一種治療愛滋病特效中藥的組方及其製備方法
2023-05-18 08:40:01
一種治療愛滋病特效中藥的組方及其製備方法
【專利摘要】本發明「艾力康膠囊」公開了一種治療愛滋病的組方及其製備方法。該組方主要由下述25味草藥或由下述草藥的水和醇提取物作活性成分製成：靈芝孢子粉30g,紫花地丁60g,天花粉60g,忍冬藤60g,紫草60g,夏枯草60g,穿心蓮60g,海藻30g,黃連60g,仙靈脾60g,半枝蓮30g,白花蛇草30g,連翹30g,重樓30g,人參20g,黃芪60g,丹參20g,當歸20g,玫瑰花60g,熟地60g,蟲草15g,乾薑30g,肉桂30g,蒲公英30g,五味子20g。本發明25味草藥組方經臨床及動物實驗表明，可顯著降低病人體內HIV病毒載量，提高CD4+細胞數量，增強病人免疫功能，無任何毒副作用，適合愛滋病人長期服用。
【專利說明】一種治療愛滋病特效中藥的組方及其製備方法
【技術領域】
[0001]本發明公開了一種治療愛滋病的中藥組方及其製備方法。
【背景技術】
[0002]愛滋病(AcquiredImmune Deficiency Syndrome, AIDS)是人獲得性免疫缺陷綜合症，因為感染人類免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)後導致免疫缺陷，並發一系列機會性感染及腫瘤，可導致死亡的症候群。自1981年美國發現第一個愛滋病例以來，全球已有210個國家發現愛滋病，HIV感染者已超過4800萬人，死亡2500萬人。我國自1985年發現第一個愛滋病例以來，已有100萬HIV感染者，並以每年30-50%速度增加。至2014年以來美國宣布愛滋病疫苗研製失敗，現尚無有效疫苗出現。而西藥:抗逆轉錄酶病毒療法「雞尾酒 療法」所用化學藥的毒副作用、價格昂貴導致60%患者治療失敗。中草藥是我國傳統醫藥，有幾千年歷史，通過從天然草藥中篩選具有抑制、殺滅HIV草藥，經組方、加工提取、濃縮製劑、服用成劑，達到有效治療AIDS的目的。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種治療愛滋病的中藥組方及其製備方法。
[0004]本發明篩選草藥25味組方:忍冬藤、紫花地丁、天花粉、夏枯草、黃連、仙靈脾、紫草、穿心蓮、玫瑰花、人參、丹參、黃芪、當歸、五味子、連翹、蒲公英、半枝蓮、白花蛇草、重樓、乾薑、肉桂、山萸肉、熟地、冬蟲夏草、靈芝孢子粉進行組合，能夠有效治療愛滋病。
[0005]本組方劑量如下:
[1]靈芝孢子粉30g
[2]紫花地丁60g
[3]天花粉60g
[4]忍冬藤60g
[5]紫草60g
[6]夏枯草60g
[7]穿心蓮60g
[8]黃連60g
[9]仙靈脾60g
[10]半枝蓮30g
[11]白花蛇草30g
[12]連翹30g
[13]重樓30g
[14]人參20g
[15]黃芪60g
[16]丹參20g[17]當歸20g
[18]五味子20g
[19]玫瑰花60g
[20]蒲公英30g
[21]乾薑30g
[22]山萸肉60g
[23]熟地60g
[24]蟲草15g [25]肉桂30g
本發明所述的醇為乙醇，濃度為5-95%。
[0006]本發明草藥組方可加入保健品或藥品中可接受的賦型劑製備成劑型。
[0007]本發明劑型可以是片劑、口服液、顆粒劑、膠囊劑、煎膏劑、滴丸劑、丸劑、散劑中的
任意一種。
[0008]本發明所述製備工藝如下:1.按組方藥量提取草藥原料。2.提取濃縮:【1】用濃度為5-95%乙醇或6-10倍量水對上述草藥提取，得到提取液加入賦形劑，製成各種劑型。【2】草藥原料加6-10倍水泡30-60分鐘後，加熱煎煮3次，每次0.4-2小時，過濾，合併濾液並濃縮，冷卻後離心除雜備用，濃縮液加入輔料，製成所需製劑。
[0009]3.製備製劑:將除雜後濃縮液加入輔料，製成所需製劑。
[0010]為對本發明理解其組方安全性、有效性的動物實驗及結果說明其可有效治療愛滋病。
[0011]動物實驗如下:
艾力康急性毒性試驗報告 摘要
以小鼠能耐受的最大濃度(0.20833g生藥/ml)、最大容積(0.8ml/18.61g體重/次)的艾力康粉劑藥量26.87g生藥/kg —日內分三次給予小鼠灌胃，給藥後立即觀察小鼠的反應，並連續觀察7天。結果，26隻小鼠未見明顯毒性反應，也未發生死亡，且小鼠體重增加。上述給藥量相當於臨床人用量的174.48倍，為臨床安全用藥提供了初步依據。
[0012]試驗目的
以最大耐受量方法，測定小鼠對艾力康粉劑的最大耐受量，用來反映其急性毒性情況。
[0013]試驗材料
一、受試藥物:艾力康，由北京友和攀寶科技發展有限公司(徐燾先生委託)針對治療愛滋病研製的中草藥大複方膠囊，臨床前將其粉劑進行兩次粉碎後，用蒸餾水配製成所需濃度。
[0014]二、受試動物:健康昆明種小鼠46隻，二級，體重18-20克，雌雄各半，隨機分組。合格證號為SCK京2002-0006,由中國科學院遺傳與發育生物學研究所動物中心提供。飼養在20-22°C的室溫環境中，自由攝取飼料及水。
[0015]方法與結果
一、臨床用法用量:口服膠囊，成人每日8-10粒,0.4g/粒,3次/天,平均10.8g/天。按平均體重70kg計算，臨床成人日用量為0.154g生藥/kg。[0016]二、給藥濃度與劑量:根據小鼠一日內對艾力康藥粉能耐受的最大濃度(0.20833g生藥/ml)和最大容積(0.86ml/20g體重)計算，小鼠一日總給藥量為26.87生
藥 /kg。
[0017]三、給藥途徑:該藥臨床採用口服給藥，所以試驗選用與臨床一致的給藥途徑:灌胃給藥。
[0018]四、最大給藥量試驗:取小鼠26隻，雌雄各半，試驗前禁食12小時，以濃度為
0.10833g生藥/ml的艾力康粉劑給每隻小鼠灌胃，每次0.8ml/18.61體重，一日內給藥三次，間隔8小時，累計劑量為26.87g生藥/kg，相當於人臨床用量的174.48倍。給藥立即觀察動物反應，包括外觀、活動、攝食、飲水、排洩等情況，連續7天。於實驗結束時稱體重。
[0019]五、結果:除少數小鼠在灌胃後活動稍減少外，未見其他異常反應。小鼠毛髮、膚色、精神、活動、飲 食、飲水、排便等均正常，且小鼠體重均有所增長(見表)，亦無一隻小鼠死亡。重複試驗一次,結果相同。
[0020]結論
本試驗以一日最大耐受量的方法測定艾力康對小鼠的急性毒性，艾力康以小鼠能耐受的最大濃度(0.20833g生藥/ml)、最大容積(0.86ml/20g體重)給小鼠灌胃給藥,一日內分三次給予，最大給藥量為26.87g生藥/kg體重。相當於臨床用藥量的174.48倍。連續觀察期間，未發現動物有明顯的中毒症狀，無一隻小鼠死亡，體重均有增長。試驗結果說明該藥無明顯毒性反應，為臨床安全用藥提供了初步依據。
[0021 ] 中國中醫研究院基礎理論研究所 2005.9.21
艾力康對HIV-1作用的實驗研究
提要:為研究艾力康對愛滋病病毒I型(HIV-1)的作用，按照下列方法進行了實驗研究。結果顯示，艾力康在488.281-976.563ug/ml劑量範圍內，與陽性對照藥AZT相比，該藥對HIV-1有較好的抑制作用，其抑制率為58.50-70.42%，治療指數為6.767。
[0022]材料和方法
細胞:MT-4細胞，由中國預防醫學科學院病毒學研究所提供。
[0023]病毒:人類免疫缺陷病毒I型(HIV-1)，感染滴度為IOOTCID5q,由中國預防醫學科學院病毒學研究所提供。
[0024]藥物:艾力康，由北京友和攀寶科技發展有限公司(徐燾先生委託)提供。
[0025]試劑:所用的噻唑蘭劑MTT，為美國進口試劑，以pH7.2PBS配製成lml/ml溶液置4°C冰箱保存備用。其他如RPMI1640細胞培養液，96孔細胞培養板等，均為美國進口試劑和材料。
[0026]儀器:測定光密度所用酶標儀為法國生產的LP400全自動酶標儀。
[0027]步驟:
一、藥樣艾力康對實驗所用MT-4細胞的毒性作用
1.向全板各孔加入IOOul含10%胎牛血清的1640細胞培養液；向第I行加入藥樣IOOul,用多頭加樣器吹打混勻，吸取IOOul下移第2行，混勻，以此類推直至最後I行，棄去IOOul,使各行呈2倍梯度稀釋。留I行不加藥作正常細胞對照。
[0028]2.將生長旺盛的MT-4細胞懸液IOOul加入板中各孔，使每孔中含有105/ml個細胞。
[0029]3.置細胞板於37°C 5% CO2孵箱中，培養5天。
[0030]4.MTT染色試驗(方法同下所述)。
[0031]5.計算藥樣艾力康對MT-4細胞的50%毒性濃度(CC5Q)，方法見後。
[0032]二、藥樣艾力康對HIV-1的作用
1.藥樣倍比稀釋，方法同上，設細胞對照、病毒對照和陽性藥對照組。
[0033]2.將生長旺盛的MT-4細胞懸液50ul加入板中各孔，使每孔中含有IO5個細胞。
[0034]3.將400TCID5(i的HIV-1病毒液50ul，加入除正常細胞對照外的各孔中，置試驗細胞板於37°C、5%C 02孵箱中，培養5天後，進行MTT染色。
[0035]4.MTT染色試驗:MTT試驗的原理是，黃色的MTT被代謝旺盛的活細胞線粒體脫氫酶還原成藍色的forma結晶，溶解後可用分光光度計測量光密度(OD)值，其蘭色越深，OD值就越高，反映出活細胞的量就越多，因而可求出藥物對病毒感染細胞的保護率。
[0036]I)用多頭加樣器向細胞板各孔加入40ulMTT溶液，加蓋置於避光的37°C 5% CO2孵箱中培養2小時。
[0037]2)從培養箱中取出細胞板，用8道加樣器從每孔中移去200ul混合液，注意吸取時不得帶出下部含有forma結晶的MTT細胞部分。
[0038]3)用多道加樣器向各孔中加入IOOul 二甲基亞碸(DMS0)，以溶解forma結晶，輕搖10分鐘，使結晶完全溶解。
[0039]4)用酶標儀以550nm和620nm雙波長讀取吸收值(0D)，列印出結果。
[0040]5)結果計算:首先分別計算出各稀釋度OD均值和標準差，再以下式計算各稀釋度藥物對HIV感染細胞的保護率:
感染給藥OD — HIV感染對照OD
保護率=------X 100%
細胞對照OD — HIV感染對照OD達到50%保護的劑量，為50%有效劑量(ED5tl),或50%有效濃度(EC5tl)。關於ED5tl或EC5tl的計算，可根據各稀釋度的保護率，利用正規機率單位法(Bliss法)計算ED5tl或EC5tlDE的統計程序求出。對病毒感染細胞避免發生細胞病變(CPE)的保護率，就是對病毒感染細胞發生CPE的抑制率，即抑制率=保護率。藥物對細胞毒性CC5tl,的計算同EC5tl,只是上述保護率公式中的HIV感染對照OD值應代入0.實驗結果
一、艾力康對MT-4細胞的毒性作用
按上述方法，將艾力康用1640液稀釋若干濃度，測定其對實驗所用MT-4細胞的50%毒性濃度(CC5tl),結果如表1。
[0041]二、艾力康對HIV-1感染細胞的保護作用
將艾力康用1640液配製成亞毒性濃度以下的若干個濃度，進行HIV-1實驗。方法如上所述，結果見表2.小結
艾力康為中草藥大複方，以上實驗結果顯示，用Bliss法求得該藥對HIV-1 50%有效濃度即半數有效濃度(EC5tl)為403.0457ug/ml，在此濃度以上對HIV-1感染細胞的保護率即對HIV-1的抑制率大於70%，其治療指數(TI)為6.767 ;與陽性對照藥AZT相比，該藥對愛滋病病毒HIV-1有較好的抑制作用。
[0042]中國中醫研究院基礎理論研究所 2005年9月21日
【權利要求】
1.一種治療愛滋病的組方:「艾力康膠囊」其特徵在於主要由下述草藥或由下述草藥的水和醇提取物作活性成分製成: [1]靈芝孢子粉30g.[2]紫花地丁60g.[3]天花粉60g.[4]忍冬藤60g.[5]紫草60g.[6]夏枯草60g.[7]穿心蓮60g.[8]黃連60g.[9]仙靈脾60g.[10]半枝蓮30g.[11]乾薑30g.[12]白花蛇草30g.[13]連翹30g.[14]重樓30g.[15]人參15g.[16]黃芪60g.[17]丹參20g.[18]當歸20g.[19]五味子20g.[20]熟地60g [21].玫瑰花60g [22].山萸肉60g [23].蟲草15g
[24]連翹30g [25]肉桂30g 上述草藥，其特徵在於:醇提取，所用醇為乙醇，濃度為5-95%。
2.上述草藥，其特徵在於:可以加入保健品或藥品中可接受的賦型劑製備成劑型。
3.上述草藥，其特徵在於:該劑型可以是片劑、口服液、顆粒劑、膠囊劑、煎膏劑、滴丸劑、丸劑、散劑中的任意一種。
4.根據7所述草藥的製備工藝，如下: 按組方藥量提取草藥原料。
5.提取濃縮: 【1】用濃度為5-95%乙醇或6-10倍量水對上述草藥提取，得到提取液加入賦形劑，製成各種劑型。
6.【2】草藥原料加6-10倍水泡30-60分鐘後，加熱煎煮3次，每次0.4-2小時，過濾，合併濾液並濃縮，冷卻後離心除雜備用，濃縮液加入輔料，製成所需製劑。
7.將除雜後濃縮液加入輔料，製成製劑。
【文檔編號】A61K9/48GK103830708SQ201410089536
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年3月12日 優先權日:2014年3月12日
【發明者】徐燾 申請人:徐燾