墊狀卷柏提取物、提取方法及用途的製作方法
2023-05-12 06:27:01
專利名稱：：墊狀卷柏提取物、提取方法及用途的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一類新的墊狀巻柏提取物，本發明還涉及其提取方法及用途。巻柏屬植物約有700種植物，廣泛分布於全世界，我國約產50餘種，各地均有分布。2005年版《中國藥典》收載了巻柏Selaginellatamariscina(Beauv.)Spring和墊狀巻柏S.pulvinata(Hook.etGrev.)Maxim兩個品種，除藥典品種外，另約有20個品種的巻柏屬植物在民間被作為藥用。巻柏屬植物的化學成分主要是雙黃酮類化合物，其次是生物鹼、苯丙素、甾類、多糖等。江南巻柏(S.moellendrfiihieron.)具有清熱解毒，抗癌，止血之功效，用於治療癌症，肺炎，急性扁桃炎，眼結膜炎和乳腺炎。現代藥理研究表明巻柏屬植物具有免疫調節及抗腫瘤、保護皮膚、抑菌抗炎、鎮靜鎮痛等作用。墊狀巻柏(Selaginell即ulvinataMaxim.)為巻柏科巻柏屬植物，墊狀巻柏具有活血通經之功效，用於經閉痛經，跌打損傷，炒碳後可化淤止血。蘭州大學Li-PingZhang等2007年報導了從中華巻柏中分離出一個新型碳骨架結構的炔酚類化合物一selaginellin，最近，林瑞超等從巻柏中分離得到了selaginellinA和selaginellinB(如下結構式)。除上述化合物以外，目前國內外尚未見此類化合物的相關文獻報導。&=CH20H，R2=H，Selaginellin&=R2=H，SelaginellinAR丄=CH3，R2=H，SelaginellinB
發明內容本發明對墊狀巻柏進行了深入的研究，提供了墊狀巻柏提取物、提取方法及其用途。本發明提供了兩種新的墊狀巻柏提取物，具有如下結構式
背景技術：
：formulaseeoriginaldocumentpage4其中，R為醛基或甲基。R為醛基是墊狀巻柏醛(pulvinatahyde)，R為甲基是墊狀巻柏二酚(pulvinat即hendiol)。本發明還提供了上述兩種提取物的提取方法，步驟包括1)取墊狀巻柏全草，用75%乙醇回流提取兩次，回收溶劑，得渾濁濃縮液，靜置72h，過濾；2)將步驟1)得到的濾液依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，萃取後殘留濾液進行聚醯胺柱層析，分別用30%、60%、95%乙醇_水梯度洗脫；3)取步驟2)60%醇洗部分進行聚醯胺柱層析，乙醇-水梯度洗脫，再經製備液相色譜洗脫，70%甲醇為流動相，分別得到上述化合物。上述的墊狀巻柏提取物，可用於抗阿爾茨海默病藥物的製備。本發明運用多種柱色譜分離技術和製備高效液相色譜分離方法，分離提取得到兩種新的化合物墊狀巻柏醛及墊狀巻柏二酚，並對其結構進行了嚴格的表徵，所得到的新化合物能顯著上調KlothomRNA表達和抑制AP卜42誘導的大鼠海馬神經元細胞衰老，可用於製備抗阿爾茨海默病的藥物。具體實施方式實施例取墊狀巻柏全草18.0kg，75X乙醇回流提取兩次，回收溶劑，得渾濁濃縮液。靜置72h，過濾，濾液依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，萃取後殘留濾液進行聚醯胺柱層析，乙醇-水梯度洗脫(30%、60%、95%)，取60%醇洗部分再進行聚醯胺柱層析，乙醇_水梯度洗脫，250ml/Fr.，Frl98_206再經Pr印-HPLC分離，70%MeOH為流動相，分別得到墊狀巻柏醛(15mg)和墊狀巻柏二酚(15mg)。墊狀巻柏醛桔紅色粉末(H20，凍幹)，可溶於MeOH，不溶於H20。矽膠TLC，以CHC13:CH30H(10:O.9)展開，Rf=O.30。紫外燈下可見明顯暗斑；NH3燻顯紫紅色，H2S04-MeOH即顯桃紅色，FeCl3試液顯紅色，理化試驗提示該化合物為酚類化合物。UVAmaxMe0Hnm:360.40，302.8，272.2;。IRvmaxrar(cm—1):3429(OH)，2924，2842(CH3)，1616，1508，1483(Ar_H)。墊狀巻柏醛波譜數據(DMSO，400MHz)tableseeoriginaldocumentpage5墊狀巻柏二酚桔紅色粉末(H20，凍幹)可溶於MeOH，不溶於H20。矽膠TLC，以CHC13:CH30H(10:0.9)展開，Rf=0.32。紫外燈下可見明顯暗斑；NH3燻顯紫紅色，H2S04-MeOH即顯桃紅色，FeCl3試液顯紅色，理化試驗提示該化合物為酚類化合物。UVAmaxMe0Hnm:435.20，254.5，245.8。IRvmaxrar(cm-1):3429(OH)，2924，2842(CH3)，1616，1508，1483(芳氫)。墊狀巻柏二酚波譜數據(DMSO，400MHz)tableseeoriginaldocumentpage6權利要求墊狀卷柏提取物，具有如下結構式其中，R為醛基或甲基。F2008101430567C0000011.tif2.權利要求1所述墊狀巻柏提取物的提取方法，步驟包括1)取墊狀巻柏全草，用75%乙醇回流提取兩次，回收溶劑，得渾濁濃縮液，靜置72h，過2)將步驟1)得到的濾液依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，萃取後殘留濾液進行聚醯胺柱層析，分別用30%、60%、95%乙醇-水梯度洗脫；3)取步驟2)60%醇洗部分進行聚醯胺柱層析，乙醇-水梯度洗脫，再經製備液相色譜洗脫，70%甲醇為流動相，分別得到上述墊狀巻柏提取物。3.根據權利要求1所述的墊狀巻柏提取物，其特徵在於，可用於抗阿爾茨海默病藥物的製備。全文摘要本發明對墊狀卷柏進行了深入的研究，運用多種柱色譜分離技術和製備高效液相色譜分離方法，分離提取得到兩種新的化合物墊狀卷柏醛及墊狀卷柏二酚，並對其結構進行了嚴格的表徵，所得到的新化合物可用於抗阿爾茨海默病藥物的製備。文檔編號C07C47/57GK101712604SQ20081014305公開日2010年5月26日申請日期2008年10月8日優先權日2008年10月8日發明者劉蘇友,周應軍,姜德建,徐康平,李元建,李福雙,譚桂山申請人:中南大學