一種二萜醇酯類化合物大戟因子l2的製備方法

2023-05-20 03:51:56 2

一種二萜醇酯類化合物大戟因子l2的製備方法
【專利摘要】本發明涉及一種二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法，採用二維液相色譜技術進行從千金子中提取Euphorbia FactorL2，通過色譜柱、溶解液、流動相等的合理選擇，流速、洗脫方式、收集區段等工藝條件的優化，以及第一維和第二維的正交性而達到的互補分離，使得整個分離純化方法切實可行，可操作性高，得到的Euphorbia FactorL2純度最高在98％以上。
【專利說明】一種二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法

【技術領域】
[0001] 本發明涉及化合物生產領域，尤其是一種二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備 方法。

【背景技術】
[0002] 千金子系大戟科植物續隨子Euphorbia Iathyris的乾燥成熟種子，是我國傳統 中藥材之一。千金子性溫，味辛，有小毒，主要功效為逐水消腫、破血消癥，用於治療水 腫、痰飲、積滯脹滿、二便不通、血瘀經閉，外治頑癬、撫贅。Euphorbia FactorL2(大戟因子 L2)是二萜醇酯類化合物，分子式為C38H42O9，，分子量為642. 283,其結構如下：
[0003]

【權利要求】
1. 一種二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法，其特徵在於：具體步驟如下： (1) 取千金子為原料，進行粉碎得到千金子粉； (2) 取千金子粉進行有機試劑提取，有機試劑為乙酸乙酯，收集提取後的上清，過濾，濃 縮、乾燥； (3) 將步驟（2)得到的沉澱重複1?5次提取，收集提取後的上清，進行過濾，濃縮、幹 燥，得到QJZ初提物； (4) 取步驟（3)得到QJZ初提物用流動相進行全部溶解，所述流動相為流動相A或流動 相B或兩者的組合，經製備液相DAC正相色譜柱進行分離，採用二元流動相體系進行洗脫分 離，所述流動相A和流動相B採用正己烷、乙醇中的一種或幾種的組合，洗脫方式梯度洗，檢 測波長為210nm，收集目的峰，乾燥後得到組分化合物QJZ-5,60°C鼓風乾燥箱吹乾，進行下 一步分離純化； (5) 取步驟（4)得到QJZ-5組分用流動相進行全部溶解，所述流動相為流動相A或流動 相B或兩者的組合，經製備液相色譜柱進行分離，採用二元流動相體系進行洗脫分離，所述 流動相A和流動相B採用正己烷、乙酸乙酯、乙醇、二氯甲烷、甲醇中的一種或幾種的組合， 洗脫方式等度洗脫，檢測波長為210nm，收集目的峰，乾燥後得到單體化合物QJZ-5-1，60°C 鼓風乾燥箱吹乾，QJZ-5-1為最終活性目標單體二萜醇酯類化合物。
2. 根據權利要求1所述的二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法，其特徵在於：所 述步驟（2)中有機溶劑提取的溫度為40?60°C，提取時間為4?6h，靜置一夜。
3. 根據權利要求1所述的二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法，其特徵在於：所 述步驟（3)中所述千金子粉或沉澱與有機試劑的重量體積比按Kg :L計為1: (3?8)，將千 金子粉或沉澱與有機試劑進行混合浸提。
4. 根據權利要求1所述的二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法，其特徵在於：所 述步驟（4)的分離過程中一維液相色譜採用的色譜柱類型為正相矽膠軸向加壓色譜柱，流 速：600ml/min，檢測波長：210nm，使用時柱溫為室溫或25-40°C。
5. 根據權利要求1所述的二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法，其特徵在於：所 述步驟⑷的分離過程中取QJZ初提物用60-80 %正己烷-乙醇溶解至濃度為lml/ml，混 合均勻後，用〇. 45 y m有機膜抽濾後經製備液相DAC正相色譜柱進行分離。
6. 根據權利要求1所述的二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法，其特徵在於：所 述步驟⑷的分離過程中洗脫方式具體為100%正己烷等度洗脫5min，100%正己燒一70% 乙醇梯度洗脫35-50min，100%乙醇lOmin。
7. 根據權利要求1所述的二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法，其特徵在於：所 述步驟（5)的分離過程中二維液相色譜採用的色譜柱類型為ACCOH XAmide色譜柱，流速：2-4ml/min，檢測波長：210nm，使用時柱溫為室溫或25-40°C。
8. 根據權利要求1所述的二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法，其特徵在於：所 述步驟（5)的分離過程中取QJZ-5組分用50%正己烷-乙醇40°C超聲至剛好溶解至濃度 為5〇-75mg/ml，用0. 45 y m有機膜過濾。
9. 根據權利要求1所述的二萜醇酯類化合物大戟因子L2的製備方法，其特徵在 於：所述步驟（5)的分離過程中洗脫方式具體為100%正己烷一90%乙醇梯度洗脫 30_40min，100% 乙醇 lOmin。
【文檔編號】C07C69/78GK104447339SQ201410707604
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年11月28日 優先權日:2014年11月28日
【發明者】張耀洲, 楊珊珊 申請人:天津耀宇生物技術有限公司