調節α-突觸核蛋白積聚的物質及其製藥用途的製作方法

2023-04-28 14:58:46 2

專利名稱：調節α-突觸核蛋白積聚的物質及其製藥用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及生物化學和分子生物學的研究領域，具體涉及調節a -突觸核蛋白積聚的物質及其製藥用途。
背景技術：
帕金森症(Parkinson』 s Disease)是一種常見的神經退行性疾病，發病原因尚未明確，臨床上病人主要表現為麻痺、震顫、運動障礙等，病理上病人腦組織中腦黑質的多巴胺能神經元大量喪失，而存活的神經元中有稱為路易氏體(Lewy body)的小體形成。5_10%帕金森症病人有家族史，可能與Ct-突觸核蛋白(a-synuclein, a-Syn)和Parkin等基因的突變有關；其它如氧化壓力，線粒體功能障礙以及環境毒素等因素都可能引起類似帕金森病的表現，稱為帕金森綜合症。Lewy體中有許多種異常積聚的蛋白質,而a-Syn是Lewy 體的主要組成成分，另外還包括synphilinl (Sphl)、parkin、SIAH I、泛素、以及蛋白酶體亞基等，說明這類疾病與蛋白質的異常積聚密切相關。a -Syn是一種突觸前神經末梢蛋白，由140個胺基酸組成。它在腦中含量豐富，分布廣泛，在人體的其他器官中也有表達。在發育過程中a-Syn由細胞體逐漸向神經末梢聚集。a-Syn蛋白在體外很容易積聚成纖維樣結構，其形態與生理病變所導致的纖維物形態相似。研究表明，a-Syn的突變體，剪切產物以及它們的過量表達，都可以導致神經退行性疾病的症狀出現(Agorogiannis, Ε. I. ；Agorogiannis, G. I. ；Papadimitriou,A. ;Hadjigeorgiou， G.M.Protein misfolding in neurodegenerative diseases，Neuropathol Appl Neurobiol，2004，30(3)，215-224 ;Bucciantini， M. ;Giannoni， E.；Chiti, F. ；Baroni, F. ;Formigli，L ；Zurdo, J. ；Taddei, N. ；Ramponi, G. ；Dobson, C. M.；Stefani，M. Inherent toxicity of aggregates implies a common mechanism forprotein misfolding diseases，Nature，2002，416 (6880)，507-511)，這表明 a-Syn 參與了 PD 病理過程(Spillantini，M. G. ；Crowther, R. Α· ;Jakes，R. ;Hasegawa，Μ. ；Goedert,Μ. alpha-Synuclein in filamentous inclusions of Lewy bodies from Parkinson’sdisease and dementia with Iewy bodies，Proc Natl Acad Sci U S A，1998，95 (11)，6469-6473 ;Spillantini，M. G. ；Schmidt, M. L. ;Lee，V. M. ；Trojanowski, J. Q. ；Jakes,R. ；Goedert, M. Alpha-synuclein in Lewy bodies，Nature，1997，388 (6645)，839-840 ;Wakabayashi, K. ;Matsumoto， K. ；Takayama, K. ;Yoshimoto， M. ;Takahashi， H.NACP， apresynaptic protein， immunoreactivity in Lewy bodies in Parkinson' s disease，Neurosci Lett，1997，239 (I)，45-48)。單體的a-Syn對多巴胺能神經細胞沒有毒性，而它的寡聚體對多巴胺能神經細胞具有毒性。蛋白質積聚後生成的寡聚體的毒性最大，成熟纖維的毒性較小，纖維的形成，是機體出於保護自身免受到傷害而從原纖維轉化而成的。篩選能夠與a-Syn相互作用並且能夠影響其積聚的物質，有利於研究a-Syn蛋白積聚過程和分子機制，並且能夠為抑制路易氏體形成和治療帕金森症的藥物研發提供基礎。因此，本領域需要對a-Syn蛋白積聚過程進行研究，找到調節其積聚過程的物質，以開發出臨床可用的藥物。

發明內容
本發明的目的在於提供調節α-突觸核蛋白積聚的物質及其製藥用途。在本發明的第一方面，提供式⑴、(II)或(III)結構的化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物的用途，用於製備降低α-突觸核蛋白的毒性(細胞毒性)的組合物；
權利要求
1.式(I)、(II)或(III)結構的化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物的用途，用於製備降低α-突觸核蛋白的毒性的組合物；
2.如權利要求I所述的用途，其特徵在於，所述的化合物選自吩噻嗪類化合物；吖啶類化合物或吩嗪類化合物。
3.如權利要求I所述的用途，其特徵在於，所述的化合物可以形成帶有正電荷的形態。
4.如權利要求2所述的化合物，其特徵在於，所述的化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物選自
5.如權利要求I所述的用途，其特徵在於，所述的組合物還用於促進α-突觸核蛋白積聚成多聚體或不溶性纖維或團塊。
6.ー種製備藥物的方法，所述的藥物用於預防或治療代謝性疾病，其特徵在於，所述方法包括將有效量的式(I)、(II)或(III)結構的化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物與藥學上可接受的載體混合
7.—種體外降低α-突觸核蛋白的毒性的方法，其特徵在幹，對細胞施用式(I)、(II)或(III)結構的化合物或其藥學上可接受的鹽或水合物
8.一種多肽，其特徵在於，所述多肽是 具有SEQ ID NO :I中第118 130位所示胺基酸序列的多肽。
9.ー種多核苷酸，其特徵在於，其編碼權利要求5所述的多肽。
10.ー種重組質粒，其特徵在於，其含有權利要求9所述的多核苷酸。
11.ー種重組細胞，其特徵在於，其含有權利要求9所述的多核苷酸或權利要求10所述的重組質粒。
12.權利要求8所述的多肽或其編碼核酸的用途，用於篩選降低α-突觸核蛋白的毒性的物質。
13.—種篩選降低α-突觸核蛋白的毒性的潛在物質的方法，其特徵在於，所述方法包括 (1)將候選物質與表達權利要求8所述的多肽的體系接觸； (2)篩選出與權利要求8所述的多肽相互作用的物質，所述物質是對於降低α-突觸核蛋白的毒性有用的潛在物質。
14.如權利要求13所述的方法，其特徵在於，在測試組中，將候選物質加入到表達權利要求8所述的多肽的體系中；和/或 步驟(2)包括檢測測試組的體系中候選物質與權利要求8所述的多肽的相互作用情況，並與對照組比較，其中所述的對照組是不添加所述候選物質的表達權利要求8所述的多肽的體系； 如果測試組中候選物質與權利要求8所述的多肽的相互作用在統計學上強於對照組，就表明該候選物質是對於降低α-突觸核蛋白的毒性有用的潛在物質。
全文摘要
本發明涉及調節α-突觸核蛋白積聚的物質及其製藥用途。本發明首次揭示了一類化合物，這些化合物可與α-突觸核蛋白(α-synuclein，α-Syn)相互作用，並且能夠促進α-Syn蛋白二體的形成，從而加速α-Syn的積聚並形成纖維。一般地，α-Syn寡聚體對細胞的毒性最大。這些化合物能夠促進α-Syn蛋白積聚成纖維或團塊，從而減少α-Syn對細胞的毒性。並且，本發明還首次揭示α-突觸核蛋白C-端的118～130位胺基酸序列區域是α-Syn與這些化合物相互作用的位點，並可作為潛在的藥物靶點。
文檔編號C12N15/63GK102690244SQ201110069889
公開日2012年9月26日 申請日期2011年3月22日 優先權日2011年3月22日
發明者周辰傑, 胡紅雨, 謝圓圓 申請人:中國科學院上海生命科學研究院