牛乳免疫球蛋白g定量技術及相關特異性抗體檢測技術的製作方法

2023-05-23 05:33:31 2

專利名稱：牛乳免疫球蛋白g定量技術及相關特異性抗體檢測技術的製作方法
技術領域：
本發明屬於檢測技術領域，具體是一種牛乳及保健品中免疫球蛋白G定量技術及相關特異性抗體檢測技術。
牛奶中由於存在若干物質如脂肪、雜蛋白質，掩蓋了免疫球蛋白G及相關的特異性抗體反應，所以不能採用一般的人體酶標試劑盒來檢測特異性抗體；同時由於牛奶中免疫球蛋白G及其相關抗體的分子量較小，目前國內還沒有一種有效簡捷的方法來定量牛奶以及保健食品中的免疫球蛋白G；紐西蘭及澳大利亞的檢測技術複雜，一般條件難以操作，不夠實用。
本發明的目的是針對現有技術的不足，提供一種簡捷易於操作而效果好的免疫球蛋白G定量技術及相關特異性抗體的檢測技術。
本發明的技術方案是這樣的本發明採用特殊方法對牛乳及保健品作暴露隱蔽性免疫活性預處理，即將原來被遮掩的免疫球蛋白G及相關特異性抗體暴露出來，從而可直接使用人體酶標試劑盒進行檢測特異性抗體；利用免疫增效技術，採用最適抗原抗體配比及相應儀器動態定量免疫球蛋白G。
本發明暴露隱蔽性免疫活性預處理是這樣實現的將牛乳及乳製品進行脫脂，去除雜蛋白質，雜蛋白質主要是指酪蛋白。其中脫脂可採用離心脫脂，去蛋白質採用一定PH條件下乙酸與乙酸鹽緩衝沉澱去除。
本發明免疫增效技術是指添加免疫增效劑，免疫增效劑採用聚乙二醇、氯化鈉、蒸餾水製成，它可使抗原抗體複合物顆粒增大，可辨性增強。
本發明免疫增效技術也可用血細胞懸浮吸附技術。
本發明的最適抗原抗體配比可根據微量濁度法來測定。
本發明在定量時，採用酶標儀代替直接目測，提高解析度。
本發明由於採用了暴露隱蔽性免疫活性相應處理技術，可直接使用人體酶標試劑盒檢測特異性抗體；同時利用免疫增效技術，免疫球蛋白G分子聚集，使生成的相應抗原抗體複合物顆粒增大，可辨性增強，並可被定量檢出。
本發明實施例一、牛乳中免疫球蛋白G相關特異性抗體檢測技術1、對牛乳作暴露隱蔽性免疫活性預處理技術，將牛乳用離心法脫脂(4000轉/分，10分鐘)，或用乙醚抽取，取中下部濁液去除雜蛋白質，將PH控制在4.6，用0.05mol乙酸與乙酸鹽緩衝沉澱，取中、下層清液；為保持樣品穩定，可採用1％雞蛋清液覆蓋「封閉」抗原/抗體。
2、採用人體酶標試劑檢測免疫球蛋白G相關特異性抗體。
二、牛乳中免疫球蛋白G定量技術1、在牛乳中添加免疫增效劑，免疫增效劑採用聚乙二醇5.6克，氯化鈉0.9克、蒸餾水100mol製成，或採用3％兔純紅細胞吸附技術達到免疫增效效果。
2、用微量濁度法(MFT)測定抗原抗體最適配比。
3、採用酶標儀定量測出牛乳球蛋白含量，酶標儀波長選擇在490mm。
權利要求
1.一種牛乳免疫球蛋白G相關特異性抗體檢測技術，其特徵在於對牛乳及保健品作暴露隱蔽性免疫活性預處理，直接採用人體酶標試劑盒進行檢測特異性抗體。
2.據權利要求1所述的牛乳免疫球蛋白G相關特異性抗體檢測技術，其特徵在於暴露隱蔽性免疫活性預處理是將牛乳及乳製品進行離心脫脂，用乙酸與乙酸鹽緩衝液沉澱去除。
3.一種牛乳免疫球蛋白G定量技術，其特徵在於利用免疫增效技術，採用最適抗原抗體配比及相應儀器動態定量。
4.據權利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技術，其特徵在於免疫增效技術是指在牛乳中添加免疫增效劑，免疫增效劑採用聚乙二醇、氯化鈉、蒸餾水製成。
5.據權利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技術，其特徵在於免疫增效技術採用血細胞懸液吸附技術。
6.據權利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技術，其特徵在於最適抗原抗體可根據微量濁度法來測定。
7.據權利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技術，其特徵在於採用酶標儀定量。
8.據權利要求6所述的牛乳免疫球蛋白G定量技術，其特徵在於酶標儀的波長在490mm。
全文摘要
本發明涉及一種免疫球蛋白G定量技術及相關特異性抗體檢測技術,採用特殊方法對牛乳及保健品作暴露隱蔽性免疫活性預處理技術,利用人體酶標試劑盒進行檢測特異性抗體;採用免疫增效技術,採用最適抗原/抗體配比及相應儀器定量出免疫球蛋白G,本發明使用方便,經濟實用。
文檔編號G01N33/53GK1296184SQ9912148
公開日2001年5月23日 申請日期1999年11月16日 優先權日1999年11月16日
發明者徐明灶, 程越夫 申請人:徐明灶, 程越夫, 金華迪耳保健飲品有限公司