一種水稻雄性育性可控系的構建方法及育種方法

2023-12-03 06:08:41

專利名稱：一種水稻雄性育性可控系的構建方法及育種方法
技術領域：
本發明涉及植物基因工程技術領域，具體涉及一種條件誘導控制的水稻雄性育性可控系的基因工程育種及其雜交制種的方法。
背景技術：
作物不同品種間的異花受粉產生的雜種可能在生長勢、適應性、產量等方面具有優勢。利用這些雜種優勢可以提高農作物的產量、質量和抗性。水稻是一種雌雄同株的自花授粉植物，要生產雜交水稻種子，必須選育一個雄性不育的品系，讓雌蕊接受來自異株的花粉。中國育種家利用普通野生稻iPryza rufipogon)的天然雄性不育株(稱為「野敗」)為不育細胞質的供體，通過與栽培秈稻(ft sativa ssp.)雜交和回交育出三系雜交稻生產上所需的不育系、保持系和恢復系。利用不育系和恢復系做親本雜交可省去除雄的 操作，便於生產高純度的雜交種子，因此有重要的生產應用價值(袁隆平.1977.中國農業科學· 1:27-31, Lin, and Yuan 1980. In: IRRI (eds) Innovative approaches to ricebreeding. IRRI, Manila, p35 - 51)。在中國，已用野敗不育細胞質培育了大量的三系雜交稻品種並大規模應用，產生了巨大的經濟和社會效益(Cheng等，2007，Am. Bot. , 100，959-966)。多種農作物如水稻、小麥、玉米、油菜等關於雄性不育性及其育性恢復性的研究已有許多報導，在生產上已大規模用於雜交種生產。不育系可分為細胞質不育基因控制的細胞質雄性不育(cytoplasmic male sterility,簡稱為CMS)和核不育基因控制的核不育(genic male sterility,簡稱為GMS)。從近年發展的基因學來說細胞質雄性不育系的細胞質通常為攜帶不育基因的線粒體基因組，其不育基因的表達導致花粉不育；恢復系的核基因組中攜帶細胞質雄性不育恢復基因(restorer of fertility),簡稱為恢復基因或TP/基因，其花粉正常可育，可自交結實；保持系具有正常的可育細胞質，但其核基因組不攜帶有恢復功能的基因，花粉正常可育，可自交結實。生產上配套應用的「三系」中，保持系和不育系具有相同的核基因組，其差別是細胞質基因組不同。由於不同類型的植物細胞質雄性不育是由不育細胞質的線粒體基因組中的特異不育基因產生，其育性的恢復需要特異的恢復基因的作用(Schnable and Wise, 1998,Trends Plant Sci. 3 :175_180)。水稻細胞質雄性不育有多種類型，主要是(I)野敗型(wild abortive,簡稱WA型)，屬於孢子體不育；(2)包臺(BT)型，屬於配子體不育；(3)紅蓮(HL)型，屬於配子體不育(朱英國，2000，水稻雄性不育的生物學，武漢大學出版社)。其中野敗型不育系在「三系」雜交稻的應用最廣泛。三系雜交稻育種體系對種質的遺傳基礎有特殊的要求，即不育系要有不育細胞質(線粒體基因組含有特別的不育基因)，保持系要完全不含主效和微效恢復基因，而恢復系要攜帶主效和微效恢復基因。因此，三系雜交稻的三系培育所能利用的種質資源有限，育種難度較大，雜交配組的自由度不大，不育系和雜交種的繁殖和制種程序較繁瑣。在水稻也成功培育出基於光溫敏不育系的二系雜交稻，並在生產中推廣應用(朱英國，2000，水稻雄性不育的生物學，武漢大學出版社；Cheng等，2007，Am. Bot. , 100，959-966)。光溫敏不育系是利用在短日低溫的條件下雄性可育自交繁殖，在長日高溫的條件下雄性不育，可作為母本與父本雜交制種。任何正常可育的父本的相關野生型育性基因都可以抑制光溫敏不育性，雜交種在正常生長季節的花粉育性正常。因此二系雜交稻的父本的篩選配組的自由度較大。中國目前應用的二系雜交稻主要是以溫敏不育為主。由於溫敏不育系的雄性育性受溫度控制，不育系繁殖需要在特定區域的特定季節(如海南省偏南地區的冬季)或特定條件(如深水庫低溫水灌溉)進行。更嚴重的問題是在制種季節的育性轉換敏感期(一般是減數分裂期至小孢子發育期)遇到異常的低溫天氣(25°C或以下)會產生部分可育花粉，造成部分自交結實而降低雜種純度，嚴重的情況下使雜交種達不到純度標準而報廢。因此，由於溫度變化產生的制種風險是制約二系雜交稻發展的主要因素。水稻花葯發育涉及大量核基因的參與，自然突變或理化誘變可以較高頻度產生雄性不育突變。在水稻已經報導了大量的雄性不育突變體，其中已有20多個雄性育性基因已被克隆(Zhang DB and Wilson ZA, 2009，Chinese Science Bulletin, 2342-2353)。但由於大部分突變體是相關基因隱性不育突變，它們的純合突變體不能自交繁殖，而用野生型親本與其雜交只能產生相關基因雜合的可育(或部分可育)的雜種，因此核不育突變系不適宜直接作為商業化雜交稻制種的不育系親本。 另一方面，也有多種基因工程方案創建植物不育系及其恢復系的報導。這些方案歸納起來主要有2種，一是用花葯或花粉特異表達啟動子驅動細胞毒素基因的表達影響花葯或花粉的正常發育。如用花葯特異表達啟動子TA29控制Barnase基因轉化菸草和油菜產生雄性不育(Mariani等，1990)。另一種是用花葯或花粉特異表達啟動子驅動的反義RNA或RNA幹擾抑制花葯必需基因的表達。如在玉米中表達類黃酮生物合成關鍵基因CHS反義RNA產生雄性不育(Cie等1981)。這些方案都需要用基因工程技術解決不育系的繁殖問題和雜種雄性育性的恢復問題。例如在Barnase基因工程不育系統中，需要用篩選標記基因篩選不育系，以及用Barster基因轉化父本作為恢復基因(Mariani等，1992)。目前在水稻中還沒有開發出實用性的基因工程雜交制種體系。基於以上分析，開發優於三系和溫敏二系雜交稻制種技術體系和現有的基因工程雜交制種體系，對雜交稻的進一步發展具有重要的意義。

發明內容
本發明的第一個目的是提供一種水稻雄性育性可控系的構建方法。本發明的第二個目的是利用此水稻雄性育性可控系進行雜交制種的方法。本發明的第三個目的是提供以此育種方法的關鍵材料和元件，即水稻雄性不育突變系、包含誘導型啟動子和雄性育性基因的重組基因表達盒及其載體、以及合適的誘導劑。為此，本發明的水稻雄性育性可控系的構建方法包括(a)獲得水稻雄性育性基因的不育突變系和相應的雄性育性基因；(b)構建由誘導型啟動子控制的雄性育性基因表達盒轉化載體；(C)以所述表達盒轉化載體轉化所述不育突變系，獲得水稻雄性育性可控系。上述方法包括獲得一個水稻雄性育性基因的不育突變系，用分子生物學方法克隆該雄性育性基因，和篩選出合適的誘導劑(例如化學誘導劑)和相應的誘導型啟動子。構建此誘導型啟動子控制的所述雄性育性重組基因表達盒載體，轉化所述的雄性不育系，獲得水稻雄性育性可控系。本發明建立的雄性育性可控系優選利用化學誘導劑誘導重組育性基因表達使其自交繁殖，而不施加誘導條件的自然生長條件下表現完全的雄性不育，因而可與父本雜交生產雜交一代(F1)種子。為獲得所述水稻雄性育性基因的不育突變系，本發明從鈷60-Y射線誘變水稻品系02428的突變體庫篩選得到I個孢子體型雄性不育突變系該突變系的保藏編號為CCTCC P201207，保藏單位為中國典型培養物保藏中心，地址為中國武漢市珞珈山武漢大學，保藏日期為2012年8月29日，保藏的生物材料拉丁文學名為Oryza sativa L.，分類命名為稻屬水稻。以此突變系與水稻品種黃華佔雜交獲得F2遺傳群體，以定位克隆技術克隆到導致此雄性不育的功能缺失突變基因(SEQ ID No. I)，命名為及其功能型(野生型)基因(SEQ ID No. 2，SEQ ID No. 3)，命名為及7(575"基因編碼一個688 胺基酸的 ABC 運轉子蛋白(ATP-binding cassette transporter) (SEQ ID No. 4)。其功能涉及從花葯絨氈層運輸脂肪酸到小孢子，合成花粉壁的主要成分花粉素，屬於孢子體育性基因。在此突變系中，該基因缺失了包括一個外顯子和2個內含子的1479 bp而功能缺失，導致早期小孢子不能正常發育而退化，產生無花粉型敗育。本發明以丙環唑和腈菌唑為有效成分的內吸性殺菌劑(可在植物組織間傳導)混 合溶液施加到孕穗期的水稻葉片，24h後取處理和對照的花葯提取RNA。利用水稻全基因組表達晶片(OsAffx)雜交和定量RT-PCR驗證，發現I個晶片探針(OsAffx. 13615. I. Sl_at)代表的基因在非處理樣品的表達水平很低，而在處理樣品的表達水平大大高於非處理對照。本發明用PCR技術擴增克隆了這個基因的啟動子序列(SEQ ID No. 5)。本發明將所述的啟動子和功能型育性基因的全長編碼區(CDS)序列、或具有編碼該蛋白功能活性序列的部分cDNA序列、或基因組序列在轉化載體上構建成重組基因表達盒。如SEQ ID No. 6所示的是用所述的啟動子和功能型育性基因的全長CDS序列構建的重組基因表達盒。將含有此重組基因表達盒的載體轉化導入所述的雄性不育突變系，經下述方法誘導育性恢復，自交繁殖獲得轉基因純合的雄性育性可控系。如果在構建重組育性基因轉化載體時結合使用一種篩選標記剔除技術，就可以獲得無篩選標記的雄性育性可控系O所述功能型雄性育性基因是指能夠實現雄性可育性的基因，其包括野生型雄性育性基因和雖然發生突變但仍保持雄性育性功能的基因，或從其它物種分離的具有相同功能活性的同源基因。本發明育成的水稻雄性育性可控系的自交繁殖方法為，在花葯發育期為減數分裂期至單核小孢子發育期，用丙環唑或腈菌唑或其混合水溶液噴施葉片或施入土壤，可誘導重組育性基因表達而恢復花粉育性，自交獲得種子。本發明的雜交制種方法為，將所述的水稻雄性育性可控系與正常可育的父本(按適當比例)種植在制種田。在不施用化學誘導劑的正常生長條件下，由於所述的化學誘導型啟動子的本底表達水平低，即重組轉基因的表達水平低，而內源突變基因(SEQ ID No. I)是功能缺失的，雄性育性可控系的花葯發育異常而完全雄性不育，因此可接受父本的花粉受精結實，獲得高純度的F1種子。父本來源的功能型育性基因(SEQ ID No. 2)的正常功能可以使F1植株的花葯和花粉正常發育，因此雄性育性正常，能產生結實種子。用本發明方法除了利用所述的育性基因(SEQ ID No. 2)及其突變基因(SEQ ID No. I)外，還可以獲得和利用在(包括其啟動子區)的任何位置產生的等位性突變不育基因，構建具有本實施例所述類似效果的雄性育性可控系。由於通過各種誘變技術或從自然突變中可以獲得水稻其它育性基因的雄性不育突變體，並可以用分子生物學技術克隆相應的野生型育性基因，根據本發明的方法，還可以利用水稻其它雄性育性突變基因及其野生型基因，構建具有本實施例所述類似效果的雄性育性可控系及其雜交制種系統。類似地，也可以用其它誘導型啟動子及其合適的誘導劑替代本實施例所示的啟動子(SEQ ID No. 5)及其誘導劑丙環唑或腈菌唑，構建具有類似效果的雄性育性可控系及其雜交制種系統。本發明方法構建的雄性育性可控系及其雜交制種方法是一種結合利用內源核不育突變基因和重組轉基因的新型二系雜交稻制種系統。它克服了基於細胞質雄性不育基因與恢復基因的三系雜交稻和基於光溫敏不育基因的二系雜交稻育種方法存在的問題，也比其它基因工程方法創製的不育系和恢復系雜交體系具有更多優點(I)其它的基因工程培育植物雄性不育技術是基於轉基因的表達控制雄性不育的發生，往往轉基因的表達效果及其作用效應不穩定，導致不育性不完全或不穩定。本發明產生的雄性育性可控系的花粉不育性由內源的功能缺失突變基因決定，因而不育性完全且穩定，不受環境條件如溫度和日長的影響；(2)不需像其它的基因工程植物雄性不育系方法那樣用基因工程技術建立不 育系繁殖和雜種育性恢復體系，本發明方法對任何可育品種(系)都是潛在的父本恢復系，因而雜交組合配對的自由度大；(3)本發明只在雄性育性可控系的自交繁殖環節才使用化學誘導劑誘導重組育性基因的表達來恢復育性，對育性恢復程度的要求不高，如40-60%左右的結實率即可達到經濟實用性；(4)在所有水稻種植區的水稻生長季節都可以繁殖和制種，不必像光溫敏不育系那樣選擇合適日長或溫度的季節或地域進行繁殖和制種；(5)需要育性操控(施誘導劑)的繁殖田面積最少(是雜交制種田面積的約1/300)，且所用的化學誘導劑是常用的廉價的低毒殺菌劑，因而雄性育性可控系的繁殖簡單，成本低；(6)在結合使用篩選標記剔除技術的情況下，本方法產生的雄性育性可控系只攜帶植物來源(如水稻來源)的轉基因組分(啟動子和育性基因)，不構成超出自然突變事件程度的生物安全性問題。


圖I雄性育性可控系創製及其雜交制種方法示意圖-Jns為育性突變基因，M為雄性育性功能型基因；pind為誘導型啟動子。圖2水稻雄性不育突變體的表型A為野生型(WT)和突變體的小花；B為花葯I2_k染色，突變體花葯內不含花粉粒；C為野生型和突變體灌漿後的株型；A、B小圖中標尺為I _。圖3 (A)雄性不育突變基因座的精細定位；(B)相關功能型育性基因i0sABCG15)及其功能缺失突變基因iosabcgl,5)的結構；(C)用定量RT-PCR進行OsABCG15在花葯的表達分析(以OsActinl為內參)；1-5分別為花粉母細胞期、減數分裂期，四分體期至單核早期、單核中晚期、二核期；(D)以Pubi: :遺傳轉化突變體恢復雄性育性，以驗證其功能。圖4定量RT-PCR檢測水稻化學誘導型啟動子(SEQ ID No. 4)的本底表達(對照)及其受誘導24 h後的相對表達水平(以OsUbiquitin基因為內參)。
圖5重組基因表達盒結構，所示位點的鹼基位置是根據SEQ ID No. 5列出。圖6 (A)用所述重組基因轉化雄性不育突變體，獲得的雄性育性可控系在不施用誘導劑的情況下產生無花粉型不育；(B-D)在減數分裂期至小孢子發育期施用所示誘導劑的花粉育性和小穗結實。圖7 (A)雄性育性可控系與秈稻父本HNL-I雜交獲得的雜種Fl ； (B)Fl的花粉育性和小穗結實。所述不育突變系的保藏編號為CCTCC P201207，保藏單位為中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC)，保藏日期為2012年8月29日。
具體實施例方式以下實施例用於進一步說明本發明，但不限制本發明的範圍。若未特別指明，所用 的是本領域技術人員所熟知的常規技術方法。實施例I水稻雄性不育突變基因及其功能型育性基因的定位克隆和功能驗證 用鈷60- Y射線誘變水稻粳稻品種02428，獲得I個單座位隱性孢子體雄性不育突變
體，命名為(圖2)。將與秈稻品種黃華佔雜交獲得F2定位群體。以表I所列的基於PCR的插入/缺失多態性分子標記，利用約10500株F2個體將定位在第6染色體的一個43 kb的區間(圖3A)。該區間存在2個預測基因(基因號0s06g006700和0s06g006800\ DNA測序分析表明，與原親本的基因組序列相比，msll2的0s06g006800沒有變異，而在0s06g006700缺失了一段包括I個外顯子和2個內含子的1479 bp片段(圖3B, SEQ ID No. I)。本發明將該野生型(功能型)基因命名為(SEQ ID No. 2，SEQID No. 3),它編碼一個 454 胺基酸的 ABC 運轉子(ATP-binding cassette transporter)蛋白(SEQ ID No. 4)。其功能可能是從花葯絨氈層運輸脂肪酸到小孢子，合成花粉壁的主要成分花粉素。用特異引物 5』-CATGTGTGGCCAACCAAAGA-3 和 5』-GTG GTCTTGCCACTGCC AGA-3』對不同發育時期花葯進行定量RT-PCR分析表明，0sABCG15主要在四分體期至單核小孢子早期表達(圖3C)。表I定位所用的插入/缺失(insertion/deletion)分子標記引物
標記名I引物序列(5』 -一3』)-
623652 GGTGCGTATGTTTGTTCCAGT, GGATAATATCAGGAGACCCCT_
6237l5~TGTAATGAGTATGAGTTGTAG, TTGAGTCGTTGACATGTGGGA 625024~GAGTGAGATTGTCTCCTC, GGCACTAAGGCTTTGCA 62505ΓGTACCCCGAATTCTAGTTTGGA, GACAAATCTATTTATATCCTAC 625067TCCACAAGACTGATACCTG, CAACCTTCACTACCACATG 625070"GCTTACCTAAACTAATAG, GTTCCTAACCAACTATAC 62^939|aCCTAATTTTGGGATTGAGAG, GTGGAATGCAGTTTATCTAAAT
為了驗證 OsABCG15 的功能，用特異引物 5』 -TTCTTGGTACCTG ATTAAAAGGAGAG-3』 (下劃
錢為 Kpn I 切點)和 5』 -GCCAAGCTTCGCTTATGCT TACAAGCTGA-3』(下劃線為歷/ d III 切
點)以PCR擴增OsABCG15全長cDNA，與玉米泛素基因啟動子Pubi連接後克隆到植物轉化
雙元載體PCAMBIA1305. I改造的載體。把此載體以農桿菌轉化方法轉化由雜
合體產生的種子(有1/4 H執是msll2/msll2純合體)誘導的愈傷組織。從獲得的Ttl轉化
體用分子標記625051 (表I)篩選出2個純合體，它們的花葯發育正常並產生
可育花粉(圖3D)。此結果證明是具有育性功能的目標基因，突變基因osabcgl5(SEQ ID No. I)的功能缺失導致小孢子早期不能正常發育而退化，產生無花粉型敗育。實施例2從水稻分離化學誘導型基因啟動子
本發明用O. 05%丙環唑和O. 05%腈菌唑混合水溶液施加到水稻葉片，24h後取處理和對照的減數分裂期至小孢子期的花葯，提取RNA。利用水稻全基因組表達晶片(OsAfTx)雜交(由博奧生物有限公司完成)篩查，發現I個基因探針(OsAffx. 13615. I. Sl_at)代表的基因在非處理樣品的表達水平很低，而在處理樣品的表達水平大大高於非處理對照。進一步用定量RT-PCR驗證，證實其本底表達較低，而丙環唑或腈菌唑可提高其表達水平，這2種誘導劑共用的表達水平更高(圖4)。實施例3水稻雄性育性可控系的構建
以特異引物 5 』 -CTTGAGGCCGGCCTAAATTATTATTTTTCCAATATTTA-3，(下劃線為 Ae I 切點)和TCAGGTACCGATCGGTGATCCCTCCTCAA-3> (下劃線為式I切點)從水稻基因組PCR擴增所述的啟動子序列；用5 』 -GATCGGTACCTGATTAAAAGGAGAGA AG-3 』(下劃線為Kpn I切點)和5 』 -GGAGGATCCAGACCTCGCGCA-3 』 (下劃線為BanM I切點)PCR擴增野生型 OsABCG15 近全長 cDNA 編碼序列；以 5』 -CTCT GGATCCTCCTCGCCATGGC-3，(下劃線為I 切點)和 5』 -CCTACTCGAG CTCCCTGCAGGTGAGGA-3』 (下劃線為 Xho I 切點)PCR 擴增0sABCG15的小部分cDNA編碼序列和3』終止子序列。將這3個片段用所示的限制性內切酶切出粘性末端，連接成重組基因表達盒結構(圖5)，其DNA序列如SEQ ID No. 6所示。將此表達盒序列克隆到基於可轉化人工染色體載體(Lin等2003，PNAS，100, 5962-5967)的改造載體。將含有此重組基因表達盒的載體以農桿菌介導方法(Hiei等，199A PlantJ. 6，271-282)轉化導入所述的雄性不育突變系，獲得轉化體。將轉化體與I個秈稻品系TB雜交，並以TB為輪迴親本回交3代，選育出偏秈型的雄性育性可控系HNLS-I。每次回交時以引物組 5』 -CCTGTTCCATCGAGGAGT-3』 /5』 -CTCAACAATGGCCATCTCCA-3』 以及5』 -CTCGGCCTCCTCTGGTGGAAGT-3』 / 5』 -CGGCTGCCGCAGTTGTAGGT-3 』 篩選含有轉基因和內源突變基因的個體作為回交的母本。實施例4水稻雄性育性可控系的繁殖
在雄性育性可控系的花葯減數分裂期至單核小孢子期，以O. 05%丙環唑或O. 05%腈菌唑或O. 05%丙環唑+0. 05%腈菌唑混合水溶液噴施到葉片，3天後重施一次。結果表明，單獨使用丙環唑或腈菌唑的自交結實率約為60%，將2種誘導劑混用的自交結實率約為86% (圖6)。實施例5用水稻雄性育性可控系進行雜交制種
將本發明育成的水稻雄性育性可控系與I個秈稻品系HNLR-I按12:2的比例種植，在抽穗楊花時輔以人工趕花粉以提高雜交率，獲得Fl雜交種子(結實率約55%)。Fl雜種植株的花粉正常可育，自交結實率達到約90% (圖7)。
權利要求
1.一種水稻雄性育性可控系的構建方法，包括 Ca)獲得水稻雄性育性基因的不育突變系和相應的雄性育性基因； (b)構建由誘導型啟動子控制的雄性育性基因表達盒轉化載體； (c)以所述表達盒轉化載體轉化所述不育突變系，獲得水稻雄性育性可控系。
2.根據權利要求I所述的構建方法，其中所述水稻雄性不育突變係為自然突變或人工誘變產生的隱性不育突變系。
3.根據權利要求I所述的構建方法，其中所述水稻雄性不育突變係為孢子體型雄性不育突變系。
4.根據權利要求I所述的構建方法，其中所述雄性育性基因為可恢復所述雄性不育系的花粉育性的基因，該基因是所述雄性不育系的突變育性基因的功能型等位基因。
5.根據權利要求I所述的構建方法，所述誘導型啟動子是化學誘導啟動子。
6.根據權利要求I所述的構建方法，其中所述雄性不育突變係為保藏編號為CCTCCP201207的雄性不育突變系，其功能缺失突變型育性基因的基因組DNA序列如SEQ ID No. I所示。
7.根據權利要求I所述的構建方法，其中所述雄性育性基因的基因組DNA序列如SEQID No. 2所示，或所述雄性育性基因的cDNA序列如SEQ ID No. 3所示。
8.根據權利要求7所述的方法，其中所述雄性育性基因編碼的蛋白的胺基酸序列如SEQ ID No. 4 所示。
9.根據權利要求5所述的方法，其中所述化學誘導啟動子的DNA序列如SEQID No. 5所示。
10.一種育種方法，其包括 Ca)向權利要求I所述的水稻雄性育性可控系施加誘導劑，使得功能型雄性育性基因表達，以恢復花粉育性，進行自交繁殖；或 (b)在自然條件下將權利要求I所述的水稻雄性育性可控系與正常可育的父本品系按適當比例種植，從而與父本進行雜交獲得雜交種子。
11.根據權利要求10所述的育種方法，其中所述誘導劑含有作為有效成分的丙環唑或腈菌唑或兩者的組合。
12.根據權利要求10所述的育種方法，其中在步驟(a)中，在花葯發育期向所述水稻雄性育性可控系施加誘導劑。
13.根據權利要求12所述的育種方法，其中花葯發育期為減數分裂期至小孢子發育期。
14.一種重組基因表達盒，其核苷酸序列如SEQ ID No. 6所示。
15.一種轉化載體，其包含權利要求14所述的重組基因表達盒。
全文摘要
本發明提供一種水稻雄性育性可控系的構建方法，包括(a)獲得水稻雄性育性基因的不育突變系和相應的功能型雄性育性基因；(b)構建由誘導型啟動子控制的功能型雄性育性基因表達盒轉化載體；(c)以所述表達盒轉化載體轉化所述不育突變系，獲得水稻雄性育性可控系。本發明創製的雄性育性可控系可利用相應的誘導劑誘導重組育性基因表達，使其可育自交繁殖；不施加誘導劑時表現完全雄性不育，因而可與父本雜交生產雜交種子。此育種方法克服了基於細胞質雄性不育的三系雜交稻和基於光溫敏不育系的二系雜交稻育種以及其它基因工程方法創製不育系方法的缺點。
文檔編號A01H1/02GK102925478SQ201210339978
公開日2013年2月13日 申請日期2012年9月14日 優先權日2012年9月14日
發明者劉耀光, 牛百曉, 王平, 祝欽瀧, 林玉茹 申請人:華南農業大學