用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片的製作方法

2023-11-11 23:51:02 3

專利名稱：用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片的製作方法
技術領域：
本實用新型涉及的是一種與生物學領域中植物及其食品有關的基因晶片，特別是一種可用於對多種轉基因植物及其食品進行鑑定的檢測型基因晶片。
在生物學領域中所涉及的基因晶片技術，是一種同時將大量的探針分子固定到固相支持物上，藉助核酸分子雜交配對的特性對DNA樣品的序列信息進行高效的解讀和分析的方法。這類技術目前在對基因表達譜的分析、突變檢測、多態性分析、基因測序和基因組文庫作圖等方面已有應用的報導。隨著生物技術的快速發展，通過將外源基因導入天然農作物遺傳基因，實現對其原有基因進行改造，以期得到能增加營養成分含量、提高抗逆性等改良和優化性狀的農作物新品種，並進而提高以其為原料的食品在相應方面的品質和/或功能，目前已在進行廣泛的研究和應用。與此同時，對這類通過轉基因技術得到的植物和/或以其為原料的食品的使用安全性問題也日益引起了人們的關注。因此，如何通過植物檢疫的方法對轉基因植物進行判斷和鑑定的問題，也相應提出並正在研究和探索之中。
鑑於此，本實用新型的目的是提供一種可用於對多種轉基因植物進行判斷和鑑定的檢測型基因晶片。
本實用新型用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片，其結構是在平面型支承載體的平面上被覆有帶正電荷材料的膜層，在該膜層的表面以微點陣方式排布有供轉基因植物判斷用的外源基因探針。其中所說的該平面型支承載體，可以採用目前同類技術中已有使用的玻璃片、矽片、聚丙烯膜、硝酸纖維素膜、尼龍膜等材料製成的片狀支持基體中的一種。在該平面型支承載體上被覆的帶正電荷材料的膜層，可以為聚賴氨酸材料或氨基矽烷材料膜層中的一種。以微點陣方式排布於該膜層表面處的供轉基因植物判斷用的外源基因探針，可以以平面附著的方式位於所說的該帶正電荷的材料膜層的表面，也可以使所說的帶正電荷材料的膜層表面具有按微點陣形式排布的凹窩狀結構，所說的各供轉基因植物判斷用的外源基因探針以被覆於各凹窩狀結構內凹表面的形式，或者以其它需要或適當的形式分別位於各凹窩狀結構內。根據使用目的和/或領域的不同，所說的以微點陣方式排布的供轉基因植物判斷用的外源基因探針可以集中於所說的帶正電荷材料膜層的一個區域內，也可以使各微點陣方式排布的供轉基因植物判斷用的外源基因探針為分布在所說的該帶正電荷材料膜層表面處保持有空間間隔距離的複數個區域內的形式。
由於目前在植物轉化方面通常採用的一種方法，是以根癌農桿菌Ti質粒作載體，介導轉化雙子葉植物，如棉花、番茄等農作物。另一種方法是直接採用質粒載體通過電轉化單子葉植物，如玉米、水稻等糧食作物。無論採用哪種方法，植物轉化載體必須包含選擇標記基因，如氯黴素抗性基因、卡那黴素抗性基因等。報告基因，如GUS基因、GFP基因等，以及適用於植物的基因啟動子，如植物病毒35S RNA基因的啟動子等基本要素，這些序列隨同被轉化、整合到轉基因植株的染色體上。由於在植物轉化中所用的標記基因數目有限，且都已成為一些標準技術，故而通過檢測在植株中是否存在有這些外來的基因序列(DNA序列)，原則上也就能鑑定該植株是天然的，還是轉基因植株。因此，在上述的用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片中，所說的供轉基因植物判斷用的外源基因探針可以包括有氯黴素抗性基因、潮黴素抗性基因、卡那黴素抗性基因、GUS基因、綠色螢光素基因(GFP)、35S RNA啟動子DNA序列、根癌農桿菌nos基因終止子DNA序列等。這些基因可廣泛應用於水稻、大豆、菸草、番茄、棉花等轉基因植物。使用本實用新型上述結構形式的基因檢測晶片可以實現對上述多種轉基因植物的外源性基因作出快速、準確和定量化的判斷分析。
以下通過附圖所示的實例對本實用新型的上述內容作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本實用新型上述主題的範圍僅限於下述的實例。凡基於本實用新型上述主題所實現的產品均屬於本實用新型的範圍。


圖1是本實用新型用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片一種結構的示意圖。
圖2是本實用新型用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片另一種結構的示意圖。
如圖1所示的用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片中，在常用的玻璃片或高分子有機材料的平面型支承載體1的平面上，被覆有帶正電荷材料的膜層2。該帶正電荷材料的膜層可以為聚賴氨酸材料或氨基矽烷材料膜層中的一種。在該膜層2的表面上以平面附著的微點陣方式排布有供多種轉基因植物進行判斷用的外源基因探針3。該微點陣方式排布的判斷用外源基因探針可以為集中於該帶正電荷材料膜層2表面處的一個區域內的形式，也可以為將多個以微點陣方式排布的外源基因探針分別以保持有空間間隔距離5的形式分布在該帶正電荷材料膜層2的表面處複數個的不同區域內的形式。
圖2所示的用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片在結構上與圖1的不同之處在於，所說的該帶正電荷材料的膜層2的表面處具有按微點陣形式排布的凹窩狀結構4，所說的供轉基因植物判斷用的各外源基因探針3分別以被覆於相應各凹窩狀結構4內凹表面處的形式，或以其它所需要或適當的方式設置位於各凹窩狀結構4內。
權利要求1.用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片，其特徵在於在平面型支承載體(1)的平面上被覆有帶正電荷材料的膜層(2)，在該膜層的表面以微點陣方式排布有供轉基因植物判斷用的外源基因探針(3)。
2.如權利要求1所述的用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片，其特徵在於所說的帶正電荷材料膜層(2)的表面具有按微點陣形式排布的凹窩狀結構(4)，所說的各供轉基因植物判斷用的外源基因探針(3)分別位於各凹窩狀結構(4)內。
3.如權利要求2所述的用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片，其特徵在於所說的供轉基因植物判斷用的外源基因探針(3)以被覆於凹窩狀結構(4)內凹表面的形式設置。
4.如權利要求1至3之一所述的用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片，其特徵在於所說的以微點陣方式排布的供轉基因植物判斷用的外源基因探針(3)分布在所說的帶正電荷材料膜層(2)表面處保持有空間間隔距離的複數個區域內。
5.如權利要求1至3之一所述的用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片，其特徵在於所說的帶正電荷材料的膜層(2)為由聚賴氨酸材料或氨基矽烷材料膜層中的一種。
專利摘要本實用新型涉及的是用於轉基因植物鑑定的基因檢測晶片,在平面型支承載體的平面上被覆有帶正電荷材料的膜層,在該膜層的表面以微點陣方式排布有供轉基因植物判斷用的外源基因探針。
文檔編號G01N33/68GK2472234SQ0121451
公開日2002年1月16日 申請日期2001年3月22日 優先權日2001年3月22日
發明者尹海濱, 馮紅, 楊冬, 黃迎春 申請人:成都百奧生物信息科技有限公司