一種毛細管電泳拆分2-甲基-4-氯戊氧基丙酸對映體的方法
2023-12-06 11:51:16 1
一種毛細管電泳拆分2-甲基-4-氯戊氧基丙酸對映體的方法
【專利摘要】一種毛細管電泳拆分2-甲基-4-氯戊氧基丙酸對映體的方法，所述方法包括以下步驟：(1)將外消旋的2-甲基-4-氯戊氧基丙酸用乙腈助溶後與水溶劑混合製成樣品溶液，所述的樣品溶液中2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的濃度為10-2mg/ml～10-1mg/ml；(2)配製十二烷基硫酸鈉-磷酸水溶液，其中H3PO4濃度和十二烷基硫酸鈉濃度均在55～70mmol/L，並調節溶液pH至1.5～2.5；隨後加入手性選擇劑γ-環糊精使其質量濃度為2.5-3.5%，再添加異丙醇使其體積濃度為3～5%，得到含有γ-環糊精和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液，作為運行用的緩衝溶液；(3)將步驟(1)製得的樣品溶液和步驟(2)製得的含有γ-環糊精和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液放入毛細管電泳儀中，加上反向電壓，進行拆分。本發明具有簡單、準確的優點。
【專利說明】一種毛細管電泳拆分2-甲基-4-氯戊氧基丙酸對映體的方法
(-)【技術領域】
[0001]本發明涉及一種手性除草劑2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的對映體拆分方法，屬於環境汙染物分析【技術領域】。
(二)【背景技術】
[0002]除草劑是一類用來殺死植物的藥劑。這些藥劑能夠選擇性地作用於特定目標，使其他對於人類有用的農作物不受傷害，或受的傷害較小。據統計，我國目前除草劑每年使用面積以200萬hm2遞增。如此大量化學除草劑的使用，一方面，它對我們農業發展作出了非常重要的貢獻，但同時也造成了一系列的環境問題，如抗藥雜草種群的增加、土壤板結、水體汙染等，嚴重地影響了農業的可持續發展和人類的健康安全。
[0003]2-甲基-4-氯戊氧基丙酸，是一種主要針對闊葉類的手性除草劑。英文名稱為2- (4-Chloro-2-methylphenoxy) propanoic acid,分子式 CltlH11ClO3,分子量 214.65,在水中溶解度為0.734g/L。大鼠半數致死量(經口)650mg/kg，小鼠半數致死量(經口)369mg/kg。
[0004]
X
Cl
式I
[0005]已有研究表明，同一手性除草劑的各對映體之間雖然有著相同的理化性質，但是它們在生理和毒理方面存在著巨大的差異，因此，從對映體層面考慮這些手性除草劑的藥效和環境安全性就顯得尤為重要，而手性除草劑2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的拆分則是研究其對映體環境行為差異和環境安全的必要前提，它將對於準確評價2-甲基-4-氯戊氧基丙酸在環境和農產品的殘留有著十分重要的意義。
(三)
【發明內容】
[0006]本發明要解決的技術問題在於提供一種毛細管電泳結合紫外檢測技術拆分2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的方法，為評價其各對映體的殘留特徵和環境健康風險提供技術支持。
[0007]為解決上述技術問題，本發明採用的技術方案如下:
[0008]一種拆分2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的方法，包括以下步驟:
[0009](I)將外消旋的2-甲基-4-氯戊氧基丙酸用乙腈助溶後與水溶劑混合製成樣品溶液，所述的樣品溶液中2-甲基-4-氯戍氧基丙酸的濃度為10_2mg/mL~lOHmg/mL ；
[0010](2)配製十二烷基硫酸鈉-磷酸水溶液，使H3PO4濃度和十二烷基硫酸鈉(SDS)濃度均在55~70mmol/L，調節溶液pH至1.5~2.5 ;隨後加入手性選擇劑Y-環糊精(Y-⑶)使其質量濃度為2.5-3.5%，再添加異丙醇使其體積濃度為3~5%，得到含有y-CD和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液，作為運行用的緩衝溶液；
[0011](3)將步驟(1)製得的樣品溶液和步驟(2)製得的含有Y-環糊精和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液放入毛細管電泳儀中，加上反向電壓，進行拆分。
[0012]本發明步驟⑴中，由於2-甲基-4-氯戊氧基丙酸不溶於水，因此需加入少量的助溶劑乙腈助溶。
[0013]本發明步驟⑵中，配置Η3Ρ04&度和十二烷基硫酸鈉(SDS)濃度都在55~70mmol/L的緩衝溶液，優選緩衝溶液中十二烷基硫酸鈉與磷酸的濃度分別為60mmol/L和60mmol/L。本發明採用鹼液如飽和氫氧化鈉溶液調節緩衝溶液的pH值，優選調節緩衝溶液的pH至2.5左右。本發明優選含有Y-CD和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液中
Y-環糊精的質量終濃度為2.85%。所述緩衝溶液中加入了有機改性劑異丙醇，異丙醇的體積濃度優選5%。
[0014]進一步，所述步驟(2)中的含有Y-環糊精和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液優選按照如下方法配製:
[0015]配製十二烷基硫酸鈉-磷酸水溶液，使H3PO4濃度和十二烷基硫酸鈉濃度均為60mmol/L,並用飽和氫氧化鈉溶液調節溶液pH至2.5 ;隨後加入手性選擇劑Y -環糊精使其質量濃度為2.85%,再添加異丙醇使其體積濃度為5%，得到含有Y -環糊精和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液。
[0016]本發明運行用的緩衝溶液在配製好後使用一次性注射器經過0.45 μ m的濾膜過濾。
[0017]本發明步驟(3)中，在用毛細管進行拆分之前，通常先後用NaOH溶液、水、十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液衝洗毛細管，具體推薦按照如下方法進行衝洗:用0.lmol/L NaOH溶液和水分別衝洗2min，然後運行緩衝溶液衝洗2min，之後進行拆分。本發明可在常規拆分條件下進行拆分，如拆分過程中的反向電壓控制在15~25kV，優選20kV ;進樣採用壓力進樣 0.3psi X 5s。
[0018]本發明的有益效果是:本發明所述的2-甲基-4-氯戊氧基丙酸拆分方法簡單、準確，為準確、真實的了解和評價此類物質對映體選擇性差異提供技術支撐。
(四)【專利附圖】
【附圖說明】
[0019]圖1是本發明實施例1中的2-甲基-4-氯戊氧基丙酸對映體的拆分效果圖。
(五)【具體實施方式】
[0020]下面以具體實施例對本發明的技術方案做進一步說明，但本發明的保護範圍不限於此: [0021]實施例1
[0022](1)樣品配製:稱取5mg的2_甲基_4_氯戊氧基丙酸溶於ImL乙腈中，配置成5mg/:溶液和水分別衝洗2111111，運行緩衝溶液衝，其中左邊的峰記為峰一，右邊的峰記為峰
妃製得到的樣品溶液連續進樣5次，得到與I面積、峰高的重現性，實驗結果如下:1.出:面積的標準偏差:峰一 3.79%，峰二 3.69% ；3此可見，本發明所述拆分方法具有良好的
【權利要求】
1.一種拆分2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的方法，包括以下步驟: (1)將外消旋的2-甲基-4-氯戊氧基丙酸用乙腈助溶後與水溶劑混合製成樣品溶液，所述的樣品溶液中2-甲基-4-氯戍氧基丙酸的濃度為10_2mg/mL?lOHmg/mL ； (2)配製十二烷基硫酸鈉-磷酸水溶液，其中H3PO4濃度和十二烷基硫酸鈉濃度均在55?70mmol/L，並調節溶液pH至1.5?2.5 ;隨後加入手性選擇劑Y -環糊精使其質量濃度為2.5-3.5%，再添加異丙醇使其體積濃度為3?5%，得到含有Y -環糊精和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液，作為運行用的緩衝溶液； (3)將步驟(I)製得的樣品溶液和步驟(2)製得的含有Y-環糊精和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液放入毛細管電泳儀中，加上反向電壓，進行拆分。
2.如權利要求1所述的方法，其特徵在於:步驟(2)中，使十二烷基硫酸鈉與磷酸的濃度都為60mmol/L。
3.如權利要求2所述的方法，其特徵在於:步驟(2)中，用飽和氫氧化鈉溶液調節緩衝溶液的pH至2.5。
4.如權利要求1?3之一所述的方法，其特徵在於:步驟⑵中，使Y-環糊精的質量終濃度為2.85%。
5.如權利要求1?3之一所述的方法，其特徵在於:步驟(2)中，使異丙醇的體積濃度為5% ο
6.如權利要求1所述的方法，其特徵在於所述步驟(2)中的含有Y-環糊精和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液按照如下方法配製: 配製十二烷基硫酸鈉-磷酸水溶液，使H3PO4濃度和十二烷基硫酸鈉濃度均為60mmol/L，並用飽和氫氧化鈉溶液調節溶液pH至2.5 ;隨後加入手性選擇劑Y -環糊精使其質量濃度為2.85%，再添加異丙醇使其體積濃度為5%，得到含有Y -環糊精和異丙醇的十二烷基硫酸鈉-磷酸緩衝溶液。
【文檔編號】C25B7/00GK103834964SQ201310754848
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2013年12月31日 優先權日:2013年12月31日
【發明者】張全, 趙美蓉, 許杭傑, 王萃 申請人:浙江工業大學