一種微生物液態發酵生產茶色素的方法

2023-05-23 16:09:11

專利名稱：一種微生物液態發酵生產茶色素的方法
技術領域：
本發明涉及一種微生物液態發酵生產茶色素的方法，屬茶葉生產技術領域。
背景技術：
本發明中的茶色素是指由茶葉中以兒茶素為主的多酚類化合物氧化衍生而來的一類水溶性色素混合物，主要由茶黃素(Theaflavins，TF)、茶紅素(Thearubigins，Rs)和茶褐素(Theabromine，TBs)組成。具有調節血脂異常、抗動脈粥樣硬化、抗凝促纖溶、抗脂質過氧化、增強免疫功能、改善微循環、抗腫瘤作用；臨床治療缺血性心腦血管疾病和腫瘤，有良好效果。
目前要得到這類茶色素，主要是從渥堆的紅茶和普洱茶中提取。而現有的紅茶和普洱茶存在生產周期長(30天以上)、易受茶葉生產季節限制等缺點。因此，現有的茶色素提取也就存在這些制約因素。
經文獻檢索，未見與本發明相同的公開報導。

發明內容
本發明的目的在於提供一種生產條件及環境容易控制，且不受茶葉生產季節限制、可實現自動化生產的微生物液態發酵生產茶色素的方法。
本發明依據為由茶黃素、茶紅素和茶褐素組成的茶色素，它們都是茶多酚的氧化產物，均溶於熱水，存在於茶湯中，用乙酸乙酯可以從茶湯中把茶黃素萃取分離出來，但有部分茶紅素也被提取出來，這部分茶紅素可利用其溶於碳酸氫鈉溶液進一步分離除去。另外一部分茶紅素留在水層。利用茶褐素不溶於正丁醇，茶湯用正丁醇萃取後，茶黃素和茶紅素都轉溶到正丁醇中，茶褐素留在水層中。
本發明的微生物液態發酵生產茶色素的方法，其步驟如下a.將曬青綠茶原料粉碎至60-80目，按1-10g∶100-200ml的比例加入蒸餾水，在121℃的溫度下滅菌10分鐘，隨後將一種或多種混合的微生物接種其中，接種量按0.1克/100ml蒸餾水計；密封后進行搖床發酵，發酵溫度為20-35℃，搖床轉速為110r/min，培養時間15天。接種的微生物為市場銷售的能分泌多酚氧化酶的微生物菌種(如酵母菌、黑麴黴、米麴黴)，也可以為本發明人已用於申請專利(申請號分別為200510010941.4、200510010940.x、200510010942.9)的微生物菌種，該菌種在中國微生物菌種保藏中心保藏，黑麴黴的保藏號為CGMCC No.1373，釀酒酵母的保藏號為CGMCC No.1372，米麴黴的保藏號為CGMCC No.1374。
b.茶黃素與茶紅素的分離將發酵物用普通濾紙過濾，得到澄清的發酵液；吸取100ml發酵液，加入100ml醋酸乙酯，在500ml的分液漏鬥中振蕩10分鐘，分層後，將上層的醋酸乙酯和下層的水層分別置於200ml三角瓶中；吸取醋酸乙酯萃取液50ml，加入2.5％NaHCO3水溶液50ml，在200ml分液漏鬥中在轉速為300r/min下振蕩30秒，分層後，將醋酸乙酯層蒸乾，得到茶黃素，將水層蒸乾，得到茶紅素；c.茶褐素的分離吸取50ml澄清的發酵液和50ml正丁醇放入分液漏鬥中，搖振5分鐘，待分層後將上層除去，取下層即水層濃縮、蒸乾後即得到茶褐素。
本發明具有生產條件及環境容易控制，且不受茶葉的生產季節限制等優點，可實現工業化生產。
具體實施例方式實施例1
a.將曬青綠茶原料粉碎至60目，按1g∶100ml的比例加入蒸餾水，在121℃的溫度下滅菌10分鐘，隨後將一種微生物接種其中，接種量按0.1克/100ml蒸餾水計；密封后進行搖床發酵，發酵溫度為20℃，搖床轉速為110r/min，培養時間15天。接種的微生物黑麴黴已在中國微生物菌種保藏中心保藏，黑麴黴的保藏號為CGMCC No.1373；b.茶黃素與茶紅素的分離將發酵物用普通濾紙過濾，得到澄清的發酵液；吸取100ml發酵液，加入100ml醋酸乙酯，在500ml的分液漏鬥中振蕩10分鐘分層後，將上層的醋酸乙酯和下層的水層分別置於200ml三角瓶中；吸取醋酸乙酯萃取液50ml，加入2.5％NaHCO3水溶液50ml，在200ml分液漏鬥中以轉速300r/min振蕩30秒，分層後，將醋酸乙酯層蒸乾，得到0.08克茶黃素，將水層蒸乾，得到0.2克茶紅素；c.茶褐素的分離吸取50ml澄清的發酵液和50ml正丁醇放入分液漏鬥中，搖振5分鐘，待分層後將上層除去，取下層即水層濃縮、蒸乾後即得到0.06克茶褐素。
實施例2基本同實施例1。不同之處為曬青綠茶原料粉碎至70目，取3克曬青綠茶加150毫升蒸餾水，接種0.1克釀酒酵母和黑麴黴，發酵溫度為25℃，得到0.05克茶黃素、0.3克茶褐素，0.8克茶紅素。
實施例3基本同實施例1。不同之處為曬青綠茶原料粉碎至80目，10克曬青綠茶加200毫升蒸餾水，接種米麴黴0.1克，發酵溫度為35℃，得到0.09克茶黃素、0.31克茶褐素，0.42克茶紅素。
實施例4基本同實施例1。不同之處為曬青綠茶原料粉碎至70目，取3克曬青綠茶加150毫升蒸餾水，接種0.1克市場銷售的能分泌多酚氧化酶的微生物菌(釀酒高活性乾酵母)，發酵溫度為25℃，得到0.05克茶黃素、0.3克茶褐素，0.8克茶紅素。
實施例5基本同實施例1。不同之處為曬青綠茶原料粉碎至80目，10克曬青綠茶加200毫升蒸餾水，接種0.1克市場銷售的能分泌多酚氧化酶的微生物菌(釀酒高活性乾酵母)，發酵溫度為35℃，得到0.09克茶黃素、0.31克茶褐素，0.42克茶紅素。
權利要求
1.一種微生物液態發酵生產茶色素的方法，其特徵在於該方法的步驟如下a.將曬青綠茶原料粉碎至60-80目，按1-10g∶100-200ml的比例加入蒸餾水，在121℃的溫度下滅菌10分鐘，隨後將一種或多種混合的微生物接種其中，接種量按0.1克/100ml蒸餾水計；密封后進行搖床發酵，發酵溫度為20-35℃，搖床轉速為110r/min，培養時間15天；b.茶黃素與茶紅素的分離將發酵物用普通濾紙過濾，得到澄清的發酵液；吸取100ml發酵液，加入100ml醋酸乙酯，在500ml的分液漏鬥中振蕩10分鐘，分層後，將上層的醋酸乙酯和下層的水層分別置於200ml三角瓶中；吸取醋酸乙酯萃取液50ml，加入2.5％NaHCO3水溶液50ml，在200ml分液漏鬥中在轉速為300r/min下振蕩30秒，分層後，將醋酸乙酯層蒸乾，得到茶黃素，將水層蒸乾，得到茶紅素；c.茶褐素的分離吸取50ml澄清的發酵液和50ml正丁醇放入分液漏鬥中，搖振5分鐘，待分層後將上層除去，取下層即水層濃縮、蒸乾後即得到茶褐素。
全文摘要
一種微生物液態發酵生產茶色素的方法，屬茶葉生產技術領域。本發明方法為a.將茶粉碎至60－80目，按1－10g∶100－200ml加入蒸餾水，在121℃的溫度下滅菌10分鐘，再按0.1克/100ml蒸餾水計接種微生物；進行搖床發酵，發酵溫度為20－35℃，搖床轉速為110r/min，培養時間15天；c.吸取100ml發酵液，加入100ml醋酸乙酯，在500ml的分液漏鬥中振蕩10分鐘分層後，將上層的醋酸乙酯和下層的水層分別置於200ml三角瓶中；吸取醋酸乙酯萃取液50ml，加入2.5％NaHCO
文檔編號A23F3/16GK1826921SQ200610010788
公開日2006年9月6日 申請日期2006年3月31日 優先權日2006年3月31日
發明者龔加順, 周紅傑, 彭春秀 申請人:彭春秀