一種鮮三七提取物及其製備方法和其藥用製劑的製作方法
2023-05-15 14:00:21
專利名稱：一種鮮三七提取物及其製備方法和其藥用製劑的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫藥技術領域，具體地，涉及一種鮮三七提取物，以其為活性成分的 藥用製劑，從鮮三七提取三七總皂苷的方法。
背景技術：
三七Panax notoginseng(Buck)F. H. Chen為五加科人參屬植物，有「金不換」、 「南國神草」等美譽，是我國名貴中藥材，也是雲南獨具特色的中藥材資源，主產雲南文山。 文山以其特殊自然條件優勢，成為傳統中藥三七種植的原產地，其產量佔全國總產量的 90%以上。國內外的專家學者對三七的化學成分進行了較為系統的研究，目前已經從三七根 中分離到多種達瑪烷型三萜皂苷，即人參皂苷(ginsenoside) Rb1, Rb2i, Re、Rd、Rg1, Re、、 Rg2^Rh1,Rg3>20- (0)-葡萄糖人參皂苷 Rfj1Ja3,三七皂苷(notoginsenoside)禮、&、1 3、 R4> R6、R8、R9、A、B、C、D、E、G、H、I、J、K、L、M、0、P、Q、L、S、T，膠股蘭皂苷(gypenoside) XVII。加上三七其它部位分離得到的化合物，三七中已經分離得到的皂苷類化合物達到了 70餘種。但其主要成分仍為三七總皂苷，包括三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參 皂苷Rb1、人參皂苷Rd，在三七主根中R1+ Rg1+ Rb1 > 5%，而三七蘆頭中R1+ Rg1+ Rb1三者 含量之和大於10%。三七生產中常見的提取總皂苷的方法有冷浸法、醇回流、水提法；所用溶劑為乙 醇、水；所用原料均為幹品原料。三七中澱粉含量達到70%左右，一般不宜採用水或低濃度 乙醇提取，以免糊化。因此醇回流提取是本方法的最佳選擇。傳統三七提取均採用幹品進 行提取。多採用60%或70%的乙醇進行提取，但由於提取過程中工藝參數選擇的不同，會直 接造成三七總皂苷有效成分種類及含量差別很大。幹品含水量按我國藥典要求，須小於等 於14%。鮮三七皂苷含量高於幹品三七約20%，而鮮品三七含水量70%左右。因此，用鮮三七 為原料提取活性成分較之用幹品作原料是一個較為理想的選擇。
發明內容
本發明的目的是提供一種用鮮三七為原料提取的皂苷含量高的三七提取物。本發明的另一目的是提供一種用鮮三七為原料製備三七提取物的方法。本發明的再一目的是提供一種由鮮三七提取的提取物製成的藥物製劑。為了實現本發明的上述目的，本發明提供了如下的技術方案
鮮三七提取物，其含有三七皂苷札4 10%、人參皂苷Rgl23 36%、人參皂苷Re2 5%、 人參皂苷1^27 39%、人參皂苷Rd 3 10%，其中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、 人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd佔總量的65 95%。優選的三七提取物，其含有三七皂苷R1 4 7%、人參皂苷23 30%、人參皂苷 Re 2 3. S^KASS-Rb1 27 35%、人參皂苷Rd 4 7%，其中三七皂苷R1、人參皂苷Rgl、 人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd佔總量的65 85%。
更優選的三七提取物，其含有三七皂苷R1 7 8%、人參皂苷Rg1 27 34%、人參 皂苷Re 3 4%、人參皂苷Md1 33 36%、人參皂苷Rd 6 8%，其中三七皂苷R1、人參皂苷 Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd佔總量的80 90%。本發明同時提供鮮三七提取物，其含有三七皂苷禮4 10%、人參皂苷Rgl23 36%、人參皂苷Re2 5%、人參皂苷1^27 39%、人參皂苷Rd 3 10%，其中三七皂苷R1、人 參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd佔總量的65 95%，由下述方法提取而 得
採用鮮三七為原料，先將三七主根或蘆頭破碎成6-10mm的顆粒或切成厚度在l_3mm的 薄片，用6-8倍量的70% 95%乙醇經熱回流循環提取6-10個小時，放置過濾，收集濾液 減壓濃縮，並經大孔吸附樹脂柱吸附，然後用70-80%乙醇洗脫，洗脫液脫色後減壓濃縮，幹
燥以上所述的各組分的百分數均為重量百分數。本發明另外提供了製備上述任意一項所述的鮮三七提取物的方法採用鮮三七主 根或三七剪口為原料，先將三七主根或蘆頭破碎成6-10mm的顆粒或切成厚度在l_3mm的薄 片，用6-8倍量的70% 95%乙醇經熱回流循環提取6-10個小時，放置過濾，收集濾液減壓 濃縮，並經大孔吸附樹脂柱吸附，然後用70-80%乙醇洗脫，洗脫液脫色後減壓濃縮，乾燥。所述的方法中大孔吸附樹脂採用DlOl大孔樹脂；脫色採用D941樹脂和藥用炭兩 步脫色；濃縮採用單效濃縮器。本發明更具體的方法可描述為
(1)取新鮮三七主根或蘆頭破碎成粗粉6-10mm的顆粒或切成厚度在l_3mm的薄片， 用6-8倍量70% 95%乙醇熱回流循環提取6-10小時，回收乙醇至無醇味，加水稀釋成 0. 20-0. 30g生藥/ml，混勻，沉澱12-18小時，離心去除雜質，過濾；
(2)所述(1)步驟所得濾液以流速為1.0-1. 4BV/H的流速經DlOl大孔樹脂吸附，然後 用樹脂體積1-4倍量的純化水過柱除去雜質，流速2-4BV/h，棄去水液，用70-80%的乙醇溶 液3-5倍量以流速2-4BV/h的速度洗脫收集液脫液，至TLC檢測無皂苷流出為止；
(3)再將(2)步驟所得洗脫液以流速為6升至9升/min的流速過D941樹脂脫色，洗脫 液上完後，加入樹脂1-3倍量70-80%的乙醇以相同流速衝洗樹脂柱，至TLC檢測無皂苷流 出為止，合併初流液和洗脫液；
(4)在(3)步驟後加入生藥重量4-6%的藥用炭於45 55°C保溫脫色30 40分鐘，在 此溫度下過濾除炭，減壓濃縮回收乙醇，濃縮至相對密度為1.05-1. 20，離心，去除不溶物， 最後減壓乾燥。本發明還提供了由本發明的三七提取物製成的藥用製劑，所述藥用製劑為注射 液、凍乾粉針劑、輸液劑、膠囊劑、顆粒劑或片劑。目前，三七總皂苷的常規提取方法為幹品藥材冷浸和乙醇回流提取、水提取，再經 吸附樹脂富集總皂苷成分，且吸附樹脂富集的成分多為含量較高的三七皂苷R1，人參皂苷 Rgl，人參皂苷Re，人參皂苷Rbl和人參皂苷Rd;本發明方法應用了鮮三七原料，同時對提取 溶劑進行優化，使得提取的三七總皂苷成分純度高，提取得率更高。因此鮮品提取法是本方 法的優勢所在。本發明三七提取物可根據本領域熟知的製備方法，由三七提取物、或三七提取物
5和藥用輔料製成不同藥用製劑，比如注射液、凍乾粉針劑、輸液劑、膠囊劑、顆粒劑或片劑。所述藥用輔料為氯化鈉、葡萄糖、澱粉、糊精、蔗糖、滑石粉、硬脂酸鎂。本發明採用高效液相色譜儀，以乙腈和水作為流動相進行梯度洗脫的方法對三七 提取物及製劑中的成分進行鑑別檢測，5分鐘後的色譜峰，以三七總皂苷對照提取物的主要 色譜峰校正，三七提取物及其製劑的相似度在0. 95以上。具體說來，本發明採用高效液相色譜儀，以乙腈和水溶液作為流動相進行梯度洗 脫的方法對三七提取及其製劑中皂苷成分進行HPLC鑑別檢測，各成分的出峰順序依次為 三七皂苷Rl，人參皂苷Rgl，人參皂苷Re，人參皂苷Rbl和人參皂苷Rd。綜上，與現有技術相比，本發明的鮮三七提取物及其製劑及其提取方法具有以下 優點
1、鮮三七提取物純度高、顏色淺、雜質少。2、經本發明方法製備的鮮三七提取物比傳統方法得率高1-2%。3、經過本發明方法製備而得的鮮三七提取物得率、含量及製劑的含量明顯高於常 規方法製備的樣品，總皂苷含量可提升10 25%。4、經過本發明方法製備而得的鮮三七提取物含量提升的同時，雜質成分相應減 少。以電感耦合等離子體質譜儀對三七提取物中無機元素進行測定，結果，重金屬及有害 元素含量小於0. 0007%。；以氣相色譜儀對三七提取物中的大孔吸附樹脂有機殘留物進行檢 測，結果，未檢測出正已烷、苯、甲苯、對二甲苯，鄰二甲苯、苯乙烯、1，2-二乙基苯和二乙烯苯。5、通過降壓物質檢查、過敏檢查、異常毒性檢查、熱原檢查、溶血與凝聚檢查、刺激 試驗等結果，表明由本三七提取物製備的製劑安全性更高。
具體實施例方式
下面用本發明的試驗例來說明本發明的優異效果 試驗例1
本發明用鮮三七為原料提取三七提取物的最佳工藝選擇試驗 1、乙醇濃度選擇用破碎機把鮮三七根莖破碎成6-10mm的鮮顆粒，選擇三因素四水平 實驗來考察熱回流提取時間(h)，乙醇的用量(倍)，乙醇的濃度(％)作為考察因素，以幹浸膏 提取率和五個單體皂苷含量(Rl、Rgl、 Rbl、 Re、Rd) %為考察指標，選用(34)正交表進行試 驗。因素水平安排見下表。
權利要求
1.鮮三七提取物，其特徵在於其含有三七皂苷禮4 10%、人參皂苷Rgl23 36%、人參 皂苷Re2 5%、人參皂苷Rbp 39%、人參皂苷Rd 3 10%，其中三七皂苷R1、人參皂苷 Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd佔總量的65 95%。
2.根據權利要求1所述的三七提取物，其特徵在於其含有三七皂苷R14 7%、人參皂 苷23 30%、人參皂苷Re 2 3. 5%、人參皂苷Rb1 27 ；35%、人參皂苷Rd 4 7%，其 中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd佔總量的65 85%。
3.根據權利要求1所述的三七提取物，其特徵在於其含有三七皂苷R17 8%、人參皂 苷收27 ；34%、人參皂苷Re 3 A^KASS-Rb1 33 36%、人參皂苷Rd 6 8%，其中 三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd佔總量的80 90%。
4.鮮三七提取物，其特徵在於其含有三七皂苷禮4 10%、人參皂苷Rgl23 36%、人參 皂苷Re2 5%、人參皂苷Rbp 39%、人參皂苷Rd 3 10%，其中三七皂苷R1、人參皂苷 Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd佔總量的65 95%，由下述方法提取而得採用鮮三七為原料，先將三七主根或蘆頭破碎成6-10mm的顆粒或切成厚度在l_3mm的 薄片，用6-8倍量的70% 95%乙醇經熱回流循環提取6-10個小時，放置過濾，收集濾液 減壓濃縮，並經大孔吸附樹脂柱吸附，然後用70-80%乙醇洗脫，洗脫液脫色後減壓濃縮，幹
5.製備權利要求1-4任意一項所述的鮮三七提取物的方法，其特徵在於，採用鮮三七 主根或三七剪口為原料，先將三七主根或蘆頭破碎成6-10mm的顆粒或切成厚度在l_3mm的 薄片，用6-8倍量的70% 95%乙醇經熱回流循環提取6-10個小時，放置過濾，收集濾液 減壓濃縮，並經大孔吸附樹脂柱吸附，然後用70-80%乙醇洗脫，洗脫液脫色後減壓濃縮，幹O
6.根據權利要求4所述的方法，其特徵在於，所述大孔吸附樹脂採用DlOl大孔樹脂。
7.根據權利要求4所述的方法，其特徵在於，所述脫色採用D941樹脂和藥用炭兩步脫色。
8.根據權利要求5-7任一項所述的方法，其特徵在於，所述濃縮採用單效濃縮器。
9.根據權利要求5-7任一項所述的方法，其特徵在於(1)取新鮮三七主根或蘆頭破碎成粗粉6-10mm的顆粒或切成厚度在l_3mm的薄片， 用6-8倍量70% 95%乙醇熱回流循環提取6-10小時，回收乙醇至無醇味，加水稀釋成 0. 20-0. 30g生藥/ml，混勻，沉澱12-18小時，離心去除雜質，過濾；(2)所述(1)步驟所得濾液以流速為1.0-1. 4BV/H的流速經DlOl大孔樹脂吸附，然後 用樹脂體積1-4倍量的純化水過柱除去雜質，流速2-4BV/h，棄去水液，用70-80%的乙醇溶 液3-5倍量以流速2-4BV/h的速度洗脫收集液脫液，至TLC檢測無皂苷流出為止；(3)再將(2)步驟所得洗脫液以流速為6升至9升/min的流速過D941樹脂脫色，洗脫 液上完後，加入樹脂1-3倍量70-80%的乙醇以相同流速衝洗樹脂柱，至TLC檢測無皂苷流 出為止，合併初流液和洗脫液；(4)在(3)步驟後加入生藥重量4-6%的藥用炭於45 55°C保溫脫色30 40分鐘，在 此溫度下過濾除炭，減壓濃縮回收乙醇，濃縮至相對密度為1.05-1. 20，離心，去除不溶物， 最後減壓乾燥。
10.由權利要求1或2或3或4所述的三七提取物製成的藥用製劑，所述藥用製劑為注射液、凍乾粉針劑、輸液劑、膠囊劑、顆粒劑或片劑。
全文摘要
用鮮三七為原料提取的三七提取物，該三七提取物的製備方法，以本發明三七提取物為活性成分製備的藥用製劑。本發明的三七提取物含有三七皂苷R14～10%、人參皂苷Rg123～36%、人參皂苷Re2～5%、人參皂苷Rb127～39%、人參皂苷Rd3～10%，其中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd佔總量的65～95%。本發明的方法製備的三七提取物雜質少，總皂苷成分純度高，以三七提取物為活性成分製備的藥用製劑療效好，安全性高。
文檔編號A61K36/258GK102145034SQ201110093879
公開日2011年8月10日 申請日期2011年4月14日 優先權日2011年4月14日
發明者崔秀明, 趙愛, 高明菊 申請人:雲南文山七丹藥業股份有限公司, 文山三七研究院