茵陳蒿湯配方顆粒的製備方法，其特徵在於，第一次加8體積倍的水提取，或第二、三次加6倍體積的水提取，優選地，所述乾燥為噴霧乾燥、減壓乾燥或微波乾燥，還優選地，所述乾燥為微波乾燥；進一步優選地，於55°C，乾燥25分鐘。
5.根據權利要求1所述的茵陳蒿湯配方顆粒的檢測方法，所述檢測方法包括以下步驟: 步驟1:通過薄層色譜法鑑定所述茵陳蒿湯配方顆粒； 步驟2:通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒的指紋圖譜； 步驟3:通過高效液相色譜 法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中物質的含量； 步驟4:通過熱浸法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒的浸出物含量； 步驟5:通過熾灼殘渣檢查法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中的重金屬含量； 步驟6:通過農藥殘留量測定法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中的有機氯農藥殘留含量。
6.根據權利要求1所述的茵陳蒿湯配方顆粒的檢測方法，其特徵在於，所述步驟I包括以下步驟: I)製備茵陳蒿樣品溶液組、桅子樣品溶液組和大黃樣品溶液組，所述茵陳蒿樣品溶液組包括茵陳蒿湯配方顆粒茵陳蒿供試品溶液和第一茵陳蒿對照藥材溶液，所述桅子樣品溶液組包括茵陳蒿湯配方顆粒桅子供試品溶液、第一桅子對照藥材溶液和第一桅子苷對照品溶液，所述大黃樣品溶液組包括茵陳蒿湯配方顆粒大黃供試品溶液和第一大黃對照藥材溶液和；優選地，所述茵陳蒿湯配方顆粒茵陳蒿供試品溶液通過包括以下步驟的方法製得:取所述茵陳蒿湯配方顆粒，加水溶解，再加鹽酸加熱，濾過後用乙酸乙酯提取，合併乙酸乙酯液，蒸乾後，殘渣加乙醇溶解，即得；還優選地，加熱至80 □，或還優選地，加乙酸乙酯提取2次，每次加IOml乙酸乙酯，更優選地，取所述茵陳蒿湯配方顆粒1.0g，加水IOml溶解，再加稀鹽酸Iml ； 或優選地，所述第一茵陳蒿對照藥材溶液通過包括以下步驟的方法製得: 取所述茵陳蒿對照藥材，加水煎煮，濾過後，濾液加乙酸乙酯後，按照與製備所述陳蒿湯配方顆粒桅子供試品溶液加乙酸乙酯提取的方法提取，還優選地，取茵陳蒿對照藥材3g，加水50ml，煎煮5 10分鐘；或優選地，所述茵陳蒿湯配方顆粒桅子供試品溶液通過包括以下步驟的方法製得:取所述茵陳蒿湯配方顆粒，加水溶解，再加入乙醇搖勻，靜置，濾過後，濃縮濾液，即得；還優選地，取所述茵陳蒿湯配方顆粒1.0g，加25ml水溶解，再加入50ml乙醇搖勻，靜置，濾過後，濃縮濾液至20ml ； 或優選地，所述第一桅子對照藥材溶液通過包括以下步驟的方法製得: 取所述桅子對照藥材，加水煎煮，濾過後，濾液加乙酸乙酯後，按照與製備所述陳蒿湯配方顆粒桅子供試品溶液加乙酸乙酯提取的方法提取，還優選地，取茵陳蒿對照藥材3g，力口水50ml，煎煮5 10分鐘； 或優選地，所述第一桅子苷對照品溶液通過包括以下步驟的方法製得: 取所述桅子苷對照品，加乙醇製成桅子苷濃度為4mg/ml的溶液，即得； 或優選地，所述茵陳蒿湯配方顆粒大黃供試品溶液通過包括以下步驟的方法製得:取所述茵陳蒿湯配方顆粒，加水溶解，再加鹽酸，用乙醚振蕩提取2次，即得；還優選地，所述茵陳蒿湯配方顆粒3.0g，加20ml水溶解，再加Iml鹽酸；或還優選地，每次加20ml乙醚； 或優選地，所述第一大黃對照藥材溶液通過包括以下步驟的方法製得: 取大黃對照藥材，加水煎煮，濾過後，濾液按照與從「再加鹽酸」開始與製備茵陳蒿湯配方顆粒大黃供試品溶液相同的方法製得。還優選地，煎煮10分鐘，再優選地，取大黃對照藥材lg，加水20ml ； 2)將所述茵陳蒿樣品溶液組、桅子樣品溶液組和大黃樣品溶液組分別點於同一矽膠G薄層板上，加展開劑展開，取出晾乾，噴以顯色劑至斑點顯色，檢測，即得； 優選地，所述茵陳蒿樣品溶液組以石油醚-乙酸乙酯-丙酮為展開劑，還優選地，所述石油醚-乙酸乙酯-丙酮中石油醚、乙酸乙酯、丙酮的體積比為5:3:2 ;更優選地，所述顯色劑為5wt%的氫氧化鉀乙醇溶液； 或優選地，所述桅子樣品溶液組以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水為展開劑，還優選地，所述乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水中乙酸乙酯、丙酮、甲酸和水的體積比為5:5:1: 1，更優選地，所述顯色劑為10體積％的硫酸乙醇溶液； 或優選地，所述大黃樣品溶液組以石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，還優選地，所述石油醚-甲酸乙酯-甲酸中石油醚、甲酸乙酯和甲酸的體積比為15:5:1，更優選地，所述顯色劑為氨氣。
7.根據權利要求5或6所述的茵陳蒿湯配方顆粒的檢測方法，其特徵在於，所述步驟2或3通過包括以下步驟的方法進行: 製備待測樣品溶液，通過高效液相色譜法測定； 當通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒的指紋圖譜時，所述待測樣品溶液包括:第一供試品溶液、對照藥材溶液組和對照品溶液組，所述對照藥材溶液包括第二茵陳蒿對照藥材溶液、第二桅子對照藥材溶液和第二大黃對照藥材溶液，所述對照品溶液組包括綠原酸對照品溶液、第二桅子苷對照品溶液和黃酸對照品溶液； 當通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中物質的含量時，所述待測樣品溶液包括:第二供試品溶液、第三桅子苷對照品溶液和第二桅子苷陰性對照品溶液； 優選地，以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑； 或優選地，當通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒的指紋圖譜時，以甲醇為流動相A，0.05體積％磷酸為流動相B，按下述條件進行梯度洗脫:O至10分鐘:流動相A的濃度由10體積％勻速變為20體積％，流動相B濃度由90體積％勻速變為80體積％ ； 10至40分鐘:流動相A的濃度由20體積％勻速變為50體積％，流動相B濃度由80體積％勻速變為50體積％ ； 40至60分鐘:流動相A的濃度由50體積％勻速變為80體積％，流動相B濃度由50體積％勻速變為20體積％ ； 60至80分鐘:流動相A的濃度為80體積％，流動相B濃度為20體積％ ;還優選地，檢測波長為254nm，理論塔板數按桅子苷峰計算不低於3000 ;或 當通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中物質的含量時，以體積比為20:80的甲醇-水為流動相，還優選地，檢測波長為240nm，理論塔板數按桅子苷峰計算不低於6000。
8.根據權利要求7所述的茵陳蒿湯配方顆粒的檢測方法，其特徵在於，所述第一、第二供試品溶液通過包括以 下步驟的方法製得: 取所述茵陳蒿湯配方顆粒粉末，加甲醇溶液溶解，稱重，超聲處理後，再次稱重，並用甲醇溶液補足減失的重量，濾過，取濾液，即得；優選地，超聲處理30分鐘，還優選地，稱取所述茵陳蒿湯配方顆粒粉末0.lg，加甲醇溶液20ml ； 或所述對照藥材溶液組通過包括以下步驟的方法製得: 取茵陳蒿、桅子、大黃對照藥材，加甲醇溶液溶解，超聲處理後，，濾過，取濾液，即得；優選地，超聲處理30分鐘，還優選地，稱取所述茵陳蒿、桅子和大黃對照藥材和lg，加甲醇溶液 20ml ； 或所述對照品溶液組和第三桅子苷對照品溶液通過包括以下步驟的方法製得: 取桅子苷對照品、綠原酸對照品或大黃酸對照品，加甲醇溶液製成含對照品濃度為0.lmg/ml的溶液； 優選地，所述甲醇溶液為體積比為50%的甲醇溶液。
9.根據權利要求5至8中任一項所述的茵陳蒿湯配方顆粒的檢測方法，其特徵在於，所述步驟4中浸出物的含量> 30wt%o
10.根據權利要求5至9中任一項所述的茵陳蒿湯配方顆粒的檢測方法，其特徵在於，在步驟5中，測得的重金屬含量< 25ppm ;或 在步驟6中，所述有機氯農藥為六六六、滴滴涕和五氯硝基苯,所述六六六的含量(0.20ppm ;所述滴滴涕的含量< 0.20ppm,所述五氯硝基苯的含量;^ 0.lOppm。
全文摘要
本發明提供一種茵陳蒿湯配方顆粒及其製備方法和檢測方法，所述茵陳蒿湯配方顆粒由質量比為31.51的茵陳蒿、梔子和大黃加水提取，過濾，濃縮噴霧乾燥而製得；所述茵陳蒿湯配方顆粒的檢測方法，所述檢測方法包括以下步驟通過薄層色譜法鑑定所述茵陳蒿湯配方顆粒；通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒的指紋圖譜；通過高效液相色譜法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中物質的含量；通過熱浸法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒的浸出物含量；通過熾灼殘渣檢查法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中的重金屬含量；通過農藥殘留量測定法測定所述茵陳蒿湯配方顆粒中的有機氯農藥殘留含量。
文檔編號A61P31/04GK103230453SQ20131013930
公開日2013年8月7日 申請日期2013年4月19日 優先權日2013年4月19日
發明者韋冬菊, 許冬瑾, 馬興田, 向飛軍, 吳小明, 陳有軍 申請人:康美藥業股份有限公司, 廣東康美藥物研究院有限公司