一種^99mTcO核標記的苯丁酸氮芥類配合物、其製備分離純化方法及其用途的製作方法

2023-05-14 00:51:36 2

專利名稱：一種99mTcO核標記的苯丁酸氮芥類配合物、其製備分離純化方法及其用途的製作方法
技術領域：
一種99mTcO核標 記的苯丁酸氮芥類配合物、其製備分離純化方法及其用途，屬於放射性藥物製備及應用領域。
背景技術：
惡性腫瘤是嚴重威脅人類健康和生命的常見病和多發病，已成為人類死亡的第二位原因，僅次於心腦血管疾病，有些地方已上升為第一位原因(鄭虎等.藥物化學.[M]，北京人民衛生出版社，2001，第四版)。據統計，發達國家中約有三分之一的人會在他們生命歷程的不同階段患上癌症，其中近四分之一的患者最終死於癌症。它對人類構成了巨大的威脅，是人類最難對付的頑症之一。氮芥衍生物抗腫瘤作用的發現被認為是腫瘤化療發展的裡程碑之一(Pratt W. B. , The Anticancer Drugs. Oxford University Press, 1979)。其後，為了尋找副作用小，選擇性高的類似物，先後合成了 3000餘種衍生物，但臨床常用的只有10餘種。苯丁酸氮芥便是其中之一。氮芥衍生物作用原理的研究表明，氮芥的烷化作用是由於它在生理溫度及PH為中性或鹼性條件下環化成乙烯亞胺的結果，後者與核酸組份的親核基團烷化而發揮其生物學作用。前期的研究證明苯丁酸氮芥有抗腫瘤作用，預計它在腫瘤細胞中被選擇性的活化，並證明具有較低的毒性和較高的活性而成為後來臨床上應用較多的一種烷化藥物。將苯丁酸氮芥和其他的活性基團相連接，可以降低苯丁酸氮芥本身的毒性，而且特異性也會增強。於是人們設想把兩種藥物結合在一個分子中可能會取得較好的活性。 如2005年Beatrece Coggila等合成的苯丁酸氮芥衍生物的生理活性較兩種藥物混合使用好(Coggiola B. , Pagliai F. , et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. , 2005, 15:3551)。 2005年Parker L. L.等合成了環狀大分子多功能烷化劑，生理活性測試表明它與DNA交聯接能力是苯丁酸氮芥的IO4倍，是美法侖的2000倍，它的細胞毒性和臨床藥物相當(Parker L. L. , Anderson F. Μ. , et al. Bioorg. Med. Chem., 2005，13:2389)。2006年Su Τ· L等人將DNA嵌入劑和氮芥相連後生物學活性得到不同程度提高(Su Τ. L.，Lin Y. W. et al. J. Med. Chem. 2006, 49 3710)。本專利中我們將苯丁酸氮芥和雙功能螯合劑N2S2通過醯胺化反應連接，希望得到對腫瘤作用靈敏度高、特異性強的標記前體，進而與99mTc完成標記後通過乙酸乙酯萃取分離純化，標記物的最終放化純達到99%以上。目前，如何提前檢測癌症的發生，是有效的提高癌病患者的生活質量著重解決的問題。但是很多癌症患者在發病前期並不能察覺自己的症狀，耽誤了最佳的治療時間，也為後期的治療帶來了很多困難。所以尋找一種靈敏度高、特異性強診斷癌症患者的藥物也成為了一種必然趨勢。放射性核素在醫學上主要有兩方面的應用一是核醫學成像，用於疾病診斷；二是腫瘤的放射治療。核醫學就是利用核技術來診斷、治療和研究疾病的一門新興學科。而核醫學成像作為近代臨床醫學影像診斷中重要組成部分也得到迅速的發展，和CT、核磁共振、超聲技術等相互補充，彼此印證，極大的提高了對疾病的診療和研究水平。其中放射性核素99mTc在顯像中應用的非常廣泛，首先，99mTc的γ射線能量適中(140 KeV)，半衰期較短 (6.02 h)，適合於顯像；其次，99mTc在血液中的清除較快，並且該核素由反應堆生產，價格便宜，便於推廣使用。苯丁酸氮芥本身作為一種抗腫瘤藥物已經得到廣泛應用，與99mTc標記後可作為一種具有潛在應用前景的腫瘤顯像劑。99fflTcO-N2S2-CLB是我們 設計的一種新型腫瘤單光子發射計算機斷層成像 (Single-Photon Emission Computed Tomography, SPECT)顯像劑，在 CA 上沒有登記號，而且國內外也沒有相關報導。期望通過苯丁酸氮芥中引入雙功能螯合劑N2S2並與同位素99mTc 形成穩定的配合物，為進一步的生物學性質研究和腫瘤(惡性淋巴瘤、多發性骨髓瘤、卵巢癌、乳腺癌等)SPECT顯像奠定基礎。

發明內容
本發明的目的是提供一種99mTcO核標記的苯丁酸氮芥配合物，將其應用於後期生物學性質的研究和核醫學診斷顯像，並提供了其製備和分離純化方法。為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案 一種結構式5所示的99mTcO核標記的苯丁酸氮芥配合物
M7 YrOOCH2CH2CH2 「9%< 1
L4、J Q
τ °凡.
CIH2CH2C CH2CH2CI
5將含N2S2-LCB 70-200ug 的 N2S2-LCB 的乙醇溶液 0. 1 mL,含 EDTA_2Na 1. 50-3. 50 mg 的 EDTA-2Na 水溶液 250 uL，10-30 mg GH 固體以及含 0. 1-0. 6 mg SnCl2WSnCl2 ·2Η20 鹽酸溶液0. 1 mL加入到反應容器中，再加入37-55. 5 MBq新鮮的"mTc04_淋洗液，用磷酸鹽緩衝液調至PH為5-7，並控制總反應體積為1.5-2 mL，充分震蕩混勻，80-100 °C反應30 min-1. 5 h，即得標記率大於81%的99mTcO標記的苯丁酸氮芥配合物。所述磷酸鹽緩衝液pH 約等於 6，由 0. 2 mol/L 的 NaH2PO4 (如 87. 7 mL)與 0. 2 mol/L 的 Na2HPO4 (如 12. 3 mL) 混合而成，並調至PH為5-7。上述標記率大於81% 99mTcO標記的苯丁酸氮芥配合物的分離純化方法是 將上述所得標記液冷卻，加入乙酸乙酯萃取，上層為含標記物99mTcO-N2S2-CLB的乙酸乙
酯有機層，分離出乙酸乙酯有機層，再通氮氣去除乙酸乙酯溶劑，加入體積比為1:1的生理鹽水和乙醇溶解即可99mTcO標記的苯丁酸氮芥配合物，HPLC放化純大於99%。99mTcO核標記的苯丁酸氮芥配合物在核醫學腫瘤診斷顯像製劑製備中的應用。本發明的有益效果=99mTcO-N2S2-CLB是我們設計的一種新型腫瘤SPECT顯像劑，在 CA上沒有登記號，而且國內外也沒有相關報導。我們成功地在抗腫瘤藥物苯丁酸氮芥中引入N2S2螯合劑，並與放射性核素99mTc形成穩定的配合物。通過一種簡易的純化方法將放化純由81%提升為99%，足以滿足臨床對放射性藥物的要求(放化純大於90%)。為進一步的生物學性質研究和腫瘤(惡性淋巴瘤、多發性骨髓瘤、卵巢癌、乳腺癌等)顯像應用奠定了基石出。


附圖用來提供對本發明的進一步理解，並且構成說明書的一部分，與本發明的實施例一起用於解釋本發明，並不構成對本發明的限制。在附圖中
圖1是實施例1的所得化合物2的質譜圖； 圖2是實施例1的所得化合物3的質譜圖3是實施例1的所得99mTcO-N2S2-CLB放化純的HPLC測定圖譜，a為游離鎝的HPLC圖譜，b為標記物純化前水相HPLC圖譜，c為標記物乙酸乙酯萃取純化後的HPLC圖譜。
具體實施例方式以下結合附圖對本發明的優選實施例進行說明，應當理解，此處所描述的優選實施例僅用於說明和解釋本發明，並不用於限定本發明。)製備 99mTcO-N2S2-CLB 實施例1
合成路線如下
權利要求
1.一種結構式5所示的99mTcO核標記的苯丁酸氮芥配合物 (/ ^nXOCH2CH2CH2
2.權利要求1所述的99mTcO核標記的苯丁酸氮芥配合物的合成方法，其特徵在於將含 N2S2-LCB 70-200 Ug 的 N2S2-LCB 的乙醇溶液 0. 1 mL,含 EDTA_2Na 1. 50-3. 50 mg 的 EDTA-2Na 水溶液 250 uL, 10-30 mg GH 固體以及含 0. 1-0. 6 mg SnCl2 的 SnCl2 · 2H20 鹽酸溶液0.1 mL加入到反應容器中，再加入37-55. 5 MBq新鮮的99mTc04_淋洗液，用磷酸鹽緩衝溶液，並控制總反應體積為1.5-2 mL，充分震蕩混勻，80-100 °C反應30 min-1. 5 h，即得標記率大於81 %的99mTcO標記的苯丁酸氮芥配合物。
3.根據權利要求2所述的99mTcO核標記的苯丁酸氮芥配合物的合成方法，其特徵在於 所述標記率大於81% 99mTcO標記的苯丁酸氮芥配合物的分離純化方法是，將權利要求2所得標記液冷卻，加入乙酸乙酯萃取，上層為含標記物99mTcO-N2S2-CLB的乙酸乙酯有機層，分離出乙酸乙酯有機層，再通氮氣去除乙酸乙酯溶劑，加入體積比為1:1的生理鹽水和乙醇溶解即可99mTcO標記的苯丁酸氮芥配合物，HPLC放化純大於99%。
4.權利要求1-3所述的99mTcO核標記的苯丁酸氮芥配合物在核醫學腫瘤診斷顯像製劑製備中的應用。
全文摘要
一種99mTcO核標記的苯丁酸氮芥類配合物、其製備分離純化方法及其用途，屬於放射性藥物標記合成及應用領域。其配合物的製備方法是，將配體N2S2-CLB、還原劑、EDTA、GH、磷酸緩衝液和高鎝酸鈉(Na99mTcO4)溶液混合反應，即得到99mTcO核標記的苯丁酸氮芥配合物。標記物用乙酸乙酯萃取純化，HPLC測其放化純可達到99%以上。本發明99mTcO核標記的苯丁酸氮芥配合物製備方法簡單易操作、條件溫和，通過分離純化後放化純高，其為後續的核醫學腫瘤顯像的研究奠定了優秀的基礎。
文檔編號C07F13/00GK102311458SQ20111014542
公開日2012年1月11日 申請日期2011年5月31日 優先權日2011年5月31日
發明者林建國, 程文, 羅世能, 薛麗, 邱玲 申請人:江蘇省原子醫學研究所