從小球藻中提取葉綠素銅鈉鹽的方法
2023-05-16 04:58:26 2
專利名稱：從小球藻中提取葉綠素銅鈉鹽的方法
技術領域：
本發明屬於生物技術領域，涉及一種從小球藻中提取葉綠素銅鈉鹽的方法。
背景技術：
葉綠素是脂溶性色素，存在於一切綠色植物中，目前廣泛應用於醫藥、食品、日用化工等領域，其降解產物和衍生物在醫藥上具有廣闊的應用前景，其中葉綠素銅鈉鹽最為重要，可治療傳染性肝炎、胃和十二指腸潰瘍、慢性腎炎、胰腺炎、白血病等疾病。一般綠色植物中葉綠素含量較低，含量為0.2%，綠藻中的小球藻葉綠素含量是自然界中最高的生物，含量為4% 6%。但小球藻為單細胞微藻，有堅固的纖維素胞壁，常規的有機溶劑提取法並不能有效地將葉綠素提取出來。葉綠素銅鈉鹽的分子式為:C34H29CuN4Na306，結構如下所示:
權利要求
1.一種從小球藻中提取葉綠素銅鈉鹽的方法，其特徵在於，有以下步驟: 1)取小球藻菌種，接種於SE固體培養基上活化，用SE液體培養基擴大培養，濃度為IO7個/mL，得到小球藻液體； 2)取步驟I)所述的小球藻液200mL，離心，用50-65%乙醇作浸提劑，得到小球藻固體，小球藻固體與乙醇的固液比g/mL為1:10，超聲波萃取破細胞壁，65°C下，用5%的NaOH溶液調至小球藻破碎液PH為11 12，用5%Na0H皂化30_50min，溶液蒸發濃縮； 3)將步驟2)所得到的濃縮液用IOmL蒸餾水、IOmL石油醚、10mL50%的乙醇溶液連續洗滌； 4)用鹽酸(1:1)調節步驟3)所得溶液的PH為2 3，然後加入2mL質量分數為20%的CuSO4溶液銅化葉綠素，60°C銅化40min.，用少量蒸餾水溶解後，加入5mL質量分數為2%的NaOH-乙醇溶液；再 用Imol/mL的NaOH溶液溶液調節混合液的pH為11 12 ;抽濾，乾燥，得到葉綠素銅鈉鹽。
2.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:步驟2)所述乙醇濃度為60%。
3.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:步驟2)所述超聲波時間為17min，強度為600wo
4.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:步驟2)所述皂化時間為42min。
5.根據權利要求1所述的方法，其特徵在於:步驟2)所述離心的時間為5min，離心的速度為 3000r/min。
全文摘要
本發明涉及一種從小球藻中提取葉綠素銅鈉鹽的方法，該方法採用將小球藻菌種經活化、擴大培養，得到的小球藻液體經浸提，得到的小球藻固體，經超聲波萃取破細胞壁，皂化後，用蒸餾水、石油醚、乙醇溶液連續洗滌，以除去未被皂化的葉綠素和葉黃素等其他色素雜質，濃縮，加入CuSO4溶液銅化葉綠素，用少量水溶解後，加入NaOH-乙醇溶液,沉澱生成，控制溶液pH11～12；經抽濾，乾燥，得到葉綠素銅鈉鹽。該方法為藻類植物的葉綠素測量、微藻中油脂的提取提供實驗依據，為葉綠素鹽的工業化生產提供試驗數據。
文檔編號C07D487/22GK103145718SQ201310094739
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月22日 優先權日2013年3月22日
發明者王萬能 申請人:重慶理工大學