一種含檸檬酸銅的仔豬微量元素預混料及其應用的製作方法
2023-05-04 22:53:16
本發明涉及畜牧養殖飼料技術領域，具體來說是一種含檸檬酸銅的仔豬微量元素預混料及其應用。
背景技術：
銅作為一種必須的微量元素，參與機體的構成，同時也是多種酶(銅鋅超氧化物歧化酶、銅藍蛋白等)的重要組成成分。研究表明高劑量的銅具有促進仔豬生長，提高飼料轉換效率的作用。在現代化、規模化的養豬生產中，仔豬腹瀉比較常見，而高銅對降低仔豬的腹瀉具有一定的作用。然而飼料中高劑量的銅會在豬體內殘留，可能會對豬帶來危害。
目前常用的無機銅飼料添加劑在體內的吸收率很低，這會造成大量銅被排放到環境中，造成環境中銅的富集。相比之下，有機銅相對比較穩定、呈電中性、高度可溶，在動物消化道內能維持其結構完整性而到達小腸吸收部位，從而可被有效吸收。這就意味著可以用較少劑量的有機銅達到與高劑量無機銅相似的生長性能的同時，減少對環境汙染，降低對豬的有害作用，提高豬肉的安全性。
技術實現要素：
本發明的目的是針對上述技術存在的問題，提供一種含檸檬酸銅的仔豬微量元素預混料及其應用。
為實現上述目的，本發明採用的技術方案是：一種含檸檬酸銅的仔豬微量元素預混料，所述預混料中含有檸檬酸銅，且所述檸檬酸銅在預混料中的重量份數為4.412-35.294份。
進一步的，還包括下列重量份數的原料：一水硫酸亞鐵16.667份、一水硫酸鋅11.594份、一水硫酸錳47.17份、亞硒酸鈉1.667份、碘化鉀0.329份和沸石粉29.732-60.615份。
在本發明的一些具體實施方案中，本發明提供的微量元素預混料組分包括：一水硫酸亞鐵16.667份、一水硫酸鋅11.594份、檸檬酸銅4.412份、一水硫酸錳47.17份、亞硒酸鈉1.667份、碘化鉀0.329份和沸石粉60.615份。
在本發明的一些具體實施方案中，本發明提供的微量元素預混料組分包括：一水硫酸亞鐵16.667份、一水硫酸鋅11.594份、檸檬酸銅8.824份、一水硫酸錳47.17份、亞硒酸鈉1.667份、碘化鉀0.329份和沸石粉56.203份。
在本發明的一些具體實施方案中，本發明提供的微量元素預混料組分包括：一水硫酸亞鐵16.667份、一水硫酸鋅11.594份、檸檬酸銅17.647份、一水硫酸錳47.17份、亞硒酸鈉1.667份、碘化鉀0.329份和沸石粉47.379份。
在本發明的一些具體實施方案中，本發明提供的微量元素預混料組分包括：一水硫酸亞鐵16.667份、一水硫酸鋅11.594份、檸檬酸銅35.294份、一水硫酸錳47.17、亞硒酸鈉1.667份、碘化鉀0.329份和沸石粉29.732份。
本發明還提供一種含檸檬酸銅的仔豬微量元素預混料在製備仔豬配合飼料中的應用。
本發明還提供一種仔豬配合飼料，含有所述微量元素預混料。
進一步的，所述微量元素預混料的質量百分含量為0.2％。
本發明中，一水硫酸亞鐵中鐵含量≥30.0％、一水硫酸鋅中鋅含量≥34.5％份、檸檬酸銅中銅含量≥34.0％、一水硫酸錳中錳含量≥31.8％、亞硒酸鈉中硒含量≥0.5％、碘化鉀中碘含量≥3.8％。
本發明的有益技術效果是：本發明微量元素預混料有助於提高仔豬平均日增重(ADG)、平均日採食量(ADFI)和料重比(F/G)，前期(0～14天)日糧添加60、120和240mg/kg檸檬酸銅的ADG和ADFI顯著高於陰性對照組(P<0.05)，240mg/kg檸檬酸銅的ADFI顯著高於對照組(P<0.05)。後期(15～28天)日糧添加30和60mg/kg檸檬酸銅的ADG和ADFI顯著高於對照組和陰性對照組(P<0.05)，全期(0～28天)日糧添加30和60mg/kg檸檬酸銅的ADG和ADFI顯著高於陰性對照組，60mg/kg檸檬酸銅的ADFI顯著高於對照組(P<0.05)；
此外本發明還能提高仔豬血清中HDL-C、幹擾素γ和INS，同時降低盲腸、結腸大腸桿菌數。
具體實施方式
下面將結合本發明實施例，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基於本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有作出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬於本發明保護的範圍。
實施例1
一種含檸檬酸銅的仔豬微量元素預混料包括組分：一水硫酸亞鐵16.667份、一水硫酸鋅11.594份、檸檬酸銅4.412份、一水硫酸錳47.17、亞硒酸鈉1.667份、碘化鉀0.329份和沸石粉60.615份。
實施例2
一種含檸檬酸銅的仔豬微量元素預混料包括組分：一水硫酸亞鐵16.667份、一水硫酸鋅11.594份、檸檬酸銅4.412份、一水硫酸錳47.17、亞硒酸鈉1.667份、碘化鉀0.329份和沸石粉60.615份。
實施例3
一種含檸檬酸銅的仔豬微量元素預混料包括組分：一水硫酸亞鐵16.667份、一水硫酸鋅11.594份、檸檬酸銅17.647份、一水硫酸錳47.17、亞硒酸鈉1.667份、碘化鉀0.329份和沸石粉47.379份。
實施例4
一種含檸檬酸銅的仔豬微量元素預混料包括組分：一水硫酸亞鐵16.667份、一水硫酸鋅11.594份、檸檬酸銅35.294份、一水硫酸錳47.17、亞硒酸鈉1.667份、碘化鉀0.329份和沸石粉29.732份。
實施例5
材料與方法
1.1受試物
檸檬酸銅：檸檬酸銅≥98.5％，銅≥34.0％，實測值為34.4％，由四川省畜科飼料有限公司生產。
五水硫酸銅：五水硫酸銅≥98.0％，銅≥24.0％，實測值為24.5％，由四川省畜科飼料有限公司提供。
1.2試驗動物與分組
本試驗採用單因子試驗設計，選用216頭35日齡健康的杜長大三元雜交斷奶仔豬，初始體重為8.98±1.21kg，按體重一致、公母各半的原則，隨機分為6個處理，每個處理6個重複，每個重複6頭豬，試驗期28天。基礎日糧為玉米-豆粕型，對照組在基礎日糧中添加180mg/kg硫酸銅，5個處理組分別在基礎日糧中添加0(陰性對照組)、30mg/kg(實施例1)、60mg/kg(實施例2)、120mg/kg(實施例3)和240mg/kg(實施例4)檸檬酸銅(以銅計)。
1.3試驗日糧
試驗採用玉米-豆粕型基礎日糧，基礎日糧營養水平參考NRC豬飼養標準(2012版)配合而成，試驗基礎日糧的組成及營養水平見 表1。配合日糧時，用玉米粉對硫酸銅或檸檬酸銅進行逐級稀釋放大，混勻後與其他原料混合。
表1試驗基礎日糧組成及營養水平(％)
註：1預混料給每千克配合飼料提供：維生素A，12KIU；維生素D3，2KIU；維生素E，30.00IU；維生素K3，2.50mg；維生素B1，2.50mg；維生素B2，4.00mg；維生素B6，3.00mg；維生素B12，20.00ug；煙酸，40.00mg；泛酸，12.50mg；葉酸，0.70mg；生物素，0.07mg；鐵，100mg；銅，10mg(以硫酸銅形式添加)；鋅，80mg；錳，30mg；碘，0.25mg；硒，0.15mg。
2營養水平除消化能外均為實測值。
1.4飼養管理
試驗前對豬舍進行徹底消毒，並清洗料槽、飲水器，同時對試驗豬進行常規免疫與驅蟲。豬舍溫度控制在23-27℃，自由採食和飲水。 消毒按常規程序進行。嚴格遵循豬場飼養和管理制度，每日注意觀察豬採食、糞便和精神狀況。
1.5樣品採集
於試驗第14和28天，每處理每重複選取1頭體重接近該圈平均值的豬(每處理6頭豬)進行前腔靜脈採血10mL，於室溫下傾斜放置0.5h，2000rpm離心10min製備血清，於-20℃保存備用。於試驗第28天，每處理每重複選取1頭體重接近該圈平均值的豬(每處理6頭豬)屠宰，採集肝臟樣品，液氮處理後於-20℃保存備用；採集盲腸、結腸食糜，液氮處理後於-80℃保存備用。
1.6測定指標及方法
1.6.1生長性能
於試驗開始、第14天和第28天對豬進行空腹稱重，結算耗料量，在整個試驗期記錄死亡情況。以重複為單位，計算平均日採食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、耗料增重比(F:G)和死亡率。
1.6.2血脂指標
血脂指標包括血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和極低密度脂蛋白(VLDL-C)含量。血脂含量檢測方法為比色法，按照南京建成生物工程研究所試劑盒的說明進行測定，使用儀器為日立7600生化儀。
1.6.3免疫指標
血清免疫指標包括血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量、白細胞介素-1(IL-1β)和幹擾素γ(IFN-γ)含量。血清IgM、IgA和IgG含量檢測方法為比色法，按照南京建成生物工程研究所試劑盒的說明進行測定，使用儀器為日立7600生化儀；血清IL-1β和IFN-γ含量檢測方法為酶聯免疫分析法，試劑盒廠家為eBioscience，CA，美國。使用儀器為Multiskan MK3酶標儀(Thermo Fisher Scientific公司)。
1.6.4抗氧化指標
血清和肝臟抗氧化指標包括丙二醛(MDA)含量、銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、穀胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和銅藍蛋白(CuP)活性。按照南京建成生物工程研究所試劑盒的說明進行測定，使用儀器為日立7600生化儀。
1.6.5血清激素
血清激素包括三碘原甲狀腺素(T3)、甲狀腺素(T4)、類胰島素生長因子(IGF-1)、生長激素(GH)和胰島素(INS)含量。血清激素檢測方法為放射免疫分析法，使用儀器為Sn-69513型免疫計數器(上海核所日環光電儀器有限公司)。
1.6.6血清微量元素
血清微量元素包括銅、鐵、鋅含量。血清Cu、Fe和Zn含量採用電感耦合等離子體質譜儀(安捷倫7500，安捷倫科技有限公司，美國)測定。
1.6.7腸道微生物
微生物測定指標包括總菌(好氧菌和厭氧菌)，大腸桿菌和乳酸桿菌數量，檢測方法為塗布平板計數法。
1.7數據處理與統計分析
試驗數據以重複(圈)為統計單位，採用SAS 9.2統計軟體處理，進行GLM分析、Duncan多重比較。檸檬酸銅添加水平的一次和二次效應分析採用正交多項式比較，P<0.05時差異顯著。
2.結果與分析
2.1生長性能
表2日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬生長性能的影響1
註：1同行數據中肩標不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
2 ADG為平均日增重，ADFI為平均日採食量，F:G為耗料增重比。
日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬生長性能的影響見表2。由表2可知，前期(0～14天)日糧添加60、120和240mg/kg檸檬酸銅的ADG和ADFI顯著高於陰性對照組(P<0.05)，240mg/kg檸檬酸銅的ADFI顯著高於對照組(P0.05)。試驗各組間的F:G和死亡率差異不顯著(P>0.05)。
後期(15～28天)日糧添加30和60mg/kg檸檬酸銅的ADG和ADFI顯著高於對照組和陰性對照組和240mg/kg檸檬酸銅組(線性和二次，P0.05)。F:G和死亡率各組間均無顯著差異(P>0.05)。
全期(0～28天)，日糧添加30和60mg/kg檸檬酸銅的ADG和ADFI顯著高於陰性對照組，60mg/kg檸檬酸銅的ADFI顯著高於對照組(線性，P0.05)。
全期斷奶仔豬獲得最大平均日增重的日糧檸檬酸銅添加量預測值為48.11mg/kg。
結果表明，前期(0～14天)日糧添加60、120和240mg/kg的檸檬酸銅，後期(15～28天)添加30和60mg/kg的檸檬酸銅，全期(0～28天)添加30和60mg/kg的檸檬酸銅改善了斷奶仔豬的生長性能。表明在斷奶仔豬日糧中檸檬酸銅適宜的添加劑量為30～60mg/kg。
2.2血脂含量
表3日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬血脂含量的影響1
註：1同行數據中肩標不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
2 TC為總膽固醇，TG為甘油三酯，HDL-C為高密度脂蛋白，LDL-C為低密度脂蛋白，VLDL-C為極低密度脂蛋白。
日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬血脂含量的影響見表3。由表3可知，14天時，血清TC、TG、HDL-C、LDL-C和VLDL含量各組間均無顯著差異(P>0.05)。
28天時，日糧添加60mg/kg檸檬酸銅血清HDL-C含量顯著高於其他組(線性，P0.05)。
表明日糧中添加不同劑量的檸檬酸銅對血清TC、TG、HDL-C、LDL-C和VLDL含量影響較小。日糧中添加60mg/kg的檸檬酸銅可以提高斷奶仔豬後期(15～28天)的血清HDL-C含量，有助於改善斷奶仔豬的脂質代謝。
2.3血清免疫性能
表4日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬免疫性能的影響1
註：1同行數據中肩標不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
2 IgM為免疫球蛋白M，IgA為免疫球蛋白A，IgG為免疫球蛋白G，IL-1β為白細胞介素-1，IFN-γ為幹擾素γ。
日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬免疫性能的影響見表4。由表4可知，14天時，日糧添加30mg/kg檸檬酸銅的血清IgA含量顯著高於對照組和120、240mg/kg檸檬酸銅組(P<0.05)。30和60mg/kg檸檬酸銅組的血清幹擾素γ含量顯著高於對照組和陰性對照組(線性和二次，P0.05)。
表明前期(0～14天)日糧中添加30mg/kg檸檬酸銅提高了血清IgA和幹擾素γ含量，提高了斷奶仔豬的免疫性能。
2.4抗氧化性能
表5日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬抗氧化性能的影響1
註：1同行數據中肩標不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
2 MDA為丙二醛，Cu/Zn-SOD為銅鋅超氧化物歧化酶，GSH-Px為穀胱甘肽過氧化物酶，CuP為銅藍蛋白。
日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬抗氧化性能的影響見表5。由表5可知，14天時，日糧添加240mg/kg檸檬酸銅的血清Cu/Zn-SOD活性顯著高於對照組、0、60和120mg/kg檸檬酸銅組(P0.05)。
28天時，日糧添加30、60和120mg/kg檸檬酸銅的血清MDA含量顯著低於陰性對照組(線性，P0.05)。30和60mg/kg檸檬酸銅組的血清Cu/Zn-SOD活性顯著高於其他組(線性，P<0.05)。30、60和120mg/kg檸檬酸銅組和對照組血清GSH-Px活性顯著高於陰性對照組(線性，P0.05)。
日糧添加30、60和120mg/kg檸檬酸銅和對照組肝臟MDA含量顯著低於0和240mg/kg檸檬酸銅組(線性和二次，P0.05)。
表明日糧添加240mg/kg檸檬酸銅可以提高14天血清Cu/Zn-SOD活性，30和60mg/kg檸檬酸銅降低了28天血清MDA含量，30～120 mg/kg檸檬酸銅提高了28天血清GSH-Px和Cu/Zn-SOD活性，降低了肝臟MDA含量，減少了肝臟的過氧化程度，改善了斷奶仔豬的抗氧化性能。
2.5血清激素
表6日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬血清激素含量的影響1
註：1同行數據中肩標不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
2 T3為三碘原甲狀腺素，T4為甲狀腺素，IGF-1類胰島素生長因子，GH為生長激素，INS為胰島素。
日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬血清激素含量的影響見表6。由表6可知，14天時，日糧添加30和60mg/kg檸檬酸銅的血清INS含量顯著高於對照組和陰性對照組(線性，P0.05)。28天時，血清T3、T4、IGF1、GH和INS含量各組間均無顯著差異(P>0.05)。表明，日糧添加30和60mg/kg檸檬酸銅提高了血清胰島素含量，增強對血清葡萄糖的利用，促進斷奶仔豬的生長。
2.6血清微量元素
表7日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬血清微量元素含量的影響1(mg/L)
註：1同行數據中肩標不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬血清微量元素的影響見表7。由表7可知，14天時，日糧添加120和240mg/kg檸檬酸銅的血清Cu含量顯著高於0和30mg/kg檸檬酸銅組(P<0.05)，240mg/kg檸檬酸銅組的血清Cu含量顯著高於除120mg/kg檸檬酸銅組外的其他處理組(P<0.05)。120、240mg/kg檸檬酸銅組和對照組的血清Fe含量顯著低於0、30和60mg/kg檸檬酸銅組(P0.05)。
28天時，日糧添加240mg/kg檸檬酸銅和對照組血清Cu含量顯著高於0和30mg/kg檸檬酸銅組(P0.05)。
表明日糧添加120～240mg/kg的檸檬酸銅時，顯著升高了血清Cu含量，降低了Fe含量。添加30和60mg/kg檸檬酸銅對血清微量元素無影響。
2.7腸道微生物
表8日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬腸道微生物的影響1(lg(CFU/g))
註：1同行數據中肩標不同小寫字母表示差異顯著(P0.05)。
日糧添加不同水平檸檬酸銅對斷奶仔豬腸道微生物的影響見表8。由表8可知，日糧添加檸檬酸銅組的盲腸、結腸大腸桿菌數均顯著低於陰性對照組(P0.05)。對照組的結腸大腸桿菌數顯著低於陰性對照組(P0.05)。表明，日糧添加檸檬銅或硫酸銅對盲腸、結腸的總菌群和乳酸桿菌數無影響，但添加30～240mg/kg的檸檬酸銅可以減少盲腸、結腸的大腸桿菌數，改善腸道菌群。
3.小結
3.1前期(0～14天)日糧添加60、120和240mg/kg檸檬酸銅的ADG和ADFI顯著高於陰性對照組(P<0.05)，240mg/kg檸檬酸銅的ADFI顯著高於對照組(P<0.05)。後期(15～28天)日糧添 加30和60mg/kg檸檬酸銅的ADG和ADFI顯著高於對照組和陰性對照組(P<0.05)，全期(0～28天)日糧添加30和60mg/kg檸檬酸銅的ADG和ADFI顯著高於陰性對照組，60mg/kg檸檬酸銅的ADFI顯著高於對照組(P<0.05)。
3.2 28天時日糧添加60mg/kg檸檬酸銅的血清HDL-C含量顯著高於其他組(P<0.05)；
3.3 14天時日糧添加30和60mg/kg檸檬酸銅的血清幹擾素γ含量顯著高於對照組和陰性對照組(P<0.05)；
3.4 28天時日糧添加30、60和120mg/kg檸檬酸銅與陰性對照組比血清和肝臟MDA含量顯著降低(P0.05)。30和60mg/kg檸檬酸銅組的血清Cu/Zn-SOD活性顯著高於其他組(P<0.05)；
3.5 14天時日糧添加30和60mg/kg檸檬酸銅的血清INS含量顯著高於對照組和陰性對照組(P<0.05)；
3.6 14天時日糧添加120和240mg/kg檸檬酸銅與陰性對照組比血清Cu含量顯著增高(P<0.05)。血清Fe含量顯著降低(P0.05)。28天時240mg/kg檸檬酸銅組的血清Cu含量顯著高於陰性對照組(P<0.05)；
3.7日糧添加30、60、120和240mg/kg檸檬酸銅的盲腸、結腸大腸桿菌數顯著低於陰性對照組(P<0.05)；
3.8斷奶仔豬日糧中檸檬酸銅推薦的適宜添加量為30～60mg/kg。
本技術領域技術人員可以理解，除非另外定義，這裡使用的所有術語(包括技術術語和科學術語)具有與本發明所屬領域中的普通技術人員的一般理解相同的意義。還應該理解的是，諸如通用字典中定義的那些術語應該被理解為具有與現有技術的上下文中的意義一致 的意義，並且除非像這裡一樣定義，不會用理想化或過於正式的含義來解釋。
最後所應說明的是：以上實施例僅用以說明而非限制本發明的技術方案，儘管參照上述實施例對本發明進行了詳細說明，本領域的普通技術人員應該理解：依然可以對本發明進行修改或者等同替換，而不脫離本發明的精神和範圍的任何修改或局部替換，其均應涵蓋在本發明的權利要求範圍當中。