新製劑及合成方法與流程
2023-11-11 16:57:37 4
本發明涉及藥物產物組合物，且特別涉及包含正電子發射斷層攝影(PET)示蹤劑的組合物。本發明的組合物及其合成方法具有超過現有技術的某些優點。相關技術描述非天然胺基酸18F-1-氨基-3-氟環丁烷-1-甲酸(18F-FACBC，也稱為18F-Fluciclovine)被胺基酸轉運體特異吸收，並顯示有希望用於前列腺癌的正電子發射斷層攝影(PET)成像(Nanni等人2014ClinicalGenitourinaryCancer;12(2):106-110)。產生18F-FACBC包括在除去兩個保護基之前用18F-氟化物標記三氟甲磺酸酯前體化合物：在去保護步驟後，進行純化以除去雜質。在目前實行的方法中，使用固相的組合：用離子阻滯以除去從去保護步驟留下的過量Na+和過量Clˉ，用氧化鋁以除去18F-氟化物，並用反相以除去FACBC相關雜質，例如1-氨基-3-羥基-環丁烷-1-甲酸(羥基-ACBC)和1-氨基-3-氯-環丁烷-1-甲酸(氯-ACBC)。合成當前一般通過自動放射合成程序進行，所述自動放射合成程序採用設計成可拆卸和可互換地裝配到自動合成裝置的所謂「盒」或「柱」，所述自動合成裝置例如為購自以下的那些：GEHealthcare，CTIInc，IonBeamApplicationsS.A.(CheminduCyclotron3,B-1348Louvain-La-Neuve,Belgium)；Raytest(Germany)和Bioscan(USA)的那些裝置。盒包含在通過PET示蹤劑生產領域中熟知的方法引入合適製備的18F-氟化物之後製備18F-FACBC所必需的所有試劑、反應容器和裝置。用於合成18F-FACBC的已知盒為購自GEHealthcare的FASTlabTM盒。各個盒建在具有25個三通旋塞的單片模製歧管周圍，均由聚丙烯製成。盒包含甲基季銨(QMA)固相萃取(SPE)柱、5ml環烯烴共聚物反應器、一個1ml注射器和兩個5ml注射器、用於與5個預填充試劑瓶A-E連接的長釘、1個水袋(100ml)、3個SPE柱(tC18、HLB和氧化鋁)和過濾器。如下填充5個FASTlabTM盒試劑瓶：瓶A含有包含在乙腈(MeCN)中的Kryptofix2.2.2.和K2CO3的洗脫劑溶液，瓶B包含HCl，瓶C包含MeCN，瓶D包含來自上述反應方案的式I的乾燥前體化合物，且瓶E包含NaOH。使用這種FASTlabTM盒產生18F-FACBC藥物產物的已知方法描述於WO2013/093025的實施例1。放射合成通過捕集水性18F-氟化物到QMA上開始，隨後使用來自瓶A的洗脫劑洗脫進入反應器，且隨後通過用來自瓶C的乙腈共沸蒸餾濃縮至乾燥。近似地使MeCN與來自瓶D的前體化合物混合，且將溶解的前體加到反應器，並在85℃下加熱3min。然後用水稀釋反應混合物，並送過tC18柱。用水洗滌反應器，並送過tC18柱。用水洗滌在tC18柱上固定的經標記的中間體，且隨後用NaOH培育5min，以除去酯基。將經去酯的中間體用水從tC18柱洗脫，並回到反應器中。通過加入HCl並在60℃下加熱5min，在反應器中水解BOC基團。然後將粗18F-FACBC送過HLB(HLB=親水性親脂性平衡)柱以除去FACBC相關雜質，送過氧化鋁柱以除去18F-氟化物，且隨後送到包含檸檬酸鹽緩衝劑的30ml產物瓶中。然後用水洗滌HLB和氧化鋁柱，送到產物瓶。最後向產物瓶加入NaOH和水，以提供18F-FACBC的最終純化製劑。在靜脈施用前，使該製劑經過無菌過濾器。本發明人已發現，使用上述已知FASTlabTM盒和方法得到的最終18F-FACBC藥物產物品質可能稍微改變。已發現殘留乙腈水平為約100μg/ml至約600μg/ml範圍。雖然就允許的每日暴露而言和在18F-FACBC藥物產物的接受標準的情況下可接受，但量和觀察的可變性還較不理想。另外，已發現殘留鋁在約7μg/ml至接近20μg/ml範圍內，這將意味在5ml18F-FACBC注射中100μg潛在量。在18F-FACBC藥物產物還包含檸檬酸鹽緩衝劑時，可能存在鋁和檸檬酸鹽的絡合物，這就成問題，因為已知這些絡合物跨過血腦屏障(Rengel2004Biometals;17:669-689)。因此，存在改進18F-FACBC藥物產物製劑的餘地。發明概述本發明提供克服已知的此類組合物見到的問題的包含18F-FACBC的藥物產物組合物。具體地講，本發明的組合物具有與現有技術比較改進的雜質分布，使其更安全且更有效地用於成像。最終藥物產物中乙腈和/或鋁的低和可預測水平意味本發明的組合物更容易滿足世界範圍的藥典要求。除了顯著降低最終藥物產物中鋁的濃度外，去除氧化鋁柱具有允許較短和簡化過程且不存在來自該柱的顆粒的關聯優點，本發明人已注意到顆粒可堵塞在注射藥物產物前使用的無菌過濾器。另外，只對已知方法較小改變，就可達到本發明的優點，而不削弱已知的18F-FACBC組合物的合乎需要品質。優選實施方案詳述為了更清楚和簡要地描述和指出要求保護的本發明的主題，以下在詳述中對在整個說明書和權利要求書中使用的具體術語提供定義。本文具體術語的任何例證應認為是非限制性實例。在一個方面，本發明涉及包含反-1-氨基-3-18F-氟環丁基-1-甲酸(18F-FACBC)的正電子發射斷層攝影(PET)示蹤劑組合物，其特徵在於所述組合物包含不超過5.0µg/mL溶解鋁(Al)。在一個方面，本發明涉及包含反-1-氨基-3-18F-氟環丁基-1-甲酸(18F-FACBC)的正電子發射斷層攝影(PET)示蹤劑組合物，其特徵在於所述組合物包含不超過5.0µg/mL溶解鋁(Al)和不超過50µg/mL乙腈(MeCN)。在本發明的上下文中，「PET示蹤劑組合物」指適用於哺乳動物施用劑型的包含PET示蹤劑以及生物相容載體的組合物。本發明的PET示蹤劑組合物在下文還稱為本發明的組合物。「PET示蹤劑」在本文中定義為包含為正電子發射體的原子的生物活性分子，該正電子發射體適合對哺乳動物受試者靜脈施用，隨後PET成像，以得到PET示蹤劑的位置和/或分布的一個或多個臨床有用圖像。「生物相容載體」在本文中定義為其中懸浮或溶解藥物，使得組合物在生理學上可容忍(即，可施用到哺乳動物體而沒有毒性或過度不適)的流體，尤其是液體。生物相容載體適合為可注射載液，例如無菌無熱原注射用水，或水溶液，例如鹽水。化合物「18F-FACBC」由以下化學結構表示：應了解，本文所用術語「不超過」指小於且包括引用量的任何量。在本發明的組合物的理想實施方案中，將有0µg/mL各雜質存在。然而，實際上，0µg/mL雜質是不可能的，且在組合物中留有至少痕量的各雜質。術語「不超過」表示一種或多種痕量雜質存在於PET示蹤劑組合物，並限定濃度限度，高於該限度不認為對使用可接受。在一個實施方案中，本發明的組合物包含不超過3.0µg/mL溶解鋁Al，在另一個實施方案中不超過1.5µg/mL溶解鋁Al。在一個實施方案中，本發明的組合物包含不超過20µg/mL濃度的MeCN。在一個實施方案中，本發明的組合物具有至少95%的合成完(EOS)放射化學純度(RCP)，在另一個實施方案中至少98%，且在又一個實施方案中至少99%。術語「合成完」指在產物收集瓶中收集經標記化合物的時間點。EP2119458(A1)教導當pH保持在2.0-5.9範圍內時得到18F-FACBC的更穩定製劑。如WO2013/093025中討論，使用檸檬酸鹽緩衝劑允許pH保持在甚至更窄範圍內，提供抗降解性，並使製劑能夠高壓滅菌。因此，在一個實施方案中，本發明的組合物包含約50-100mM檸檬酸鹽緩衝劑，在另一個實施方案中約60-90mM檸檬酸鹽緩衝劑，且在又一個實施方案中約75-85mM檸檬酸鹽緩衝劑。關於這一點，詞語「約」結合本領域的技術人員期望達到相同穩定作用的範圍的精確值和圍繞這些值的小的變化。在另一個方面，本發明提供製備本發明的PET示蹤劑組合物的方法，其中所述方法包括：(a)使18F-氟化物源與式I的前體化合物在反應容器中反應：(I);其中：LG為離去基團；PG1為羧基保護基；並且PG2為胺保護基；以得到包含式II化合物的反應混合物：(II);其中PG1和PG2如關於式I所限定；(b)除去PG1和PG2，以得到包含18F-FACBC的反應混合物；並且(c)通過使其經過親水性親脂性平衡(HLB)固相純化包含18F-FACBC的所述反應混合物，其特徵在於所述純化不包括使包含18F-FACBC的反應混合物經過氧化鋁固相。在另一個方面，本發明提供製備本發明的PET示蹤劑組合物的方法，其中所述方法包括：(a)使18F-氟化物源與式I的前體化合物在反應容器中反應：(I);其中：LG為離去基團；PG1為羧基保護基；並且PG2為胺保護基；其中所述反應步驟在乙腈中進行；以得到包含式II化合物的反應混合物：(II);其中PG1和PG2如式I所限定；(b)從所述反應容器轉移出包含所述式II化合物的所述反應混合物，並除去PG1，以得到包含式III化合物的反應混合物:(III)其中PG2如式I所限定；(c)在與除去PG1同時加熱所述反應容器；(d)將包含所述式III化合物的所述反應混合物轉移回到所述反應容器中，並除去PG2，以得到包含18F-FACBC的反應混合物；(e)通過使其經過親水性親脂性平衡(HLB)固相純化包含18F-FACBC的所述反應混合物，其特徵在於所述純化不包括使包含18F-FACBC的反應混合物經過氧化鋁固相。適用於本發明的方法的步驟(a)的「18F-氟化物源」一般從核反應18O(p,n)18F作為水溶液得到。為了增加氟化物的反應性和使從存在水產生的羥基化副產物減少或最大限度地減少，一般在反應前從18F-氟化物除去水，並使用無水反應溶劑進行氟化反應(Aigbirhio等人1995JFluorChem;70:279-87)。用於改進放射氟化反應的[18F]-氟化物反應性的其他步驟是在除去水前加入陽離子反荷離子。合適地，反荷離子應具有在無水反應溶劑內足夠的溶解度，以保持[18F]-氟化物的溶解度。因此，一般使用的反荷離子包括大而軟的金屬離子，例如銣或銫、與穴狀配體絡合的鉀(例如KryptofixTM)或四烷基銨鹽，其中與穴狀配體絡合的鉀(例如KryptofixTM)或四烷基銨鹽是優選的。本發明的方法的步驟(a)的「前體化合物」包含放射性標記化合物的非放射性衍生物，設計成使具有可檢測標記的方便化學形式的化學反應以位點特異性發生，能夠以最少數目的步驟(理想地單一步驟)進行，而不需要顯著純化(理想地不進一步純化)，以給出所需的放射性標記化合物。這些前體化合物為合成的，並且能夠方便地以良好的化學純度得到。在本發明的方法的步驟(a)中在式I化合物的情況下，合適的「離去基團」為能夠用氟離子親核置換反應置換的化學基團。這些在合成化學領域熟知。在一些實施方案中，本發明的離去基團為直鏈或支鏈C1-10滷代烷基磺酸取代基、直鏈或支鏈C1-10烷基磺酸取代基、氟磺酸取代基或芳族磺酸取代基。在本發明的其它實施方案中，離去基團選自甲磺酸、甲苯磺酸、硝基苯磺酸、苯磺酸、三氟甲磺酸、氟磺酸和全氟烷基磺酸。在一些實施方案中，離去基團為甲磺酸、三氟甲磺酸或甲苯磺酸，且在另一個實施方案中，離去基團為三氟甲磺酸。結合取代基PG1和PG2使用的術語「保護基」是指抑制或阻止不合乎需要的化學反應，但被設計成為足夠反應性以便可以在不改變分子其餘部分的足夠溫和條件下從所討論的官能團裂開以得到所需產物的基團。保護基為本領域的技術人員所熟悉，並描述於「ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis(有機合成中的保護基)」，TheodoraW.Greene和PeterG.M.Wuts，(第4版,JohnWiley&Sons,2007)。在本文中PG1「羧基保護基」優選為直鏈或支鏈C1-10烷基鏈或芳基取代基。單獨或作為另一個基團的部分使用的術語「烷基」限定為任何直鏈、支鏈或環狀飽和或不飽和CnH2n+1基團。術語「芳基」指從單環或多環芳族烴或單環或多環雜芳族烴衍生的任何C6-14分子片段或基團。在本發明的方法的一個實施方案中，PG1選自甲基、乙基、叔丁基和苯基。在本發明的另一個實施方案中，PG1為甲基或乙基，且在又一個實施方案中，PG1為乙基。在本文中PG2「胺保護基」指適合在提供式II化合物過程中防止18F和胺基之間反應的化學基團。合適的胺保護基的實例包括各種氨基甲酸酯取代基、各種醯胺取代基、各種醯亞胺取代基和各種胺取代基。優選地，胺保護基選自直鏈或支鏈C2-7烷基氧基羰基取代基、直鏈或支鏈C3-7烯基氧基羰基取代基、可具有修飾基團的C7-12苄基氧基羰基取代基、C2-7烷基二硫基氧基羰基取代基、直鏈或支鏈C1-6烷基醯胺取代基、直鏈或支鏈C2-6烯基醯胺取代基、可具有修飾基團的C6-11苯甲醯胺取代基、C4-10環醯亞胺取代基、可具有取代基的C6-11芳族亞胺取代基、直鏈或支鏈C1-6烷胺取代基、直鏈或支鏈C2-6烯胺取代基和可具有修飾基團的C6-11苄胺取代基。在本發明的一些實施方案中，PG2選自叔丁氧基羰基、烯丙基氧基羰基、鄰苯二甲醯亞胺和N-亞苄基胺。在其它實施方案中，PG2選自叔丁氧基羰基或鄰苯二甲醯亞胺。在本發明的一個實施方案中，PG2為叔丁氧基羰基。本領域的技術人員所熟悉的在本發明的方法的步驟(a)中的術語「反應」指使兩種或更多種化學物質(在本領域一般稱為「反應物」或「試劑」)在一起，以產生化學物質之一或二者/所有的化學變化。在本發明的方法的步驟(b)中的「除去PG1」適合通過使在步驟(a)中得到的反應混合物內包含的式II的化合物與羧基去保護劑接觸來進行。合適的羧基去保護劑可以為酸或鹼溶液，這為技術人員所熟悉(見以上Greene和Wuts)。羧基去保護劑的濃度適合只足以除去羧基保護基。優選地，羧基去保護劑為鹼溶液。在某些實施方案中，羧基去保護劑為氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液，且在一個優選實施方案中，為例如0.5-2.0M的氫氧化鈉溶液。在一些實施方案中，調節用於去保護的溫度和持續時間以允許除去PG1。例如，在某些實施方案中，反應步驟在室溫下進行且歷時約1-5分鐘的持續時間。在一個實施方案中，通過使包含式II化合物的反應混合物經過固相萃取(SPE)柱除去PG1，在該柱中式II化合物結合到固相。一旦式II化合物結合，就關閉SPE柱出口，使得羧基去保護劑在其中保留規定時間量。以此方式使用的合適固相為反相固相，例如tC18。步驟(c)包括使用本領域的技術人員熟悉的方法加熱反應容器歷時放射合成的持續時間，例如，使用向其中放置反應容器的指定加熱器。加熱必須使反應容器可用於隨後步驟(d)，即，使反應容器完整且未受損壞，且還使得有效除去殘留溶劑。該步驟(c)在與除去PG1同時進行，即，在已從所述反應容器轉移出包含式II化合物的反應混合物後。用於此加熱步驟的合適溫度應不超過反應容器的耐受性，例如，溫度不超過約130℃的由環烯烴共聚物(COC)製成的反應容器，和溫度不超過約200℃的由聚醚醚酮(PEEK)製成的反應容器。為方便起見，可選擇在步驟(c)中加熱反應容器所用溫度儘可能接近在標記步驟(a)期間所用溫度。用於放射性標記步驟(a)的合適溫度在約80-140℃範圍內，在其它實施方案中85-130℃。在本發明的方法的步驟(d)中的「除去PG2」通過使式III的化合物與胺去保護劑接觸來進行。合適的胺去保護劑可以為酸或鹼溶液，這為本領域的技術人員所熟悉(見以上Greene和Wuts)。胺去保護劑的濃度適合只足以除去PG2。優選地，胺去保護劑為酸溶液。合適的酸為選自無機酸(例如鹽酸(HCl)、硫酸(H2SO4)和硝酸(HNO3))和有機酸(例如全氟烷基羧酸，例如三氟乙酸(CF3CO2H))的酸。在某些實施方案中，胺去保護劑為HCl，例如1.0-4.0M濃度。在一個實施方案中，用加熱除去PG2，以允許更快地進行去保護。時間取決於反應溫度或其它條件。例如，在一個實施方案中，在60℃下用5分鐘的反應時間除去PG2。「純化」步驟(e)的目的是得到基本上純的18F-FACBC。術語「基本上」指完全或接近完全範圍或程度的作用、特徵、性質、狀態、結構、項目或結果。在18F-FACBC的情況下本文所用術語「基本上純的」包括完全純的18F-FACBC或足夠純以適合用作PET示蹤劑的18F-FACBC。術語「適合用作PET示蹤劑」指經純化的18F-FACBC產物適合對哺乳動物受試者靜脈施用，隨後PET成像，以得到18F-FACBC的位置和/或分布的一個或多個臨床有用圖像。「HLB固相」為具有適合一定範圍目的的親水性和親脂性組分的反相固相。HLB固相作為適用於本發明的方法的SPE柱購得，例如OasisHLBSPE柱。「氧化鋁固相」為常規用於18F標記方法的氧化鋁正相固相，作為除去游離18F-氟化物並優化最終產物的放射化學純度的手段。氧化鋁固相作為適用於本發明的方法的SPE柱購得，例如WatersAluminaNLight。在本發明的方法中，步驟(a)-(c)或(a)-(e)按次序進行。在本發明的方法的一個實施方案中，式I化合物中的取代基LG為直鏈或支鏈C1-10滷代烷基磺酸取代基、直鏈或支鏈C1-10烷基磺酸取代基、氟磺酸取代基或芳族磺酸取代基。LG的實例包括甲磺酸、甲苯磺酸、硝基苯磺酸、苯磺酸、三氟甲磺酸、氟磺酸和全氟烷基磺酸。在一個實施方案中，LG為三氟甲磺酸。在本發明的方法的一個實施方案中，式I和II化合物中的取代基PG1為直鏈或支鏈C1-10烷基鏈或芳基取代基。例如，PG1可以為甲基、乙基、叔丁基或苯基。在一個實施方案中，PG1為甲基或乙基。在另一個實施方案中，PG1為乙基。在本發明的方法的一個實施方案中，式I-III化合物中的取代基PG2為氨基甲酸酯取代基、醯胺取代基、醯亞胺取代基或胺取代基。實例包括叔丁氧基羰基、烯丙基氧基羰基、鄰苯二甲醯亞胺和N-亞苄基胺。在一個實施方案中，PG2為叔丁氧基羰基。本發明的方法可進一步包括用檸檬酸鹽緩衝劑配製在步驟(e)中得到的經純化的反應混合物的步驟。在一個實施方案中，該配製步驟得到50-100mM檸檬酸鹽緩衝劑濃度，在另一個實施方案中60-90mM檸檬酸鹽緩衝劑，且在又一個實施方案中75-85mM檸檬酸鹽緩衝劑。在一個實施方案中，本發明的方法是自動的，例如在自動合成裝置中進行。經常方便地在自動放射合成裝置上製備18F-標記的PET示蹤劑。術語「自動放射合成裝置」是指基於單元操作原理的自動模塊，如Satyamurthy等人(1999ClinPositrImag;2(5):233-253)所述。術語「單元操作」是指複雜過程簡化到可應用於一定範圍材料的一系列簡單操作或反應。合適的自動合成器裝置可購自一系列供應商，包括：GEHealthcareLtd(ChalfontStGiles,UK)；CTIInc.(Knoxville,USA)；IonBeamApplicationsS.A.(CheminduCyclotron3,B-1348Louvain-La-Neuve,Belgium)；Raytest(Straubenhardt,Germany)和Bioscan(WashingtonDC,USA)。市售自動放射合成裝置還提供由放射性藥物製劑產生的液體放射性廢棄物的合適容器。自動放射合成裝置一般不提供有輻射防護，因為它們設計用於適當構造的放射性工作間。放射性工作間，也稱為熱室，提供適合的輻射防護，以保護操作者免受潛在輻射劑量，還提供通風以除去化學和/或放射性蒸氣。本發明的優選自動放射合成裝置為與一次性或單次使用的「盒」(也稱為「柱」)相互作用的那些裝置，盒包括進行給定批次的放射性藥物的製備所必需的所有試劑、反應容器和裝置。通過使用這種盒，自動放射合成裝置具有能夠通過簡單地改變盒以最小交叉汙染風險製備多種不同放射性藥物的靈活性。盒方法也具有以下優點：簡化裝配，並因此減小操作者失誤的風險；改進GMP(良好製造規範，GoodManufacturingPractice)順應性；多示蹤劑能力；在生產運行之間快速改變；盒和試劑的預運行自動診斷檢查；化學試劑-待進行的合成的自動條形碼交叉檢查；試劑示蹤能力；單次使用，且因此沒有交叉汙染風險、防篡改和濫用。這種盒已通過去除氧化鋁柱簡化。氧化鋁柱存在於用於除去來自不充分純化和/或來自輻解的游離18F-氟化物殘留物的現有盒構造。然而，本發明人已發現，氧化鋁柱上的靜止活性(restactivity)很低(0.1-0.3%)，表明穩健純化過程和低輻解度兩者。這些數據表明氧化鋁柱是多餘的，並且可以去除。這具有沒有在藥物產物中存在的來自氧化鋁柱的任何顆粒風險的額外益處，這些顆粒造成堵塞無菌過濾器的風險。這種方法已通過增加從反應器除去殘留乙腈的並行步驟，同時在tC18柱上進行脫酯步驟來改進。這得到具有比使用現有技術方法得到的更低和更可預測的殘留乙腈濃度的最終藥物產物。附圖簡述圖1圖示說明進行本發明的方法的示例盒。實施例簡述以下非限制性實施例用於說明本發明的主題的具體實施方案。實施例中所用縮寫列表BOC叔丁基氧基羰基DP藥物產物HLB親水性-親脂性平衡K222Kryptofix222MeCN乙腈QMA甲基季銨RAC放射性濃度RCP：放射化學純度。實施例比較性實施例1：現有技術合成18F-FACBC1(i)FASTlab盒所有放射化學在市售GEFASTlabTM上用單次使用盒進行。各盒建在具有25個三通旋塞的單片模製歧管周圍，均由聚丙烯製成。簡而言之，盒包含5ml反應器(環烯烴共聚物)、一個1ml注射器和兩個5ml注射器、用於與5個預填充瓶連接的長釘、1個水袋(100ml)及各種SPE柱和過濾器。流體通道用氮吹掃、真空和三個注射器控制。設計完全自動系統採用回旋加速器產生的18F-氟化物用於單步氟化。以事件的逐步時間依賴性次序，例如推動注射器、氮吹掃、真空和溫度調節，通過軟體包對FASTlab編程。瓶A包含79.5%(v/v)MeCN(aq)(1105µl)中的K222(58.8mg,156µmol)、K2CO3(8.1mg,60.8µmol)。瓶B包含4MHCl(2.0ml)。瓶C包含MeCN(4.1ml)。瓶D包含其乾燥形式的前體(48.4mg,123.5µmol)(在–20℃下儲存直到盒裝配)。瓶E包含2MNaOH(4.1ml)。用200mM檸檬酸三鈉(10ml)填充30ml產物收集玻璃瓶。1(ii)製備18F-氟化物在GEPETtrace6回旋加速器(NorwegianCyclotronCentre,Oslo)上通過18O(p,n)18F核反應產生不加載體的18F-氟化物。使用16.5MeV質子，用HAVAR箔，在兩個相同Ag靶上用雙束30µA電流進行輻射。各靶包含1.6ml≥96%[18O]水(MarshallIsotopes)。在輻射並送到熱室後，用[16O]水(Merck，GR分析水)洗滌各靶。使水性18F-氟化物經過QMA，並進入18O-H2O回收瓶。然後用MeCN衝洗QMA，並送到廢棄物。1(iii)18F-氟化物標記將捕集的18F-氟化物使用來自瓶A的洗脫劑洗脫到反應器中，且隨後通過用乙腈(瓶C)共沸蒸餾濃縮至乾燥。使MeCN與瓶D中的前體混合，由此將溶解的前體加到反應器，並加熱到85℃。1(iv)除去酯保護基用水稀釋反應混合物，並送過tC18柱。用水洗滌反應器，並送過tC18柱。用水洗滌在tC18柱上固定的經標記的中間體，且隨後用2MNaOH培育，隨後將2MNaOH送到廢棄物。1(v)除去BOC保護基然後將經標記的中間體(沒有酯基)用水從tC18柱洗脫到反應器中。通過加入4MHCl和加熱反應器水解BOC基團。1(vi)純化將具有粗18F-FACBC的反應器內含物送過HLB和氧化鋁柱，並送到30ml產物瓶中。HLB和氧化鋁柱用水洗滌，並收集到產物瓶中。1(vii)配製向產物瓶加入2MNaOH和水，得到具有26ml總體積的經純化藥物產物(DP)。(1viii)乙腈濃度使用具有FID的氣相色譜系統、自動液體注射器、具有USP固定相G43(6%氰基丙基苯基-94%二甲基聚矽氧烷)的熔融二氧化矽毛細管柱和報告積分器或具有再積分能力的數據系統測定乙腈(MeCN)濃度。用1000μg/mlMeCN作為標準樣。通過1ml純化水轉移到2mlGC卷蓋瓶，立即蓋好，製備空白樣。將1ml標準樣轉移到2mlGC卷蓋瓶，並立即蓋好。將0.20ml樣品轉移到具有低體積鑲件(insert)(0.25ml)的2mlGC卷蓋瓶，並立即蓋好。GC儀器的實驗條件如下：載氣流速，氦：2.0ml/min烘箱溫度程序：40℃歷時6分鐘，然後20℃/min升至240℃歷時4分鐘注射器溫度：225℃分流比：10:1檢測器FID檢測器溫度：250℃氫流速：30ml/min空氣流速：400ml/min補償氣流速(He)：25ml/min自動液體注射器的實驗條件如下：溶劑預洗：3樣品泵：3溶劑後洗：3注射體積：1ml在使用前在250℃調節柱至少1小時。除了空白注射以外，按以下次序進行一次各標準樣注射和兩次樣品溶液重複注射：1.空白2.校準標準樣3.校準標準樣4.空白5.樣品，重複16.樣品，重複27.空白使用以下公式計算各分析物的濃度C樣品，以μg/ml表示：其中：A樣品：樣品中分析物的峰面積C標準樣：校準標準樣中分析物的濃度(μg/ml)A標準樣：校準標準樣中分析物的峰面積，2個注射平均值(1ix)鋁濃度通過電感耦合等離子體原子發射光譜(ICP-AES)測定鋁濃度。(1x)放射化學參數測定18F-FACBC的放射化學純度(RCP)和放射性濃度(RAC)。通過薄層色譜(TLC)測定RCP。使用由乙腈:甲醇:水:乙酸20:5:5:1v/v組成的流動相洗脫TLC條。RCP和包括18F-氟化物的任何放射化學雜質作為所有峰的淨和百分數報告。(1xi)結果得到以下結果：產生#RAC(MBq/ml)RCP(%)T0MeCN(μg/ml)Al(μg/ml)11915>995061421804>993241431950>993021341698>99891551570>995961761815>9921815實施例2：使用發明性方法合成18F-FACBC2(i)修改次序使用修改的FASTlabTM盒，如圖1中所示。使用實施例1中所述次序，不同之處在於該次序包括反應容器的額外加熱/吹掃。用兩個步驟代替水解步驟，其第一步包括在85℃、反應容器氮吹掃(600mbarHF)和真空(-600mbar)下水解和反應器平行加熱。第二步也包括水解，但停止反應容器加熱。使用氮吹掃(600mbarHF)和真空(-600mbar)冷卻反應容器。另外，去除氧化鋁SPE，並改變次序，以在HLB柱步驟後將產物直接轉移到製劑緩衝劑瓶。2(ii)分析使用實施例1中所述的分析方法。當前第1頁1 2 3