一種鵝膽提取物及其製備方法及其藥物用途的製作方法

2023-05-23 16:28:41 1

專利名稱：一種鵝膽提取物及其製備方法及其藥物用途的製作方法
技術領域：
本發明屬於中藥領域，尤其指鵝膽提取物及其製備方法及其藥物用途。

背景技術：
膽汁在我國醫藥上的應用，歷史悠久。早在東漢時期，我國第一部藥學專著《神農本草經》中就記載了一種鯉魚膽。古代著名醫學家張仲景在《傷寒論》中記載了豬膽治療疾病。明代李時珍的《本草綱目》中收載了31種。清代趙學敏的《本草綱目抬遺》中增收了2種。現代新出版的《中藥大辭典》中記載了35種，如雞膽、鵝膽、牛膽、羊膽、豬膽、狗膽、熊膽等都列入了《中藥大辭典》(上海科學技術出版社，2006.3)。《中藥大辭典》載鵝膽汁的成分與雞膽汁相似，主要有鵝去氧膽酸(CDCA)和膽酸(CA)等。CDCA有利膽、溶解膽結石、促進脂肪消化和吸收，止咳祛痰平喘、降血脂、抗高血壓和抗菌等作用。CA有中樞抑制、強心、降壓、利膽、止咳祛痰平喘、抗炎和抗過敏、抗菌和抗病毒等作用。但關於鵝膽的現代研究極少。


發明內容
本發明提供一種鵝膽提取物及其製備方法及其藥物用途，用於清熱解毒、保肝、提高免疫。本發明鵝膽提取物是由下列方法得到的 取鮮鵝膽，去掉膽皮後，過濾，收集濾液，加50-95％食用乙醇至50-70％濃度，2-24℃下沉澱5-48小時，過濾，收集濾液得鵝膽汁原液，回收乙醇，濃縮，乾燥，得鵝膽提取物。
本發明的鵝膽提取物在製備清熱解毒、保肝、提高免疫的藥物中的應用。
本發明用現代的提取工藝製得的鵝膽汁具有明顯激活，增強小鼠的網狀內皮系統功能，可提高機體非特異性免疫功能，有清熱解毒、保肝、提高免疫有作用。本發明口服每瓶5ml，口服一次一瓶，一日3次。

具體實施例方式 實施例1 取鮮鵝膽，去掉膽皮後，過濾，收集濾液，加50％食用乙醇至50％濃度，2℃下沉澱5小時，過濾，收集濾液得鵝膽汁原液，回收乙醇，濃縮，乾燥，得鵝膽提取物。
實施例2 取鮮鵝膽，去掉膽皮後，過濾，收集濾液，加75％食用乙醇至60％濃度，13℃下沉澱25小時，過濾，收集濾液得鵝膽汁原液，回收乙醇，濃縮，乾燥，得鵝膽提取物。
實施例3 取鮮鵝膽，去掉膽皮後，過濾，收集濾液，加95％食用乙醇至70％濃度，24℃下沉澱48小時，過濾，收集濾液得鵝膽汁原液，回收乙醇，濃縮，乾燥，得鵝膽提取物。
下面結合藥效學實驗進一步說明本發明的藥物作用。
試驗材料 一、藥物 鵝膽提取物由實施例2方法獲得，陽性對照藥護肝片由哈爾濱世一堂製藥廠生產每片重0.35g(含提取物0.25g/片)，批號011128，試驗時用蒸餾水配製所需濃度，對照組給予等體積蒸餾水。
二、動物 小鼠，昆明種，雌雄各半，體重25±2g每組12-15隻，由山西省中醫院研究院實驗動物室繁殖提供。
三、其他材料，均為常規選購。
方法與結果 一、對小鼠四氯化碳急性肝損傷的保護作用 將小鼠隨機分為六組，分設空白對照組、四氯化碳模型組、鵝膽提取物高、中、低劑量組及陽性藥護肝片對照組。各給藥組均為灌胃給藥(空白對照組、模型組給同體積水)，每日一次，連續給藥前10小時，除空白對照組外，其餘各組均腹腔注射0.2％CCl4豆油溶液0.2ml/20g，其後20小時，由眼底靜脈叢取血，分離血清，以比色法測血清丙氨酸氨基轉移酶(ATL)，穀草轉氨酶(COT)含量，結果進行統計學處理。同時將各組動物處死，取肝臟，鏡下觀察各組動物肝臟損傷程度，見表1。
表1 鵝膽提取物對CCl4中毒小鼠血清ALT GOT含量的影響 注同模型組相比**P＜0.01 *P＜0.05 表1結果表明，模型組給四氯化碳後血清ALT、GOT均明顯升高(同空白對照組相比)。而各給藥組同模型組相比，血清ALT含量均明顯降低，但對GOT無明顯影響。另外，鵝膽提取物中劑量組與護肝片組相比(相同劑量)降低谷丙轉氨酶強度基本相同，無顯著性差異。
經鏡下觀察，空白對照組肝小葉結構完整，胞核圓形、清晰，核膜完整，肝細胞以中央靜脈為中心呈放射狀排列，均未見異常，模型組肝小葉結構紊亂，肝細胞嚴重壞死，大部分核溶解，線粒體腫脹，基質疏鬆，胞漿中出現大量空泡。鵝膽提取物各組及護肝片組與模型相比，肝小葉結構紊亂，程度同模型組基本相同，肝細胞壞死程度有所減輕，線粒體腫脹程度及基質疏鬆程度亦有所減輕。
實驗結果表明，鵝膽提取物與原劑型對四氯化碳引起的小鼠肝損傷的保護作用。
二、對D-半乳糖胺鹽酸鹽急性肝損傷的保護作用 動物分組，給藥劑量、給藥時間均同實驗一。致肝損傷藥物選用D-半乳糖胺鹽酸鹽，小鼠按600mg/kg腹腔注射(10％濃度，PH值為7.0)，注射後30小時各組動物取血，測血清中丙氨酸基轉移酶和穀草轉氨酶含量，結果進行統計學處理，見表2。
表2 鵝膽提取物對D-半乳糖胺中毒小鼠血清ALT、GOT的影響 注同模型組相比**P＜0.01 *P＜0.05 實驗結果表明，模型組同空白對照組相比，小鼠給予D-半乳糖胺後血清ALT明顯升高，GOT亦有升高趨勢，但不明顯。各給藥組分別同模型組相比，可使ALT明顯降低，鵝膽提取物呈一定的量效關係，鵝膽提取物中劑量組與護肝片組相比無明顯性差異，兩者降低ATL作用基本相同。另外，各給藥組對GOT均無明顯的影響。
三、對小鼠單核吞噬細胞功能的影響 取小鼠72隻，隨機分為六組，每組12隻，雌雄各半。除空白對照組外，其餘六組均腹腔注射氫化可的松25mg/kg，同時各給藥組按表3劑量灌胃給藥，每日一次，連續給藥7天(對照組、模型組給同體積水)。最後一次給藥後3小時，由尾靜脈注射印度墨汁1ml/kg，注射後1分鐘，5分鐘分別從眼眶靜脈取血20ul，溶於2ml0.1％Na2CO，溶液中，在波長650nm下測定吸收度。最後將小鼠處死，稱定肝、脾重量，計算吞噬指數K值和吞噬活性a值，結果進行統計學處理，見表3 表3 鵝膽汁對小鼠單核吞噬細胞功能的影響 注同模型組相比**P＜0.01 *P＜0.05 實驗結果表明，空白對照組同模型組(氫化可的松組)相比，可使K、a值明顯降低，各給藥組同模型組相比，可對抗由氫化可的松引起的K值降低，並可達到正常水平(同空白對照組相比無明顯性差異)。鵝膽汁高劑量組使a值明顯升高。
四、清熱作用 試驗目的 觀察鵝膽汁對發熱動物的解熱作用 受試藥物 鵝膽提取物由實施例2方法獲得。
動物 紐西蘭純種家兔，性別雄性，體重1.6～2.2kg，每組家兔12隻。
實驗方法選擇 選擇體內解熱試驗。以傷寒、付傷寒甲乙三聯菌苗為致熱劑，蘭州生化製藥廠。批號020108 試驗主要步驟 選擇體溫在33℃～38.9℃紐西蘭純種家兔60隻供實驗用。隨機分成5組即生理鹽水組、鵝膽提取物三組高、中、低劑量、阿斯匹林組，耳靜脈注射三聯菌苗0.8ml/kg，待動物體溫升高差值達0.8℃後，鵝膽汁三組分別灌胃5.4g/kg、2.8g/kg、1.4g/kg鵝膽汁，阿斯匹林組灌胃0.37g/kg阿斯匹林，生理鹽水組灌胃5ml/kg生理鹽水，，每隔1小時測肛溫一次，以不同時間所測肛溫與基礎肛溫之差值為體溫變化的指標。動物給藥後反應 觀察指標家兔給藥後肛溫變化。
觀察時間給藥30分鐘計時，共觀察5小時，每隔1小時測肛溫一次。
劑量設置3個劑量組，大劑量組4ml/kg、中劑量組2ml/kg、小劑量組1ml/kg。
[給藥方法]灌胃給藥，給藥次數1次。
[試驗對照]空白對照為生理鹽水。
陽性對照藥物阿斯匹林，批號010802，西北第二合成藥廠。給藥劑量0.37g/kg。氯丙嗪，批號010425，西安製藥廠。給藥劑量25mg/kg。
[試驗結果] 鵝膽提取物4ml/kg、2ml/kg和1ml/kg三組對致熱家兔在給藥後3小時均產生顯著降溫作用，與生理鹽水組相比差異顯著(P＜0.05)，阿斯匹林組降溫作用與生理鹽水組相比差異顯著(P＜0.01)，其降溫過程比鵝膽汁快，且作用強，兩者相比差異顯著(P＜0.01)見表2。
表2 鵝膽提取物對致熱劑所致家兔體溫的影響
與生理鹽水組相比*P＜0.05 **P＜0.01 結論 在本實驗條件下，兩種動物、兩種方法解熱實驗表明鵝膽汁能顯著降低傷寒，付傷寒甲乙三聯菌苗所致家兔體溫的升高，其4ml/kg和2ml/kg為解熱有效劑量但解熱作用與速度弱於0.37g/kg的阿司匹林。1ml/kg劑量的鵝膽汁無解熱作用。
上述結果說明，鵝膽汁具有明顯激活，增強小鼠的網狀內皮系統功能，可提高機體非特異性免疫功能，有解熱作用。
製劑 1、片劑取鵝膽提取物100g，加入澱粉60g、乳糖30g、羥丙基纖維素1.25g，製成顆粒，乾燥，整粒，加入滑石粉5g和硬脂酸鎂0.5g混合均勻，製成1000片，包薄膜衣，即得。一日三次，一次2片。
2、膠囊將鵝膽提取物100g粉碎，加入微粉矽膠和糊精按4∶1組成的複合輔料100g，制粒，混勻，裝入膠囊。一日三次，一次2粒。
3、顆粒劑取鵝膽提取物100g，加入澱粉60g、蔗糖30g、羥丙基纖維素1.25g，製成顆粒，乾燥，整粒，裝袋1000g即得。一日三次，一次一袋。
權利要求
1.一種鵝膽提取物，其特徵在於它是由下列方法製得的取鮮鵝膽，去掉膽皮後，過濾，收集濾液，加50-95％食用乙醇至50-70％濃度，2-24℃下沉澱5-48小時，過濾，收集濾液得鵝膽汁原液，回收乙醇，濃縮，乾燥，得鵝膽提取物。
2.如權利要求1所述的鵝膽提取物的製備方法。
3.如權利要求1所述的鵝膽提取物在製備清熱解毒、保肝、提高免疫的藥物中的應用。
全文摘要
本發明涉及一種鵝膽提取物及其製備方法及其藥物用途，屬於中藥領域。取鮮鵝膽，去掉膽皮後，過濾，收集濾液，加50-95％食用乙醇至50-70％濃度，2-24℃下沉澱5-48小時，過濾，收集濾液得鵝膽汁原液，回收乙醇，濃縮，乾燥，得鵝膽提取物。本發明的鵝膽提取物在製備清熱解毒、保肝、提高免疫的藥物中的應用。本發明用現代的提取工藝製得的鵝膽汁具有明顯激活，增強小鼠的網狀內皮系統功能，可提高機體非特異性免疫功能，有清熱解毒、保肝、提高免疫有作用。
文檔編號A61P1/16GK101810643SQ20101016479
公開日2010年8月25日 申請日期2010年5月7日 優先權日2010年5月7日
發明者李平亞, 劉傳貴, 金立群, 王福文, 王文杰, 閆智力, 張廣民 申請人:吉林華康藥業股份有限公司