一種組織凍存液的製作方法
2023-04-23 18:55:01
專利名稱：一種組織凍存液的製作方法
技術領域：
本發明屬於生物技術領域，涉及活體組織細胞培養技術，尤其涉及一種能夠保持
深低溫凍存生物組織細胞活性的組合物。
背景技術：
細胞凍存液(或稱為細胞冷凍保護劑)是指可以保護細胞免受冷凍損傷的物質，其將擬凍存的活性組織細胞懸浮於凍存液，供給細胞生命代謝所必須的營養物質，同時具有防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。常規凍存液配方均為細胞培養液70 80%、牛血清10 20%、二甲亞碸10%。普遍使用的細胞培養液有四種RPMI-1640、MEM、Eagfe和TC-199細胞培養液均己市場商品化。凍存液的作用在長期的細胞生物學實驗中，廣泛地使用的是此常規配方的細胞凍存液，經過大量實際生物細胞學操作實驗、相關學術刊物報導認為在排除其它影響因素的情況下，復甦率為40 70%。 在生物學技術飛速發展的當今，人們在細胞生物學及其相關學科的研究中，越來越多的運用組織細胞培養增殖技術，將有研究意義或有應用前景的活體組織細胞採用低溫度進行長期保存數年、數十年甚至數百年， 一旦需要，可隨時對所保存的組織細胞進行復甦，恢復其完整的形態結構與生物學特性，供生命科學研究實驗。復甦率的高或低，是直接影響人工培養組織細胞增殖是否成功和順利進行的一個關鍵技術。而細胞凍存液則是在細胞凍存過程中起到保護和營養細胞的關鍵溶液，所以，細胞凍存液的配方與含量，對細胞復甦率有重要和直接的影響作用。
發明內容
本發明的目的就在於克服現有技術存在的上述不足，而提供一種復甦率高的細胞凍存液。 為了實現上述目的，本發明是採用如下技術方案，本發明細胞凍存液的各成分的體積百分比為18 25的二甲基亞礬，12 18的乙酞胺，3 6的丙二醇，3 8的2，3 —丁二醇，5 7的聚乙二醇。
本發明的有益效果 本發明的細胞凍存液能有效地防止生物組織細胞在極快的降溫和復溫過程中冰晶形成對生物組織細胞造成冷凍損傷，因而顯著提高了生物組織細胞冷凍保存的存活率，細胞復甦率可達80-90%以上，較使用常規細胞凍存液的復甦率有了顯著提高，保證了細胞生長質量和生物學特性，縮短了細胞復甦的增殖周期。使復甦後的組織培養細胞能及時、保質保量的提供生物學研究實驗。在組織細胞培養增殖技術中，應用本發明的細胞凍存液明顯了提高凍存細胞復甦率、提高了工作效率。
具體實施方式
實施例1
本發明細胞凍存液的各成分的體積百分比為
14. 5，丙二醇 3. 5，2，3 —丁二醇 4. 5，聚乙二醇 5。
實施例2 本發明細胞凍存液的各成分的體積百分比為16. 5，丙二醇 5. 5，2，3 —丁二醇 6. 5，聚乙二醇 7。
實施例3 本發明細胞凍存液的各成分的體積百分比為
15. 5，丙二醇 4. 5，2，3 —丁二醇 5. 5，聚乙二醇 6。
甲基亞礬 19. 5，乙酞胺 甲基亞礬 21. 5，乙酞胺 甲基亞礬 20. 5，乙酞胺
權利要求
一種組織凍存液，其特徵在於，細胞凍存液的各成分的體積百分比為18～25的二甲基亞礬，12～18的乙酞胺，3～6的丙二醇，3～8的2，3一丁二醇，5～7的聚乙二醇。
2. 根據權利要求1所述的一種組織凍存液，其特徵在於，細胞凍存液的各成分的體積 百分比為二甲基亞礬 21. 5，乙酞胺 16. 5，丙二醇 5. 5，2，3 —丁二醇 6. 5，聚乙二 醇 7。
3. 根據權利要求1所述的一種組織凍存液，其特徵在於，細胞凍存液的各成分的體積 百分比為二甲基亞礬 20. 5，乙酞胺 15. 5，丙二醇 4. 5，2，3 —丁二醇 5. 5，聚乙二 醇 6。
全文摘要
一種組織凍存液屬於生物技術領域，涉及活體組織細胞培養技術，尤其涉及一種能夠保持深低溫凍存生物組織細胞活性的組合物。本發明提供一種復甦率高的細胞凍存液。本發明細胞凍存液的各成分的體積百分比為18～25的二甲基亞礬，12～18的乙酞胺，3～6的丙二醇，3～8的2，3一丁二醇，5～7的聚乙二醇。在組織細胞培養增殖技術中，應用本發明的細胞凍存液明顯了提高凍存細胞復甦率、提高了工作效率。
文檔編號C12N5/00GK101705204SQ20081013215
公開日2010年5月12日 申請日期2008年7月21日 優先權日2008年7月21日
發明者姜尚國 申請人:姜尚國