一種檢測樣本的裝置製造方法

2023-05-23 21:40:11 1

一種檢測樣本的裝置製造方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種檢測樣本的裝置，包括，試紙條，試紙條包括樣本墊、標記墊和檢測墊，標記墊位於樣本墊的下遊，檢測墊位於標記墊的下遊；其中，該檢測樣本的裝置還包括捕獲墊，該捕獲墊位於試紙條的上遊並與試紙條液體相流通；該捕獲墊與試紙條連接或不連接。本實用新型的檢測樣本的裝置因捕獲墊及捕獲墊上的抗體分為兩部分並分開，增加了抗體與樣本中被分析物的結合的時間和空間，從而使結合更為充分，特別是針對特殊的樣本，排除的假陽性的可能，提高了檢測的準確性。
【專利說明】一種檢測樣本的裝置

【技術領域】
[0001] 本實用新型涉及檢測樣本的裝置，特別是用於檢測樣本的試紙條。

【背景技術】
[0002] 利用免疫結合反應原理來檢測樣本中是否存在被分析物質的這一技術被廣泛用 在各個領域。可以用它來檢測各種生物樣本（唾液，血液，尿液，血清，汗液等等）的被分析 物質來監測疾病和人類的健康狀況（早孕,腫瘤,傳染病,毒品等等）。這種檢測技術的根本 原理是建立在免疫分子之間具有特異結合的性能，例如抗體與抗原，半抗原/抗體，生物素 與抗生物素等等。另外，很多這樣的檢測都可以在固體介質上完成，例如常用的橫向流動試 劑條，玻璃或塑料多孔盤中，免疫層析裝置等等。通常，在免疫特異結合分子上可以再結合 一些固體顆粒或者化學物質，這樣可以通過肉眼或其他儀器設備來定性，定量或半定量的 得出檢測結果。這種固體顆粒可以是帶顏色的膠體顆粒（乳膠或金顆粒），這種化學物質可 以是帶有發色基團的物質，這些物質在其他合適的條件下可以發出特定波長來顯示檢測結 果。
[0003] 利用這些原理的檢測試劑條或裝置在現有技術中都可以找到，例如如下一些 專利描述的試劑條或含有試劑條的裝置：US 4857453 ;US 5073484 ;US 5119831;US 5185127 ；US 5275785 ；US 5416000 ；US 5504013 ；US 5602040 ；US 5622871 ；US 5654162 ； US 5656503 ；US 5686315 ；US 5766961 ；US 5770460 ；US 5916815 ；US 5976895 ；US 6248598 ；US 6140136 ；US 6187269 ；US 6187598 ；US 6228660 ；US 6235241 ；US 6306642 ； US 6352862 ;US 6372515 ;US 6379620 ;和 US 6403383。
[0004] 免疫檢測通常包括兩種原理，三明治法和競爭法，其中用競爭方法來檢測樣本中 的半抗原小分子物質最為常見。利用競爭法檢測的方法和試劑以及檢測裝置在美國專利 US4235601 ;US4442204，US5208535，US5229073裡有詳細的描述。這些裝置都是描述在檢測 區域上或結果讀取區域上沒有顏色變化或沒有顏色線條出現的時候，檢測結果判為陽性， 表示檢測樣本可能存在被分析物質，相反，當檢測區域或結果讀取區域上出現顏色變化或 者有顏色線條出現的時候，檢測結果判為陰性，表示檢測樣本中可能不存在被分析物質。
[0005] 在一些檢測裝置中，樣本處理區域與試紙條分離，比如中國專利 CN200610052628. 1中描述的一種檢測裝置，包括一個第二試劑區域。該第二試劑區域與試 紙條分離，提前與樣本接觸，使樣本中的被分析物與其抗體能夠充分的結合；然後，被處理 過的樣本再流向試紙條進行檢測。
[0006] 在實際的操作中，這種檢測裝置存在以下問題：對於粘稠或著含水量低泡沫多的 唾液樣本無法將最前期捕獲墊（第二試劑區域）中的抗體完全進行洗脫下來，即樣本無法 與捕獲墊上的抗體進行充分的結合，導致沒有足夠量的抗體和標記墊中的抗原結合，因此 無法顯色，從而造成假陽性。 實用新型內容
[0007] 為了解決這些問題，本實用新型提供一個改進的檢測裝置以及使用該改進的裝置 的方法，通過改進的檢測裝置和方法能夠使樣本中的被分析物與捕獲墊上的特異結合的分 子（抗體）更充分的結合，從而有效的克服假陽性的問題，提高產品檢測的準確率。
[0008] -方面，本實用新型所提供的一種檢測樣本的裝置，包括，試紙條，試紙條包括樣 本墊、標記墊和檢測墊，標記墊位於標記墊的下遊，檢測墊位於標記墊的下遊；其特徵在於， 該檢測樣本的裝置還包括捕獲墊，所述的捕獲墊還包括與被分析物質不相關的特異結合分 子對之一種分子以及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子，該捕獲墊位於試 紙條的上遊並與試紙條液體相流通；該捕獲墊可以與試紙條連接或不連接。
[0009] -個優選的實施方式中，該捕獲墊包括第一捕獲墊和第二捕獲墊；第二捕獲墊上 的特異結合被分析物的分子以及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子的含 量為第一和第二捕獲墊總量的15% -50%。
[0010] 更為優選的方式中，第一捕獲墊位於第二捕獲墊上遊，二者不相連接，但液體相連 通。
[0011] 一個具體的實施方式中，第二捕獲墊位於試紙條的上遊，二者並液體相連通。此 時，第二捕獲墊與試紙條可以相連接，也可以不相連接。
[0012] 捕獲墊包括兩個，並且不相連接，使樣本流過的時間加長，即在捕獲墊上的總停留 時間加長。當捕獲墊上包含有與樣本中被分析物發生反應的試劑時，能夠使被分析物與試 劑有更充分的時間和空間進行結合。
[0013] 一些實施方式中，第二捕獲墊位於試紙條的樣本墊的上遊，與樣本墊相連接。
[0014] 一個具體的實施方式中，第二捕獲墊為樣本墊的延長部分。
[0015] 另一些實施方式中，捕獲墊材質為聚酯纖維膜或玻璃纖維膜。
[0016] 優選的實施方式中，第一捕獲墊材質為聚酯纖維膜；第二捕獲墊材質為玻璃纖維 膜。
[0017] 本實用新型還提供一種檢測樣本的試劑盒，包括：檢測樣本的裝置和收集樣本的 裝置，其中，檢測樣本的裝置包括試劑條，所述的試紙條包括樣本墊、標記墊和檢測墊，標記 墊位於樣本墊的下遊，檢測墊位於標記墊的下遊；其中，收集樣本的裝置包括可以吸收液體 樣本的收集頭；其特徵在於，所述的檢測樣本的裝置中還包括捕獲墊，捕獲墊位於試紙條的 上遊並與試紙條液體相流通；該捕獲墊可以與試紙條連接或不連接。
[0018] 優選的，捕獲墊包括第一捕獲墊和第二捕獲墊；第一捕獲墊位於第二捕獲墊上遊， 二者不相連接但液體相流通；第二捕獲墊位於試紙條的樣本墊的上遊，二者相連接並流體 相連通；第一捕獲墊和第二捕獲墊上包括特異結合被分析物的分子以及與被分析物質不相 關的特異結合分子對之一種分子。
[0019] 一些具體的實施方式中，第二捕獲墊上的特異結合被分析物的分子以及與被分析 物質不相關的特異結合分子對之一種分子的含量為第一和第二捕獲墊總量的15% -50%。
[0020] 在第一捕獲墊和第二捕獲墊上的用於與被分析物結合的試劑（特異結合被分析 物的分子以及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子）具有一定的配比後，能 夠與樣本中的被分析物進行更充分的反應。一些優選的實施方式中，。第二捕獲墊上的特 異結合被分析物的分子以及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子的含量為 第一和第二捕獲墊總量的20% -35%。
[0021] 一些實施方式中，檢測墊上包括一種固定不動的、與捕獲墊上被分析物質不相關 的特異結合分子對之另一種分子。
[0022] 另一些實施方式中，第一捕獲墊上與第二捕獲墊上的特異結合被分析物的分子包 括被分析物質的第一抗體；標記墊包括被分析物的第二抗體。
[0023] 優選的，所述的與被分析物質不相關的特異結合分子對選自於下列分子對之一： 生物素/親合素（biotin/avidin);生物素/鏈黴親和素（biotin/streptavidin);若丹 明 / 若丹明的抗體（rhodamine/anti-rhodamine);鼠 IgG/ 鼠 IgG 的抗體（Mouse IgG/ anti-mouse IgG)〇
[0024] 包含在捕獲墊上的試劑（特異結合被分析物的分子以及與被分析物質不相關的 特異結合分子對之一種分子）是被處理並固定在捕獲墊上的，當液體樣本被添加在捕獲 墊上並流過捕獲墊時，被固定處理在捕獲墊上的試劑與被分析物結合後可以隨液體一起流 動。其中，試劑被處理在捕獲墊上方式多樣。一些具體的實施方式中，特異結合被分析物的 分子以及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子被處理在整個的第一捕獲墊 和第二捕獲墊上。這種方式中，能夠使被分析物與試劑進行充分的反應。
[0025] 另一些優選的實施方式中，特異結合被分析物的分子以及與被分析物質不相關的 特異結合分子對之一種分子被處理在整個的第一捕獲墊上；特異結合被分析物的分子以及 與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子以線性排列的方式被處理在第二捕獲 墊的一條線上。第二捕獲墊上的線性排列的試劑排列更集中，使所有的樣本都能夠流經線 性處進行充分的液體接觸，使結合更為充分，從而也更有效的方式了產品的假陽性。
[0026] 另一方面，本實用新型還提供一種檢測液體樣本中是否存在被分析物質的方法， 包括：提供一種檢測樣本的裝置，該檢測裝置包括試劑條和捕獲墊，所述的試劑條試紙條包 括樣本墊、標記墊和檢測墊，標記墊位於樣本墊的下遊，檢測墊位於標記墊的下遊；捕獲墊 包括第一捕獲墊和第二捕獲墊；第一捕獲墊位於第二捕獲墊上遊，二者不相連接但液體相 流通；第二捕獲墊位於試紙條的樣本墊的上遊，二者相連接並流體相連通；其特徵在於：向 第一捕獲墊上添加液體樣本，讓該液體樣本先與第一捕獲墊上的試劑反應30秒-60分鐘 後；然後讓液體樣本依次流到第二捕獲墊和試紙條上的樣本墊、標記墊、檢測墊並與各個墊 上的試劑反應完成檢測；讀取檢測結果。
[0027] -些實施方式中，捕獲墊上的試劑包括特異結合被分析物的分子以及與被分析物 質不相關的特異結合分子對之一種分子；該分子和所述的特異結合被分析物質的分子相連 或結合併可以隨液體一起流動。
[0028] -些優選的實施方式中，第二捕獲墊上的特異結合被分析物的分子以及與被分析 物質不相關的特異結合分子對之一種分子的含量為第一和第二捕獲墊總量的15% -50%。
[0029] 另一些優選的實施方式中，向第一捕獲墊添加液體樣本後，讓液體樣本和第一捕 獲墊上的試劑反應30秒鐘-30分鐘。
[0030] 有益效果
[0031] 本實用新型的檢測樣本的裝置因捕獲墊及捕獲墊上的抗體分為兩部分並分開，增 加了抗體與樣本中被分析物的結合的時間和空間，從而使結合更為充分，特別是針對特殊 的樣本，排除的假陽性的可能，提高了檢測的準確性。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0032] 圖1為普通試紙條的分解結構示意圖；
[0033] 圖2為普通試紙條的俯視圖；
[0034] 圖3為本實用新型的改進前的檢測樣本的裝置的結構示意圖；
[0035] 圖4為本實用新型的改進後的檢測樣本的裝置的結構示意圖；
[0036] 圖5為本實用新型一個具體方案的檢測裝置檢測前和檢測後結果示意圖；
[0037] 圖6為本實用新型另一個具體方案的檢測裝置檢測前和檢測後結果示意圖；
[0038] 圖7為本實用新型另一個具體方案的檢測裝置檢測前和檢測後結果示意圖；
[0039] 圖8為本實用新型包含改進後檢測樣本的裝置的檢測盒的分解示意圖；
[0040] 圖9為圖8檢測盒的一個部件的剖面示意圖。
[0041] 附圖標記說明：
[0042] 100, 300試劑條；101樣本墊；102標記墊；103,檢測墊；132檢測結果線；133檢測 結果控制線；104吸水墊；105支撐片；210捕獲墊；310第一捕獲墊；320第二捕獲墊；400 檢測裝置；500收集裝置；501收集手柄；502收集頭；4011第一收集腔；4012第二收集腔； 401收集腔；4011-1，4011-2第一收集腔的通孔；403,403-1，403-2密封圈；406樣本導入區 域；406-1樣本導入通孔；3101粘貼端；3102試劑端；404本體；4041讀取窗口；確認腔407 ; 4071底座；4073導出通孔；4072塞子；4043上板；4045下板。

【具體實施方式】
[0043] 下面對本實用新型涉及的結構或這些所使用的技術術語做進一步的說明。
[0044] 試紙備100
[0045] 一般的試劑條，如圖1和圖2所示，試劑條100包括樣本接受區域和標記區域以及 檢測區域，檢測區域包括一種特異結合分子。更優化的試劑條還包括位於檢測區域下遊 的吸水區域，樣本可以沿著箭頭所指的方向在試劑條上流動。在樣本接受區域上包括完成 反應所必須的物質，例如一些緩衝試劑、預處理樣本試劑等等；在標記區域包括螢光標記物 質，膠體金標記顆粒，或以著色乳膠體標記顆粒，還可以是水溶性標記物質，這些標記物質 可以連接抗體、抗原、半抗原或者被分析物類似物質等等，在檢測區域上包括固定不動的特 異結合分子，通過特異結合分子可以在檢測區域上出現顏色變化來表示樣本中是否存在被 分析物質。在檢測區域的下遊還可以包括檢測結果控制區域133。試劑條可以由下列部件 組成，樣本墊101和標記墊102,檢測墊103,吸水墊104,這些材料被組裝在支撐片105上 組成整個試劑條100(如圖1);其中在檢測墊103上包括檢測區域132,優先的方案是在檢 測區域的下遊還包括檢測結果控制區域133。液體樣本可以沿著箭頭所指的方向從樣本墊 101順次經過標記墊102、檢測墊103最後到達吸水墊104。組成試劑條的各個部件可以是 由吸水材料構成，通常，檢測墊103可以為硝酸纖維素膜、醋酸纖維素膜或者尼龍膜之一構 成。這些構成試劑條的部件和材料以及在這些部件上處理一些常用的化學試劑和處理方法 都是現有技術公開的。
[0046] 捕獲墊210
[0047] 捕獲墊210上包括可以隨液體流動的特異結合被分析物質的分子，該捕獲墊210 位於試劑條100的上遊並和試劑條100分離。如圖3所不的一個方案，捕獲墊210位於試 劑條100的樣本墊101的上遊，液體樣本先流過捕獲墊210然後到達試劑條100上的樣本 墊上101完成整個檢測。
[0048] 檢測裝置400
[0049] 如圖8,9所示，檢測裝置400包括本體404和樣本收集腔401，其中試劑條100, 300 位於本體404中，捕獲墊位於樣本收集腔401中；捕獲墊和試劑條處於液體流通狀態。這裡 所說的"液體流通狀態"是指液體可以從收集腔401流到試劑條上，這種流動可以由於液體 本身的重力作用而流動，也可以經過收集腔401和試劑條300之間開有通孔而流動，同時在 收集腔和試劑條之間還可以安裝上一些引流結構，這樣可以讓液體更加順暢的從收集腔流 到試劑條上。更具體的講，本體404上包括讀取窗口 4041和樣本導入區域406,樣本導入 區域406包括樣本導入通孔406-1等，試劑條上的檢測區域和本體404中的讀取窗口 4041 對應，試劑條的樣本接受區域（樣本墊）和樣本導入通孔對應。通過樣本導入通孔406-1 流入的樣本可以流到試劑條上的樣本接受區域然後到達檢測區域完成整個檢測反應。收集 腔401包括第一收集腔4011和第二收集腔4012,第一收集腔4011 -端開口用於接納需要 檢測的樣本或者接納帶有樣本的收集裝置，在另一端上開有幾個可以讓液體通過的液體通 孔4011-1，4011-2等（圖9);在液體通孔4011-1的對應位置上有一堅條梁，該梁一端可以 固定在第一收集腔4011的側壁上，另一端向下延伸並穿過液體通孔4011-1，捕獲墊位于堅 條梁上。捕獲墊一端可以固定在堅梁的表面上，另一端可以穿過液體通孔到達第二收集腔 4012的底部，在捕獲墊的一端上包括可以隨液體流動的特異結合被分析物的分子（Yl)和 與被分析物不相關的特異結合分子對（M1/M2)中之一種分子（Ml);該捕獲墊的材料可以是 一些吸水性材料組成，在上面可以處理一些蛋白物質，例如玻璃纖維、濾紙、醋酸纖維等等， 捕獲墊的一端可以被有機無或機膠水粘在堅梁的表面。該捕獲墊也可以膠粘在液體通孔 4011-2中。捕獲墊也可以其它形式存在於收集腔401中，例如捕獲墊可以直接放在第一收 集腔4011的底部，也可以放在第一收集腔底部和第二收集腔底部之間形成的隔離空間裡， 只要捕獲墊放置在收集腔401中，可以讓樣本充分和它接觸就可以了，在收集腔401裡，捕 獲墊可以完全浸泡在樣本裡，也可以部分浸泡在樣本裡。捕獲墊上還可以包括一些其他輔 助試劑，例如緩衝作用的緩衝試劑，一些蛋白分子等等。本領域的一般技術人員結合本實用 新型都容易想到的其他形式或方式都可以作為本實用新型的一個實施例子。第一收集腔 4011和第二收集腔4012組裝成收集腔401 (圖8)。第二收集腔4012包括一端開口，另一端 開有幾個液體通孔，在這些液體通孔的分別安裝有相應的密封圈403,403-1，403-2等。類 似與本裝置的其他具體的結構描述在美國專利申請2005/0180882A1中有具體的描述。
[0050] 在一個具體的實施例子中，捕獲墊上還可以包括與被分析物質不相關的特異結合 分子對之一種分子M1，該分子和特異結合被分析物質的分子Yl相連或結合。捕獲墊可以位 於試劑條上樣本墊的上遊。更具體的講，就是捕獲墊位於樣本墊201的上遊，樣本墊位於標 記墊202的上遊，標記墊位於檢測墊的上遊；在檢測墊上的檢測區域上固定有特異結合被 分析物質的另一種分子Y2,在標記墊上包括標記物質L和與被分析物質不相關的特異結合 分子對之另一種分子M2 (圖5A)。當進行反應的時候，如果樣本中含有被分析物質A，則被 分析物質A和捕獲墊上的特異結合分子Yl進行結合形成複合物質A-Yl-Ml ;當該複合物質 通過樣本墊到達標記墊上，便形成新的複合物質A-Y1-M1-M2-L ;當新的複合物質流過檢測 墊上的時候，固定在檢測區域上的特異結合分子Y2特異結合新的複合物質，從而在檢測區 域上出現顏色表示陽性結果（圖5B)。
[0051] 在另一個具體的實施例子中，捕獲墊上還可以包括與被分析物質不相關的特異 結合分子對之一種分子M1，該分子和特異結合被分析物質的分子Yl相連或結合，在檢測 墊的檢測區域上固定有與被分析物質不相關的特異結合分子對之另一種分子M2,在標記 墊上包括標記物質L和與特異結合被分析物質的另一種分子Yl (圖6A)。當進行反應的 時候，如果樣本中含有被分析物質A，則被分析物質A和捕獲墊上的特異結合分子Yl進 行特異結合形成複合物質A-Yl-Ml ;當該複合物質通過樣本墊到達標記墊上，便形成新 的複合物質M1-Y1-A-Y2-L ;當新的複合物質流過檢測墊上的時候，固定在檢測區域上的 與被分析物質不相關的特異結合分子對之另一種分子M2特異結合新的複合物質，形成 M2-M1-Y1-A-Y2-L，從而在檢測區域上出現顏色表示陽性結果（圖6B)。
[0052] 在另一個具體的實施例子中，基於競爭法，捕獲墊上包括與被分析物質不相關的 特異結合分子對之一種分子M1，該分子和特異結合被分析物質的分子Yl相連或結合，在檢 測墊的檢測區域上固定有與被分析物質不相關的特異結合分子對之另一種分子M2,在標記 墊上包括標記物質L和被分析物質的類似物質A* (圖7A)。捕獲墊和試紙條上的試劑濃度 可以隨著檢測的要求不同而任意調節；例如在毒品檢測中，需要讓樣本中某種毒品的濃度 大於預先設置的濃度C的時候，讓在檢測區域上不出現顏色線條表示陽性結果，小於濃度C 的時候，在檢測區域上出現顏色線條表示陰性結果。
[0053] 當進行反應的時候，如果樣本中含有被分析物質A，而且大於預先設置的濃度C的 時候，則捕獲墊上的特異結合分子Yl幾乎完全和被分析物質A進行特異結合形成複合物質 A-Y1-M1，此時可能還存在剩餘過量的被分析物質A ;當該複合物質通過樣本墊到達標記墊 上，由於捕獲墊上的試劑Yl-Ml被完全反應，標記墊上的試劑A*-L就不能結合到Yl-Ml上； 當該複合物質A-Yl-Ml流過檢測墊上的時候，固定在檢測區域上的與被分析物質不相關的 特異結合分子對之另一種分子M2特異結合該複合物質，形成M2-M1-Y1-A，從而在檢測區域 上不出現顏色表示陽性結果（圖7B)。
[0054] 相反，如果樣本中含有被分析物質A，而且小於預先設置的濃度C的時候，則捕獲 墊上的特異結合分子Yl只是部分的和被分析物質A進行特異結合形成複合物質A-Y1-M1， 此時可能還存在剩餘過量的Yl-Ml ;當該複合物質通過樣本墊到達標記墊上，標記墊上的 試劑A*-L就和Yl-Ml結合形成M1-Y1-A*-L ;當這些複合物質A-Y1-M1、M1-Y1-A*-L流過檢 測墊上的時候，固定在檢測區域上的與被分析物質不相關的特異結合分子對之另一種分子 M2特異結合該複合物質，形成M2-M1-Y1-A和M2-Y1-A*-L，從而在檢測區域上出現顏色表示 陰性結果（圖7B)。
[0055] 被分析物質不相關的特異結合分子對（M1/M2)包括，但不僅限於此，生物素/ 親合素〇3；1〇1：；[11/^￥1(1；[11)，生物素/鏈黴親和素（13；[01：；[11/81^6口七3￥1(1；[11)，抗體/抗原 (antibody/antigen)(不包括抗被分析物質的抗體和被分析物本身），若丹明/若丹明的抗 體（rhodamine/anti-rhodamine)，老鼠 IgG/ 鼠 IgG 的抗體（Mouse IgG/anti-mouse IgG) 等等。被分析物質A可以是抗體或抗原，Yl和Y2可以是被分析物質上不同位點對應的特 異抗原或抗體分子或者抗體片段。標記物質L包括，但是不局限於此，膠體金顆粒，乳膠顆 粒，水溶性標記物質等等，標記物質和一些特異的抗原、抗體或者其他特異結合分子相連或 者結合的技術是現有公知的技術。當然，在樣本接受區域還可以包括一些調節反應體系條 件的其他化學試劑，例如磷酸緩衝試劑、硼酸緩衝試劑、碳酸緩衝試劑或者其他蛋白、大分 子等等來優化反應體系的。這些優化措施都是本領域一般技術人員結合本實用新型和現有 技術容易想到和實施的。
[0056] 利用上面具體施例子中的裝置可以檢測樣本中低濃度或者小分子物質，因為一些 重要的被分析物質在樣本中的濃度非常底或者被分析物質的分子量很小，利用傳統的檢測 裝置經常由於樣本中的被分析物質濃度很低而不能檢測出或到達臨床意義上的要求。利用 本實用新型的裝置預先把需要和樣本反應的試劑處理在捕獲墊上，一是可以讓樣本和試劑 反應充分，不會因為液體要及時流動而影響反應完成的程度，另一個就是操作者不需要再 另外添加其他的試劑。
[0057] 但在實際的檢測中，上述的包括捕獲墊的檢測裝置針對一些特別粘稠或者含水量 低泡沫多的樣本，比如粘稠的唾液樣本，還是會出現以下的問題：由於樣本的粘度較高，含 水量少，或是呈泡沫狀態，導致樣本在捕獲墊上時不能與捕獲墊上的試劑進行充分的反應， 導致不能將捕獲墊上的試劑（抗體或特異結合的分子）完全結合併隨著樣本流入下遊的試 紙條上，隨後在試紙條的檢測過程中，會導致沒有足夠量的抗體和標記墊中的抗原結合，無 法顯色，從而造成假陽性（尤其是針對競爭法檢測的產品）。
[0058] 要解決這一問題，則需要使樣本中的被分析物能夠充分與捕獲墊上的試劑（特異 結合被分析物的分子Yl以及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子Ml)結合， 一個優選的實施方式中，增加一個捕獲墊，使捕獲墊包括2個，並且2個捕獲墊分開不相連 接，在分開的兩個捕獲墊上分別處理有與樣本中被分析物結合的試劑（Y1，M1)，該試劑的總 量與原先的一個捕獲墊的總量相同。這樣，使樣本先流過第一捕獲墊，與捕獲墊上的試劑進 行充分的反應後，再流經第二捕獲墊，與其上的試劑再進行反應。這樣，在試劑總量相同的 情況下，被分析物與試劑進行結合的時間和空間都均增加，從而使二者的結合更為充分，因 此，在後續的試紙條的檢測過程中，避免了因被分析物攜帶的抗體的不足而無法在檢測區 顯色造成的假陽性。
[0059] -些具體的實施例中，第一捕獲墊310與原先的捕獲墊210形狀相同，區別是在其 上處理的試劑（Yl，Ml等）量減少；並且第一捕獲墊310仍然位於檢測裝置的第一收集腔 401上。第二捕獲墊320位於試紙條上，更為具體的，位於試紙條的樣本墊101上，與樣本墊 101部分搭接，如圖4所示；第二捕獲墊320上處理有另一部分的試劑（YLMl)，樣本先流經 第二捕獲墊320並與其上的試劑進行結合，而後再依次流經試紙條上的樣本墊、標記墊、檢 測墊和吸水墊，完成檢測。
[0060] 在一些具體的實施方式中，第一捕獲墊310與第二捕獲墊320上的試劑含量具有 一定的配比，在一些具體的實施例中，第二捕獲墊上的試劑（特異結合被分析物的分子Yl 以及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子Ml)在試劑總量的15-50%之間。 在這一配比下，樣本中的被分析物與試劑的結合更為充分。另一個更為優選的實施例中，第 二捕獲墊上的試劑（特異結合被分析物的分子Yl以及與被分析物質不相關的特異結合分 子對之一種分子Ml)在試劑總量的20-35%之間。
[0061] 在一個具體的實施例中，為了方便試紙條的生產，第二捕獲墊可以直接與樣本墊 相同，為樣本墊的延長部分。在延長的部分處理有Yl和Ml後，即相當於第二捕獲墊的功能， 起到第二捕獲墊的作用。
[0062] 捕獲墊的材質可以選自於捕獲墊材質為聚酯纖維膜、玻璃纖維膜以及可溪水材質 的濾紙等。第一捕獲墊與第二捕獲墊的材質可以相同，也可以不同。一個優選的實施方式 中，第一捕獲墊材質為聚酯纖維膜；第二捕獲墊材質為玻璃纖維膜。
[0063] 下面用收集唾液來檢測唾液中是否存在毒品來為例來詳細描述如何使用本實用 新型的檢測裝置和檢測盒。如圖8所示，是檢測前的收集階段，第一收集腔4011位於第二 收集腔4012內部，而且第二收集腔上的液體通孔並不是和樣本導入區域406上的樣本導入 通孔406-1相通，而是被樣本導入區域406的底平面密封，為了增加收集腔401和樣本導入 區域306的底平面的密封性，可以在第二收集腔4012的底部的液體通孔對應位置安裝密封 圈。首先收集要檢測的唾液，先用樣本收集裝置500收集需要檢測的唾液樣本，把收集頭 502放入到被檢測者的口中，502由吸水材料組成，例如海綿材料，所以該收集頭可以吸收 需要檢測的唾液樣本。然後把吸有唾液樣本的收集頭502放入到收集腔401中的第一收集 腔4011中，通過轉動收集裝置的手柄501來擠壓收集頭502,這時候收集頭上的唾液樣本就 被擠壓到第一收集腔4011中，並通過液體通孔流入到二收集腔4012中。在這個過程中，由 於第一收集腔4011中的第一捕獲墊310通過液體通孔延伸到第二收集腔4012的底部，在 擠壓樣本的同時，唾液樣本就和第一捕獲墊310上的試劑充分反應，在等到反應合適的時 間後，如 10、20 或 30 秒，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、45、60分鐘後，轉動收集腔401， 讓第二收集腔的液體通孔和液體導入區域上的液體導入通孔相通，液體通孔和液體導入通 孔相通。這個時候，唾液樣本就通過液體導入通孔流到試劑條上，液體首先到達試紙條上遊 端的第二捕獲墊處，液體樣本繼續與第二捕獲墊上的試劑進行充分的結合，而後，液體再流 入到樣本墊上，依次向下遊流動，到達標記墊和檢測墊，最後到達吸水墊，進行檢測反應，如 果唾液中存在一定量的毒品，在試劑條的檢測區域上不出現顏色線條表示陽性結果，相反 就出現顏色線條表示陰性結果，這種在檢測區域上的檢測結果可以通過本體上的讀取窗口 4041觀察結果，讀取窗口 4041上可以是透明的材料覆蓋檢測區域也可以直接讓檢測區域 裸露在外面。唾液樣本還可以通過液體導入通孔進入確認腔407,為了進一步的確認而檢測 唾液樣本的。確認腔407由底座4071和周圍的側壁圍成，進入確認腔的液體可以通過導出 通孔4073取出，導出通孔4073在取樣前被一塞子4072密封。當認為檢測結果需要進一步 通過其他手段，例如用液相色普、氣相色普或其他更精確的儀器來確認檢測結果的時候，移 開塞子4073,從確認腔407取出部分唾液樣本來檢測（如圖8和9)。這裡僅僅是用唾液樣 本作為一個例子來詳細說明如何使用本實用新型的檢測裝置，除了唾液外，還可以是其他 液體樣本，例如血液、尿液、汗液、糞便等等。
[0064] 實施例
[0065] 為了更清楚的闡述本實用新型如何實現，現在以有限的實驗進行說明，這些說明 僅在本實用新型的權利要求的精髓下做有限的舉例，並不構成對本實用新型權利要求的限 制。
[0066] 實驗：用本實用新型改進前後的檢測裝置檢測唾液中是否存在一定濃度的抗焦慮 藥與鎮靜催眠藥（BZO)。
[0067] 第一部分：本實用新型的試劑條和檢測裝置的組裝和部件製作（具有第一和第二 捕獲墊）
[0068] 如圖3所示的試劑條100用來說明本實驗所用本實用新型的試劑條的部件和製作 方法。
[0069] 硝酸纖維素膜的處理。檢測墊103為硝酸纖維素膜（NC)，在硝酸纖維素膜上有兩 條線條，一個是檢測線132,位於檢測線下遊的檢測結果控制線133。在檢測線上固定連接 有IgG的鏈黴親和素（streptavidin-IgG);在檢測結果控制線上固定養抗兔IgG。固定的 方法可以用自動噴膜處理機器來自動處理，其中在處理檢測線條的濃度為1.0毫克/毫升， 稀釋緩衝液體為磷酸緩衝液（PBS);在檢測結果控制線上固定羊抗兔IgG抗體；濃度為1.0 毫克/毫升，稀釋緩衝液體為磷酸緩衝液（PBS)。把處理好的硝酸纖維素膜放在37°C烘箱 裡烘乾即可。
[0070] 標記墊102的處理。標記片為聚脂膜，被膠體金顆粒標記好的帶有耦聯蛋白分BSA 的BZO半抗原被處理在聚脂膜上。處理溶液的OD值為57,稀釋溶液為1倍PBS緩衝溶液， 其中還含有1 %的BSA。在標記片上還處理有膠體金標記的兔IgG抗體。把處理好的標記 片放在37°C烘箱裡烘乾即可。
[0071] 樣本墊101的處理。樣本接受片為玻璃纖維素膜，在該膜上處理的溶液為： Borax(0.07M/L) ;Tween20(l%) ;Cholic Acid(l%) ;Tris(0.1M)。把處理好的樣本接受 片放在37°C烘箱裡烘乾即可。
[0072] 第一捕獲墊310的處理。捕獲墊包括非吸水性的粘貼端3101和吸水性的試劑端 3102。試劑端的材料為聚酯膜，試劑端處理的化學溶液包括：把連接上生物素（Biotin)的 抗BZO抗體物質被溶解在1倍PBS緩衝溶液中，使最終濃度為I. 0毫克/毫升；其中還含有 1 %的BSA，使處理好的第一捕獲墊上的抗BZO抗體物質含量為0. 0025毫克。把處理好的捕 獲墊放在37°C烘箱裡烘乾即可。然後把含有試劑的聚脂膜小片（3102)粘貼在非吸水性的 小片上（3101)上。
[0073] 第二捕獲墊320的處理。一部分第二捕獲墊在整個捕獲墊上處理化學溶液：把連 接上生物素（Biotin)的抗BZO抗體物質被溶解在1倍PBS緩衝溶液中，使最終濃度為0. 2 毫克/毫升；其中還含有1 %的BSA ;使處理好的第二捕獲墊上的抗BZO抗體物質含量為 0. 0005暈克。另一部分第二捕獲墊，以點噴的方式將0. 2暈克/暈升的抗BZO抗體物質噴 在的第二捕獲墊距一個埠 2mm處的一列線性的位置上。將所有的第二捕獲墊放在37°C烘 箱裡烘乾。
[0074] 最終使第一樣本墊上的抗BZO抗體物質含量與第二捕獲墊上的含量比約為5 :1。
[0075] 試劑條300的組裝。把處理好的各個部件按照圖4所示的樣子組裝，讓第二捕獲 墊（兩種）位於樣本墊的上遊，讓樣本墊位於標記墊的上遊，標記墊位於檢測墊和樣本墊之 間，在檢測墊的下遊放置吸水的濾紙104。這些部件都放置在一個非吸水性的支撐片105 上。
[0076] 檢測裝置的組裝。檢測裝置如圖8,9所示。把第一捕獲墊的粘貼端3101粘貼在 第一收集腔4011上的堅條梁的表面上，另一端3102穿過液體通孔併到達第二收集腔4012 的底部。然後把整個收集腔401安裝在本體404的樣本導入區406的卡環中，並且讓第二 收集腔4012的底部處於被導入區域的底表面密封（圖8)的位置。把帶有捕獲墊的試劑條 300放置在上板4043和下板4045之間，讓試劑條100的檢測區域與讀數窗口 4041對應，樣 本接受區域和液體導入通孔306-1對應。上板和下板扣合為一整體。這樣就組裝成了本實 驗所用的檢測裝置。
[0077] 第二部分：對照試紙條100和檢測裝置400的組裝和製作（具有捕獲墊）。
[0078] 與上面所述的試劑條和檢測裝置相比，對照試劑條與檢測裝置基本與之相同。與 之不同的是，安裝在檢測裝置上的為捕獲墊，同時在試紙條上不具有第二捕獲墊。其中，捕 獲墊210的處理。捕獲墊的試劑端處理的化學溶液包括：把連接上生物素（Biotin)的抗 BZO抗體物質被溶解在1倍PBS緩衝溶液中，使最終濃度為I. 0毫克/毫升；其中還含有1 % 的BSA，使處理好的捕獲墊上的抗BZO抗體物質含量約為0. 003毫克。
[0079] 檢測結果記錄都在加唾液樣本10分鐘後讀取。通常，設定唾液樣本中BZO的濃度 為lOng/ml (納克/毫升）為檢測閾值。檢測閾值的意思就是指如果樣本中的被分析物質 BZO的濃度大於檢測閾值，在理論上，檢測結果應該是陽性，反之，如果被分析物質BZO的濃 度小於檢測閾值，檢測結果為陰性。
[0080] 操作方法：
[0081] 先讓每個檢測裝置處於收集腔401的第二收集腔4012的底部被導入區域406封 閉的狀態。
[0082] 然後加入要檢測的樣本，讓樣本和收集腔401中捕獲墊（第一捕獲墊）上的試劑 反應1分鐘；
[0083] 旋轉收集腔401，讓唾液液體從收集腔中流到試劑條的樣本接受區域並完成反 應；
[0084] 10分鐘後記錄檢測的實際結果。
[0085] 說明：
[0086] Control為改進前的檢測裝置；Lotl為改進後裝置,其中第二捕獲墊整體處理試 齊IJ ;l〇t2為改進後裝置，其中第二捕獲墊線性處理試劑
[0087] 1.利用標準品溶液來比較改進前後檢測裝置的檢測靈敏度。在標準樣本中分別設 置BZO的濃度為Ong/ml (陰性樣本）；30ng/ml，利用各個裝置進行檢測。
[0088]

【權利要求】
1. 一種檢測樣本的裝置，包括，試紙條，試紙條包括樣本墊、標記墊和檢測墊，標記墊 位於樣本墊的下遊，檢測墊位於標記墊的下遊；其特徵在於，該檢測樣本的裝置還包括捕獲 墊，所述的捕獲墊還包括與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子以及與被分析 物質不相關的特異結合分子對之一種分子，該捕獲墊位於試紙條的上遊並與試紙條液體相 流通；該捕獲墊與試紙條連接或不連接。
2. 根據權利要求1所述的檢測樣本的裝置，其特徵在於，該捕獲墊包括第一捕獲墊和 第二捕獲墊；第二捕獲墊上的特異結合被分析物的分子以及與被分析物質不相關的特異結 合分子對之一種分子的含量為第一和第二捕獲墊總量的15% -50%。
3. 根據權利要求2所述的檢測樣本的裝置，其特徵在於，第一捕獲墊位於第二捕獲墊 上遊，二者不相連接，但液體相連通。
4. 根據權利要求3所述的檢測樣本的裝置，其特徵在於，第二捕獲墊位於試紙條的上 遊，二者液體相連通。
5. 根據權利要求4所述的檢測樣本的裝置，其特徵在於，第二捕獲墊位於試紙條的樣 本墊的上遊，並與樣本墊相連接。
6. 根據權利要求5所述的檢測樣本的裝置，其特徵在於，第二捕獲墊為樣本墊的延長 部分。
7. 根據權利要求6所述的檢測樣本的裝置，其特徵在於，捕獲墊材質為聚酯纖維膜或 玻璃纖維膜。
8. 根據權利要求7所述的檢測樣本的裝置，其特徵在於，第一捕獲墊材質為聚酯纖維 膜；第二捕獲墊材質為玻璃纖維膜。
9. 根據權利要求8所述的檢測樣本的裝置，其特徵在於，特異結合被分析物的分子以 及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子被處理在整個的第一捕獲墊和第二 捕獲墊上。
10. 根據權利要求8所述的檢測樣本的裝置，其特徵在於，特異結合被分析物的分子以 及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子被處理在整個的第一捕獲墊上；特異 結合被分析物的分子以及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子以線性排列 的方式被處理在第二捕獲墊的一條線上。
11. 一種檢測樣本的試劑盒，包括：檢測樣本的裝置和收集樣本的裝置，其中，檢測樣 本的裝置包括試劑條，所述的試紙條包括樣本墊、標記墊和檢測墊，標記墊位於樣本墊的下 遊，檢測墊位於標記墊的下遊；其中，收集樣本的裝置包括可以吸收液體樣本的收集頭；其 特徵在於，所述的檢測樣本的裝置中還包括捕獲墊，捕獲墊位於試紙條的上遊並與試紙條 液體相流通；該捕獲墊可以與試紙條連接或不連接。
12. 如權利要求11所述的試劑盒，其特徵在於，捕獲墊包括第一捕獲墊和第二捕獲墊； 第一捕獲墊位於第二捕獲墊上遊，二者不相連接但液體相流通；第二捕獲墊位於試紙條的 樣本墊的上遊，二者相連接並流體相連通；第一捕獲墊和第二捕獲墊上包括特異結合被分 析物的分子以及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子。
13. 如權利要求12所述的試劑盒，其特徵在於，第二捕獲墊上的特異結合被分析物的 分子以及與被分析物質不相關的特異結合分子對之一種分子的含量為第一和第二捕獲墊 總量的15% -50%。
【文檔編號】G01N33/558GK204214874SQ201420360442
【公開日】2015年3月18日 申請日期:2014年7月1日 優先權日:2014年7月1日
【發明者】沈麗荔, 伍欣 申請人:艾博生物醫藥(杭州)有限公司