金絲桃素的一種提取方法
2023-05-17 09:21:21 4
專利名稱：金絲桃素的一種提取方法
技術領域：
本發明涉及化合物的提取方法，特別是涉及金絲桃素的提取方法。
背景技術：
金絲桃素(hypericin 4，4，5，5，7，7-六羥基-2，2-二甲基-中位-萘並二蒽酮)，是貫葉連翹(Hypericum Perforatum L.)中最具生物活性的物質，具有抗病毒、抗抑鬱和光動活性。
由於貫葉連翹全草中金絲桃素的含量只有萬分之幾，因此只有通過化學手段進行提取精製。目前國內外常用的提取方法如下1、甲醇或乙醇提取法將貫葉連翹全草乾燥、粉碎後，用乙醇或甲醇作溶劑，80℃回流提取1-2h，重複提取多次，合併提取液並濃縮，得到金絲桃素浸膏。用這種方法得到的產品存在易吸溼、發粘的缺點。
2、鹼液提取法稱取一定量經乾燥、粉碎的貫葉連翹全草，用30倍量的1％氫氧化鈉溶液煮沸2h，提取3次，過濾，合併濾液，加入0.1mol/L鹽酸溶液至pH值為3，減壓濃縮，真空乾燥，得到金絲桃素浸膏。這種方法存在所使用得溶劑毒性較大，提取周期長並且得到的產品含量較低的缺點。
3、談增毅，高蓉(貫葉連翹浸膏的工藝研究J.基層中藥雜誌.2002，16(3)26)的方法為取幹藥材1000g，用剪刀剪成2cm長短，用70-80℃氫氧化鈉溶液(0.2mol/L)迅速拌潤，裝入塑膠袋中，立即用棉絮包裹，保溫發酵5d，待整個草藥變為黑色腐爛狀時，加入甲醇—丙酮(混合比例為7∶3)6000mL，50℃溫浸12h，過濾，如此溫浸3次，合併濾液，60℃減壓濃縮，回收溶劑，再60℃真空乾燥，得到金絲桃素幹浸膏粉86.4g。這種提取方法中所用溶劑的毒性較大，提取周期長，並且提取物中金絲桃素的含量較低。
發明內容
本發明的目的是提供一種簡單易行且經濟適用的金絲桃素的提取方法。
本發明所提供的金絲桃素的提取方法，包括以下步驟1、將貫葉連翹乾燥、粉碎；2、將貫葉連翹粗粉與有機溶媒按體積比為1-2∶3混合，在40-70℃下提取2-4小時，收集提取液，過濾，收集過濾液；所述有機溶媒可為80-100％(V/V)乙醇；
3、對過濾液減壓濃縮，回收濃縮液；4、將濃縮液用樹脂進行吸附，洗脫，收集洗脫液；5、對洗脫液減壓濃縮，得到金絲桃素浸膏。
在上述提取方法中，為獲得更純的金絲桃素，可將步驟1中經乾燥、粉碎的貫葉連翹先用乙醚進行除雜，再進行步驟2-步驟5。
所述步驟2中的有機溶媒優選為98％乙醇；貫葉連翹粗粉與有機溶媒混合的體積比優選為2∶3；過濾所需的濾膜孔徑為0.45um。
為獲得更好的提取效果，可將步驟2重複15-20次，合併過濾液。
步驟3和步驟5中的減壓濃縮優選為在50-60℃下進行。
步驟4中所用的樹脂為LSA-5B專用吸附樹脂或大孔吸附樹脂；可用的洗脫液為80-100％(V/V)乙醇。
本發明提供了一種有效的金絲桃素的提取方法。該提取方法具有以下優點1、操作簡單，易於進行工業化應用；2、提取成本低廉；3、所用提取溶劑的毒性較小，提取周期短；4、提取物中金絲桃素含量高，含量可達0.9-1.4％，收率約為萬分之2至5。本發明為金絲桃素的大規模生產奠定了基礎，將在金絲桃素的有效利用中發揮巨大作用。
下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細說明
圖1為本發明金絲桃素提取工藝的流程2A為金絲桃素標準反相高效液相色譜2B為提取的金絲桃素樣品的反相高效液相色譜3為提取的金絲桃素樣品的核磁共振氫譜圖具體實施方式
下述實施例中所用方法如無特別說明均為常規方法。
實施例1、金絲桃素的提取現用本發明的方法進行金絲桃素的生物提取，流程圖見圖1，包括以下步驟1、將貫葉連翹乾燥、粉碎至24目，精密稱取貫葉連翹碎粉2Kg；2、貫葉連翹粗粉裝滲漉柱，分批加入，用乙醚去除雜質，避光陰乾；3、將除雜的貫葉連翹與80％(V/V)乙醇按體積比為1∶3混合，在40℃下提取4小時，收集提取液，用孔徑為0.45um的濾膜過濾，收集過濾液，重複該步驟15次，合併過濾液；4、在60℃下對過濾液減壓濃縮至粘稠狀，回收濃縮液；
5、將濃縮液用大孔吸附樹脂進行吸附，用80％(V/V)乙醇洗脫，收集玫瑰紅色的洗脫液；6、在60℃下對洗脫液減壓濃縮至無液體流出，得到金絲桃素浸膏。
現用反相高效液相色譜法對提取的金絲桃素浸膏進行檢測，同時測定含量，反相高效液相色譜檢測結果如圖2B所示(圖2A為金絲桃素標準品的檢測結果)，核磁共振氫譜圖如圖3所示，結果表明獲得了純度較高的金絲桃素提取物，提取物中的金絲桃素含量為0.9％，收率約為萬分之2。
實施例2、金絲桃素的提取現用本發明的方法進行金絲桃素的生物提取，包括以下步驟1)將貫葉連翹乾燥、粉粹至24目，精密稱取貫葉連翹碎粉3Kg；2)將除雜的貫葉連翹與90％(V/V)乙醇按體積比為2∶3混合，在60℃下提取3小時，收集提取液，用孔徑為0.45um的濾膜過濾，收集過濾液，重複該步驟20次，合併過濾液；3)在60℃下對過濾液減壓濃縮至粘稠狀，回收濃縮液；4)將濃縮液用LSA-5B專用吸附樹脂進行吸附，用90％(V/V)乙醇洗脫，收集玫瑰紅色的洗脫液；5)在60℃下對洗脫液減壓濃縮至無液體流出，得到金絲桃素浸膏。
現用與實施例1相同的方法對提取的金絲桃素浸膏進行檢測，同時測定含量，表明獲得了純度較高的金絲桃素提取物，提取物中的金絲桃素含量為0.95％，收率約為萬分之2.2。
實施例3、金絲桃素的提取現用本發明的方法進行金絲桃素的生物提取，包括以下步驟1)將貫葉連翹乾燥、粉粹至24目，精密稱取貫葉連翹碎粉2Kg；2)貫葉連翹碎粉裝滲漉柱，分批加入，用乙醚去除雜質，避光陰乾；3)將除雜的貫葉連翹與98％(V/V)乙醇按體積比為2∶3混合，在70℃下提取2小時，收集提取液，用孔徑為0.45um的濾膜過濾，收集過濾液，重複該步驟20次，合併過濾液；4)在50℃下對過濾液減壓濃縮至粘稠狀，回收濃縮液；5)將濃縮液用LSA-5B專用吸附樹脂進行吸附，用98％(V/V)乙醇洗脫，收集玫瑰紅色的洗脫液；
6)在50℃下對洗脫液減壓濃縮至無液體流出，得到金絲桃素浸膏。
現用與實施例1相同的方法對提取的金絲桃素浸膏進行檢測，同時測定含量，表明獲得了純度較高的金絲桃素提取物，提取物中的金絲桃素含量為1.0％，收率約為萬分之2.5。
上述實施例中的檢測結果表明本發明的方法可用於金絲桃素的工業化提取中。
權利要求
1.一種金絲桃素的提取方法，包括以下步驟1)將貫葉連翹乾燥、粉碎；2)將貫葉連翹粉末與有機溶媒按體積比為1-2∶3混合，在40-70℃下提取2-4小時，收集提取液，過濾，收集過濾液；所述有機溶媒為80-100％乙醇；3)對過濾液減壓濃縮，回收濃縮液；4)將濃縮液用樹脂進行吸附，洗脫，收集洗脫液；5)對洗脫液減壓濃縮，得到金絲桃素浸膏。
2.根據權利要求1所述的提取方法，其特徵在於所述提取方法還包括將步驟1)中經乾燥、粉碎貫葉連翹用乙醚進行除雜的步驟，再進行步驟2)-步驟5)。
3.根據權利要求1或2所述的提取方法，其特徵在於所述步驟2)中的有機溶媒為98％乙醇；貫葉連翹粉末與有機溶媒混合的體積比為2∶3；過濾所需的濾膜孔徑為0.45um。
4.根據權利要求1或2所述的提取方法，其特徵在於將步驟2)重複15-20次，合併過濾液。
5.根據權利要求1或2所述的提取方法，其特徵在於所述步驟3)和步驟5)中的減壓濃縮是在50-60℃下進行的。
6.根據權利要求1或2所述的提取方法，其特徵在於所述步驟4)中樹脂的類型為LSA-5B專用吸附樹脂或大孔吸附樹脂；洗脫液為80-100％乙醇。
全文摘要
本發明公開了一種金絲桃素的提取方法。該方法包括以下步驟1.將貫葉連翹乾燥、粉碎；2.貫葉連翹粉末與有機溶媒按體積比為1－2∶3混合，在40－70℃下提取2－4小時，收集提取液，過濾，收集過濾液；3.對過濾液減壓濃縮，回收濃縮液；4.將濃縮液用樹脂進行吸附，洗脫，收集洗脫液；5.對洗脫液減壓濃縮，得到金絲桃素浸膏。該提取方法具有以下優點1.操作簡單，易於進行工業化應用；2.提取成本低廉；3.所用提取溶劑的毒性較小，提取周期短；4.提取物中金絲桃素含量高。基於上述優點，本發明將在金絲桃素的生物提取中發揮巨大作用。
文檔編號C07C46/00GK1850766SQ200610078988
公開日2006年10月25日 申請日期2006年4月29日 優先權日2006年4月29日
發明者梁劍平, 崔穎, 王學紅, 華蘭英, 尚若鋒, 羅永江, 牛建榮, 呂嘉文, 白衛兵, 趙曉紅, 王選慧, 祝豔, 王曙陽, 謝等龍 申請人:中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所