抗同種動物免疫球蛋白m的抗體的獲得方法及用該抗體檢測早期感染的方法
2023-05-21 07:25:51 2
專利名稱：抗同種動物免疫球蛋白m的抗體的獲得方法及用該抗體檢測早期感染的方法
技術領域：
本發明涉及到一種抗同種動物免疫球蛋白M的抗體的獲得方法、以及用獲得抗體來檢測動物早期病原感染情況的檢測方法。
背景技術：
目前，動物被病原感染後早期抗體的檢測方法是首先獲得抗體，其方法是直接利用特定病原刺激動物使它產生針對這種病原的免疫球蛋白M——簡稱IgM，再以該免疫球蛋白M作為抗原研製出抗這種免疫球蛋白M的抗體，就得到所需的抗體；在此基礎上，再通過免疫標記技術的原理建立酶聯免疫吸附試驗檢測方法——又稱ELISA檢測方法，或者通過免疫層析技術的原理建立金標免疫分析檢測方法——又稱GLISA檢測方法，就可檢測出動物被病原早期感染的情況。其原理是以被檢病原包被酶標板建立ELISA方法，以研製的抗某特定病原免疫球蛋白M的抗體為介導，檢測特定病原感染動物後產生特異性的早期免疫球蛋白M抗體。上述方法的缺點是獲得抗體時需要直接使用病原刺激動物，這極有可能造成病原的擴散，危險性很高；並且，操作中針對某特定病原的免疫球蛋白M抗體由於產生時間短、產量低而很難提純，這對研製抗抗體影響較大，不僅影響工作質量，實驗過程也比較複雜。
發明內容
針對上述問題，本發明將提供一種無需直接使用病原就可獲得用於檢測動物早期病原感染的抗體的方法——即抗同種動物免疫球蛋白M的抗體的獲得方法，在此基礎上，本發明同時提供一種用所得的抗體檢測動物早期病原感染的檢測方法。
本發明採用的具體技術方案是所述的抗同種動物免疫球蛋白M的抗體的獲得方法，主要包括如下步聚(一)利用待檢測的同一種動物的免疫球蛋白M作為抗原，去免疫選用的另一種動物使它產生針對待檢測動物免疫球蛋白M的抗體。(二)從步驟(一)所得的抗體中獲得具有型的特異性、並與待檢測動物的其它免疫球蛋白無交叉反應的抗體，就得到所需的抗體。
在此基礎上，本發明所述的利用上面所得到的抗體來檢測動物早期病原感染的檢測方法，其主要步驟是在得到所需的抗體的基礎上，再利用免疫標記技術或免疫層析技術的原理建立檢測方法，就可檢測出動物早期病原感染的情況。
上述的利用免疫標記技術的原理建立的檢測方法是以所得的抗體為介導，建立以免疫標記技術為基礎的檢測方法。例如，可以建立酶聯免疫吸附試驗檢測方法。
上述的利用免疫層析技術的原理建立的檢測方法是以所得的抗體為介導，建立以免疫層析技術為基礎的檢測方法。例如，可以建立金標免疫分析檢測方法。
本發明的主要原理及優點進一步解釋如下利用待檢測的同一種動物——如豬的免疫球蛋白M作為抗原，去免疫另一種選定的動物——如老鼠，使老鼠產生抗該種動物——如豬的免疫球蛋白M的抗體，這種抗體既可以是單抗，也可以是多抗，並且這種抗豬免疫球蛋白M的抗體必須具有隻與豬的免疫球蛋白M特異性反應、且與豬的其它球蛋白無交叉反應的特性，這樣方能滿足對該種動物——豬進行早期感染檢測的要求。這種方法的優點是由於利用的是同一種動物的免疫球蛋白M，因而這種物質獲取十分方便、簡單。
在獲得了所需的抗體的基礎上，在檢測載體——如酶標板或試紙條上包被好病原或病原某特定基因表達產物，再以所得的抗體為介導，通過免疫標記技術的原理建立ELISA檢測方法、或者利用免疫層析技術的原理建立GLISA檢測方法，就可檢測出動物早期病原感染的情況。需要說明的是，本發明所述的利用免疫標記技術原理建立的ELISA檢測方法、或者利用免疫層析技術的原理建立的GLISA檢測方法都是本領域中的技術人員常用的、成熟的檢測方法，故本發明中不再作詳細的描述。
例如通過對豬免疫球蛋白M的研究，我們製備出抗豬IgM的單抗，用豬瘟病原包被酶標板後，以獲得的單抗為介導建立ELISA檢測方法，對豬瘟疫苗免疫豬後(由於豬瘟是國家一類動物傳染病，實驗過程無法獲得病原感染早期樣品，通過疫苗免疫可以達到同樣效果)進行早期監測，結果比市售試劑盒早3～4天發現了免疫陽性動物。如果利用此法對新出現疾病進行檢測，只要發現病原就可以對早期感染動物進行檢測；比如非典，只要獲得該病的病原則可以通過此方法來檢測早期感染人群。
本發明的優點是方法建立簡單，避免了直接利用病原去免疫動物而極可能發生的病原擴散的情況，比其它的早期感染產生的抗體檢測方法更安全；並且，利用本發明所述的方法可比其它的非早期感染檢測方法提早3～4天發現感染動物，因而具有極好的社會效益。
權利要求
1.抗同種動物免疫球蛋白M的抗體的獲得方法，其特徵在於主要包括如下步聚(一)利用待檢測的同一種動物的免疫球蛋白M作為抗原，去免疫選用的另一種動物使它產生針對待檢測動物免疫球蛋白M的抗體。(二)從步驟(一)所得的抗體中獲得具有型的特異性、並與待檢測動物的其它免疫球蛋白無交叉反應的抗體，就得到所需的抗體。
2.一種利用權利要求1所得的抗體來檢測動物早期病原感染的檢測方法，其特徵在於在得到所需的抗體的基礎上，利用免疫標記技術或免疫層析技術的原理建立檢測方法，就可檢測出動物早期病原感染的情況。
3.根據權利要求2所述的檢測方法，其特徵在於所述的利用免疫標記技術的原理建立的檢測方法是以所得的抗體為介導，建立以免疫標記技術為基礎的檢測方法。
4.根據權利要求2所述的檢測方法，其特徵在於所述的利用免疫層析技術的原理建立的檢測方法是以所得的抗體為介導，建立以免疫層析技術為基礎的檢測方法。
全文摘要
本發明公開了抗同種動物免疫球蛋白M的抗體的獲得方法，主要包括如下步聚(一)利用待檢測的同一種動物的免疫球蛋白M作為抗原，去免疫選用的另一種動物使它產生針對待檢測動物免疫球蛋白M的抗體。(二)從步驟(一)所得的抗體中獲得具有型的特異性、並與待檢測動物的其它免疫球蛋白無交叉反應的抗體，就得到所需的抗體。還公開了利用上面所得到的抗體來檢測動物早期病原感染的檢測方法，其主要步驟是利用所得到的抗體為介導，再利用免疫標記技術或免疫層析技術的原理建立檢測方法，就可檢測出動物早期病原感染的情況。本發明的優點是方法建立簡單、安全，不會發生病原擴散的情況，並且可比其它檢測方法提早3～4天發現感染動物。
文檔編號G01N33/53GK1760207SQ20051004151
公開日2006年4月19日 申請日期2005年8月13日 優先權日2005年8月13日
發明者陳飛, 袁克, 秦愛建, 肖國平, 姚永華, 戴先禮, 柯家法 申請人:陳飛, 袁克