一種應用於海參、鮑魚養殖的巨大芽孢桿菌組合物的製作方法

2023-05-02 10:24:36 1

一種應用於海參、鮑魚養殖的巨大芽孢桿菌組合物的製作方法
【專利摘要】本發明涉及一種應用於海參、鮑魚養殖的製劑，具體是由巨大芽孢桿菌製成的製劑在促進海參、鮑魚的生長，提高海參、鮑魚免疫力，防治海參、鮑魚疾病，提高飼料轉化率中的應用。
【專利說明】一種應用於海參、鮑魚養殖的巨大芽孢桿菌組合物
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種應用於海參、鮑魚養殖的製劑，具體是由巨大芽孢桿菌製成的製劑在促進海參、鮑魚的生長，提高海參、鮑魚免疫力，提高飼料轉化率中的應用。
【背景技術】
[0002]2006年底在全國爆發的大菱鮃藥殘事件給我們敲響了警鐘。歐盟已於2006年全面禁止抗菌藥作為飼料添加劑在養殖中的應用。為保證食品安全，美國等發達國家對肉類、海產品等抗菌藥殘留進行檢測。隨著中國加入世貿組織，名優產品出口被普遍看好。但由於國內養殖不科學使用抗生素等有害藥物的現象嚴重，大大限制了產品的出口。開發抗菌藥替代產品應用於養殖業是目前市場所需要的。

【發明內容】

[0003]本發明的目的是提供一種促進海參、鮑魚的生長，提高海參、鮑魚免疫力，提高飼料轉化率的製劑，該製劑由巨大芽孢桿菌製成。
[0004]本發明製劑的製備優選是通過下述步驟實施的，但不局限於此製備工藝，公知的能實現的製備工藝均可以:採取含巨大芽孢桿菌的樣品，然後將樣品置於滅菌瓶內，4°C保存，研究時從中取一定量樣品加入ISmL滅菌的稀釋液中，充分混勻，在無菌操作臺內，進行ιο'ιο'ιο'ιοΛ 10_5，10_6，10_7梯度稀釋，取10_5，10_6，10_7三個稀釋梯度，分別塗布於巨大芽孢桿菌選擇性單菌落分離固體培養基上，置於培養箱內，30°C下培養48小時,選擇長勢良好的單菌落分別接種於巨大芽孢桿菌液體擴增培養基中，置於培養箱內，30°C下擴增培養48小時。將所得培養液離心(12000rpm)分離出菌體後，將菌體冷凍真空乾燥，調製出各菌種的乾燥菌粉，然後根據《伯傑細菌鑑定手冊》、相關細菌鑑定文獻或16S rRNA序列對比分析進行巨大芽孢桿菌菌種鑑定和毒性試驗，將無毒性的巨大芽孢桿菌乾燥菌粉按需要比例添加粘合劑、沸石粉等輔料製成顆粒劑、片劑、膠囊、散劑、粉劑或液體製劑等各種劑型，或製成獸藥、飼料添加劑或水質淨化劑，也可加入其他活菌或低聚果糖等低聚糖起到協同作用。
[0005]巨大芽孢桿菌選擇性單菌落分離固體培養基優選但不局限於:純化水1L，蛋白腖10.0g,葡萄糖20.0g,酵母粉10.0g,瓊脂25.0g,調pH7.4，115°C，滅菌15分鐘
[0006]巨大芽孢桿菌液體擴增培養基優選但不局限於:純化水1L，蛋白腖5.0g，酵母粉1.0g,檸檬酸鐵0.1g,氯化鈉19.45g，氯化鎂5.98g，硫酸鈉3.24g，氯化鈣1.8g，氯化鉀
0.55g，碳酸鈉0.16g，溴化鉀0.08g,氯化鍶0.034g,硼酸0.022g,矽酸鈉0.004g,氟化鈉
0.0024g,硝酸鈉 0.0016g,磷酸氫二 0.008g,調 ρΗ7.4，121。。，滅菌 15 分鐘。
[0007]為進一步具體說明本發明，發明人利用上述方法通過巨大芽孢桿菌選擇性單菌落分離固體培養基分離鑑 定出了無毒性的巨大芽孢桿菌，本發明所述巨大芽孢桿菌並不局限於為說明本發明所述的巨大芽孢桿菌，只要無毒性的巨大芽孢桿菌均是本發明所述，均在本發明的保護範圍內。[0008]本發明所述巨大芽孢桿菌優選但不限於巨大芽孢桿菌DHH16保藏編號
CGMCC8550,巨大芽孢桿菌DHH52保藏編號CGMCC8564。
[0009]本發明實施說明中優選使用的巨大芽孢桿菌的細菌學性質，本發明並不局限本發
明所述細菌學性質，只是為說明本發明的優選:
[0010]1、為說明本發明，本發明利用上述方法分離的巨大芽孢桿菌分別為巨大芽孢桿菌
DHHl6保藏編號CGMCC8550，巨大芽孢桿菌DHH52保藏編號CGMCC8564。
[0011]2、菌體和菌落形態
[0012]菌體形態:革蘭氏染色為陽性。菌體細胞呈杆狀，末端圓。單個或呈短鏈排列。
1.2~1.5X2.0~4.0微米。芽孢1.0~1.2X1.5~2.0微米，橢圓形，中生或次端生。
[0013]菌落形態:在營養瓊脂平板上，菌落為淡黃色，邊緣整齊，表面光滑，凸狀隆起。
[0014]3、生理生化鑑定，見表1。
[0015]表1，巨大芽孢桿菌生理生化特徵
【權利要求】
1.一種應用於海參、鮑魚養殖的製劑，其特徵在於該製劑由巨大芽孢桿菌製成。
2.按權利要求1所述應用，其特徵在於促進海參、鮑魚的生長，提高海參、鮑魚免疫力或提高飼料轉化率。
3.按權利要求1所述製劑，其特徵在於包括獸藥或飼料添加劑。
4.按權利要求1所述巨大芽孢桿菌，其特徵在於巨大芽孢桿菌指活的生物個體。
5.按權利要求1所述巨大芽孢桿菌，其特徵在於包括巨大芽孢桿菌DHH16保藏編號C6MCC8550。
6.按權利要求1所述巨大芽孢桿菌，其特徵在於包括巨大芽孢桿菌DHH52保藏編號CGMCC8564。
7.按權利要求1所述微生態製劑，其特徵在於固體製劑包含的總活菌數不低於.1 X 106CFU/g，一般在 1 X 109CFU/g 以上，最高可達到 1 X 10nCFU/g 或 1 X 10nCFU/g 以上；或液體製劑包含的總活菌數不能低於I X 106CFU/mL，一般在lX109CFU/mL以上，最高可達到.1 X 10nCFU/mL 或 1 X 10nCFU/mL 以上。
【文檔編號】A61P3/00GK103845366SQ201410014888
【公開日】2014年6月11日 申請日期:2014年1月3日 優先權日:2014年1月3日
【發明者】崔雲龍 申請人:青島東海藥業有限公司