一種中藥組合物及其製備方法和質量控制方法
2023-10-11 16:15:24 2
專利名稱：一種中藥組合物及其製備方法和質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種治療女性陰道炎、宮頸炎、宮頸糜爛等婦科炎症的中藥組合物及其製備方法和質量控制方法，屬中藥領域。
背景技術：
宮頸炎、陰道炎、宮頸糜爛是婦女生殖系統炎症中的常見病、多發病，屬中醫「帶下」、「陰癢」範疇，古有「十女九帶」之說，給廣大婦女帶來很大的身心痛苦。在該類疾病的治療上，西醫多採用化學藥物外用治療，但復發率高，且易引起化學性外陰道炎和表皮的潰破，療效不甚滿意。
中藥中有許多藥材具有殺菌抗炎的作用，但如何將這些中藥材配方組合，使其能發揮協同增效的作用，是中藥界一直在研究的課題。另外，由於製劑技術的局限和衛生條件的限制，至今極少有適宜的中藥劑型可以供婦科外用。而已有的劑型也僅有洗劑、栓劑、泡騰片劑，這些劑型都存在載藥量小、藥物停留時間短或釋藥不均勻等問題。
本發明目的旨在克服現有藥物的不足，提供一種有效治療女性陰道炎、宮頸炎、宮頸糜爛的中藥組合物及其製備方法；本發明目的還在於提供一種中藥組合物的質量控制方法。
發明內容
本發明目的是通過如下技術方案實現的本發明所述的藥物是由下列組份的原料藥製成的(用量為重量份)苦參1000～2000份、莪朮200～800份、蒼朮100～500份、冰片5～20份。
經優選後的原料藥比例為苦參1400～1600份、莪朮400～600份、蒼朮200～400份、冰片5～15份。
經實驗後進一步優選後，確實最優配比為苦參1500份、莪朮500份、蒼朮300份、冰片10份。
為了方便臨床使用，發明人針對該原料藥做了進一步研究，以制定其提取製備工藝，將其製成臨床或藥學所需的各種劑型，如顆粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、栓劑、凝膠劑、洗液等。研究過程如下首先為前提取工藝的研究採用正交試驗法，以苦參鹼和總生物鹼得量為指標考察苦參的提取工藝和精製工藝；以揮髮油得量為指標考察了莪朮、蒼朮的提取工藝；冰片為直接入藥的部分，將上述三部分藥物合併即得本藥物組合物。
基本工藝過程為取苦參藥材，粉碎，加水煎煮，煎液減壓濃縮至60℃時相對密度為1.00～1.10的清膏，加乙醇使含醇量達60～80％，靜置冷藏後濾過，濾液減壓回收乙醇，並濃縮至60℃時相對密度為1.10～1.20的清膏，調pH2～3，靜置，濾過，濾液通過強酸性陽離子交換樹脂柱，加完藥液後，以去離子水繼續洗脫至水洗脫液pH6～8，棄去；加濃氨水浸泡1～3小時，再以5～15％的氨水液洗脫至完全，收集洗脫液，減壓回收溶劑，藥液濃縮至幹，粉碎，備用；另取莪朮、蒼朮兩味藥材，加水蒸餾提取，收集餾液，加5～30％的氯化鈉，冷藏，分取上層油液，與上面的苦參提取精製物及冰片合併，製成中間體，可以進一步製成各種劑型。
優選後的工藝過程為取苦參藥材，粉碎分別加10倍量水煎煮三次，合併煎液，於65～70℃，-0.08Mpa條件下減壓濃縮至60℃時相對密度為1.08～1.10的清膏，放冷加乙醇使含醇量達70～80％，靜置冷藏24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時相對密度為1.18～1.20的清膏，加鹽酸調pH2～3，放置12小時，濾過，濾液通過H型強酸性陽離子交換樹脂柱，加完藥液後，以去離子水繼續洗脫至水洗脫液pH6～7，棄去；加濃氨水浸泡2小時，再以10～15％的氨水液洗脫，以10％矽鎢酸試劑檢查至沉澱反應陰性為止，收集洗脫液，減壓回收溶劑，藥液濃縮至幹，粉碎，備用；另取莪朮、蒼朮兩味藥材，加8～10倍量水蒸餾提取5～8小時，收集餾液，加12～20％的氯化鈉，冷藏12小時，分取上層油液，與上面的苦參提取精製物及冰片合併，得到製劑中間體。
這其中，樹脂柱的具體要求是用溼法裝柱，溼樹脂重0.75～1.0kg，柱徑與柱高之比為1∶5～1∶10，水流出液pH3～4。
應用以上提取及前處理工藝得到的藥物組合物中間體，配以相應的輔料，就可以製成臨床所需的各種劑型，包括包括顆粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、栓劑、凝膠劑、洗液等。由於凝膠劑最有創新性，最適合本發明產品的應用，故發明人重點研究了凝膠劑。
凝膠製劑的研究按上述的工藝研究資料，取莪朮500份、蒼朮300份提取揮髮油，加揮髮油中加入80型吐溫5份，研磨均勻，取冰片10份，加乙醇使溶解，加入到上述混合物中，研磨均勻，再加甘油200份，羥丙甲纖維素20份，充分研勻，得藥液A；再取苦參1500份提取精製成藥粉，加水500份，再加適量乳酸調節pH至3～4，加熱使溶解，放冷，濾過，所得濾液加入到藥液A中，邊加邊攪，再加水補足至1000份，攪拌使成均勻凝膠，即得。
隨著處方量的變化，各種輔料的比例也會有所波動，但其比例是基本不變的，因而都應屬本發明申請的保護範圍。
凝膠劑是一種新的中藥外用劑型，本發明是採用新型水溶性基質-羥丙甲纖維素為賦形劑，配以中藥苦參、莪朮、蒼朮、冰片的提取物，加適宜附加劑製成的凝膠劑，具有清熱燥溼，抗菌、消炎、殺蟲、解毒之功效，用於治療女性宮頸炎、陰道炎症。凝膠劑是一種適用於中藥外用的理想劑型，它是藥物與能形成大分子網絡體系的輔料混合製成的半流體製劑，與黏膜有良好的偶合作用和水合作用，可較長時間與作用部位緊密黏附，有較好的生物相容性，無油膩感，有利於藥物釋放。本製劑克服了一般製劑經口服、注射、直腸等給藥途徑產生的味苦、疼痛、給藥不便的缺點；療效確切，使用方便，毒副作用小，患者易接受。
質量控制方法的研究在研究本發明產品及製備方法的過程中，為了有效控制本發明產品的質量，發明人還制定了其質量控制方法，也應屬於本發明的整體思路之一，因而也是本申請的保護內容。這套質量控制辦法包括含量測定部分和定性鑑別兩部分，分述如下。
含量測定方法照高效液相色譜法測定苦參鹼色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，比例為30∶70的乙腈-0.02％三乙胺為流動相，流速1ml/min，檢測波長為230nm，理論塔板數按苦參鹼峰計算應不低於2000。
對照品溶液的製備 精密稱取已乾燥至恆重的苦參鹼對照品，加甲醇製成每1ml含苦參鹼200μg的溶液，作為對照品溶液。
供試品溶液的製備 取本品1.0g，精密稱定，置錐形瓶中，加飽和食鹽水20ml，攪拌使溶，再加濃氨水調節pH9～10，以氯仿振搖提取5次，每次20ml，合併氯仿液，水浴揮幹溶劑，殘渣加甲醇定量轉移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，微孔濾膜濾過，即得。
測定法 分別精密吸取對照品與供試品液各10μl注入液相色譜儀，測定，即得。
定性鑑別方法(1)取本品4g，加硅藻土10g，研磨均勻，加水50ml轉移至100ml圓底燒瓶中，上接揮髮油提取器，提取器刻度管內先加滿水，再加入醋酸乙酯2ml，蒸餾提取1小時，收集醋酸乙酯液，作為供試品溶液；另取莪朮對照藥材1g，加石油醚20ml超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2～5μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以比例為19∶1苯-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的紫色主斑點。
(2)取(1)項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取蒼朮對照藥材1g，加石油醚20ml超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3～8μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以石油醚為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的墨綠色斑點。
(3)取(1)項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取冰片對照品，加乙醇製成每1ml含5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以比例為19∶1環己烷-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取(1)項下經蒸餾提取後的水液，以脫脂棉濾過，再加濃氨水調節pH9～10，以氯仿振搖提取3次，每次30ml，合併氯仿液，水浴蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取苦參鹼對照品適量，加無水乙醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以比例為2∶3∶4∶0.2的苯-丙酮-醋酸乙酯-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點。
經發明人證明，以上質量控制方法可以應用於本發明技術方案能夠製成的各種劑型。
有益效果本發明藥物組合物具有行氣破瘀，燥溼殺蟲，生肌止痛之功效，可用於治療女性細菌性、黴菌性陰道炎，宮頸炎，宮頸糜爛等症。為證明其效果，發明人進行了如下動物藥效學實驗。
試驗藥品婦康凝膠(按本發明最優技術方案製備而得)批號20031020含量2.31g生藥/g凝膠受試藥物的配置用基質稀釋，小、中、大劑量含生藥分別為0.58g生藥/g凝膠、1.16g生藥/g凝膠、2.31g生藥/g凝膠。
試驗動物Wistar大鼠，由山東中醫藥大學動物中心提供，動物合格證號2003002；白色豚鼠動物合格證號2003004；家兔，體重2.1～2.5kg，♀♂兼用，由山東省農科院畜牧所種兔場提供，動物合格證號魯動質字D20021135。
試驗器材Oliympus ch30顯微鏡(日本)，YJ-1450醫用淨化工作檯(蘇州金燕掙化廠)。
菌種金黃色葡萄球菌(ATCC，25923)，大腸桿菌(ATCC，25922)，乙型溶血性鏈球菌(32204)、淋球菌、白色念珠菌，均由山東中醫藥大學附屬醫院檢驗科細菌室臨床分離。
潔爾陰洗液成都恩威製藥有限公司，批號021140。
營養肉湯(生物製劑)山東省衛生防疫站，批號20000401。
磷酸組胺上海麗珠東風生物技術有限公司，批號990406。
達克寧栓西安楊森製藥有限公司，批號010115711。
注射用青黴素山東魯抗醫藥股份有限公司，批號B030616。
試驗方法與結果1.婦康凝膠體外抑菌試驗1.1婦康凝膠抑制細菌試驗(1)菌種致病性大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、淋球菌、白色念珠菌，以上細菌均選標準菌株(皆從臨床標本分離，每個菌種分離10個菌株)。(2)培養基營養肉湯(3)方法取滅菌小試管若干支，用相應的培養基稀釋被試藥，濃度從含生藥0.2g/ml開始，並二倍稀釋法分為6管，(另設藥物對照組試管及菌株對照試管)每管加培養基1ml，每管加入0.1ml稀釋的新鮮菌液(含菌量金黃色葡萄球菌約3.5×108、乙型溶血性鏈球菌1×107、大腸桿菌約5×109)，置37℃培養箱中培養18小時後觀察有無細菌生長，如果藥液顏色深或不透明，無法判定有無細菌生長，把可疑試管再移到平面皿培養基上，培養18小時，觀察細菌生長情況，細菌不生長的最高藥物稀釋濃度為該藥的最低抑菌濃度(MIC)，每個菌種採用10株，求其平均值為其最低抑菌濃度，試驗結果見表1。
表1 凝膠液體試管法體外抑菌(MIC)試驗結果(X±SD)(g/ml)
「+」有細菌生長，「-」無細菌生長結論婦康凝膠與對照藥相比，有明顯抑菌作用。
1.2婦康凝膠抑制真菌試驗(1)菌種白色念珠菌、酵母菌，試驗用第二代新鮮培養物，選標準菌株。(2)培養基沙雷氏真菌培養基(3)方法取滅菌小試管若干支，用相應的培養基稀釋被試藥，藥物濃度從含生藥0.2g/ml開始，並二倍稀釋法分為5管，(另設藥物對照組試管及菌株對照試管)每管加培養基1ml，再加入200倍稀釋的新鮮真菌培養液0.1ml，置32℃培養箱中培養18小時後觀察有無真菌生長，如果藥液顏色深或不透明，無法判定有無細菌生長，把可疑試管再移到沙雷氏真菌培養平面皿上，培養18小時，觀察細菌生長情況，細菌不生長的最高藥物稀釋濃度為該藥的最低抑菌濃度(MIC)。試驗結果見表2。
表2凝膠液體試管法體外抑真菌(MIC)試驗結果(X±SD)(g/ml)
「+」有細菌生長，「-」無細菌生長。與潔爾陰組比較※P＜0.05結論婦康凝膠與對照藥相比，有明顯抑菌作用。
2.婦康凝膠對陰道炎模型的影響2.1.婦康凝膠對家兔真菌性(白色念珠菌)陰道炎模型的影響方法建立了真菌性(白色念珠菌)陰道炎動物模型，將大白兔用兔架固定，眼科鑷鑷起陰道口，用大鼠灌胃針頭注入濃度為3×108個/ml的白色念珠菌0.05ml，然後用浸入青黴素的棉球堵住陰道口。接種後每天肉眼觀察陰道有無發生充血水腫、出血、糜爛、分泌物增多等情況，於接種後第5天取陰道分泌物，用生理鹽水溼片法鏡檢為陽性，並用沙氏培養基培養後見假菌絲和芽生孢子，證實造模成功。將感染的大白兔隨機分為6組治療凝膠基質組、達克寧組、藥物大、中、小劑量組、生理鹽水組，每組動物8隻，另設空白對照組也為8隻，於接種第5後連續給藥7天。於第8天取家兔陰道局部分泌物作真菌培養，經鏡檢和培養無菌者為轉陰者。藥物與達克寧經秩和檢驗看區別。處死大鼠取陰道肉眼觀察並作病理檢查觀察家兔陰道炎症情況無充血、水腫為(-)，評分0分；輕度為(+)評分1分；中度為(++)評分2分；重度為(+++)評分3分。每項指標炎症評分值的總和為炎症總分值，受試組炎症總分值與空白對照組炎症總分值之差計算感染炎症分值。以生理鹽水對照組的感染炎症分值定為100％(炎症程度)，藥物組與生理鹽水對照組比較，可得出藥物組的炎症程度(％)，100％減去炎症程度即為對陰道炎的治癒程度(100％-炎症程度％)。分析比較其對白色念珠菌所致陰道炎症的影響，試驗結果見表3。
表3 婦康凝膠對家兔白色念珠菌陰道炎的影響(X±SD)
與生理鹽水比較※p＜0.05，※※p＜0.01結論婦康凝膠與對照藥相比，有明顯的抗炎作用。
2.2.凝膠對大鼠細菌性陰道炎模型的影響建立金葡菌、大腸桿菌混合感染性陰道炎動物模型從大鼠陰道注入金葡菌(3×108個/ml)和大腸桿菌(16×108個/ml)混合菌液，菌液注入量為0.05ml/100g，隔日再注射一次，第5天及第7天分別取陰道分泌物做鏡檢、細菌培養，並分別分離出金葡菌和大腸桿菌，再分別接種於培養基中，經培養後做菌株鑑定。鏡檢及菌株鑑定均為陽性者即為感染成功的大鼠。取感染成功的大鼠隨機分組治療。於接種後第5天取陰道分泌物，經鏡檢和培養檢驗為陽性者作為感染模型。治療方法、炎症評分標準同真菌性陰道炎模型，結果見表4。
表4婦康凝膠對大鼠細菌性陰道炎模型的影響(X±SD)
與生理鹽水比較※p＜0.05，※※p＜0.01與生理鹽水比較※p＜0.05，※※p＜0.01結論婦康凝膠與對照藥相比，有明顯的抗炎作用。
3、婦康凝膠對大鼠宮頸炎的影響取健康、雌性、末孕大白鼠70隻，體重150～200g，將動物按體重隨機分成7組，正常對照組、試驗造模組、基質組、婦康凝膠小、中、大劑量組、潔爾陰組。除正常對照組外其餘6組用注射器向陰道深部注入25％苯酚膠漿，每隻0.5ml，3天1次，共3次。造模後第9天開始給以上藥物，0.5ml/只/次/天，連續給藥12天後處死各組動物，解剖子宮後取出觀察。取陰道至子宮分角處組織，置10％福馬林中固定，3天後將組織自中線縱行切開，做常規石蠟切片，HE染色，鏡下觀察陰道至子宮組織形態學變化及黏膜、黏膜下間質形態學的炎症改變程度，根據評定標準評定炎症程度。標準黏膜，鱗狀上皮層僅局部超過2～3層略有增厚為「+」，明顯增厚為「++」，廣泛增厚並使黏膜凹凸不平為「+++」；有些柱狀上皮可見有增生而出現鱗化趨勢為「+」，明顯鱗化為「++」，鱗化區域廣泛甚至達管腔為「+++」；僅見極少區域鱗狀上皮出現糜爛，而被鄰近柱狀上皮增生替代為「+」，柱狀上皮增生明顯替代鱗狀上皮為「++」，鱗狀上皮大片脫落由柱狀上皮替代為「+++」，僅見極少區域糜爛突破基底膜為「+」，可見明顯黏膜上皮變性壞死為「++」，黏膜潰瘍伴有感染為「+++」；炎細胞浸潤僅見黏膜及黏膜下淺層有少量炎細胞浸潤為「+」，黏膜及黏膜下間質內均有中等量炎細胞浸潤為「++」，黏膜下及間質內深層均見大量廣泛炎細胞浸潤為「+++」；間質成纖維細胞增生間質內僅見成纖維細胞賂較正常對照組增多為「+」，成纖維細胞增生明顯並有少量膠原纖維束為「++」，成纖維細胞增生伴有大量膠原纖維束形成為「+++」。將宮頸總體炎症改變程度分為4級，正常六項中僅見淺層少量炎細胞浸潤；輕度六項中兩項以上「+」；中度六項中兩項以上「+」，兩項有「++」；重度六項中一項有「+++」，兩項有「++」，三項有「+」或三項有「+++」，試驗結果見表5。
表5 婦康凝膠對宮頸炎大鼠的影響
組織形態學觀察造模組陰道黏膜鱗狀上皮層增厚，宮頸鱗柱交界處可見有枝狀上皮鱗狀化生，有多處可見上皮糜爛，並有糜爛部位柱狀上皮替代鱗狀上皮的趨勢。少數動物可見有黏膜潰瘍，黏膜下層毛細血管擴張充血，間質水腫。從黏膜至間質均可見大量炎細胞浸潤，並可見間質纖維組織增生。藥物組與造模組相應部位比較，病變均明顯輕微，其炎症改變程度也明顯較其它組輕，其鱗狀上皮形態與正常對照組相似，黏膜下炎細胞浸潤較造模組明顯減少，組織結構與正常對照組無明顯差異。
結論婦康凝膠與對照藥相比，有明顯的抗炎作用。
4.止癢作用取白色豚鼠60隻，雌雄各半，體重300～400g，隨機分成6組，試驗前一天各鼠右後足背剃毛，塗藥一次。試驗當天用粗砂紙擦傷剃毛處，面積約為1cm2，局部再塗藥一次，對照組給予等量的生理鹽水。末次塗藥後10分鐘，開始在創面滴0.01％磷酸組織胺，每隻0.05ml，此後每隔3分鐘按0.01％、0.02％、0.03％……遞增濃度，每次均為0.05ml，直至出現豚鼠回頭舔後足所給予的磷酸組織胺總量為致癢閾，記錄並比較各組致癢閾，經方差分析比較區別。磷酸組織胺50μl，塗抹擦傷皮膚，3分鐘內若豚鼠不出現回頭舔後足皮膚動作，重複操作，如此直至出現為止，記錄塗抹組織胺次數及用量。試驗結果見表6表6 婦康凝膠對磷酸組織胺所致豚鼠癢閾值的影響(X±SD)(ug)
與生理鹽水比較※p＜0.05結論婦康凝膠與對照藥相比，有明顯的止癢作用。
具體實施例方式以下通過實施例來詳細說明本發明的技術方案實施例1[處方]苦參1000g、莪朮200g、蒼朮100g、冰片5g[製法]取苦參藥材，粉碎成最粗粉，分別加10倍量水煎煮三次，每次1小時，濾過，合併濾液，減壓濃縮至相對密度為1.05～1.10的清膏，放冷加乙醇使含醇量達60％，靜置冷藏24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至相對密度為1.15～1.18的清膏，加鹽酸調pH2～3，放置12小時，濾過，濾液通過已處理好的強酸性陽離子交換樹脂柱(溼法裝柱，溼樹脂重0.8kg，柱徑與柱高之比為1∶5，水流出液pH3)，加完藥液後，以去離子水繼續洗脫至水洗脫液pH6～7，棄去；加濃氨水浸泡1小時，再以7％的氨水液洗脫，以10％矽鎢酸試劑檢查至沉澱反應陰性為止，收集洗脫液，減壓回收溶劑，藥液濃縮至幹，粉碎，備用；再取莪朮、蒼朮兩味藥材，粉碎成粗顆粒，加8倍量水蒸餾提取5小時，收集餾液，加12％的氯化鈉，冷藏12小時，分取上層油液，加入吐溫-80 2g研磨30分鐘，取冰片，加乙醇10ml使溶解，加入到上述混合物中，研磨均勻，再加甘油100g，羥丙甲纖維素10g，充分研勻，放置30分鐘，備用；取苦參提取精製的藥粉，加水200ml，再加適量乳酸調節pH至4，加熱使溶解，放冷，濾過，所得濾液加入到上面的混合物中，邊加邊攪，再加水補足至600g，攪拌使成均勻凝膠，即得。
實施例2[處方]苦參2000g、莪朮800g、蒼朮500g、冰片20g[製法]取苦參藥材，粉碎成最粗粉，分別加10倍量水煎煮二次，每次1.5小時，濾過，合併濾液，減壓濃縮至相對密度為1.00～1.03的清膏，放冷加乙醇使含醇量達70％，靜置冷藏24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至相對密度為1.10～1.15的清膏，加鹽酸調pH2～3，放置12小時，濾過，濾液通過已處理好的H型強酸性陽離子交換樹脂柱(溼法裝柱，溼樹脂重1.0kg，柱徑與柱高之比為1∶8，水流出液pH4)，加完藥液後，以去離子水繼續洗脫至水洗脫液pH7，棄去；加濃氨水浸泡3小時，再以15％的氨水液洗脫，以10％矽鎢酸試劑檢查至沉澱反應陰性為止，收集洗脫液，減壓回收溶劑，藥液濃縮至幹，粉碎，備用；再取莪朮、蒼朮兩味藥材，粉碎成粗顆粒，加10倍量水蒸餾提取8小時，收集餾液，加20％的氯化鈉，冷藏12小時，分取上層油液，加入吐溫-80 8g研磨30分鐘，取冰片，加乙醇20ml使溶解，加入到上述混合物中，研磨均勻，再加甘油250g，羥丙甲纖維素27g，充分研勻，放置40分鐘，備用；取苦參提取精製的藥粉，加水700ml，再加適量乳酸調節pH至3，加熱使溶解，放冷，濾過，所得濾液加入到上面的混合物中，邊加邊攪，再加水補足至1500g，攪拌使成均勻凝膠，即得。
實施例3[處方]苦參1500g、莪朮500g、蒼朮300g、冰片10g[製法]取苦參藥材，粉碎成最粗粉，分別加10倍量水煎煮三次，每次1小時，濾過，合併濾液，減壓濃縮至相對密度為1.08～1.10的清膏，放冷加乙醇使含醇量達80％，靜置冷藏24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇至相對密度為1.18～1.20的清膏，加鹽酸調pH2～3，放置12小時，濾過，濾液通過已處理好的H型強酸性陽離子交換樹脂柱，加完藥液後，以去離子水繼續洗脫至水洗脫液pH6～7，棄去；加濃氨水浸泡2小時，再以10％的氨水液洗脫，以10％矽鎢酸試劑檢查至沉澱反應陰性為止，收集洗脫液，減壓回收溶劑，藥液濃縮至幹，粉碎，備用；再取莪朮、蒼朮兩味藥材，粉碎成5目左右顆粒，加8倍量水蒸餾提取6小時，收集餾液，加15％的氯化鈉，冷藏12小時，分取上層油液，加入吐溫-80 5g研磨30分鐘，取冰片，加乙醇15ml使溶解，加入到上述混合物中，研磨均勻，再加甘油200g，羥丙甲纖維素20g，充分研勻，放置30分鐘，備用；取苦參提取精製的藥粉，加水500ml，再加適量乳酸調節pH至4，加熱使溶解，放冷，濾過，所得濾液加入到上面的混合物中，邊加邊攪，再加水補足至1000g，攪拌使成均勻凝膠，即得。
實施例4[處方]苦參1200g、莪朮400g、蒼朮300g、冰片15g[製法]取苦參藥材，粉碎，加水煎煮，煎液減壓濃縮至60℃時相對密度為1.08～1.10的清膏，加乙醇使含醇量達65％，靜置冷藏過夜，濾過，濾液減壓回收乙醇，並濃縮至60℃時相對密度為1.18～1.20的清膏，調pH3，靜置，濾過，濾液通過強酸性陽離子交換樹脂柱(溼法裝柱，溼樹脂重0.8kg，柱徑與柱高之比為1∶8，水流出液pH3)，加完藥液後，以去離子水繼續洗脫至水洗脫液pH7，棄去；加濃氨水浸泡1小時，再以10％的氨水液洗脫至矽鎢酸反應陰性，收集洗脫液，減壓回收溶劑，藥液濃縮至幹，粉碎，備用；另取莪朮、蒼朮兩味藥材，加10倍量水蒸餾提取6小時，收集餾液，加15％的氯化鈉，冷藏12小時，分取上層油液，與上面的苦參提取精製物及冰片合併，加入80％乙醇，混合均勻，製成洗劑。
實施例5對實施例3所制凝膠進行質量檢驗[鑑別](1)取本品4g，加硅藻土10g，研磨均勻，加水50ml轉移至100ml圓底燒瓶中，上接揮髮油提取器，提取器刻度管內先加滿水，再加入醋酸乙酯2ml，蒸餾提取1小時，收集醋酸乙酯液，作為供試品溶液；另取莪朮對照藥材1g，加石油醚(60～90℃)20ml超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2～5μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯(19∶1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的紫色主斑點。
(2)取[鑑別](1)項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取蒼朮對照藥材1g，加石油醚(60～90℃)20ml超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3～8μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的墨綠色斑點。
(3)取[鑑別](1)項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取冰片對照品，加乙醇製成每1ml含5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以環己烷-醋酸乙酯(19∶1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取[鑑別](1)項下經蒸餾提取後的水液，以脫脂棉濾過，再加濃氨水調節pH9～10，以氯仿振搖提取3次，每次30ml，合併氯仿液，水浴蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取苦參鹼對照品適量，加無水乙醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以苯-丙酮-醋酸乙酯-濃氨試液(2∶3∶4∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點。
pH取本品5g，加新沸冷卻水50ml，攪拌30分鐘，測定水液的pH，應為4.0～6.0。
照高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑(5μm，250mm×4.6mm)，乙腈-0.02％三乙胺(30∶70)為流動相，流速1ml/min，柱溫40℃，檢測波長為230nm，理論塔板數按苦參鹼峰計算應不低於2000。
對照品溶液的製備 精密稱取已乾燥至恆重的苦參鹼對照品，加甲醇製成每1ml含苦參鹼200μg的溶液，作為對照品溶液。
供試品溶液的製備 取本品1.0g，精密稱定，置錐形瓶中，加飽和食鹽水20ml，攪拌使溶，再加濃氨水調節pH9～10，以氯仿振搖提取5次，每次20ml，合併氯仿液，水浴揮幹溶劑，殘渣加甲醇定量轉移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。
測定法 分別精密吸取對照品與供試品液各10μl注入液相色譜儀，測定，即得。
行氣破瘀，燥溼殺蟲，生肌止痛。用於治療女性細菌性、黴菌性陰道炎，宮頸炎，宮頸糜爛。
權利要求
1.一種用於治療婦科生殖系統炎症的藥物組合物，其特徵在於它是由如下重量份原料藥製成的苦參1000～2000份、莪朮200～800份、蒼朮100～500份、冰片5～20份。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於各原料藥的優選重量配比為苦參1400～1600份、莪朮400～600份、蒼朮200～400份、冰片5～15份。
3.根據權利要求2所述的藥物組合物，其特徵在於各原料的最佳重量配比為苦參1500份、莪朮500份、蒼朮300份、冰片10份。
4.根據權利要求1至3中任一所述的藥物組合物，其特徵在於該組合物可製成臨床上或藥學上可接受的各種劑型，包括顆粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、栓劑、凝膠劑、洗液等。
5.權利要求4所述的藥物組合物的製備方法，其特徵在於該方法包含如下工藝過程取苦參藥材，粉碎，加水煎煮，煎液減壓濃縮至60℃時相對密度為1.00～1.10的清膏，加乙醇使含醇量達60～80％，靜置冷藏後濾過，濾液減壓回收乙醇，並濃縮至60℃時相對密度為1.10～1.20的清膏，調pH2～3，靜置，濾過，濾液通過強酸性陽離子交換樹脂柱，加完藥液後，以去離子水繼續洗脫至水洗脫液pH6～8，棄去；加濃氨水浸泡1～3小時，再以5～15％的氨水液洗脫至完全，收集洗脫液，減壓回收溶劑，藥液濃縮至幹，粉碎，備用；另取莪朮、蒼朮兩味藥材，加水蒸餾提取，收集餾液，加5～30％的氯化鈉，冷藏，分取上層油液，與上面的苦參提取精製物及冰片合併，加入適宜輔料，製成相應劑型。
6.根據權利要求5所述藥物組合物的製備方法，其特徵在於該具體過程如下取苦參藥材，粉碎分別加10倍量水煎煮三次，合併煎液，於65～70℃，-0.08Mpa條件下減壓濃縮至60℃時相對密度為1.08～1.10的清膏，放冷加乙醇使含醇量達70～80％，靜置冷藏24小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至60℃時相對密度為1.18～1.20的清膏，加鹽酸調pH2～3，放置12小時，濾過，濾液通過H型強酸性陽離子交換樹脂柱，加完藥液後，以去離子水繼續洗脫至水洗脫液pH6～7，棄去；加濃氨水浸泡2小時，再以10～15％的氨水液洗脫，以10％矽鎢酸試劑檢查至沉澱反應陰性為止，收集洗脫液，減壓回收溶劑，藥液濃縮至幹，粉碎，備用；另取莪朮、蒼朮兩味藥材，加8～10倍量水蒸餾提取5～8小時，收集餾液，加12～20％的氯化鈉，冷藏12小時，分取上層油液，與上面的苦參提取精製物及冰片合併，加入適宜輔料，製成所需劑型。
7.根據權利要求6所述藥物組合物的製備方法，其特徵在於其中的陽離子交換樹脂柱是用溼法裝柱，溼樹脂重0.75～1.0kg，柱徑與柱高之比為1∶5～1∶10，水流出液pH3～4。
8.根據權利要求7所述藥物組合物的製備方法，其特徵在於凝膠劑的工藝過程為取莪朮500份、蒼朮300份提取揮髮油，加揮髮油中加入80型吐溫5份，研磨均勻，取冰片10份，加乙醇使溶解，加入到上述混合物中，研磨均勻，再加甘油200份，羥丙甲纖維素20份，充分研勻，得藥液A；再取苦參1500份提取精製成藥粉，加水500份，再加適量乳酸調節pH至3～4，加熱使溶解，放冷，濾過，所得濾液加入到藥液A中，邊加邊攪，再加水補足至1000份，攪拌使成均勻凝膠，即得。
9.權利要求8所述藥物組合物的質量控制方法，含有含量測定和定性鑑別兩部分，其特徵在於含量測定方法如下色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，比例為30∶70的乙腈-0.02％三乙胺為流動相，流速1ml/min，檢測波長為230nm，理論塔板數按苦參鹼峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備 精密稱取已乾燥至恆重的苦參鹼對照品，加甲醇製成每1ml含苦參鹼200μg的溶液，作為對照品溶液；供試品溶液的製備 取本品1.0g，精密稱定，置錐形瓶中，加飽和食鹽水20ml，攪拌使溶，再加濃氨水調節pH9～10，以氯仿振搖提取5次，每次20ml，合併氯仿液，水浴揮幹溶劑，殘渣加甲醇定量轉移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品與供試品液各10μl注入液相色譜儀，測定，即得。
10.根據權利要求9所述藥物組合物的質量控制方法，其特徵在於其中的鑑別方法包含如下的一種或幾種1)取本品4g，加硅藻土10g，研磨均勻，加水50ml轉移至100ml圓底燒瓶中，上接揮髮油提取器，提取器刻度管內先加滿水，再加入醋酸乙酯2ml，蒸餾提取1小時，收集醋酸乙酯液，作為供試品溶液；另取莪朮對照藥材1g，加石油醚20ml超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2～5μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以比例為19∶1苯-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的紫色主斑點；2)取「鑑別1)」項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取蒼朮對照藥材1g，加石油醚20ml超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至約2ml，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3～8μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以石油醚為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的墨綠色斑點；3)取「鑑別1)」項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取冰片對照品，加乙醇製成每1ml含5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以比例為19∶1環己烷-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；4)取「鑑別1)」項下經蒸餾提取後的水液，以脫脂棉濾過，再加濃氨水調節pH9～10，以氯仿振搖提取3次，每次30ml，合併氯仿液，水浴蒸乾，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取苦參鹼對照品適量，加無水乙醇製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以比例為2∶3∶4∶0.2的苯-丙酮-醋酸乙酯-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙紅色斑點。
11.權利要求1至3中任一所述的藥物組合物在製備用於治療女性陰道炎、宮頸炎、宮頸糜爛等婦科炎症的藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種用於治療婦科炎症的中藥組合物，該組合物是由苦參、莪朮、蒼朮和冰片等原料藥，經水提醇沉、樹脂柱精製、提取揮髮油等工藝步驟製成適宜的劑型，優選為凝膠劑，屬中藥領域。本發明中藥組合物對婦女細菌性、黴菌性陰道炎，宮頸炎，宮頸糜爛等有著顯著的治療效果。本發明同時還公開了該中藥組合物的製備方法和質量控制方法。
文檔編號G01N33/15GK1958058SQ20051020066
公開日2007年5月9日 申請日期2005年11月1日 優先權日2005年11月1日
發明者代龍 申請人:代龍