一種酞胺哌啶酮衍生物的穩定水溶液的製作方法
2023-05-23 16:10:36
專利名稱：一種酞胺哌啶酮衍生物的穩定水溶液的製作方法
技術領域：
本發明涉及酞胺哌啶酮衍生物EM12的非腸道應用形式以及製備酞胺哌啶酮衍生物EM12的方法。這種應用形式可用於治療炎性和血液學-腫瘤學疾病。
由噬菌細胞(如單細胞)引起的原炎性胞質TNF-α(腫瘤壞死因子)和白介素(IL)-12的過量生成，在各種炎性疾病的發病機理中起著重要的作用(Trinchieri 1995，Ann.Rev.Immunol。13251)。
治療這類疾病的一種方法包括，服用免疫調節活性成分以有意識抑制這些原炎性胞質的生成，所述免疫調節活性成分包括如地塞米松或酞胺哌啶酮或酞胺哌啶酮衍生物EM12。而腎上腺皮質類脂醇(如地塞米松)以注射液形式存在，迄今為止還沒有注射液形式的衍生物EM12，所述衍生物EM12具有免疫調節作用。DE 197 43 968.3中提出了酞胺哌啶酮的非腸道應用形式。
酞胺哌啶酮已被證明優於用於治療幾種口糜的傳統免疫抑制劑。其中酞胺哌啶酮可在不導致一般性免疫抑制的情況下，顯示出具有優良效力的疾病的其他實例包括皮膚性紅斑狼瘡、壞疽性膿皮病和Bechet’s綜合症中的泌尿生殖系統潰瘍，以及由HIV感染的潰瘍症，這種潰瘍症在組織上與口瘡性潰瘍並沒有什麼不同，而與多數HIV-相關的黏膜與皮膚損害不同，在該潰瘍症中測定不出微生物病原體。由於與口糜不同，有時也可呈現出主要口瘡尺寸的這種損害可能會存在於整個消化道中，當其位於咽腔或食道中時，它們會使得食物的攝取不同，而且由於其造成的疼痛不同，而使得口服藥物的攝取不同。
在其中口服攝取變得不同或者甚至不能口服攝取的咽喉或食管嚴重潰瘍的情況下，以及在其中嚴重症狀使得口服攝取變得不可預測的與HIV-相關的病理學情況下，非腸道給藥可以提供解決問題的方法。但是，酞胺哌啶酮在水中的低溶解度(Arch.Pharm.321，371(1988))形成了該活性成分的非腸道給藥的障礙。由此並不缺乏試圖研製水溶性應用形式的努力。水溶性酞胺哌啶酮衍生物是從DE 42 11812中得知的，該衍生物的水中溶解度顯示出比酞胺哌啶酮的水中溶解度高得多且適用於非腸道應用。
而且，人們已經建議將酞胺哌啶酮前藥應用於非腸道應用，所述前藥可在生理pH範圍內，以水溶液形式給藥，且無毒害(DE 196 13976)。存在的缺點是，製備上述兩種類型的化合物的成本遠高於製備酞胺哌啶酮的成本。
關於其在含水介質中的溶解度及經歷自發水解的趨勢，由於酞胺哌啶酮衍生物EM12顯示出與酞胺哌啶酮類似的不良性能，所以本發明的潛在目的在於研製這種具有免疫調節作用的酞胺哌啶酮衍生物的水溶性應用形式。進一步的目的是所研製的應用形式應當在其水合溶解形式下穩定，而且應當沒有可能導致毒物學作用的生理學不相容的物化性能。
已經發現，由於EM12具有經歷自發水解的趨勢，所以生產水溶液是行不通的。然而，當水溶液的pH值降至小於或等於5.5的pH範圍時，水解將不會發生。
表1. 酞胺哌啶酮和EM12物質的結構
由此，本發明涉及適用於非腸道應用的，pH小於5.5的水溶液且包含作為構成成分葡萄糖的EM12溶液。根據本發明，EM12以外消旋物或以對映體之一的形式溶解在等滲葡萄糖溶液中。這種類型的溶液可用於非腸道應用，特別適用於靜脈內應用。
EM12具有活性組分含量至少0.2mg/ml的應用形式適合於可注射應用形式。
本發明進一步涉及所述水溶液的製備方法。根據本發明，將EM12加入到pH為4至5的等滲葡萄糖溶液中，震蕩該混合物，直至EM12完全溶解和/或為了縮短製備時間，接著利用超聲波處理，再在無菌條件下過濾。
不論是以快速注入形式給藥，還是以慢速注入形式給藥(10ml/min)，本發明的應用形式均是沒有毒害的。
除了EM12之外，本發明的藥物還包含葡萄糖。其他輔助性物質也可任意地加入到EM12溶液中去。所述的進一步輔助物質及其所使用的量確切地取決於藥物如何進行給藥。
對患者進行給藥的活性成分的量取決於患者的體重、疾病的跡象和嚴重程度，通常為0.1至1mg/kg。
非腸道EM12溶液也可用作罐裝酞胺哌啶酮溶液，用於治療其中發病機理是過多生成TNF-α和JL-12的疾病(還包括腸疾病、皮膚疾病、黏膜疾病和脈管疾病，以及自身免疫性疾病)。進一步地，由於其抗血管遺傳作用，它們也可用於治療血液學疾病和其它腫瘤學疾病。
上述疾病還包括皮膚性炎症(如非典型皮炎、牛皮癬、溼疹)、呼吸道炎症(如支氣管炎、肺炎、支氣管哮喘、ARDS(成年人呼吸窘迫綜合症)、肉狀瘤病、矽肺炎/纖維症)、胃腸道炎症(如胃與十二指腸潰瘍、Crohn’s疾病、潰瘍性結腸炎)，還包括其它疾病，如肝炎、胰腺炎、闌尾炎、腹膜炎、腎炎、口瘡病、結膜炎、角膜炎、眼色素層炎、鼻炎。
免疫性疾病包括如關節炎類疾病(如類風溼性關節炎、與HLA-B27相關的疾病)，也包括多發性硬化症、幼稚型糖尿病和紅斑狼瘡。
進一步的症狀包括膿毒病、細菌性腦膜炎、萎靡不振、拒絕移植反應和移植物抗宿主反應，以及多次輸液綜合症和動脈粥樣硬化。
可以治療的其它疾病包括血液學疾病，如多發性骨髓瘤和白血病，以及其它腫瘤學疾病，如成膠質細胞瘤、前列腺癌和肝癌。
實施例為了製備濃度為200μg/ml的注射液，將於用於注射的350ml 3％葡萄糖溶液(pH4至5)中的70mg外消旋EM12引入到玻璃輸液瓶中。徹底震蕩混合物，利用超聲波處理15分鐘。由於溶解EM12的濃度取決于震蕩強度，也取決於超聲波處理，所以可重複這兩種步驟，直至得到完全溶解。超聲波浴中的水溫最高可達33℃。在無菌條件下，利用孔徑為0.22μm(Millipore S.A.，Molsheim，法國)的Millex GS消毒過的過濾器，將溶液過濾到無菌注射瓶中。溶液在室溫下存放。
最終溶液的pH為5.5。
穩定性測試在2周時間內，將數份溶液重複用作分析樣品。
在2周後，EM12仍然存在且保持其完整的生物藥效力。
免疫調節效力測試為了研究所製備的溶液的免疫調節效力，從末梢血液單核細胞(PBMCs)中分離出人道單核細胞，利用細菌性LPS(脂多糖)活化。通過夾心ELISAs(Biosource Europe，Fleurus，比利時)的方式，測定從細胞培養液得到的上清液中的TNF-α和IL-12的濃度。
表2.由上述實施例製得的EM12溶液對LPS-活化單核細胞的TNF-α和IL12生成的影響
>*％inh.＝在沒有抑制劑的對照組中，抑制TNF-α和IL 12生成的百分數％
權利要求
1.根據專利申請DE 197 43 968.3的，包含用於非腸道給藥的EM12的穩定水溶液，其中EM12溶解於等滲葡萄糖溶液中，且溶液的pH小於或等於5.5。
2.根據權利要求1的穩定水溶液，其特徵在於該穩定水溶液含有含量至少為0.2mg/ml的活性成分。
3.製備權利要求1的穩定水溶液的方法，其特徵在於將EM12加入到pH為4至5的等滲葡萄糖溶液中，震蕩該混合物，直至完全溶解和/或為了縮短製備時間，接著利用超聲波處理，再在無菌條件下過濾。
全文摘要
本發明描述了EM12水溶液,該水溶液適用於非腸道應用形式,特別適用於將EM12以靜脈內形式應用於治療免疫學和血液學－腫瘤學疾病;本發明還描述了製備相應EM12溶液的方法。
文檔編號A61P37/00GK1270027SQ0010259
公開日2000年10月18日 申請日期2000年3月30日 優先權日1999年3月31日
發明者T·格爾曼, H·庫格爾曼 申請人:格呂倫塔爾有限公司