犬冷凍精液稀釋液配方的製作方法
2023-05-19 19:47:41
犬冷凍精液稀釋液配方的製作方法
【專利摘要】本發明公開了一種犬冷凍精液稀釋液配方，其特徵在於，其主要由脫脂乳－葡萄糖型稀釋液組成，脫脂乳－葡萄糖型稀釋液的配方如下：脫脂乳30mg/ml；葡萄糖36mg/ml；果糖18mg/ml；維生素E2.5mg/ml；青黴素500IU/ml；鏈黴素500IU/ml。本發明用脫脂乳代替常用的卵黃，使用方便，可以保存犬精液。
【專利說明】犬冷凍精液稀釋液配方
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種稀釋液配方，特別是涉及一種犬冷凍精液稀釋液配方。
【背景技術】
[0002] 由於禽流感的暴發，有些國家已經限制含卵黃的犬冷凍精液入境。另外犬卵黃也 沒有標準的實驗用試劑，質量不穩定，不能高溫滅菌，且難以通過細菌濾器。因此，無法達到 真正的無菌，使用很不方便。而脫脂乳有標準的實驗級商品，質量穩定，能克服卵黃的缺點， 是很好的卵黃替代品。開發有效的脫脂乳一葡萄糖型稀釋液將有助於犬冷凍精液的生產、 流通，推動犬人工授精技術的推廣。
【發明內容】
[0003] 本發明所要解決的技術問題是提供一種犬冷凍精液稀釋液配方，其用脫脂乳代替 常用的卵黃，使用方便，可以保存犬精液。
[0004] 本發明是通過下述技術方案來解決上述技術問題的：一種犬冷凍精液稀釋液配 方，其特徵在於，其主要由脫脂乳一葡萄糖型稀釋液組成，脫脂乳一葡萄糖型稀釋液的配方 如下： 脫脂乳 30 mg/ml 葡萄糖 36 mg/ml 果糖： 18 mg/ml 維生素 E 2. 5 mg/ml 青黴素 500IU/ml 鏈黴素 500IU/ml。
[0005] 優選地，所述脫脂乳一葡萄糖型稀釋液與甘油混合均勻。
[0006] 優選地，所述脫脂乳一葡萄糖型稀釋液的體積百分比如下：脫脂乳一葡萄糖型稀 釋液86%，甘油14%。
[0007] 本發明的積極進步效果在於： 本發明犬冷凍精液稀釋液配方用脫脂乳代替常用的卵黃，使用方便，可以保存犬精液。 脫脂乳有專門的分析級商品，容易得到，質量比較穩定，很適合於與其它成分混合製作成專 用的冷凍精液稀釋液原粉使用或作為商品出售。
【具體實施方式】
[0008] 本發明犬冷凍精液稀釋液配方主要由脫脂乳一葡萄糖型稀釋液(A液）組成，A液 的配方如下： 脫脂乳 30 mg/ml 葡萄糖 36 mg/ml 果糖： 18 mg/ml 維生素 E 2. 5 mg/ml 青黴素 500IU/ml 鏈黴素 500IU/ml 將上述物質溶於雙蒸水中或純水中，混合均勻，以3000轉/分鐘的速度，離心15 min， 取上清液過濾作為基礎稀釋液，即A液。
[0009] B液的配方如下： A 液：86 % 甘油：14% 使用前將A液與甘油按上述體積百分比混合均勻，即為B液。
[0010] 精液的稀釋和冷凍：將採集到的犬精液先用等溫的A液稀釋，將精液稀釋到2 X 1〇8個精子/ml，置於4° C冰箱，緩慢降溫2.5小時，使精液的溫度達到4° C，然後加入等 溫的的B液，使用量與A液用量相同，混勻，4° C條件下平衡30分鐘，裝入0.25ml的細管， 封口，再置於4° C冰箱，放置15分鐘。將細管置於冷凍盒液氮面上方5cm處，液氮蒸氣燻 蒸15分鐘，然後投入液氮中，即可長期保存。
[0011] 實例 1 : 稀釋液的配製： 脫脂乳 3g 葡萄糖 3. 6 g 果糖 1. 8 g 維生素 E 250 mg 青黴素 5萬IU 鏈黴素 5萬IU 準確稱量以上物質，溶於l〇〇ml雙蒸餾水(或超純水）中混合均勻，以3000轉/分鐘的 速度，離心15 min，取上清液過濾作為基礎稀釋液，即A液。取86ml A液和14ml甘油混合 均勻作為B液。精液稀釋液配好備用。
[0012] 採精與精液冷凍：畢格公犬，年齡4歲，體重15kg，作為供精犬。採用按摩法收集 犬的精液，採精量為4ml，顯微鏡檢查正常，將精液在25° C下以1000轉/分鐘離心4分 鍾，吸棄上清，留下離心管底部精液，然後緩慢加入3ml等溫的A液，與精液混合均勻，置於 4° C冰箱，緩慢降溫2. 5小時，使精液的溫度達到4° C，然後加入等溫的B液3ml，混勻， 4° C條件下平衡30分鐘，裝入0.25ml的細管，封口，再置於4° C冰箱，放置15分鐘。將 細管置於冷凍盒液氮面上方5cm處，液氮蒸氣燻蒸15分鐘，然後投入液氮中，即完成冷凍。 取出做好的細管凍精，投入37° C溫水中1分鐘，解凍後活力為0.38可用於人工授精。
[0013] 冷凍精液人工授精：選擇3隻雌性畢格，年齡2?5歲，經陰道抹片確定已處於發 情期，可以配種。取出冷凍投入35° C溫水中1分鐘，使其解凍，裝入輸精器，通過輸精器將 精液輸入到母犬子宮內，隔天再輸精一次。結果，三隻母犬全部受孕，平均產仔5隻。
[0014] 實例 2 : 稀釋液的配製：按實例1的方法配製冷凍稀釋保護液。
[0015] 採精與精液冷凍：金毛公犬，年齡5歲，體重32kg，作為供精公犬，採精和精液稀釋 冷凍按實例1的方法開展。解凍後精液活力為〇. 35,符合人工授精的要求。
【權利要求】
1. 一種犬冷凍精液稀釋液配方，其特徵在於，其主要由脫脂乳一葡萄糖型稀釋液組成， 脫脂乳一葡萄糖型稀釋液的配方如下： 脫脂乳 30 mg/ml 葡萄糖 36 mg/ml 果糖： 18 mg/ml 維生素 E 2. 5 mg/ml 青黴素 500IU/ml 鏈黴素 500IU/ml。
2. 如權利要求1所述的犬冷凍精液稀釋液配方，其特徵在於，所述脫脂乳一葡萄糖型 稀釋液與甘油混合均勻。
3. 如權利要求2所述的犬冷凍精液稀釋液配方，其特徵在於，所述脫脂乳一葡萄糖型 稀釋液的體積百分比如下：脫脂乳一葡萄糖型稀釋液86%，甘油14%。
【文檔編號】A01N1/02GK104115819SQ201310145848
【公開日】2014年10月29日 申請日期:2013年4月25日 優先權日:2013年4月25日
【發明者】張似青, 滑志民 申請人:上海農林職業技術學院