一株產中溫α-澱粉酶的枯草芽孢桿菌的製作方法

2023-04-28 10:44:46

一株產中溫α-澱粉酶的枯草芽孢桿菌的製作方法
【專利摘要】本發明公布了一株產中溫α-澱粉酶的枯草芽孢桿菌。所述菌株通過-氯化鋰-硫酸二乙酯複合誘變獲得，具體為枯草芽孢桿菌304 Bacillus subtilis304，保藏號為CCTCC NO:M 2013600。該菌株所產中溫α-澱粉酶最適作用溫度為65℃，該酶在65℃條件下保存24h仍具有80％酶活，70℃條件下保存12h仍具有50％以上酶活；該酶最適反應pH值為5.0，在pH4-6下保存18h後仍有80％以上的酶活；該酶酶活力為7000-8500U/ml，特別適合反應溫度高、液化工藝與糖化工藝並存的工業化需求。
CCTCC NO：M 2013600
20131124
【專利說明】一株產中溫a-澱粉酶的枯草芽孢桿菌

【技術領域】
[0001] 本發明屬於微生物【技術領域】，具體涉及一株產中溫a -澱粉酶的枯草芽孢桿菌。

【背景技術】
[0002] a-澱粉酶全稱為a-l，4-葡聚糖水解酶（EC3.2. 1. 1)，作用於澱粉時，可從分子 內部切開a-1，4-糖苷鍵而生成糊精和還原糖，由於產物的末端葡萄糖殘基C1碳原子為 構型，故得名為a_澱粉酶。根據其使用的溫度範圍又分為高溫a_澱粉酶、中溫a_澱 粉酶以及a-澱粉酶。在不同的工業中，需要對不同酶學性質的a-澱粉酶進行選擇使用。
[0003] 中溫a -澱粉酶是一類使用溫度在60-90°C，且在60°C以下、pH6. 0-7. 0時較為穩 定的澱粉酶。廣泛應用於酒精、啤酒、味精、澱粉糖、發酵工業的液化以及紡織、印染退漿、飼 料行業、製漿造紙等。但由於此類酶穩定性差，且pH低於5. 0以下時便會失活嚴重，從而限 制了它的應用，並且給工業生產過程帶來一定的麻煩。比如在澱粉質原料的糖化液化過程 中，由於澱粉漿的pH -般在4. 5左右，而廣泛應用的a -澱粉酶的適用pH在6. 0-7. 0,因此 在此階段需要調節澱粉漿的pH以適應澱粉液化過程在a -澱粉酶的作用條件，而在此後的 糖化過程中，糖化酶的作用pH-般在4. 2-5. 0,為了適用糖化酶的作用條件，需要在此調節 體系的pH，由於pH的反覆調整，不僅增加了工藝過程，消耗試劑，而且引入了外源離子，增 加了分類的負擔。
[0004] 若能改變此類澱粉酶的作用pH範圍，將能夠極大的簡化工藝過程，減少消耗與能 耗，降低生產成本，因此，開發出一種性能優良的中溫a -澱粉酶將具有極大的工業價值。


【發明內容】

[0005] 本發明的目的是提供一株生產中溫a -澱粉酶的枯草芽孢桿菌。
[0006] 本發明提供的產中溫a -澱粉酶的菌株具體為枯草芽孢桿菌304Bacillus SUbtilis304。該菌株已於2013年11月24日保藏於中中國典型培養物保藏中心（簡稱 CCTCC，地址為：中國.武漢.武漢大學），保藏號為CCTCC NO:M 2013600。
[0007] 所述枯草芽孢桿菌304由一株分離自酸性土壤的產中溫a -澱粉酶的枯草芽孢杆 菌出發菌株經紫外線-氯化鋰-硫酸二乙酯複合誘變篩選獲得，菌株特點如下：
[0008] 所述菌株在固體平板上菌落顏色為乳白色，表面乾燥褶皺，色暗不透明，邊緣整 齊，鏡檢為長杆狀，革蘭氏染色呈陽性，周生鞭毛，芽孢呈橢圓形。
[0009] 理化特性：
[0010]

【權利要求】
1. 一株產中溫a-澱粉酶的枯草芽孢桿菌，其特徵在於，所述枯草芽孢桿菌具體為枯 草芽孢桿菌 304Bacillus subtilis304,保藏編號為 CCTCC NO:M 2013600。
2. 如權利要求1所述的一株產中溫a -澱粉酶的枯草芽孢桿菌，其特徵在於，所述中 溫a _澱粉酶具有以下特性：該酶最適作用溫度為65°C，該酶在65°C條件下保存24h仍具 有80%酶活，70°C條件下保存12h仍具有50%以上酶活。
3. 如權利要求1-2所述的一株產中溫a -澱粉酶的枯草芽孢桿菌，其特徵在於，所述中 溫a -澱粉酶具有以下特性：該酶最適反應pH值為5. 0,在pH4-6下保存18h後仍有80% 以上的酶活。
4. 如權利要求1-3所述的一株產中溫a -澱粉酶的枯草芽孢桿菌，其特徵在於，所述中 溫a -澱粉酶具有以下特性：該酶酶活力為7000-8500U/ml。
5. 如權利要求1所述的枯草芽孢桿菌在a -澱粉酶生產中的應用。
【文檔編號】C12N9/28GK104450572SQ201410735023
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月4日 優先權日:2014年12月4日
【發明者】李洪兵, 張錦傑, 李海清, 胡永明, 朱永明, 孫明芳 申請人:湖南新鴻鷹生物工程有限公司